Revista Colombiana de Ciencias Químico - Farmacéuticas

Domestic wastewater treatment plants as sources of macrolide-lincosamide-streptogramin B- and penicillin-resistant Staphylococcus aureus in Brazil

SUMMARY Staphylococcus aureus is one of the main bacteria that affect human health. Its reduced susceptibility to beta-lactam antibiotics has driven the clinical use of macrolides and lincosamides. However, the presence of macrolide-lincosamide-streptogramin B (MLSB)-resistant S. aureus strains is increasingly common. Wastewater treatment plants (WWTPs) are the main anthropogenic source of resistance determinants. However, few studies have assessed the importance of this environment on the dissemination of MLSB-resistant S. aureus strains. Thus, we aimed to evaluate the impact of a domestic WWTP on the resistance to MLSB and penicillin in S. aureus in southeast Brazil. Of the 35 isolates tested, 40.6% were resistant to penicillin. Resistance to erythromycin (8.6%) and quinolones (2.8%) was less common. Despite the low rate of resistance to clindamycin (2.8%), many isolates showed reduced susceptibility to this antibiotic (57.1%). Regarding the resistance phenotypes of staphylococci isolates, inducible MLSB resistance (D-test positive) was found in two isolates. In addition, 27 S. aureus isolates showed the ability to produce penicillinase. In this article, we report for the first time the importance of WWTPs in the dissemination of MSLB resistance among S. aureus from southeast Brazil.

RESUMEN Staphylococcus aureus es una de las principales bacterias que afectan la salud humana. Su susceptibilidad reducida a los antibióticos betalactámicos ha impulsado el uso clínico de macrólidos y lincosamidas. Sin embargo, la presencia de cepas resistentes a macrólido-lincosamida-estreptogramina B (MLSB) de S. aureus es cada vez más común. Las plantas de tratamiento de aguas residuales (PTAR) son la principal fuente antropogénica de determinantes de resistencia. Sin embargo, pocos estudios han evaluado la importancia de este entorno en la diseminación de cepas de S. aureus resistentes a MLSB. Nuestro objetivo fue evaluar el impacto de una PTAR doméstica en MLSB y la resistencia a la penicilina en S. aureus en el sureste de Brasil. De los 35 aislamientos analizados, el 40,6% eran resistentes a la penicilina. La resistencia a la eritromicina (8,6%) y quinolonas (2,8%) fue menos común. A pesar de la baja tasa de resistencia a la clindamicina (2,8%), muchos aislamientos mostraron sensibilidad reducida a este antibiótico (57,1%). Con respecto a los fenotipos de resistencia de los aislamientos de estafilococos, la resistencia inducible a MLSB (prueba D positiva) se encontró en dos aislamientos. Además, 27 aislamientos de S. aureus mostraron la capacidad de producir penicilinasa. En este artículo informamos, por primera vez, la importancia de las PTAR en la difusión de la resistencia a MSLB entre S. aureus del sureste de Brasil.

RESUMO O Staphylococcus aureus é uma das principais bactérias que afetam a saúde humana. Sua reduzida suscetibilidade aos antibióticos beta-lactâmicos tem impulsionado o uso clínico de macrolídeos e lincosamidas. No entanto, a presença de cepas de S. aureus resistentes a macrolídeo-lincosamida-estreptogramina B (MLSB) é cada vez mais comum. As estações de tratamento de esgoto (ETEs) são a principal fonte antropogênica de determinantes de resistência. No entanto, poucos estudos avaliaram a importância desse ambiente na disseminação de cepas de S. aureus resistentes ao MLSB. Assim, nosso objetivo foi avaliar o impacto de uma ETE doméstico na resistência ao MLSB e à penicilina em S. aureus no sudeste do Brasil. Dos 35 isolados testados, 40,6% eram resistentes à penicilina. Resistência à eritromicina (8,6%) e quinolonas (2,8%) foi menos comum. Apesar da baixa taxa de resistência à clindamicina (2,8%), muitos isolados apresentaram sensibilidade reduzida a esse antibiótico (57,1%). Em relação aos fenótipos de resistência dos isolados de estafilococos, a resistência induzível ao MLSB (D-teste positivo) foi encontrada em dois isolados. Além disso, 27 isolados de S. aureus mostraram a capacidade de produzir penicilinase. Neste artigo relatamos pela primeira vez a importância das ETEs na disseminação da resistência do MSLB entre S. aureus do sudeste do Brasil.

Determination of the stability and irritability of the sericin hydrolyzate

RESUMEN La sericina es una proteína globular que se obtiene a partir de los capullos del gusano de seda Bombyx mori y tiene aplicaciones en la industria farmacéutica, alimentaria y cosmética. El objetivo de este trabajo fue determinar la estabilidad e irritabilidad dérmica y oftálmica del hidrolizado de sericina (líquido). 3 lotes producidos a escala piloto se almacenaron en frascos de polietileno de alta densidad en diferentes condiciones de temperatura: 40±2 °C por 6 meses y temperatura hasta los 30 °C durante 18 meses. Se hizo una evaluación fisicoquímica y microbiológica a tiempo inicial y 1, 2, 3, 6 meses (acelerada) y 3, 6, 9, 12, 18 meses (anaquel). Se llevaron a cabo los estudios toxicológicos correspondientes a productos con fines cosméticos. Se constató que las características organolépticas, densidad, el pH, la concentración de proteínas y la identidad de los lotes en las dos condiciones de temperaturas y no hubo variación significativa en el tiempo del estudio. Se definió el tiempo de vida útil del producto en 18 meses. Se concluyó que el hidrolizado de sericina en frascos de polietileno de alta densidad es estable a temperaturas hasta 30 °C durante 18 meses y no clasificó como irritante dérmico, ni oftálmico.

SUMMARY Sericin is a globular protein that is obtained from the cocoons of the Bombyx mori silkworm and has applications in the pharmaceutical, food and cosmetic industries. The objective of this work was to determine the stability and dermal and ophthalmic irritability of the sericine hydrolyzate (liquid). 3 batches produced on a pilot scale were stored in high density polyethylene bottles under different temperature conditions: 40 ± 2 °C for 6 months and temperature up to 30 °C for 18 months. A physical-chemical and microbiological evaluation was performed at initial time and 1, 2, 3, 6 months (accelerated) and 3, 6, 9, 12, 18 months (shelf). Toxicological studies corresponding to products for cosmetic purposes were performed. It was found that the organoleptic characteristics, density, pH, protein concentration and the identity of the lots in the two temperature conditions, there was no significant variation in the study time. The shelf life of the product was defined in 18 months. It was concluded that the sericin hydrolyzate in high density polyethylene bottles is stable at temperatures up to 30 °C for 18 months and this product did not classify as dermal or ophthalmic irritant.

Safety assessment of complex benzoic acid using in vitro permeation assays with pig skin in Franz cells

SUMMARY Franz cells are one of the main tools to evaluate the transepithelial permeation of compounds through the performance of in vitro tests, these allows inferring the safety behavior of a compound in the skin. The objective of this research was to determine the permeation behavior of benzoic acid from complexes with polyelectrolytes (EuB 75 Cl 25 EuB 100), compared to benzoic acid without complexing, to infer its safety behavior. In a first phase, skin storage conditions were established comparatively evaluating the diffusion parameters (flow and permeation constant) and transepithelial water loss, using ears skin of freshly slaughtered pigs, stored in 1M NaCl at -2 °C for 3 days; it was worked under infinite doses conditions. Subsequently, the permeation test of two complexes between Eudragit E and benzoic acid, in comparison with benzoic acid, was carried out under finite dose conditions. The benzoic acid quantification was performed with an analytical method validated by HPLC-DAD. The results showed no significant differences showing that biological samples can be stored for 72 h under the conditions described. The permeation behavior of the complexed benzoic acid with respect to the free benzoic acid showed a better safety profile, since there was a lower permeation for the first case. These results show that complexation of benzoic acid could decrease the sensitivity reactions that it normally presents, based on the decrease in its permeation.

RESUMEN Las celdas de Franz son una de las herramientas para evaluar la permeación transe-pitelial de compuestos mediante la realización de ensayos in vitro, estos permiten inferir el comportamiento de seguridad de un compuesto en la piel. El objetivo de esta investigación fue determinar el comportamiento de permeación del ácido benzoico a partir de complejos con polielectrolitos (EuB 75 Cl 25 EuB 100) en comparación con el ácido benzoico sin complejar, para inferir su comportamiento de seguridad. En una primera fase, se establecieron las condiciones de almacenamiento de la piel comparando los parámetros de difusión (flujo y constante de permeación) y pérdida de agua transepitelial, empleando piel de orejas de cerdos recién sacrificados, almacenadas en NaCl 1M a -2°C por 3 días; se trabajó bajo condiciones de dosis infinitas. Posteriormente, se realizó el ensayo de permeación de dos complejos entre ácido benzoico y Eudragit E, en comparación con el ácido benzoico, bajo condiciones de dosis finitas. La cuantificación del ácido benzoico fue realizada con un método analítico validado por HPLC-DAD. Los resultados evidenciaron que las muestras biológicas pueden almacenarse durante 72 h en las condiciones descritas. El comportamiento de permeación del ácido benzoico complejado respecto al ácido benzoico libre demostró tener un mejor perfil de seguridad, puesto que hubo una menor permeación para el primer caso. Estos resultados demuestran que la complejación del ácido benzoico podría disminuir las reacciones de sensibilidad que normalmente este presenta, basándose en la disminución de su permeación.

Development and validation of a gas chromatographic method for the determination of menthol, methyl salicylate, thymol, and benzoic acid in antiseptic solution

RESUMEN Se desarrolló y validó un método por cromatografía gaseosa para la cuantificación simultánea de mentol (MT), salicilato de metilo (SM), timol (TM) y ácido benzoico (AB) en una solución antiséptica bucal. Se utilizó una columna DB-WAX y dietilenglicol como estándar interno. Se determinó la linealidad en un intervalo de concentraciones de 64,00 a 96,00 µg/mL (MT), 80,00 a 120,00 µg/mL (SM), 96,00 a 144,00 µg/mL (TM) y 48,00 a 72,00 µg/mL (AB), obteniendo coeficientes de correlación superiores a 0,999, y coeficientes de variación de los factores de respuestas de 1,18, 1,95, 3,52 y 1,48%, respectivamente. Se establecieron límites de detección de 0,51; 1,14; 3,34 y 1,402 ng/mL para el MT, SM, TM y AB, respectivamente, mientras los límites de cuantificación fueron de 1,45, 3, 43, 9, 73 y 4, 36 ng/mL en cada caso. Los porcentajes de recuperación fueron de 100,03, 99, 31, 99, 92 y 100,12; con coeficientes de variación de 0,42, 0,79, 0,66 y 0,76% para cada caso. El método fue lineal, exacto, preciso y selectivo para la determinación de los analitos en el control de calidad.

SUMMARY A method was developed and validated by gas chromatography for the simultaneous quantification of menthol (MT), methyl salicylate (SM), thymol (TM) and benzoic acid (AB) in an oral antiseptic solution. A DB-WAX column and diethylene glycol was used as internal standard. Linearity was determined in a concentration range of 64.00 to 96.00 µg/mL (MT), 80.00 to 120.00 µg/mL (SM), 96.00 to 144.00 µg/mL (TM) and 48.00 to 72.00 µg/mL (AB) achieving correlation coefficients greater than 0.999, and coefficients of variation of the response factors of 1.18, 1.95, 3.52 and 1.48%, respectively. Detection limits were established: 0.51, 1.14, 3.34 and 1.402 ng/mL for MT, SM, TM, and AB, respectively, while the quantification limits were 1.45, 3.43, 9.73 and 4.36 ng/mL in each case. Recovery percentages were 100.03, 99.31, 99.92 and 100.12; with coefficients of variation of 0.42, 0.79, 0.66 and 0.76% for each case. The method was linear, accurate, precise, and selective for the determination of analytes in quality control.

Evaluation of physicochemical properties and dissolution studies on quality control of low water solubility drugs (raw materials and pharmaceutical formulations)

SUMMARY The purpose of this study was to evaluate physicochemical properties and dissolution studies of furosemide (FUR), hydrochlorothiazide (HCTZ) and nifedipine (NIF), low water solubility drugs, in raw materials and pharmaceutical formulations. Surface and physicochemical characterization techniques -scanning electronic microscopy (SEM), thermogravimetry (TG), X-ray diffraction (XRD) and infrared (IR) spectrometry- as well as physical and physicochemical tests on tablets and capsules were applied as supporting information on drug quality control. Simple, rapid, and efficient UV-Vis methods were developed and validated for the determination of FUR, HCTZ and NIF samples. SEM exhibited considerable differences in the crystal morphological structures. Among the drugs studied, except for furosemide, more than one polymorph was present in the samples. Drug release profiles were satisfactory for all products. FUR and HCTZ tablets exhibited similar dissolution profiles, with very rapid release to the pharmaceutical specialties (reference, similar and generic). For HCTZ tablets, the similar drug (f2= 48.74) is not equivalent to the reference drug. NIF capsules (reference and compounded) showed a release >80% of stated on product labels, in 10 minutes. The results obtained in this study suggest that the quality parameters and drug dissolution profiles may have been influenced by the morphology and size of the crystals, excipients, and technological processes.

RESUMEN El propósito de este estudio fue evaluar las propiedades fisicoquímicas y los estudios de disolución de furosemida (FUR), hidroclorotiazida (HCTZ) y nifedipina (NIF), medicamentos de baja solubilidad en agua, en materias primas y formulaciones farmacéuticas. Técnicas de caracterización fisicoquímica y de superficie: microscopía electrónica de barrido (SEM), termogravimetría (TG), difracción de rayos X (XRD) y espectrometría infrarroja (IR), así como pruebas físicas y fisicoquímicas en tabletas y cápsulas que se aplicaron como información de apoyo sobre el control de calidad. Se desarrollaron y validaron métodos simples, rápidos y eficientes de UV-Vis para la determinación de muestras de FUR, HCTZ y NIF. SEM exhibió diferencias considerables en las estructuras morfológicas de cristal. Entre las drogas estudiadas, a excepción de la furosemida, más de un polimorfo estaba presente en las muestras. Los perfiles de liberación de fármacos fueron satisfactorios para todos los productos. Las tabletas FUR y HCTZ exhibieron perfiles de disolución similares, con una liberación muy rápida a las especialidades farmacéuticas (referencia, similares y genéricas). Para las tabletas de HCTZ, el medicamento similar (f2= 48,74) no es equivalente al medicamento de referencia. Las cápsulas NIF (de referencia y compuestas) mostraron una liberación >80% de la indicada en las etiquetas del producto, en 10 minutos. Los resultados obtenidos en este estudio sugieren que los parámetros de calidad y los perfiles de disolución del fármaco pueden haber sido influenciados por la morfología y el tamaño de los cristales, excipientes y procesos tecnológicos.

Spectrophotometric determination of Copper (II) in manioc spirit (Tiquira)

RESUMO A pesquisa descreve a reação espectrofotométrica do complexo Cu(II)-PAN (1-(2-piridilazo)-2-naftol) e determina a concentração de cobre (II) em aguardente de mandioca (Tiquira). Para isso, dimensionamos a reação para os estudos de absorção do complexo, pH, estabilidade, proporção estequiométrica, interferentes, correlação e recuperação. Após essa etapa, determinamos a concentração de cobre(II) em cinco amostras de bebidas destiladas artesanalmente de cinco municípios do Estado do Maranhão. O resultados mostram que o complexo absorve em 548 nm em pH 6, é estável em um tempo de 7 horas em proporções estequiométrica mínima de 1:1 do ligante e metal, possui limite de detecção em 3,3 X 10-2 mg L-1, faixa de linearidade de 1 X 10-6 a 1 X 10-5 mol L-1, correlação (R2= 0,9990), desvio padrão=0,0035 e recuperação em 104,54 ± 7,01 e os principais íons interferentes são o ferro (III) e o cobalto (II). Na aguardente, constatamos que o teor de cobre está acima do permitido pela legislação brasileira.

SUMMARY The search describes the spectrophotometric reaction of the Cu (II)-PAN (1-(2-pyridilazo) -2-naphthol) complex and determines the concentration of copper (II) in manioc spirit (Tiquira). For this, we dimensioned the reaction for the studies of complex absorption, pH, stability, stoichiometric ratio, interferences, correlation, and recovery. After this step, we determined the concentration of copper (II) in five samples of beverages distilled artisanal from five municipalities of the State of Maranhão. The results show that the complex absorbs at 548 nm at pH 6, is stable at a time of 7 hours in minimum 1:1 stoichiometric proportions of the binder and metal, has a detection limit in 3.3 X 10-2 mg L-1, range (R2= 0.9990), standard deviation= 0.0035 and recovery at 104.54 ± 7.0, and the main interfering ions are iron (III) and cobalt (II). In the brandy, we find that the copper content is above that allowed by Brazilian legislation.

Study of the antifungal activity of ibuprofen and its association with amphotericin B or ketoconazole against Candida spp.

SUMMARY The objective was evaluating the antifungal activity of ibuprofen alone and when associated with amphotericin B or ketoconazole against Candida species. Strains of C. albicans, C. tropicalis, C. guilliermondii, C. krusei and C. parapsilosis were used. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by the microdilution method and the association study performed through the checkerboard assay. The concentration of 512 μg/mL inhibited approximately 65% of the tested strains, while against 35% of the strains presented MIC values above 2048 μg/mL. Associations of ibuprofen with amphotericin B against C. tropicalis and ibuprofen with ketoconazole against C. krusei showed synergistic effect. Antagonistic effects were evidenced in the combination of ibuprofen with amphotericin B against C. guilliermondii and C. albicans, as well as in the association of ibuprofen with ketoconazole against C. albicans and C. tropicalis. Through the experiments, it was found that ibuprofen showed antifungal activity against most of the Candida species tested. The combinations of ibuprofen and antifungals had synergistic effects. However, antagonistic results were evidenced in the association with ibuprofen, which would make clinical applicability difficult. Therefore, studies of this combined activity should be investigated, considering that this association may be positive for anti-fungal therapy.

RESUMEN El objetivo fue evaluar la actividad antifúngica del ibuprofeno solo y asociado con anfotericina B o ketoconazol contra especies de Candida. Se utilizaron cepas de C. albicans, C. tropicalis, C. guilliermondii, C. krusei y C. parapsilosis. La concentración inhibitoria mínima (MIC) se determinó mediante el método de microdilución y el estudio de asociación fue realizado a través del ensayo de checkboard. La concentración de 512 μg/mL inhibió aproximadamente el 65% de las cepas analizadas, mientras 35% de las cepas presentaron valores de MIC superiores a 2048 μg/mL. Las asociaciones de ibuprofeno con anfotericina B contra C. tropicalis e ibuprofeno con ketoconazol contra C. krusei mostraron un efecto sinérgico. Se evidenciaron efectos antagonistas en la combinación de ibuprofeno con anfotericina B contra C. guilliermondii y C. albicans, así como en la asociación de ibuprofeno con ketoconazol contra C. albicans y C. tropicalis. Se descubrió, a través de los experimentos, que el ibuprofeno mostró actividad antifúngica contra la mayoría de las especies de Candida probadas. Las combinaciones de ibuprofeno y antifúngicos tuvieron efectos sinérgicos. Sin embargo, se evidenciaron resultados antagónicos en la asociación con ibuprofeno, lo que dificultaría la aplicabilidad clínica. Por lo tanto, los estudios de esta actividad combinada deben investigarse, considerando que esta asociación puede ser positiva para la terapia antimicótica.

RESUMO O objetivo do estudo foi avaliar a atividade antifúngica do ibuprofeno sozinho e quando associado com anfotericina B ou cetoconazol contra espécies de Candida. Foram utilizadas cepas fúngicas de C. albicans, C. tropicalis, C. guilliermondii, C. krusei e C. parapsilosis, entre isolados clínicos e cepas padrão. A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada pela técnica de microdiluição e o estudo de associação realizado através do ensaio checkerboard. A concentração de 512 μg/mL foi capaz de inibir, aproximadamente, 65% das cepas ensaiadas, enquanto que 35% das estirpes apresentaram valores da CIM acima de 2048 μg/mL. Associações do ibuprofeno com anfotericina B contra C. tropicalis e ibuprofeno mais cetoconazol contra C. krusei mostraram efeito sinérgico. Efeitos antagônicos foram evidenciados na combinação do ibuprofeno com anfotericina B contra C. guilliermondii e C. albicans, como também na associação do ibuprofeno com cetoconazol contra C. albicans e C. tropicalis. Por meio dos experimentos, pôde-se afirmar que o ibuprofeno exerceu atividade antifúngica contra a maioria das espécies de Candida ensaiadas. Os efeitos das combinações entre o ibuprofeno e os antifúngicos promoveram efeitos sinérgicos. No entanto, resultados antagônicos foram evidenciados na associação com o ibuprofeno, o que dificultaria aplicabilidade clínica. Logo, estudos dessa atividade combinada devem ser investigados, pois esta associação pode traçar pontos positivos na terapia antifúngica.

Evaluation of drug advertising in the main television, radio, and written media in Costa Rica

RESUMEN La presente investigación evaluó la publicidad de medicamentos en los principales medios televisivos, radiofónicos y escritos en Costa Rica para conocer la información que se transmite al consumidor. Los medios de comunicación son interesantes objetos de estudios porque son usados por las industrias como una herramienta para poder llegar al consumidor. Este es un estudio observacional, descriptivo de tipo transversal, se realizó una encuesta a la población estudiantil de la Universidad Latina de Costa Rica y con la misma se hizo una observación de las pautas publicitarias en la radio, periódicos y la televisión en diferentes horarios. En la investigación se determinó que la mayoría de los anuncios encontrados en los diferentes medios de comunicación carecieron de ciertas disposiciones solicitadas por el reglamento. Las faltas que se encontraron fueron: composición del producto (principios activos), casa fabricante, categoría del producto, presentaciones disponibles. Se demostró que las regulaciones en la parte de la promoción de un medicamento son de gran importancia para poder proteger a los consumidores, porque las ganancias de las industrias farmacéuticas dependen en gran medida de su mercadotecnia. La promoción de productos busca aumentar las ganancias, sin embargo, si esto no se hace correctamente podría haber una mala utilización de los medicamentos.

SUMMARY This research evaluated drug advertising in the main television, radio, and written media in Costa Rica to find out the information that is transmitted to the consumer. The media are interesting objects of study because they are used by industries as a tool to reach the consumer. This is an observational, descriptive cross-sectional study, a survey was conducted of the student population of the Universidad Latina de Costa Rica and with it an observation was made of the advertising patterns on radio, newspapers, and television at different times. The investigation determined that most of the advertisements found in the different media lacked certain provisions requested by the regulation. The faults found were product composition (active ingredients), manufacturer, product category, available presentations. Regulations in the promotion part of a drug have been shown to be of great importance to protect consumers, because the profits of the pharmaceutical industries depend largely on their marketing. The promotion of products seeks to increase profits, however, if this is not done correctly there could be a misuse of medications.

Talinumpaniculatum: a plant with antifungal potential mitigates fluconazole-induced oxidative damage-mediated growth inhibition of Candida albicans

SUMMARY Aims: This study investigated the bioactivity of the crude leaf extract (CLE) and fractions hexane (HX) and ethyl acetate (EtOAc) from Talinum paniculatum alone and in association with fluconazole (FLC) against reference strain and clinical isolates of FLC-resistant Candida albicans. Furthermore, the antioxidant capability, chemical composition of this plant, and the effect's underlying mechanisms were evaluated. Methods: The antifungal activity was evaluated using checkerboard assay to establish the minimum inhibitory (MIC) and minimum microbicidal concen trations (MMC). During FLC and plant products challenges, the reactive oxygen species (ROS) generation (hydroxyl radicals [HO●]) were detected in C. albicans cells using the membrane-permeable fluorescent probes APF and HPF. High-performance liquid chromatography (HPLC) profile, quantitative analysis of antioxidant compounds, and free radical scavenging activity (DPPH assay) tests were performed. Results: The CLE and fractions presented outstanding antifungal activity and selectivity against C. albicans cells but had no synergistic effect’s with FLC. The MIC values for CLE and its fractions against C. albicans reference strain were in the order of HX (31.25 µg ml-1) < EtOAc (62.5 μg ml-1) < CLE (500 μg ml-1), and against FLC-resistant C. albicans HX (125 μg ml-1) = EtOAc < CLE (500 μg ml-1). CLE and its fractions had more potent antifungal activities than FLC against the clinical isolates. Moreover, fungicidal effect’s for these plant products were demonstrated against FLC-resistant C. albicans, which further conirmed an antifungal potential. Conversely, during association, plant products were shown to cause an increase in FLC MIC anywhere from 2- to 16-fold. FLC exposure led to an increase in the steady-state levels of ROS (HO●) in C. albicans cells. Next, we found that the increases in FLC MICs were owing to action of antioxidants containing-CLE and its fractions in preventing FLC-induced ROS-mediated growth inhibition of C. albicans. Conclusion: T. paniculatum can be a source of bioactive compounds with antifungal potential. However, because of the common use of its edible leaf, caution is advised during therapy with FLC (since it can decrease FLC susceptibility).

RESUMEN Objetivos: este estudio investigó la bioactividad del extracto de hoja en bruto (EHB) y las fracciones hexano (HX) y acetato de etilo (AcOEt) de Talinum paniculatum solo y en asociación con fluconazol (FLC) contra cepas de referencia y aislados clínicos de Candida albicans resistente a FLC. Además, evaluó la capacidad antioxidante, la composición química de esta planta y los mecanismos subyacentes del efecto fungicida. Métodos: la actividad antifúngica se evaluó mediante microdilución en caldo para establecer las concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) y microbicidas mínimas (CMM). Durante el tratamiento con FLC y productos vegetales se detectó la generación de especies reactivas de oxígeno (ERO) (radicales hidroxilo [HO●]) en células de C. albicans utilizando las sondas fluorescentes permeables a la membrana APF y HPF. El perfil de cromatografía líquida de alta resolución (CLAR), el análisis cuantitativo de compuestos antioxidantes y el ensayo DPPH fueron evaluados. Resultados: el EHB y las fracciones presentaron una excelente actividad antifúngica y selectividad contra las células de C. albicans, pero no tuvieron efectos sinérgicos con FLC. Los valores de CIM para EHB y sus fracciones contra la cepa referencia de C. albicans fueron del orden de: HX (31,25 μg ml-1) < AcOEt (62,5 μg ml-1) < EHB (500 μg ml-1), y contra C. albicans resistente a FLC: HX (125 μg ml-1)= AcOEt < EHB (500 µg ml-1). EHB y sus fracciones fueron más potentes antifúngicos que FLC contra los aislados clínicos. Además, estos productos vegetales tienen efectos fungicidas contra C. albicans resistentes a FLC, esto conirmó el potencial antifúngico. Por el contrario, durante la asociación se demostró que los productos vegetales causan un aumento en la CIM de FLC de 2 a 16 veces. La exposición a FLC aumentó los niveles de ERO (HO●) en las células de C. albicans. Los aumentos en las CIM de FLC se debieron a la acción de los antioxidantes presentes en EHB y sus fracciones para prevenir la inhibición del crecimiento mediada por ERO inducida por FLC en C. albicans. Conclusión: T. paniculatum puede ser una fuente de compuestos bioactivos con potencial antifúngico. Sin embargo, debido al uso común de su hoja comestible, se recomienda usarla con precaución durante la terapia con FLC (ya que puede disminuir la susceptibilidad a FLC).

Talinum paniculatum leaves with in vitro antimicrobial activity against reference and clinical strains of Staphylococcus aureus interfere with oxacillin action

SUMMARY Propose: We evaluated the antibacterial potential of the crude leaf extract (CLE) and fractions hexane (HX) and ethyl acetate (EtOAc) from Talinum paniculatum alone and in association with oxacillin (OXA) against OXA-resistant Staphylococcus aureus (ORSA, environment isolates) and OXA-sensitive S. aureus (OSSA, ATCC 25923). Furthermore, toxicity tests were performed. Methods: The antibacterial activity was evaluated through checkerboard assay (broth microdilution) to establish the minimum inhibitory (MIC) and minimum bactericidal concentrations (MBC). Toxicity test in mice was assessed. Results: The MIC values for the CLE and its fractions against ORSA and OSSA were in the order of HX (500 μg ml-1) = EtOAc < CLE (4000 μg ml-1). EtOAc and HX presented outstanding antibacterial activities against ORSA, and these fractions were bactericidal toward OSSA. Conversely, the associations between plant product (CLE, EtOAc, or HX) and OXA exhibited no synergistic effects. During these associations, there was an increase in OXA MICs anywhere from 2- to 4092-fold. The CLE presented absence of toxicity at a dose of 5 g kg-1 (in vivo). Conclusion: Although T. paniculatum be a good source of bioactive compounds with antistaphylococcal potential, the researchers should be cautious, since its edible leaf may interfere with OXA therapy (mitigating OXA-induced growth inhibition or killing of S. aureus and enhancing S. aureus resistance).

RESUMEN Propósito: evaluamos el potencial antibacteriano del extracto de hoja en bruto (EHB) y las fracciones hexano (HX) y acetato de etilo (AcOEt) de Talinum paniculatum solo y en asociación con oxacilina (OXA) contra Staphylococcus aureus resistente a OXA (ORSA, ambientales) y S. aureus sensible a OXA (OSSA, ATCC 25923). Además, se realizaron pruebas de toxicidad. Métodos: la actividad antibacteriana se evaluó mediante microdilución en caldo para establecer las concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) y bactericidas mínimas (CBM). Se evaluó la toxicidad en ratones. Resultados: los valores de CIM para el EHB y sus fracciones contra ORSA y OSSA fueron del orden de HX (500 μg ml-1) = AcOEt < EHB (4000 μg ml-1). AcOEt y HX presentaron actividades antibacterianas sobresalientes contra ORSA, y estas fracciones fueron bactericidas hacia OSSA. Por el contrario, las asociaciones entre el producto vegetal (EHB, AcOEt o HX) y OXA no mostraron efectos sinérgicos. Durante estas asociaciones, hubo un aumento en las CIM de OXA de 2 a 4092 veces. EHB no mostró toxicidad a una dosis de 5 g kg-1. Conclusión: aunque T. paniculatum es una buena fuente de compuestos bioactivos con potencial antiestofilocócico, los investigadores deben ser cautelosos, ya que su hoja comestible puede interferir con la terapia con OXA (mitigando la inhibición del crecimiento inducida por OXA o la muerte de S. aureus y promoviendo resistencia bacteriana).

EGFR and HER2 small molecules inhibitors as potential therapeutics in veterinary oncology

SUMMARY EGFR and HER2 receptors are crucial signaling molecules tyrosine kinase involved in human cancer. Aberrant signaling is associated with a variety of cancers, frequently with poor prognosis. Currently, EGFR and HER2 receptors are being targeted by small molecules, which offer a huge benefit to those patients afflicted by aggressive forms of cancer, improving their prognosis. Both human and canine cancers share molecular, biological, histopathological, and clinical similarities, including EGFR and HER2 expression in some forms of cancer. However, despite the use of one tyrosine kinase inhibitor approved to treat canine mastocytoma, canine cancers overexpressed EGFR and HER2 do not yet have targeted therapy, leading to high morbidity and mortality. Targeting EGFR and HER2 receptors in canine cancers using comparative approaches in human cancer could lead to better outcomes.

RESUMEN El receptor de factor de crecimiento epidérmico (Epidermal growth factor receptor, EGFR) y el receptor 2 del factor de crecimiento epidérmico (HER2 epidermal growth factor receptor 2) son moléculas señalizadoras cruciales pertenecientes a la familia de proteínas tirosina quinasa involucradas en el cáncer en humanos. La señalización aberrante de dichos receptores se encuentra asociada con una variedad de tumores, frecuentemente asociados a mal pronóstico. Actualmente, EGFR y HER2 son tratados específicamente a través de pequeñas moléculas inhibidoras, las cuales ofrecen un gran beneficio a aquellos pacientes que padecen formas agresivas de cáncer, y de esta manera su pronóstico mejora. Tanto el cáncer en medicina humana como veterinaria comparte similitudes moleculares, biológicas, histopatológicas y clínicas, las cuales incluyen la expresión tanto de EGFR y HER2 en algunas formas de cáncer. Sin embrago, a pesar del uso de un inhibidor tirosina quinasa aprobado para el manejo del mastocitoma canino los tumores que se caracterizan por la sobre-expresión de EGFR y HER2 aún no cuentan con un inhibidor específico, lo cual conduce a alta morbilidad y mortalidad.

The mathematical description for the electrochemical determination of insubosin alkaloid group, assisted by new triazoles with and without link compound

RESUMO Pela primeira vez, foi feita uma abordagem teórica do desempenho dos novos derivados triazólicos durante a determinação química dos alcaloides acridínicos do grupo insubosina, na presença de uma concentração pequena de um composto de ligação. A detecção eletroanalítica é realizada mediante um mecanismo híbrido, envolvendo ou não a formação de novos compostos iónicos. É possível mostrar que o estado estacionário é estabilzado, apesar de a região topológica, que lhe é correspondente, ser mais estreita que no caso da detecção mais comum. O comportamento oscilatório, neste caso, é mais provável que nos casos mais comuns, mas o fator adicional é relacionado apenas com a introdução de um composto de ligação.

SUMMARY For the first time, a theoretical investigation of novel triazolic derivatives during the chemical determination of acridinic alkaloids of insubosin group in the presence of the presence of the small quantity of the link compound has been realized. The electrochemical determination is realized by a hybrid mechanism, involving or not the formation of novel ionic compounds. It is possible to show that the steady-state is stabilized, despite ofthe narrower correspondent topological region, while compared to the more common detection case. The oscillatory behavior is more probable than in more common cases, due to the introduction of the link compound.

The selective obtaining of amyrins from Amazonian Protium oleoresins

SUMMARY The oleoresin produced by species of genus Protium sp. is rich in alpha and betaamyrins, two triterpenes with many pharmacogical activities. Considering the need to make the improved obtainment of these products feasible, this study sought to optimize techniques for the extraction and isolation of amyrins from resin. Two methods of extraction (maceration and sonication) with different solvents were compared to direct isolation from crude resin. The isolation of triterpenes was performed by chromatographic columns and the yields of extracts and fractions were analyzed by analysis of variance. The best extraction solvent for amyrins was hexane for both maceration and sonication methods (38.16±2.06% and 37.67±8.21%, respectively). There was no statistical difference between these methods and the direct method (32.05±2.40%). Additionally, the direct method is cheaper and more environmentally friendly. Thus, this study showed that it is possible to obtain a large quantity of amyrins by means of cheap, fast and ecological methods.

RESUMEN La oleorresina producida por especies del género Protium sp. es rica en amirinas alfa y beta, dos triterpenos con muchas actividades farmacológicas. Esta investigación buscó optimizar las técnicas de extracción y aislamiento de amirinas de la resina para hacer factible la obtención mejorada de esos productos. Se compararon dos métodos de extracción (maceración y sonicación) con diferentes solventes con aislamiento directo de la resina cruda. El aislamento de los triterpenos se realizó mediante columnas cromatográficas y los rendimientos de extractos y fracciones fueron hechos mediante análisis de varianza. El mejor solvente para la extracción de amirinas fue el hexano para ambos métodos de maceración y sonicación (38,16±2,06% y 37,67±8,21%, respectivamente). No hubo diferencia estadística entre estos métodos y el método directo (32,05±2,40%). Además, el método directo es más barato y ecológico. De este modo, esta investigación demostró que es posible obtener una gran cantidad de amirinas a través de métodos rápidos, baratos y ecológicos.

Legal regime of medical prescriptions in Spain and Iberoamerica

RESUMEN Esta contribución se ocupa de uno de los ejes sobre los que se articula la prestación farmacéutica en nuestro sistema sanitario : la receta médica. En este artículo se abordan las notas más relevantes que caracterizan el régimen jurídico de la receta médica en España y en Latinoamérica: concepto, tipos, reconocimiento por otros estados, identificación de fármacos por la denominación común internacional, objeción de conciencia del farmacéutico, receta médica electrónica o atención farmacéutica.

SUMMARY This paper deals with one of the axes on which the pharmaceutical provision in our health system is articulated: the medical prescription. Here you will find some of the most relevant notes that characterize the legal regime of the medical prescription in Spain and Latin America: concept, types, recognition by other States, identification of medications by the international common name, conscientious objection of the pharmacist, electronic medical prescription or pharmaceutical care.

Forced degradation studies and stability-indicating liquid chromatography method for determination of tirofiban hydrochloride and synthetic impurities

SUMMARY This study aimed to develop and validate a stability-indicating liquid chromatography method for the determination of tirofiban hydrochloride and two synthetic impurities (impurity A and impurity C). The method utilizes a RP-18 column (250 mm x 4.6 mm; 5 µm) with the PDA detector for quantitation. A mixture of triethylamine 0.1% (acidified to pH 5.5 with phosphoric acid) and acetonitrile was used as the mobile phase at a flow rate of 1 mL min-1 with gradient elution. The method presented satisfactory linearity, precision, accuracy and robustness, as well as low limits of detection and quantification, which demonstrate sensitivity in the determination of tirofiban and impurities A and C. It was selective for the determination of the drug and impurities analysed, without interference of the degradation products generated under forced conditions, demonstrating the stability-indicating capacity of the proposed method. Tirofiban showed to be practically stable to oxidative (30% H2O2 for 24 h) and thermal (75 °C for 24 h) conditions, but presented degradation to UVA light and acid hydrolysis, obeying the first order kinetics for both. In this way, it can be used as a stability-indicating method in the quality control of the raw material of tirofiban hydrochloride, as well as of the finished product. The obtained results demonstrate the importance of deepening the studies in this area, to guarantee the quality of commercialized pharmaceutical products.

RESUMO Este estudo teve como objetivo desenvolver e validar método indicativo da estabilidade por cromatografía líquida para determinação de cloridrato de tirofibana e duas impurezas de síntese (impureza A e impureza C). O método utilizou coluna de fase reversa RP-18 (250 mm x 4,6 mm; 5 µm) e detector PDA para quantificação. A fase móvel foi composta por uma mistura de trietilamina 0,1% (acidificada com ácido fosfórico para pH 5,5) e acetonitrila, à vazão de 1 mL/min, no modo gradiente. O método apresentou linearidade, precisão, exatidão, robustez, bem como baixos limites de detecção e quantificação, demonstrando sensibilidade na determinação da tirofibana e impurezas A e C. O método apresentou seletividade na determinação do fármaco e das impurezas, sem interferência dos produtos de degradação gerados na degradação forçada da tirofibana, demonstrando sua capacidade indicativa de estabilidade. O fármaco apresentou-se estável a oxidação (H2O2 30% por 24 h) e a degradação térmica (75 °C por 24 h), mas degradou frente à luz UVA e hidrolise ácida, obedecendo cinética de primeira ordem para ambas. Dessa forma, pode ser utilizado como um método indicativo de estabilidade no controle de qualidade da matéria -prima do cloridrato de tirofibana, bem como no produto acabado. Os resultados obtidos demonstram a importância de aprofundar os estudos na área, com intuito de garantir a qualidade dos produtos farmacêuticos comercializados.