Vitae

**EFFECT OF TWO ATMOSPHERES PACKAGING ON EDIBLE MUSHROOMS (Pleurotus ostreatus L.) TREATED BY VACUUM IMPREGNATION WITH CONSERVANT SOLUTION**

En este trabajo se describe la aplicación de la técnica de impregnación a vacío (IV) sobre hongos enteros comestibles (Pleurotus ostreatus L.) usando una disolución conservante (DI) a base de ácido ascórbico, ácido cítrico, sal, pectina de bajo metoxilo y calcio, para desarrollar un producto mínimamente procesado. Se valora la respuesta a la impregnación para determinar la composición de la DI y los cambios en las características fisicoquímicas, microbiológicas y sensoriales de la matriz impregnada durante 12 días de almacenamiento a 4ºC en dos atmósferas de envasado. La fracción volumétrica de impregnación en hongos pequeños (5,5 ± 1,4 g) y grandes (12,2 ± 2,2 g) es de 39,7 ± 8,6% y 31,2 ± 10,7%, respectivamente. Los parámetros fisicoquímicos son afectados por la DI, el tiempo de almacenamiento y la atmósfera de envasado. Los ºBrix, % acidez, % cloruros y % humedad disminuyen; el pH aumenta y la a w se mantiene con el tiempo. La DI permite controlar el pardeamiento, obteniendo un producto de color aceptable hasta el noveno día. La luminosidad (L*) presenta una tendencia a disminuir con el tiempo (más oscuras), manteniéndose en el plano cromático a*b* en las zonas grises. La textura del producto se considera aceptable, con características elásticas, y la DI le confiere duración en el tiempo. Para ambas atmósferas, los parámetros microbiológicos se encuentran dentro de los límites aceptados en la norma colombiana. El proceso IV representa una metodología efectiva que mejora los atributos sensoriales, microbiológicos y de calidad del hongo, alcanzando un incremento de un 12,5% en la vida útil.

In this paper the vacuum impregnation technique (IV) is applied on edible whole mushroom (Pleurotus ostreatus L.) using a conservant solution (CS) containing ascorbic acid, citric acid, salt, low metoxyl pectin and calcium, to develop a minimally processed product. The response to the impregnation is appraised to determine the composition of CS and to evaluate changes in the physiochemical, microbiological and sensorial characteristics of the impregnated matrix stored at 4ºC in two atmospheres during 12 days packaging. The volumetric fraction of impregnation in small (5.5 ± 1.4 g) and big mushrooms (12.2 ± 2.2 g) is respectively of 39.7 ± 8.6% and 31.2 ± 10.7%. The physicochemical parameters are affected for CS, the time of storage and the packaging atmosphere. The ºBrix, % acidity, % chlorides and% humidity decrease, the pH rises and the a w keeps uniform during that time. CS allows to control the browning, obtaining a product with an acceptable color until the ninth day. The brightness (L*) shows a tendency to decrease with the time (darker), but keeping it in the chromatic plane a*b* in the gray areas. The texture of the product is considered acceptable with elastic characteristic and CS maintains it during the time. For both atmospheres, the microbiological parameters are within the acceptable limits in the Colombian norm. The IV process represents an effective methodology that improves the sensorial, microbiological and quality attributes of the mushroom increasing 12.5% the shelf life.

**SENSORY EVALUATION OF CAPE GOOSEBERRY (Physalis peruviana L.) COLOMBIAN ECOTYPE IMPREGNATED WITH NATIVE STRAIN Lactobacillus plantarum LPBM10 AND COMMERCIAL STRAIN Lactobacillus casei ATCC 393**

La evaluación sensorial es una de las herramientas más importantes en el desarrollo de alimentos innovadores, como es el caso de frutas con microorganismos probióticos; bacterias como L. plantarum y L. casei han demostrado efectos benéficos en la salud de quien los consume. Esta investigación evalúa los atributos sensoriales de uchuvas inoculadas con las cepas L. plantarum y L. casei utilizando el proceso de impregnación a vacío como mecanismo de incorporación en el fruto. Se utiliza como líquido de impregnación solución de glucosa al 14% p/p inoculada con lactobacilos a una concentración de 5 en la escala McFarland. A las muestras se les aplicaron pruebas descriptivas escalares de 9 bloques; los jueces evaluaron la mayor o menor intensidad del atributo calificado con respecto a la muestra control, que corresponde a uchuva fresca en las mismas condiciones de almacenamiento (temperatura y tiempo) que las muestras impregnadas. En general, los miembros del panel entrenado encuentran las uchuvas impregnadas más dulces, jugosas, translúcidas, anaranjadas, menos ácidas y menos duras.

Sensory evaluation is one of the most important tools in new food development, such as fruits with probiotic microorganisms. Bacteria like L. plantarum and L. casei show beneficial health effects in people consuming them. This investigation evaluates the sensory attributes of cape gooseberry inoculated with the strains L. plantarum and L. casei using the vacuum impregnation process as incorporation mechanism in the fruit. A 14% p/p glucose solution inoculated with lactobacilli in a concentration of 5 in a McFarland scale is used as the liquid of impregnation. Tests scalars descriptive of 9 blocks are applied to the samples. The judges evaluate the biggest or smallest intensity in the qualified attribute with regard to the control sample, which was fresh cape gooseberry under the same storage conditions (temperature and time) that the impregnated samples. In general, the results established by the trained panel show that impregnated cape gooseberry are sweeter, more juicy, more translucent, more orange-coloured, less acid and less harsh.

USE OF HYDROCOLLOIDS IN DAIRY BEVERAGES KUMIS TYPE

El objetivo del presente trabajo es evaluar la mezcla más adecuada de los estabilizantes goma guar, goma xantan y carragenina iota en la bebida láctea tipo kumis. Se lleva a cabo un estudio preliminar que define la mezcla óptima de estos estabilizantes, utilizando el nivel máximo de 0,5%, aprobado por el Ministerio de la Protección Social de la República de Colombia, la variable respuesta medida es viscosidad. Definida la mejor mezcla, es utilizada en tres concentraciones (T1: 0,08%; T2: 0,1% y T3: 0,12%), y comparada con un control (T4: sin adición de estabilizante) en el producto lácteo tipo kumis. La mezcla óptima encontrada fue de 93% goma xantan y 7% goma guar, y los parámetros empleados para su evaluación son fisicoquímicos reométricos y sensoriales. Los resultados fisicoquímicos corresponden a los estándares aceptados para esta bebida. En lo referente a las pruebas de viscosidad y deformación, el tratamiento que muestra los mejores resultados es la concentración 0,12%; que corresponde al tratamiento T3. El análisis sensorial indica que T3 es el tratamiento más aceptado, junto con el control. Según los resultados, el nivel óptimo de concentración de la mezcla de hidrocoloides es 0,12%; con diferencia significativa (p<0,05) frente a los otros tratamientos.

The aim of this study was to evaluate the most appropriate mix of stabilizers: guar gum, xanthan gum and iota carrageenan in dairy beverages kumis type. A preliminary study defining the optimal mix between these stabilizers was carried, using the maximum level of 0.5% approved by the Colombian Ministry of Health. Viscosity was used as response variable. Once the best mix was selected it was used in three concentrations (T1: 0.08%, T2: 0.1% and T3: 0.12%), and compared to a control (T4: no added stabilizer) in the milk product type kumis. The parameters used for the assessment of the optimal mix of 93% xanthan gum and 7% guar gum were physicochemical, viscosity and sensory. Physicochemical results fitted to the accepted standards for such milk drinks. In terms of viscosity and strain tests, the treatment showing the best results was T3. Sensory analysis indicated that T3 is the more accepted treatment with the control. Based on the results obtained, the optimum concentration level of the hydrocolloids mixture was 0.12% of the mixture with a p <0.05.

IDENTIFICATION AND DIFFERENTIATION OF UNDERIVATIZED DIASTEROMERIC MONO-AND DISACCHARIDES BY ESI-IT-MS/MS

Los azúcares son importantes moléculas que desempeñan funciones trascendentales de señalización celular en los organismos superiores. Su complejidad estructural, representada por sus isómeros, anómeros y diasterómeros, amerita la implementación de metodologías modernas, rápidas y sensibles para su identificación y diferenciación. La espectrometría de masas y su analizador de trampa de iones brinda nuevas alternativas de análisis que favorecen el control de las energías de fragmentación de los analitos. A pesar de que la diferenciación de estereoisómeros no ha sido el campo de aplicación principal de la espectrometría de masas, se ha implementado una metodología para diferenciar los monosácaridos β-D-galactosa y β-D-glucosa y los disacαridos β-D-galactopiranosil-(1→4)-β-D-glucopiranσsido (lactosa), α-D-glucopiranosil-(1→4)-β-D-glucopiranσsido (maltosa) y β-D-fructofuranosil-(2↔1)-α-D-glucopiranσsido (sacarosa) a travιs de sus aductos con amonio y litio por ESI-IT-MS/MS en infusión directa. Se emplean diferentes energías de fragmentación para asegurar la existencia de iones marcadores de la estereoquímica de los analitos. Se evidencia que controlar las energías de colisiones en el análisis estructural de moléculas provee una poderosa y moderna herramienta analítica para los laboratorios de análisis.

Sugars are important molecules with remarkable cell signals pathway functions in higher organisms. The structural complexity of sugar represented by its isomeric, anomeric and diasteromeric configurations deserve the implementation of modern, rapid and sensitive methodologies for its identification and differentiation. Mass spectrometry and its analyzer of ion trap provide new alternative techniques that encourage the control of the fragmentation energies supplied to molecules. Since stereoisomer differentiation is consider outside the mass spectrometry domain, a methodology has been applied in order to differentiate β-D-galactose, β-D-glucose and the disaccharides β-D-galactopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranoside (lactose), α-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranoside (maltose) y β-D-fructofuranosyl-(2↔1)-α-D-glucopyranoside (sacarose) trough its ammonium and lithium adducts by infusion on ESI-IT-MS/MS mass spectrometer. Different fragmentation energies have been used to ensure the ion marker occurrence in the analyte stereochemistry. It is evident that the collision energies control in structural analysis of molecules provides a powerful and modern analytical tool to be applied in control laboratories.

**BIOACCUMULATION AND TOXICITY EVALUATION OF CADMIUM AND MERCURY IN LLANERO GRASS (Brachiaria dictyoneura)**

Se estudia la transferencia de mercurio y cadmio desde el sistema suelo hacia Brachiaria dictyoneura en función de la capacidad bioindicadora y bioacumuladora. Durante la evaluación de cadmio en B. dictyoneura se observó una disminución en el crecimiento del 65%. La toxicidad de cadmio se correlaciona con la acumulación consecutiva del catión durante el tiempo de monitoreo. En el tratamiento con mercurio, a partir de los 30 días de exposición, se observó disminución en el contenido del catión en la planta, presentando posiblemente fitorreducción de mercurio Hg2+ a Hg0 y posterior evaporación. La tolerancia y la capacidad acumuladora de B. dictyoneura podrían ser utilizadas para fitoremediación en sitios co-contaminados por Cd y Hg.

The transfer of mercury and cadmium in Brachiaria dictyoneura was studied in terms of bioaccumulative capacity and as a bioindicator. During the evaluation cadmium in B. dictyoneura show a decrease of 65%. The toxicity of cadmium was correlated with the consecutive accumulation of the cation during the monitoring time. With respect to mercury, a decrease in cation content in the plant was observed 30 days after exposure, presenting possible phytoreductión of mercury ion Hg2+ to Hg0 in B. dictyoneura and subsequent evaporation. The tolerance and accumulator capacity of B. dictyoneura could be used for phytoremediation of sites co-contaminated with Cd and Hg.

STUDY OF MATRIX EFFECT IN PESTICIDE ANALYSIS BY GAS CHROMATOGRAPHY

Con el fin de estudiar la variación en las señales cromatográficas inducidas por las matrices de análisis (efecto matriz), se estudian tres matrices bióticas de diferente naturaleza (Lactuca sativa L., Physalis peruviana L., y Solanum tuberosum) y un grupo de plaguicidas de diferentes características fisicoquímicas, organoclorados, organofosforados y piretroides, entre otros. Los análisis se realizan por medio de un cromatógrafo de gases con detección simultánea por microcaptura electrónica (μECD) y nitrógeno-fósforo (NPD), acoplados en paralelo. En este estudio se evalúa el efecto matriz por medio de análisis de covarianza y regresión lineal, y se encuentra que cerca del 75% de los plaguicidas estudiados presentan variaciones en la respuesta cromatográfica con respecto a las señales en solvente. Por otro lado se encuentra que la naturaleza de la matriz afecta la respuesta cromatográfica de 18 de los 33 plaguicidas, mientras que la cantidad de matriz inyectada influye en la respuesta de sólo 13 de ellos.

In order to study the matrix-induced chromatographic response enhancement (matrix effect), we select three different types of biotic matrices (Lactuca sativa L., Physalis peruviana L. and Solanum tuberosum) and a group of pesticides of different physicochemical characteristics including organochlorine, organophosphorus and pyrethroids pesticides. These pesticides are determined by gas chromatography by electronic microcapture detector (μECD) and nitrogen-phosphorus detector (NPD), coupled in parallel. This study evaluates the matrix effect by analysis of covariance and linear regression. There are nearly 75% of the studied pesticides which have variations in the chromatographic response compared to solvent signals. Furthermore, we notice that the nature of the matrix affect the chromatographic response of 18 of the 33 pesticides and the amount of matrix injected affects the response of only 13 pesticides.

EFFECT OF MICROENCAPSULATED NAPROXEN INTO POLY(LACTIDE-CO-GLYCOLIDE) MICROSPHERES ON CARRAGEENIN PAW EDEMA IN RATS

Las micropartículas son sistemas de entrega de fármacos ampliamente utilizados, que permiten mejorar la aplicabilidad terapéutica de fármacos tanto nuevos como convencionales. En el presente trabajo se elaboran micropartículas de un polímero biodegradable, ácido poli (láctico-co-glicólico), cargadas con naproxeno. Las mejores condiciones para la elaboración de las micropartículas son determinadas experimentalmente, encontrando que la relación fármaco: polímero, la cantidad de isopropanol, el volumen de fase acuosa, la velocidad de agitación y el tiempo de agitación influyen significativamente en las características de las micropartículas obtenidas. En el modelo de edema plantar inducido por carragenina en ratas Wistar, se encuentra que el naproxeno microencapsulado en dosis de 5 mg/Kg y 10 mg/Kg presenta mayor efecto antiinflamatorio que el naproxeno libre en dosis de 10 mg/Kg.

ABSTRACT Microparticles are pharmaceutical dosage forms widely used because they may improve the therapeutic application of new and conventional drugs. In this work we make biodegradable microparticles with poly (lactic-co-glicolic) acid as polymer loaded with naproxen. The best microencapsulation conditions are experimentally determinate. We have found that the drug:polymer ratio, the isopropanol amount, the aqueous phase volume, the stir speed and the time of stir affect the microparticles characteristics. In the carragenin paw edema model, we have found that the microencapsulated naproxen at 5 mg/Kg and 10 mg/Kg showed greater effect than free naproxen at 10 mg/Kg.

ESTUDIO COMPARATIVO DE LOS MÉTODOS DE RESAZURINA Y MTT EN ESTUDIOS DE CITOTOXICIDAD EN LÍNEAS CELULARES TUMORALES HUMANAS

Se realizó un estudio comparativo de los métodos de resazurina y MTT como indicadores de medida indirecta de sobrevivencia celular, aplicables para la estimación de actividad citotóxica, con el fin de establecer la idoneidad de cada uno de los dos sistemas de detección, a través de la valoración de citotoxicidad sobre tres líneas celulares derivadas de tumores humanos: HEp-2, HT-29 y HeLa, evaluando tres compuestos sintéticos durante un periodo de tratamiento de 48 horas, usando como referencia de actividad Doxorrubicina HCl, un agente antineoplásico. Los resultados obtenidos por los dos métodos revelaron comportamientos semejantes en las condiciones estudiadas en las líneas celulares.

A study was carried comparing the resazurina and MTT methods as indicators of indirect measure of cellular survival applied to valuated cytotoxic activity in order to assess the suitability of each of the two detection systems. The comparison was made through the valuation of cytotoxicity on three cell lines derived from human tumors: HEp-2, HT-29 and HeLa, evaluating three synthetic compounds during a treatment period of 48 hours using as a reference activity Doxorubicin HCl. The results obtained by the two methods showed a similar performance under the conditions tested in cell lines.

ANTIOPHIDIAN PROPERTIES EVALUATION OF ETHANOL EXTRACT AND FRACTIONS OBTAINED FROM Renealmia alpinia (Rottb) Mass (Zingiberaceae)CULTIVATED IN VITRO

Los extractos vegetales constituyen una fuente rica de moléculas farmacológicamente activas, cuya aplicación en medicina tradicional permite un acercamiento a potenciales actividades biológicas. En este trabajo se evalúa la capacidad inhibitoria de extractos etanólicos de hojas, raicillas y fracciones obtenidas por cromatografía en columna de Renealmia alpinia (Rottb) Mass, cultivada in vitro, sobre los efectos hemolítico indirecto, proteolítico y coagulante inducidos por el veneno de Bothrops asper. La actividad hemolítica indirecta es inhibida en mayor medida por la fracción 7-8 (47,3 ± 2,20%), seguida en su orden por los extractos de raicillas (32,6 #177; 6,90%) y hojas (24,2 ± 4,43%) de origen in vitro y hojas ex vitro (16,2 ± 3,88%). La actividad proteolítica se inhibe ampliamente por los extractos de hojas tanto in vitro como ex vitro sin diferencias significativas. Contra la actividad coagulante se registra una mayor neutralización por parte de las raicillas in vitro (81,73 ± 9,94s). Se descarta un potencial mecanismo de acción proteolítico de Renealmia alpinia sobre el veneno de Bothrops asper dado que no se producen cambios en los patrones electroforéticos del veneno. Los resultados viabilizan la aplicación de Renealmia alpinia como coadyuvante en el tratamiento del accidente ofídico y sustentan la utilidad de la micropropagación para la producción masiva de componentes activos.

Plant extracts are a rich source of pharmacologically active molecules. Their application allows a tradicional medicine approach to potential biological acitivities. This paper evaluates the inhibitory capacity of ethanolic extracts of leaves and little roots and also fractions chromatographically fractions obtained from Renealmia alpinia (Rottb) Mass, cultured in vitro, on the indirect hemolytic activity, proteolytic activity and coagulant activity induced by the Bothrops asper venom. Indirect hemolytic activity is inhibited to a greater extent by the fraction 7-8 (47.3 ± 2.20%) followed in order by the extracts from little roots (32.6 ± 6.90%) and leaves (24.2 ± 4.43%). They came from in vitro and ex vitro leaves (16.2 ± 3.88%). The proteolytic activity is largely inhibited by the leaves extracts in vitro and ex vitro without significant differences between them. Little roots in vitro showed the highest neutralization effect on coagulant activity (81.73 ± 9.949s). Proteolytic activity from Renealmia alpinia extracts on Bothrops asper venom is ruled out since there are not changes in the electrophoretic pattern of the venom. The results make possible the implementation of Renealmia alpinia as adjuvant for the treatment of ophidic accidents and sustain the value of micropropagation for mass production of active components.

BIOLOGICAL ACTIVITY EVALUATION OF OLEIC ACID-NICOTINE EMULSIONS OIL/WATER AGAINST Drosophila melanogaster

En este trabajo se estudia el efecto de las emulsiones O/W de ácido oleico-nicotina estabilizadas con Tween 80® sobre su actividad insecticida aguda y crónica en Drosophila melanogaster. La bioactividad aguda de las emulsiones de ácido oleico-nicotina registró un tiempo letal medio (TL50 = 13 ± 3 minutos) significativamente mayor que el obtenido con la nicotina en solución acuosa (TL50 = 7 ± 1 minutos). La baja bioactividad de la emulsión de ácido oleico-nicotina presenta una alta correlación con el porcentaje de nicotina encapsulada en las gotas de emulsión. La bioactividad crónica se evaluó en el ciclo de vida de D. melanogaster, donde se observó repelencia, evidenciada por la disminución en la oviposición.

This paper studies the effect of the O/W emulsion of oleic acid-nicotine stabilized with Tween 80® on its acute and chronic insecticidal activity in Drosophila melanogaster. The oleic acid-nicotine emulsions acute bioactivity show a median lethal time (LT50 = 13 ± 3 minutes) significantly higher compared with that obtained with nicotine in aqueous solution (LT50 = 7 ± 1 minutes). Oleic acid-nicotine emulsion low bioactivity present high correlation with the percentage of nicotine encapsulated in emulsion droplets. The chronic bioactivity is assessed in the life cycle of D. melanogaster where diminution in oviposition is taken as evidence of repellency.

CARBONIC ANHYDRASE IN Plasmodium falciparum: A USEFUL TARGET FOR ANTIMALARIAL DRUG DESIGNING AND MALARIA BLOCKING TRANSMISSION COMPOUNDS

La anhidrasa carbónica es una metaloenzima que cataliza la conversión reversible del CO2 a bicarbonato, un componente metabólico indispensable para la síntesis de pirimidinas de novo por Plasmodium spp y los procesos de exflagelación llevados a cabo por el parásito al interior del mosquito vector. La enzima participa además en el transporte del bicarbonato dentro y fuera de las células para evitar un desequilibrio en el sistema CO2/HCO3- y la alteración del pH al interior de las células y en el espacio intercelular. Por lo tanto, al inhibir la enzima, ya sea en el parásito o en el insecto vector, se podría conducir a una disminución de la replicación y al detrimento y/o muerte del parásito. De esta forma, los inhibidores de anhidrasa carbónica constituyen una alternativa, tanto terapéutica como de bloqueo de la transmisión, para el control de la malaria. La actividad anti-Plasmodium in vitro de algunos compuestos inhibidores de anhidrasa carbónica ya se ha determinado. Sin embargo, la eficacia in vivo y el mecanismo por el cual los inhibidores son capaces de afectar el desarrollo del parásito en los mosquitos vectores permanecen aún por evaluarse. En el marco del proyecto de investigación "Evaluación de inhibidores de anhidrasa carbónica como medidas terapéuticas y de bloqueo de la transmisión de malaria" este artículo presenta una revisión del estado del arte sobre el papel de la anhidrasa carbónica de Plasmodium spp y el uso de inhibidores específicos de esta enzima como una estrategia para el tratamiento de la malaria y el bloqueo de la transmisión de la enfermedad. Se incluyeron artículos publicados en los últimos 59 años, identificados a partir de la bases de datos bibliográficos PubMed y ScienceDirect, cruzando las palabras claves, al igual que artículos recopilados por los autores y se analizan e integran los resultados de investigaciones publicadas alrededor del tema.

Carbonic anhydrase is a metalloenzyme that catalyzes the reversible conversion of CO2 to bicarbonate, an essential metabolic component used by the malaria parasites for de novo synthesis of pyrimidines and the exflagelation of gametocytes inside the mosquito vector. Carbonic anhydrase is involved in the transport of bicarbonate. This enzyme participates in transport of bicarbonate inside and outside the cells to avoid an imbalance in the system CO2/HCO3- and alteration of pH in the interior of the cell as well as in the intercellular space. Therefore, inhibition of this enzyme either in the parasite or the insect vector, could lead to a decrease in replication and to the detriment and/or death of the parasite. Given the importance of carbonic anhydrase in the metabolism, development and survival of Plasmodium, it could be postulated that carbonic anhydrase inhibitors are both a therapeutic and a blocking transmission alternative. Previous studies have demonstrated the in vitro anti-Plasmodium activity of some inhibitors. However, it is necessary to determine their effectiveness to confirm its usefulness in the treatment or blocking malaria transmission and the mechanism by which these inhibitors are able to affect the development of the parasite in the mosquito vector. In this paper we present a review about the role of carbonic anhydrase in Plasmodium spp and using some specific inhibitors as a strategy for malaria treatment and transmission blocking strategy. Articles published in the past 59 years identified from bibliographic database (PubMed and ScienceDirect) and papers collected by the authors were included.