Revista Colombiana de Ciencias Químico - Farmacéuticas

HPV integration and cervical cancer

El cáncer de cuello uterino (CCU) constituye un problema generalizado de salud que ocupa el segundo lugar a nivel mundial entre las neoplasias malignas de la mujer. Las infecciones persistentes con virus del papiloma humano (VPH) de alto riesgo son reconocidas actualmente como un factor necesario en el desarrollo de CCU y sus lesiones precursoras. Uno de los procesos que parece estar más involucrado en el origen de las células malignas, es el evento de integración del virus al genoma del huésped, relacionado también con la progresión de lesiones preinvasivas y el mantenimiento del fenotipo transformado. Estos eventos de integración, especialmente de VPH tipo 16 se dan en secuencias específicas del genoma viral, principalmente en su región E1/E2, interrumpiendo la secuencia y permitiendo que exista desregulación de las actividades de transcripción, conduciendo a la sobreexpresión de las oncoproteínas virales E6 y E7 que normalmente inactivan genes supresores de tumores, como p53 y pRb, responsables del control en importantes puntos de chequeo del ciclo celular. Actualmente el proceso de integración viral, es considerado como una alteración genética importante que caracteriza las displasias malignas, con potenciales aplicaciones como marcador de progresión de lesiones precursoras y herramienta de diagnóstico.

Cervical cancer is the second most prevalent cancer worldwide and is the second leading cause of cancer deaths in women. Persistent infection with high-risk human papillomaviruses (HPVs) types are the causative agents of cervical cancer, since 99% of tumors are positive for HPV DNA, HPV is a necessary cause of invasive cervical cancer worldwide. One of the key events of HPV-induced carcinogenesis is the integration of the HPV genome into a host chromosome, related with precancerous lesions progression. Integration follows a more specific pattern with respect to the HPV genome, expression of the viral E6 and E7 genes is consistently maintained, whereas other positions of the viral DNA are deleted or their expression is disturbed, like E2 gene. Loss of expression of the HPV E2 transcriptional repressor is significant and may be critical for malignant progression, as it may result in increased HPV E6 and E7 expression. The HPV E6 and E7 oncoproteins inactivate the p53 and pRB tumor suppressors; expression of high-risk HPV E6/E7 oncogenes provides a subset of the minimally required carcinogenic hits for full transformation of human epithelial cells. There is also evidence for deregulated HPV-16 E6-E7 mRNA stability after integration and specific alterations of host cellular gene expression have been detected upon HPV genome integration. Currently, integration of HPV is considered to be an important genetic alteration for the progression of intraepithelial lesions to invasive disease with potential clinical applications like mark tumour progression and diagnostic tool.

**Kerosene biodesulfurization by immobilized cells pseudomonas sp. No. 6 (native isolated) at a new bioreactor of pipe bed with recirculation**

En este trabajo se realizó la biodesulfurización de queroseno con células inmovilizadas de Pseudomonas sp. ATCC 39327, en un sistema emulsionado, W/O 30/70 (v/v), con medio mínimo de sales (MMS) como fase dispersa. El sistema de inmovilización consta de dos paneles de 60 tubos cada uno. Los tubos de alta alúmina tienen 140 mm de largo, 6,6 mm de diámetro externo y 3,2 mm de diámetro interno, con una porosidad del 43% y capacidad de retención de 9,5x109 células/g de soporte, colocados dentro de una columna de vidrio enchaquetada, de 80 por 400 mm de zona de reacción, conectada a un tanque de recirculación, y el fluido se mueve con aire a razón de 8,8 pies3/h. Después de 120 horas de proceso a 30 ºC y presión atmosférica se obtuvo una remoción del contenido de azufre de 43% y una pérdida calórica menor del 2%.

In this work, the kerosene biodesulfurization was developed by immobilized cells of Pseudomonas spp. ATCC 39327, in an emulsioned system W/O 30/70 (v/v) with sales minimal medium as disperse phase. The immobilization system has two panels of 60 pipes each one. The Alta Alumina pipes has 140 mm long, 6,6 mm of external diameter and internal diameter 3,2 mm, with 43% porosity and retention capacity of 9,5x109 cells/g of support, put into jacked column, with a reaction zone of 80 by 400 mm of reaction zone, connected to recirculation tank, and the fluid is moved by air at 8,8 feet 3 /h. The process rendered a sulfur removal of 43% with a caloric lost of less than 2,0%, after 120 hours of treatment at 30 ºC and normal pressure.

General aspects about the industrial automation in pharmaceuticals

El presente artículo recopila la información sobre las tendencias mundiales en automatización de procesos industriales, aplicados al campo de los procesos de transformación de materiales en el sector farmacéutico. Se plantean los diferentes niveles de automatización que pueden ser de interés para la industria farmacéutica nacional y se hace una reflexión sobre el grado de avance para nuestra industria, seleccionando información sobre casos exitosos de automatización llevados a cabo desde la academia para el sector.

In this article, information about general world trends in pharmaceutical manufacturing automation intended for material processing are reviewed. Nowadays, different levels in automation have been developed, which would be interesting and useful in the local pharmaceutical industry. For this reason, a general analysis about their possible development and implementation in the Colombian pharmaceutical industry was done. Finally, some successful automations cases proposed by several local universities are showed.

Preliminary evaluation of hypoglycemic activity in diabetic mice and in vitro antioxidant activity of Bauhinia kalbreyeri Harms extracts

Bauhinia kalbreyeri (casco de vaca) es una planta tropical de la familia Caesalpinaceae. Sus hojas sirvieron de base para obtener un extracto etanólico con el cual se realizaron dos bioensayos con el fin de determinar la actividad hipoglicemiante de la planta. El estudio se complementó evaluando la actividad antioxidante por el método del radical libre DPPH y realizando un análisis fitoquímico preliminar. La diabetes se indujo en ratones normoglicémicos mediante la administración de aloxano en dosis de 75 mg/Kg. Los animales que resultaron diabéticos fueron asignados a diferentes grupos para ser sometidos a tratamiento con el extracto (1.000 mg/Kg), el disolvente de los tratamientos (control), la tolbutamida (patrón, vía oral) y la insulina (vía subcutánea). En los bioensayos se realizaron comparaciones mediante un análisis de varianza (ANOVA). La dosis única de 1.000 mg/Kg no disminuyó los niveles de glucosa sanguínea en ratones con diabetes tipo I (insulino dependiente). No obstante, los extractos etanólicos y acuosos de hoja y corteza de la planta mostraron capacidad atrapadora de radicales libres comparable al ácido ascórbico, utilizado como patrón. La actividad antioxidante de los extractos podría estar relacionada con el uso de la planta como antidiabético dado en la etnobotánica y ser consecuencia de la abundante cantidad de metabolitos tipo fenólico encontrados.

Bauhinia kalbreyeri (cow hof ), is a tropical plant included in the family Caesalpinaceae. In this work, an ethanolic was obtained. From this extract two bioassays were carried out in order to determine the hypoglycemic action of plant. The study was complemented evaluating the antioxidant activity by the DPPH free radical method and carrying out a preliminary phytochemical analysis. The diabetes was induced in normoglycemic mice by means of aloxane administration in dose of 75 mg/Kg. The diabetic animals were assigned to different groups to be subjected to treatment with the extract (1.000 mg/Kg), the vehicle (control), the tolbutamide (pattern, per os) and the insulin (via subcutaneous). In those bioassays was carried out comparisons by means of a variance analysis (ANOVA). The unique dose of 1.000 mg/Kg did not present antidiabetic activity in mice with diabetes type I (insulin dependent). Nevertheless, the ethanolic and aqueous extracts of leaf and bark showed free radical scavenging capacity comparable to ascorbic acid, which was used as pattern. The antioxidant activity of extracts could be related with the ethnopharmacology use of Bauhinia kalbreyeri as antidiabetic, and being consequence of the abundant presence of phenolic-like compounds detected.

Validation of an analytical methodology intended to quantification of naproxen in liquid/liquid partitioning studies by ultraviolet spectrophotometry

Se realizó la validación de la metodología analítica para la cuantificación de naproxeno (NAP) en medios acuosos de pH 1,2 y fuerza iónica µ 0,15 mol L-1 y de pH 7,4 y µ 0,15 mol L-1, los cuales son empleados en estudios de la transferencia de este fármaco entre fases líquidas inmiscibles. El método analítico fue la espectrofotometría UV, en razón de que el NAP presenta en su estructura molecular grupos cromóforos compatibles (naftilo y carbonilo), los cuales permiten obtener una adecuada absorción en la región UV. Los parámetros validados en cada uno de los sistemas buffer fueron: especificidad, linealidad, repetibilidad del instrumento de medida y del método, y precisión intermedia. Adicionalmente se presentan los resultados del reparto de NAP en diferentes sistemas líquido/líquido a 25,0 °C a los dos valores de pH.

The validation of an UV spectrophotometric analytical methodology for quantification of naproxen (NAP) in aqueous media of pH 1,2 and 7,4, and ionic strength 0,15 mol Lsup-1 was developed. The validated methodology is intended to NAP liquid/liquid partitioning studies. UV spectrophotometry was employed because NAP has chromophoric groups (naftyl and carbonyl) thus, allowing good absorption in the UV region. The validated parameters in each pH studied were the following: specificity, linearity, measurement instrument reproducibility, method reproducibility, and intermedium precision. The NAP partitioning at both pH values at 25,0 °C in several liquid/liquid systems was also studied.

**Effects of the ethanolic extract fractions obtained from Hygrophila tytthaLeonard on the CNS**

Se evaluó en ratones albinos ICR el perfil de actividad que sobre el sistema nervioso central ejercen el extracto etanólico y las fracciones acuosa, clorofórmica, metanólica y hexánica obtenidas de Hygrophila tyttha (Acanthaceae. NV: amansamachos). Para tal fin se utilizaron pruebas destinadas a detectar posible actividad ansiolítica (laberinto en cruz elevado), antidepresiva (nado forzado), anticonvulsivante (pentilentetrazol, electrochoque) e hipnótica (potenciación de sueño inducido por pentobarbital). Se efectuó un estudio fitoquímico bioguiado para determinar las fracciones con mayor actividad. La fracción clorofórmica, a juzgar por los altos índices de protección obtenidos en el modelo del electroshock (90%) y el patrón de respuesta mostrado en la prueba del laberinto en cruz elevado (comparable a diazepam), posiblemente aglutina la mayor proporción de metabolitos activos. Según el análisis fitoquímico, éstos pueden corresponder a compuestos tipo cumarinas, flavonoides, esteroides y/o terpenos y saponinas. A la luz de estos resultados se encuentra justificación al uso etnobotánico de esta especie y se destaca el potencial de Hygrophila tyttha como fuente natural de posibles compuestos con aplicación terapéutica en trastornos de ansiedad y convulsivos.

The central nervous effects elicited by the ethanolic extract and the aqueous, chloroformic, methanolic and hexanic fractions obtained from Hygrophila tyttha were evaluated in ICR mice. To achieve this objective, tests to prove anxiolytic (elevated plus-maze), antidepressant (forced swimming), anticonvulsant (pentylenetetrazol, electroshock), and hypnotic (pentobarbital induced sleep) activity were applied. A bioguided phytochemical study was carried out to determine the most active fractions. According to the high protection scores obtained by the electroshock model (90%) and the activity registered by the elevated plus maze (comparable to diazepam), the chloroformic fraction possibly contains the main active compounds, such as coumarins, flavonoids, steroids and/or terpenoids and saponins, according to the phytochemical analyses. These results support the ethnobotanical use and the therapeutic potential of Hygrophila tyttha as a natural source of therapeutic compounds for the treatment of central disorders like anxiety and seizures.

Evaluating Clostridium sp. native strains1,3-propanediol production byfermentation from glycerol USP and raw glycerol from biodiesel production

Este trabajo tuvo como propósito evaluar la producción de 1,3 propanodiol (1,3-PD) a partir de glicerol en trece cepas nativas de Clostridium spp, aisladas de suelos colombianos. Se evaluaron dos medios de cultivo con glicerol USP (G1A y G1B) con diferentes concentraciones de PABA, biotina y stock de minerales; y un medio con glicerol industrial proveniente de la producción del biodiésel y se determinó la productividad volumétrica de 1,3 PD en las cepas nativas, en los tres medios. En promedio se pudo observar que las cepas nativas presentaron una productividad 1,6 veces superior cuando fueron cultivadas en el medio G1B y un rendimiento de 1,3-PD (Yp/s) 128% mas alto con el medio G1B. La cepa nativa IBUN13A presentó una productividad volumétrica 50% superior a la cepa de referencia Clostridium butyricum DSM523 en medio G1A e incrementó su productividad en un 28% en un medio con glicerol industrial (G2). Los resultados de este trabajo sugieren que el glicerol industrial sin purificación podría ser usado para la producción de 1,3-PD a nivel industrial, mediante la optimización de las condiciones de fermentación. La transformación de este residuo en un producto rentable, podría dar valor agregado a la producción de biodiésel en Colombia.

This work was aimed at evaluating 1,3 Propanediol (1,3-PD) production from glycerol in thirteen Clostridium sp. strains isolated from Colombian soils. Two culture media containing USP glycerol (G1A and G1B) and variable concentration of PABA, biotin and mineral stock, and a third medium containing raw glycerol from biodiesel production were evaluated. Volumetric productivity for 1,3-PD was determined in native strains in three media. In average native strains showed 1,6 greater volumetric productivity and a yield 128% higher when grown in G1B medium in comparison to those obtained in G1A medium. Native IBUN13A strain had 50% greater volumetric productivity (Q1,3 PD= 0,060 mg mL-1 h-1) than the Clostridium butyricum DSM523 reference strain (Q1,3 PD= 0.030 mg mL-1 h-1) and the same parameter was increased by 28% in raw-glycerol medium (G2) regarding that obtained in G1 medium. These results suggest that raw glycerol obtained from the biodiesel process without any purification may be used for producing 1,3-PD at industrial level by optimising fermentation conditions. Transforming this waste into an added-value product should become profitable the biodiesel production process in Colombia.