Actualidades Biológicas

ANÁLISIS DE POLIFENOLES TOTALES DE SEMILLAS MADURAS Y CULTIVOS CELULARES DE ALGUNAS VARIEDADES DE CACAO COLOMBIANAS

The aim of this research was to establish cocoa (Theobroma cacao) cell suspensions culture to analyze the total polyphenols content for two Colombian cocoa varieties and to compare the results with the total polyphenols content from the same field varieties. The final results showed that it is possible to produce big amount of cocoa cell biomass able to synthesize the metabolites without loosing its organoleptic properties (smell, color, and flavor), and to produce an acceptable content of total polyphenols compared with the natural seeds. This preliminary study is a promising perspective for future production of the antioxidants and to supplement with them the cocoa by-products

El propósito de esta investigación fue el establecimiento de suspensiones celulares de cacao (Theobroma cacao) para analizar el contenido de polifenoles totales en dos variedades de cacao Colombianas y comparar estos resultados con el contenido total de polifenoles para las mismas variedades de campo. Los resultados finales mostraron que es posible producir gran cantidad de biomasa de cacao capaz de sintetizar los metabolitos sin perder sus propiedades organolépticas (olor, color y sabor), y producir un contenido aceptable de polifenoles totales comparado con las semillas naturales. Este estudio preliminar es una perspectiva promisoria para la producción futura de antioxidantes y suplementar con ellos los productos derivados del cacao.

**EVALUACIÓN PRELIMINAR DE LA TOXICIDAD Y PATOLOGÍA DE LA CEPA COLOMBIANA BACILLUS SPHAERICUS EN TEJIDOS DE RATÓN**

Colombian isolate Bacillus sphaericus OT4b25 was tested for toxicity and pathology on rabbits and mice as mammalian models. After a high single dose of microorganism (10(8)-10(9) spores/ml) in four different tests that included dermal, inhalatory, oral, and intraperitoneal routes of administration, subsequent daily observations were performed and weekly body weight was measured. In the oral and intraperitoneal routes infectivity was evaluated by a gross necropsy at interim or final sacrifice, recovering the microorganism both from organs and from peripheral blood. In the oral test, clearance of microorganism was estimated in feces and in the inhalatory test it was estimated from lungs. In both tests a decrease of the recovered microorganism was observed in time. Even though in the oral test recovery of the microorganism from the liver, spleen and lungs and additionally in the intraperitoneal from caecum and injection site was observed, it was not recovered from blood and brain in both tests. Although a persistence of the microorganism in animals was observed after oral, inhalatory and intraperitoneal routes of administration, no animals died or showed lesions during each test, and the body weight was not affected compared with the control groups. In conclusion, at the conditions and doses tested Bacillus sphaericus OT4b25 is not toxic or pathogenic following dermal, oral, inhalatory, and intraperitoneal routes of administration.

La toxicidad y patogenicidad del aislamiento colombiano de Bacillus sphaericus OT4B25 fue probada en conejos y ratones como modelos mamíferos. Después de la administración de una sola dosis del microorganismo (10(8)10(9) esporas/ml) en cuatro diferentes pruebas que incluían rutas de administración dérmica, inhalatoria, oral e intraperitoneal, se realizó un seguimiento con observaciones diarias y la determinación del peso de los individuos semanalmente. En las dos últimas rutas de administración la infectividad fue evaluada a través de necropsias en sacrificios interinos intentando recuperar el microorganismo de órganos y sangre. En la prueba oral, se estimó la eliminación del microorganismo en heces y en la inhalatoria se hizo de los pulmones, en ambas se observó la disminución en los títulos del microorganismo recuperado a través del tiempo. aunque en la ruta de administración oral el microorganismo se recuperó principalmente del hígado, bazo y pulmones, adicionalmente a estos órganos del sitio de inyección y del ciego en la intraperitoneal, no se recuperó de sangre o cerebro en ambas pruebas. a pesar de la persistencia del microorganismo en los animales tras su administración oral, inhalatoria e intraperitoneal, no se observaron muertes o lesiones durante ninguna de las pruebas y el peso corporal no se vio afectado comparado con los grupos control. En conclusión, en las condiciones y dosis probadas, la cepa de Bacillus sphaericus OT4B25 no es patógena o tóxica a través de las rutas de administración probadas.

SOMBRA DE SEMILLAS, SUPERVIVENCIA DE PLÁNTULAS Y DISTRIBUCIÓN ESPACIAL DE LA PALMA OENOCARPUS BATAUA, EN UN BOSQUE DE LOS ANDES COLOMBIANOS

El objetivo de este trabajo fue cuantificar aspectos demográficos de una población de la palma Oenocarpus bataua tales como sombra de semillas, supervivencia de plántulas, densidad y distribución espacial de semillas, plántulas, juveniles y adultos, en un bosque húmedo premontano de Antioquia (Colombia), mediante parcelas circulares y otras de media hectárea y de una hectárea. Esta palma de dosel y sub-dosel produce frutos de tamaño grande que son consumidos por frugívoros. La abundante producción de frutos y las cortas distancias de dispersión, generan una sombra de semillas espacialmente restringida (a pesar de las altas tasas de remoción), la cual produce una distribución agregada de plántulas y juveniles, posiblemente relacionada con la defaunación de estos bosques por transformación del hábitat y cacería, no contándose así con la calidad y abundancia de dispersores de larga distancia como aves y mamíferos grandes. Sin embargo, ardillas (Microsciurus mimulus y Sciurus granatensis) y guatines (Dasyprocta punctata) contribuyen en la dispersión a corta distancia, aunque en menor proporción mostraron evidencias de dispersión a mayores distancias (53-62 m). A diferencia de los estadios juveniles los adultos mostraron un patrón aleatorio que podría ser explicado por la mortalidad denso-dependiente de los estadios de semillas, plántulas y juveniles. A pesar de las limitaciones en la dispersión, la semilla grande y bien dotada de esta palma genera plántulas robustas que producen una regeneración exitosa, al punto que O. bataua es una de la especie dominantes en el bosque estudiado. Estudios como este son fundamentales para el manejo y conservación de esta palma promisoria, cuya abundancia ha disminuido debido a la explotación intensiva y a la transformación y reducción de su hábitat de bosque natural.

The objective of this work was to quantify some aspects of the demography of a population of the Oenocarpus bataua palm such as seed shadows, seedling survival, density and spatial distribution of seeds, seedlings, juveniles and adults, in a premontane humid forest of Antioquia (Colombia), using circular plots and others of half hectare and one hectare. This palm of canopy and sub-canopy produces fruits of great size consumed by frugivores. The abundant production of fruits and the short distances of dispersion generate spatially restricted seed shadows, in spite of the high rates of removal, which produces an aggregated distribution of seedlings and juveniles. It can be related to defaunation of these forests by transformation of habitat and hunting, which reduce the quality and abundance of long-distance dispersers like large birds and mammals. Nevertheless, squirrels (Microsciurus mimulus y Sciurus granatensis) and agoutis (Dasyprocta punctata) contribute to short-distance dispersal, although to a lesser degree they performed dispersal to greater distances (53-62 m). In contrast to juveniles, the adults showed a random distribution pattern that could be explained by density-dependent mortality of the seeds, seedling and juvenile stages. In spite of limited dispersal, the large seeds of this palm generate robust seedlings and successful regeneration, to the point that O. bataua is one of the dominant species in the forest. These kinds of studies are important for the management and conservation of this promissory palm, whose abundance has declined due to intensive exploitation and transformation and reduction of its natural forest habitat.

**VARIABILIDAD GENÉTICA DE LA TORTUGA DEL RÍO MAGDALENA, PODOCNEMIS LEWYANA (DUMÉRIL, 1852), EN LA DEPRESIÓN MOMPOSINA, COLOMBIA**

Two populations of the endangered Magdalena River turtle, Podocnemis lewyana, separated by 55 km in the Mompos Depression were sampled to quantify levels of genetic variation and inspect for evidence of genetic structure. Allozyme analyses resolved 22 presumptive gene loci, but only one resulted polymorphic. Genotype proportions at this locus departed from those expected under Hardy-Weinberg equilibrium, showing heterozygote deficiencies in both populations. However, allele frequencies at the locus did not differ between the two sites. The level of genetic variability documented is one of the lowest yet reported for a turtle species, and may reflect either a historical or recent bottleneck event. The lack of evidence for genetic structure suggests gene flow among the sites, at least historically, but the heterozygote deficiencies at each site also imply that inbreeding may be occurring presently within each deme.

Dos poblaciones de la tortuga amenazada, Podocnemis lewyana, en la Depresión Momposina, separadas por 55 km fueron evaluadas para cuantificar los niveles de variación genética e inspeccionar evidencias de estructura genética. Mediante un análisis de alozimas resolvimos 22 presuntivos loci genéticos, pero sólo uno resultó polimórfico. Las proporciones genotípicas en éste locus difirieron significativamente a las esperadas bajo el modelo Hardy-Weinberg, mostrando en las dos poblaciones una deficiencia de individuos heterocigotos. Además, no se encontraron diferencias en las frecuencias alélicas entre los dos sitios. El nivel de variabilidad genética documentada en este estudio es una de las más bajas reportadas para una especie de tortuga, y podría reflejar un evento de cuello de botella histórico o reciente. La falta de evidencia de estructura genética sugiere flujo genético entre los sitios, por lo menos históricamente, pero la deficiencia de individuos heterocigotos en ambos sitios podría implicar que ha ocurrido entrecruzamiento reciente dentro de cada deme.

VARIACIÓN ESPACIO-TEMPORAL DE LA ASOCIACIÓN DE ESPECIES DE PECES EN LA LAGUNA DE CACHIMBERO, UN HUMEDAL EN LA CUENCA MEDIA DEL RÍO MAGDALENA, COLOMBIA

La asociación de peces fue estudiada en la Laguna de Cachimbero en diferentes momentos pluviométricos. Las capturas fueron realizadas en cuatro sitios; en cada uno de ellos se muestreo las zonas litoral y pelágica. Fueron capturadas con redes de espera: 23 especies de peces, 1.372 individuos y un peso total de 96.160,28 g. Las especies Caquetaia kraussii, Cyphocharax magdalenae, Hoplias malabaricus, Pimelodus blochii, Prochilodus magdalenae y Trachelyopterus insignis fueron las más importantes en abundancia y biomasa. La mayoría de las especies fueron capturadas en zonas litorales y en sitios de muestreo más próximos a los tributarios del humedal y del canal de salida al Río Magdalena y el Caño Cachimbero. La Captura por Unidad de Esfuerzo total (cpue, g/m2) fue diferente entre las zonas litoral y pelágica y entre sitios de muestreo. Los valores de diversidad no superaron en ningún caso a 0,8 bits. La equidad alcanzó valores significativamente altos en algunos muestreos. Cyphocharax magdalenae, Pimelodus blochii y Caquetaia kraussii fueron las especies más importantes en la asociación espacio-temporal. No se encontró una relación significativa entre las características del medio y la asociación de especies.

Fish assemblage was studied in the Cachimbero lagoon in different raining periods. Catches were made in four sampling sites; each one was sampled its litoral and pelagic zones. 23 species of fish, 1,372 specimens (96,160.28 g) were caught with the gillnets. Caquetaia kraussii, Cyphocharax magdalenae, Hoplias malabaricus, Pimelodus blochii, Prochilodus magdalenae, and Trachelyopterus insignis had the highest number of individuals and mass. Most of species were founded in litoral zones and in the sampling sites nearest to tributaries and to the outflow channel to the Magdalena River, the Cachimbero Channel. Total CPUE were different between litoral and pelagic zones and among sampling sites. Diversity values in each sampling never ever exceed 0.8 bits. Evenness was high in some climatic moments. Cyphocharax magdalenae, Pimelodus blochii, and Caquetaia kraussii were the most important fish species in the fish assemblage. We did not found any relationship between environment characteristics and the species assemblage.

ESTUDIO HISTOLÓGICO Y MORFOLÓGICO PRELIMINAR DE LA HIPÓFISIS DE ALEVINOS DE CACHAMA BLANCA, PIARACTUS BRACHYPOMUS (CUVIER) (CHARACIDAE)

Piaractus brachypomus es una especie de gran importancia económica en colombia. el propósito de este trabajo fue efectuar un análisis de la hipófisis de alevinos de esta especie a nivel histológico y anatómico. Se realizaron cortes sagitales y transversales de 5 y 7 µm de las hipófisis de veinte alevinos, para estudios histológico y de reconstrucción tridimensional. En los alevinos, la hipófisis se ubica en la zona ventral del cerebro, posterior al quiasma óptico, parcialmente integrada entre el nucleus tuberalis ventralis (TV) y el hypotalamus periventriculares caudalis (Hc) del hipotálamo, la que parece estar conectada por tejidos conectivo y nervioso. La hipófisis presenta células basófilas (B) con núcleos grandes y excéntricos, y cromófobas (C) con núcleos pequeños y un citoplasma sin tinción, no hay presencia de acidófilas (A). La irrigación sanguínea está presente en todas las zonas de la hipófisis. Las diferencias con la literatura son atribuidas a la inmadurez de la glándula.

Piaractus brachypomus is a species of great economic importance in Colombia. The purpose of this study is to accomplish an analysis at the histological and anatomical level of alevin pituitary of this species. We realized sagittal and transversal cuts of 5 and 7 µm of 20 alevin pituitaries for a histological and three-dimensional reconstruction studies. The pituitary of these specific alevins is located in the ventral zone of the brain, posterior to the optic chiasm, partially integrated by connective and nervous tissues between the nucleus tuberalis ventralis (TV) and hypotalamus periventriculares caudalis (Hc). The pituitary contains basophils with large and non-centric nuclei, as well as chromophobes (C) with small nuclei and unstained cytoplasm. There is no presence of acidophils (A); however, blood flow reaches all parts of the pituitary. Discrepancies between our study and that of literature are attributed to glandular immaturity.

DIATOMEAS PERIFÍTICAS DE LA ZONA DE RITRAL DEL RÍO MEDELLÍN (ANTIOQUIA), COLOMBIA

Se estudió la agrupación de diatomeas colonizadoras de sustratos artificiales en la zona de ritral del río Medellín, ubicada dentro de la reserva ecológica del Alto de San Miguel entre los 1.800-2.800 m de altitud, en el municipio de Caldas (Antioquia). De enero a marzo de 1998 se tomaron muestras semanales con el fin de determinar variaciones en la composición del ensamble de diatomeas perifíticas bajo condiciones de estrés por sequía resultado del fenómeno de El Niño. Durante el proceso de colonización se encontraron 37 especies de diatomeas con distribución tropical, subtropical y cosmopolita. Los taxones encontrados fueron agrupados en 10 familias y 18 géneros, siendo Naviculaceae la de mayor número de géneros (6). Se encontraron diferencias a nivel temporal y espacial entre diversidad y equidad, las que fueron asociadas a las fluctuaciones entre épocas de muestreo y debidas a las variaciones en el caudal, el fósforo soluble reactivo, el oxígeno disuelto y el nitrógeno amoniacal. Cabe anotar que esta última variable fue la única de carácter químico que presentó relación significativa con la riqueza de diatomeas. El caudal se relacionó inversamente con la diversidad (r = -0,43; p = 0,035). Las demás variables evaluadas no presentaron fluctuaciones importantes, mostraron un comportamiento independiente del caudal y no presentaron relación con los índices biológicos.

The diatoms assemblage that colonized artificial substrata in the rhithron area of Medellin river was studied. This zone is located in the natural reservation “El Alto de San Miguel” between 1,800-2,800 m. From January to March 1998, were weekly taken samples with the purpose to evaluated variations in the composition of the assemblage under drought stress caused by the ENSO. During the colonization process, 37 diatom species with tropical, subtropical, and cosmopolitan distribution were found. The taxa were grouped in 10 families and 18 genera, being the Naviculaceae that presented the greatest number of genera (6). Spatial and temporal differences were found in diversity and evenness, associated with fluctuations inflow, soluble reactive phosphorus, dissolved oxygen, and ammonium nitrogen; this last variable was the only chemical one significant and correlated with the diatom evenness. The flow presented inverse correlation with diversity (r = -0,43; p = 0,035). The other measured variables did not present important fluctuations and showed an independent behavior in relation to the flow and did not present any relation with the biological indices.

**OVIPOSITION OF STENORRHINA DEGENHARDTI (SERPENTES: COLUBRIDAE) IN A NEST OF ACROMYRMEX OCTOSPINOSUS (HYMENOPTERA: FORMICIDAE)**

During excavation of a leaf-cutter nest (Acromyrmex octospinosus), we discovered a clutch laid by the colubrid snake Stenorrhina degenhardti. The eggs and the bulk of the ant nest were transferred to a laboratory at the University of Antioquia for rearing. The ants not only tolerated the snake clutch within their growth chamber, but the workers also actively used the eggs as structures to support symbiotic fungal growth. The lack of aggression to both the ovipositing female (presumably) and emerging neonates suggests that this association may represent more than a merely commensal association and deserves further study.

Durante la excavación de un nido de la hormiga cortadora Acromyrmex octospinosus, descubrimos una nidada de la serpiente Stenorrhina degenhardti de la familia Colubridae. Tanto los huevos como la masa del nido de hormiga fueron transferidos al laboratorio de la Universidad de Antioquia para ser mantenidos en cautiverio. Las hormigas no solo toleraron el nido de la serpiente dentro de la cámara de crecimiento, sino que activamente usaron los huevos como estructuras de soporte para el crecimiento del hongo simbionte. La ausencia de agresión hacia la hembra ovipositora (presumiblemente) y hacia los neonatos emergentes, sugiere que ésta asociación puede representar más que una asociación de comensalismo y amerita estudios futuros.