Vitae

Lectins: A brief review

MURINE INVARIANT NATURAL KILLER T CELLS RECOGNIZE GLYCOLIPIDS DERIVED FROM EXTRAC TS OF THE LICHEN Stereocaulon ramulosu

Background: Invariant natural killer T cells (iNKT ) can be activated by certain types of glycolipids that have the potential to generate adjuvant effects which could be used to develop effective and safe immunotherapies. Many of these glycolipids have been isolated from natural organisms, but there is a great amount of these organisms completely unexplored as a source of these types of compounds. Some of these organisms are lichens which are complex symbiotic organisms that have been showed to contain glycolipids. Objectives: We decide to test if glycolipids isolated from lichens would be able to activate iNKT cells in vitro and in vivo. Methods: We have used extracted glycolipids from 43 different species of lichens from Colombia. We have used iNKT hybridoma cells, C57BL/6 mice, IL-2 ELISA and the B16 melanoma to test for the adjuvant capabilities of glycolipids isolated from lichens. Results: In this study we have found two glycolipids with the capacity to activate iNKT cells in vitro. One of the glycolipids was able to activate iNKT cells in vivo, and was competent to induce protection against the B16 melanoma in the mouse model. Conclusions: We propose a possible chemical structure for a novel glycolipid called β-GalCer-lich (1) derived from the lichen Stereocaulon ramulosum.

Antecedentes: Las células asesinas naturales T (iNKT ) pueden ser activadas por ciertos tipos de glicolípidos que tienen el potencial para generar efectos adyuvantes los cuales pueden ser usados para desarrollar inmunoterapias efectivas. Muchos de estos glicolípidos han sido aislados de organismos naturales, pero hay una gran cantidad de organismos completamente inexplorados como fuente de este tipo de compuestos. Algunos de estos organismos son los líquenes, los cuales son organismos simbiontes complejos para los que se ha mostrado que contienen glicolípidos. Objetivos: Nosotros decidimos probar. si los glicolípidos aislados de líquenes podrían ser capaces de activar alas celulas iNKT in vitro e in vivo. Métodos: Nosotros hemos extraído glicolípidos de 43 especies de líquenes de Colombia. Nosotros hemos usado células de un hibridoma de iNKT s, ratones C57BL/6, ELISA para IL-2 y el melanoma B16 para probar la capacidad adyuvante de los glicolipidos aislados de los líquenes. Resultados: En este estudio nosotros hemos encontrado dos glicolípidos con la capacidad de activar iNKT s in vitro. Uno de los glicolípidos fue capaz de activar células iNKT in vivo, y fue competente para inducir protección contra el melanoma B16 en el modelo de ratón. Conclusiones: Nosotros proponemos una posible estructura química para el nuevo glicolípido llamado β-GalCer-lich (1) derivado del liquen Stereocaulon ramulosum.

HEAVY METALS AND MINERAL ELEMENTS OF Vernonia ambigua, Vernonia oocephala AND Vernonia pupurea USED IN NORTHERN NIGERIAN TRADITIONAL MEDICINE

Background: Vernonia species are widely consumed as vegetables or medicinal herbs for the treatment of various human diseases in Nigeria. Nevertheless, there exists a growing concern for consumption safety of those herbal plants, due to increasing environmental pollution. This is because plants can accumulate some heavy metals that constitute a potential risk to human health. Nonetheless, also essential elements may be accumulated in plants, which provide nutrients for combating diseases and maintaining human health. Objectives: The purpose of the study was to analyze some heavy metals and mineral elements on Vernonia ambigua, V. oocephala and V. pupurea commonly used in Northern Nigerian traditional medicine. Methods: Atomic absorption spectrometry (AAS) was used to determine the major elements (calcium and magnesium), trace elements (iron and manganese) and heavy metals (copper, cobalt, chromium, cadmium, lead and zinc). Results: We found a high Ca and Fe content in V. ambigua, Mg and Co in V. oocephala, and Cu and Cr in V. pupurea; in contrast, the last specie, showed low accumulation of Pb and Cd among all studied species. Conclusion: This study revealed that toxic elements concentrations are lower than the allowed dietary intake (ADI) in all the three Vernonia species. The quantitative estimation of these elements is important to understanding the pharmacological and/or toxicological actions of medicinal plants for safe use.

Antecedentes: Las especies de Vernonia son ampliamente consumidas como verduras o hierbas medicinales, para el tratamiento de diversas enfermedades humanas en Nigeria. Sin embargo, existe una creciente preocupación por la seguridad en el consumo de dichas plantas, debido al incremento en la contaminación. Esto es debido a que las plantas pueden acumular algunos metales pesados que constituyen un riesgo potencial para la salud humana. Sin embargo, algunos elementos esenciales también pueden acumularse en las plantas proporcionando nutrientes para combatir las enfermedades y mantener una buena salud. Objetivos: El objetivo del estudio fue analizar algunos metales pesados y minerales en Vernonia ambigua, V. oocephala y V. Pupurea, comúnmente utilizadas en la medicina tradicional del norte de Nigeria. Métodos: La espectrofotometría de absorción atómica (AAS) se utilizó para determinar elementos mayores (calcio y magnesio), elementos trazas (hierro, manganeso) y elementos pesados (cobre, cobalto, cromo, cadmio, plomo y zinc). Resultados: se encontraron altos contenidos de Ca y Fe en V. ambigua, y de Mg y Co en V. oocephala. La cantidad de Cu y Cr fueron altas en V. Pupurea; en contraste, esta última reportó las cantidades más bajas de Pb (0.01200 mg/100g) y Cd (0.00670 mg / 100g) entre las tres especies de Vernonia estudiadas. Conclusión: Este estudio demostró que las concentraciones de elementos tóxicos como Pb, Cd y Co detectadas, son inferiores a la ingesta dietética permitido (ADI) en las tres especies de Vernonia. Las estimaciones cuantitativas de elementos pesados, son importantes para la comprensión de las acciones farmacológicas y/o toxicológicas de plantas medicinales para su uso seguro.

LINALOOL EFFECT ON MITOCHONDRIAL BIOENERGETICS RAT LIVER

Antecedentes: El linalool (2,6-dimetil-2,7-octadien-6-ol) es un monoterpeno presente en más de 200 tipos de plantas, y constituye el componente mayoritario de varios aceites esenciales. El linalool posee una amplia variedad de potenciales propiedades farmacológicas; que van desde propiedades antisépticas, ansiolíticas, anti-inflamatorias, antifúngicas, antimicrobianas y proapotóticas en diferentes líneas de células tumorales. Sin embargo, su principal uso está relacionado como una molécula odorante o fragancia en productos de uso tópico en productos cosméticos y en la industria del perfume. Objetivo: En este estudio se evaluó el efecto del linalool sobre la bioenergética de mitocondrias aisladas de hígado de rata. Métodos: El linalool en concentraciones entre (5-100μg/mL) fue evaluado en mitocondrias aisladas de ratas machos albinas raza Wistar, de acuerdo al método descrito por Voss et al (1961). Inicialmente, se determinó el consumo de oxígeno en mitocondrias intactas mediante un método polarográfico por medio de un oxígrafo. Posteriormente, se determinó el efecto del compuesto sobre las enzimas de la cadena respiratoria mitocondrial usando métodos polarográficos y espectrofotométricos. Resultados: Los resultados obtenidos indican que el linalool en las concentraciones de 5, 10, 50 y 100μg/mL, afecta la velocidad de consumo de oxígeno en el estado 3 y 4 de mitocondrias energizadas con glutamato-malato y succinato. Sin embargo, el efecto inhibitorio es mayor al usar glutamato-malato como sustrato. Por su parte, el análisis de la actividad de las enzimas de la cadena respiratoria mitocondrial mostró que el linalool (50μg/mL) inhibe los complejos I, III y la actividad ATPasa. Conclusiones: El linalool inhibe el complejo I, complejo III y la ATPasa, esta inhibición podría aumentar la generación de especies reactivas de oxígeno.

Bacground: The linalool (2,6-dimethyl-2 ,7-octadiene-6-ol) is a monoterpene present in more than 200 types of plants, and it is the major component of several essential oils. The linalool has a wide range of potential pharmacological properties, such as antiseptic, anxiolytic, anti-inflammatory, antifungal, antimicrobial and proapoptotic in different tumor cell lines. However, its primary use is associated as an odorant molecule or fragrance in topical products, in cosmetics products and fragrance industry. Objective: In this study the effect of linalool on the bioenergetics of isolated rat liver mitochondria was evaluated. Methods: Linalool in concentrations between (5-100μg/mL) was evaluated in isolated mitochondria of male albino Wistar rats, according to the method described by Voss et al (1961). Initially, the oxygen consumption by intact mitochondria was determined by polarographic method using an oxygraph. Subsequently, the effect of the compound on mitochondrial respiratory chain enzymes was evaluated, by using polarographic and spectrophotometric methods. Results: The results obtained indicated that linalool, at concentrations of 5, 10, 50 and 100μg/mL, affects the rate of oxygen consumption in state 3 and 4 of mitochondria energized with glutamate-malate and succinate. However, the inhibitory effect was greater when using glutamate-malate as substrate. For its part, the analysis of the enzyme activities of the mitochondrial respiratory chain showed that linalool (50μg/mL) inhibits complex I, III, and ATPase activity. Conclusions: linalool inhibits complex I, complex III and ATPase, this inhibition could increase the generation of reactive oxygen species.

SMOKING CESSATION IN A COMMUNITY PHARMACY: PRELIMINARY RESULTS OF A PHARMACEUTICAL CARE PROGRAMME

Background: According to the World Health Organisation, tobacco use is one of the most widespread public health threats in the world, making it particularly urgent to promote smoking cessation. The effectiveness of pharmacist interventions in smoking cessation has been documented in the international literature, but not sufficiently in Portugal. Objective: To report the preliminary results of study to assess the effectiveness of a smoking cessation programme delivered in Portuguese community pharmacies using an outsorcing-based regimen. Methods: Within the scope of a pharmaceutical care programme implemented in seven community pharmacies by an outsourced pharmacist, a specific consultation for smoking cessation was developed, in accordance with Portugal's General Directorate of Health's recommendations and instruments. The smokers were identified and invited to join the programme by the pharmacy staff during their daily activities. Patients that accepted signed an informed consent. Through several face-to-face and phone consultations and based on a comprehensive patient approach, personalised plans to quit tobacco were defined with the patients' agreement. The effectiveness of the service was assessed through the evaluation of quit rates at 1, 6 and 12 months. The continuous variables were expressed as mean ± standard error of the mean. Results: During approximately 5 years (between January 2009 and July 2014), 69 smokers joined the programme. Of these, 17 desisted during the first consultation. Of the remaining 52 patients, the mean age was 47.4 ± 2.11 years old and 55.8% were male. A total of 264 pharmaceutical consultations were delivered and, on average, each patient received 7.7 ± 0.81 interventions. Most interventions (60.1%) were pharmacological (e.g. nicotine replacement products), while non-pharmacological measures (e.g. motivational interviewing) represented 39.9%. Five patients were referred to a physician. At 1 month after the quit date, 37 patients were abstinent (53.6%); 6 months later the number reduced to 24 (34.8%) and, 1 year later, 16 patients remained abstinent (23.2%). Conclusions: The implementation of a smoking cessation programme in community pharmacies using an external pharmacist may contribute effectively to tobacco cessation in Portugal.

Antecedentes: Según la Organización Mundial de la Salud, el tabaco es una de las mayores amenazas del mundo, siendo urgente promover el abandono tabáquico. La efectividad de las intervenciones farmacéuticas en cesación tabáquica ha sido documentada en la literatura, pero no en Portugal. Objetivo: Comunicar los resultados preliminares de un estudio para evaluar la efectividad de un programa de cesación tabáquica desarrollado en farmacias comunitarias portuguesas usando un régimen de out-sourcing. Métodos: En el ámbito de un programa de atención farmacéutica implantado en siete farmacias por un farmacéutico externalizado, se desarrolló una consulta de cesación tabáquica siguiendo las recomendaciones e instrumentos de la Dirección General de Salud de Portugal. Se identificó a los fumadores y el personal de la farmacia durante sus actividades rutinarias les invitó a unirse al programa. Los que aceptaban firmaban un consentimiento informado. Mediante consultas presenciales y telefónicas y a través de un abordaje global del paciente, se definieron en acuerdo con el paciente planes personalizados de abandono del tabaquismo. La efectividad del servicio se midió mediante las tasas de cesación a 1, 6 y 12 meses. Las variables continuas se expresaron como media ± error estándar de la media. Resultados: Durante aproximadamente 5 años (entre enero 2009 y julio 2014), 69 fumadores se unieron al programa. De estos, 17 desistieron durante la primera consulta. Entre los restantes 52 pacientes, tenían 47.4 ± 2.11 años y el 55,8% eran hombres. Se realizaron 264 consultas farmacéuticas y, en media cada paciente recibió 7.7 ± 0.81 intervenciones. La mayoría de las intervenciones (60,1%) eran farmacológicas (p.e. productos de substitución de nicotina), y el restante 39,9% fueron medidas no farmacológicas (p.e. entrevista motivacional). Cinco pacientes fueron remitidos al médico. Después de 1 mes de la fecha convenida para el inicio de la cesación, 37 pacientes (53,6%) estaban en abstinencia; 6 meses más tarde el número se reducía a 24 (34,8%) y un año más tarde 16 pacientes (23,2%) permanecían abstinentes.Conclusión: La implantación de un programa de casación tabáquica en farmacias comunitarias, utilizando un farmacéutico externo, puede contribuir efectivamente a la cesación tabáquica en Portugal.

EXPERIMENTAL OPTIMIZATION OF THE FREEZE DRY PROCESS OF CAPE GOOSEBERRY ADDED WITH ACTIVE COMPOUNDS BY VACUUM IMPREGNATION

Antecedentes: Los procesos de optimización experimental, representan una herramienta efectiva para el mejoramiento de la calidad de los productos, contribuyendo en la diversificación de productos en la cadena de uchuva, como frutos promisorios de exportación. Objetivo: El objetivo del estudio fue optimizar el proceso de liofilización para obtener uchuvas (Physalis peruviana L.) semiesféricas adicionadas con componentes activos y de excelentes atributos de calidad. Métodos: Las muestras semiesféricas (3 - 4 g) fueron tratadas inicialmente por impregnación al vacío con una emulsión que contenía proteína de soja, sucralosa, tensoactivos, calcio, vitamina D3 (Colecalciferol), vitamina E (DL-α-tocoferol acetato) y vitamina B9. La optimización experimental del proceso de liofilización se realizó con un diseño factorial 2² con el fin de determinar la condición óptima de operación, utilizando como variables independientes la velocidad de calentamiento de la placa (ºC/min) y el tiempo de sostenimiento a la temperatura de la placa para cada segmento del proceso y como variables dependientes: concentración de los componentes con actividad fisiológica, actividad de agua, humedad, textura, color y tiempo total de proceso. Resultados: Se identificó una influencia de las condiciones del proceso sobre las variables de respuesta, donde una porción de 49 g de uchuvas liofilizadas alcanzó contenidos superiores al 20% del valor diario de referencia de vitamina D y entre el 10 y 20% del valor diario de referencia en calcio y vitaminas B9, C y E; permitiendo identificar al producto como ''Excelente fuente de vitamina D'' y ''Buena fuente de calcio y vitaminas B9, C, E'', según la normativa colombiana. La condición óptima de proceso se alcanzó a una velocidad de calentamiento de placa de 0,04 ºC/min y un tiempo de sostenimiento de la temperatura de la placa de 1,2 h. Conclusiones: La aplicación integrada de procesos de impregnación al vacío y liofilización, representan una alternativa importante en el desarrollo de alimentos funcionales en el fruto de uchuva.

Introduction: Experimental optimization processes represent an effective tool for improving the quality of products, contributing to the diversification of products in the agricultural value chain of cape gooseberry, as promising export fruit. Aim: The aim of this study was to optimize the freeze-drying process to obtain hemispherical cape gooseberries (Physalis peruviana L.) with added active compounds, and with excellent quality attributes. Methods: The hemispherical samples (3 - 4 g) were initially treated by vacuum impregnation with an emulsion containing soybean protein, sucralose, surfactants, calcium, vitamin D3 (cholecalciferol), vitamin E (DL-α-tocopherol acetate) and vitamin B9. The experimental optimization of the freeze-drying was performed using a factorial design 2² to determine the optimum operating condition, using as independent variables the rate of heating plate (°C/min) and holding time at the temperature of the plate for each segment of the process and as dependent variables: concentration of physiologically active components, water activity, moisture content, texture, color and total processing time. Results: An influence of process conditions on the response variables was identified, where a portion of 49 g of freeze-dried gooseberries reached over 20% content of daily reference value (DRV) of vitamin D and between 10 and 20% of DRV in calcium and vitamin B9, C and E; allowing to identify the product as ''Excellent source of vitamin D'' and ''Good source of calcium and vitamin B9, C, E'', according to Colombian regulations. The optimal process condition was reached at a 0.04 °C/min heating rate of plate and a 1.2 h holding time of the plate temperature. Conclusions: The application of the integrated processes of vacuum impregnation and freeze-drying show an important technological alternative to development of functional foods from the fruit of cape gooseberry.