Revista Colombiana de Entomología

Evaluation of different aspersion equipment for the application of entomopathogenic nematodes

Se evaluaron los equipos de aspersión "Royal Cóndor" jardinera (RCJ), "Royal Cóndor" tradicional (RCT) y "Cálimax Leo Cafetera" (CLC), para determinar el efecto en Juveniles Infectivos (JI) de Steinernerna sp. (Rhabditida: Steinernematidae), sobre su viabilidad y patogenicidad. en condiciones de laboratorio simulando la aspersión de este nemátodo en el control de la broca del café, Hypothenemus hampei (ferrari), Para las aspersiones se utilizaron dosis de 500,000 JI/1,5 L de agua. El equipo CLC se evaluó a 20 y 40 psi. Todos los equipos se ensayaron con y sin filtros para observar si existía daño en los JI, Las aplicaciones se hicieron sobre frascos colectores de 80 ml, Posteriormente en dichos frascos y haciendo cuatro mediciones cada media hora se contó el número de JI vivos y muertos en cada aplicación. Mediante el método de infección en larvas de Galleria mellonella (L.), en cajas multipozo con papel filtro, se evaluó la virulencia de los JI después de cada aplicación en relación 10:1 (JI:larva) a las 24, 48 y 72 h después de la inoculación. Los resultados de viabilidad de los JI utilizando los diferentes equipos para aplicarlos usándolos con y sin filtros a diferentes presiones fueron similares estadísticamente. Estos oscilaron entre 96,57% ± 0,10 para CLC (40 psi) con filtros y 98,97% ± 0,08 para RCT sin filtros. La virulencia de los JI, sobre las larvas de G. mellonella, tampoco se afectó registrándose mortalidades del 100% al cabo de 72 h. Los resultados indican que es posible el uso de los equipos aquí evaluados para la aplicación de estos nemátodos sin que sufran deterioro en su acción sobre los insectos a los cuales van dirigidos.

"Royal Condor" garden (RCJ), "Royal Condor" traditional (RCT) and "Calimax Leo Cafetera" (CLC) sprayers were evaluated to determine the effect on viability and pathogenicity of Infective Juveniles (lJ) of Steinernema sp. (Rhabditida: Steinernematidae) under laboratory conditions, simulating the aspersion of this nematode in the control of the coffee berry borer, flypothenemus hampei (Ferrari). Doses of 500,000 lJ/1.5 L of water were used for the aspersions. The CLC was evaluated at 20 and 40 psi, AlI the sprayers were evaluated with and without filters to observe ifdamage to lJs existed. The applications were made in 80-ml collection bottles. Later, in the same bottles and making four measurements each half hour, the number of uve and dead IJs were counted in each application. Using the infection method in larvae of GaUeria mellonella (L.), in multiwell boxes with paper filter the virulence of the lJs was evaluated after each application in a ratio of 10:1 (IJ:larva) at 24, 48 and 72 hours after the inoculation. The results of viability of IJ5 using the different equipment to apply them with and without filters at different pressures were statistically similar. These oscillated between 96.57%±0.10 for CLC (40 psi) with filters and 98.97% ± 0.08 for RCT without filters. The virulence of the lJs on the larvae of O. meflonella was not affected either, registering mortalities of 100% after 72 hours. The results indicate that it is possible to use the equipment evaluated here for the appiication of these nematodes without them undergoing deterioration in their action on the insects to which they are directed.

**Secoridary kill of Periplaneta americana (Blattodea: blattidae) adults through cannibalism of specimens Rilled by imidacloprid**

Adultos de Periplaneta americana L. se evaluaron bajo condiciones de laboratorio para verificar la intoxicación indirecta (por canibalismo) por acción de un cebo tóxico con base en imidacloprid (2,15%). La mortalidad presentada por ingestión directa e indirecta (vía canibalismo) del cebo varió entre 97-100%. El tiempo letal medio de especímenes que consumieron el cebo directamente fue menor (11,012 h) y significativamente diferente que los que lo consumieron indirectamente (65,88-96.70 h). De igual forma el tiempo letal medio de "kriock down" de especímenes que ingirieron el cebo directamente fue menor (0,07 h) y significativamente diferente a los tiempos promedio de "knock down" de aquellos que lo adquirieron de manera indirecta, 7,98 h para aquellos que ingerían el tóxico de un individuo envenenado 24 h antes de los ensayos y 10,23 para aquellos que ingerían el tóxico de un individuo envenenado 24 h antes de los ensayos. Los resultados obtenidos comprobaron la hipótesis de que la molécula de imidacloprid es capaz de afectar a especímenes de forma indirecta (vía canibalismo).

Adults of Periplaneta americana L. were evaluated under laboratory conditions to verify indirect poisoning (by cannibalism) through action of a toxic bait base on imidacloprid (2,15%). The mortality caused by direct and indirect ingestion (througfl cannibalism) of the bait varied between 97-IOO%. The average lethal time of specimens that consumed the bait directly was less (11,012 h) and significantly different than those that consumed it indirectly (65,88-96,70 h). Sirnilarly, the average lethal knock down time of specimens that directly ingested the bait was less (0,07 h) and significantly different from average knocK down times of those that acquired it indirectly, 7,98 h for those that ingested the toxin of an individual poisoned 4 h before the tests and 10,23 h from those that ingested the toxin of an individual poisoned 24 h before the tests. The results obtained support the hypothesis that the imidacloprid molecule is able to affect specimens in an indirect way (through cannibalism).

**Pathogenicity of Paeczlomyces lilacinus and Metarhizzim anisopliae on Microcerotermes sp. termites (Isoptera: Termitidae)**

Se realizaron ensayos de laboratorio para determinar la patogenicidad de Paectiomyces lilactnus y Metarhizzum anisopliae sobre las termitas Microcerotermes sp Las termitas se colectaron en plantaciones de Eucalipto de la reforestadora San Sebastian de Buenavista Magdalena (Colombia) y se mantuvieron en oscuridad a una temperatura promedio de 25°C y humedad relativa de 59 5% Los bioensayos consistieron en colocar en contacto las termitas obreros con lonas 100% algodon impreg nadas con los hongos a concentraciones de 1x10¹, 1x10³, 3x10(5), 1x10(7), 3x10(8) conidios/ml. Para evaluar el efecto del hongo se utilizo la metodologia del agar arena El analisis estadistico mostro que no hubo diferencias significativas entre los efectos originados por P. lilacinusi y los testigos (X² = 3 32 P = 0, 51) Pero se presentaron diferencias significativas entre la mortalidad de las termitas con las diferentes con centraciones siendo 3x10(8) conidios/ml la que causo los porcentajes mas altos de mortalidad (X² 81 3 l0 001) Con Pi anisoplcae se observaron diferencias en la mortalidad a las diferentes concentraciones y los testigos excepto entre 1x10³ y 3x10(5) conidios/ml (Z = 0 97 E = 0 33) La conidiacion de ambos hongos en las termitas muertas fue mayor a concentraciones de 3x10(8) conidios/ml (P0 001) La DL fue de 1 78x108 conidios/ml para P. lilacinusi a los dos citas y de 0, 69x10² conidios/ml para M. anisopliae a los siete dias .

Laboratory bioassays were performed to determine the susceptibility of the termite Microcerotermes sp to the eritomopathogenic fiingus Paecilomyces hlacinus and Metarhizium anzsopliae The termites were collected from Eucalyptus plantations at the locality San Sebastian of Huenavista Magdalena (Colombia) Termites were maintained in darkness at mean temperature 25°C ancl relative humidity, 59,5%. The bioassays consisted in putting worker termites in direct contact with 100% cOtton canvas, impregnated with concentrations of the fungus at concentrations of 1x101, 1x103, 3x105, 1x107, 3x10° conidia/mI The agar sand method was used to evaluate the effect of the fungus Statistical analysis showed that there were no significant differences (X2=3 32 P=0 51) between the effects caused by P hlacrnus and the control ut there was a significant difference in the mortality of the termites with the different concentrations 3xlo8conidia/ml being the dose that caused the highest percentages of mortality (X2=81 3 Pc0 001) With ti anisoptiae significant difíerences were observed in the mortality at the different concentrations and the control (X2 = 320 7 P0 001) except for 1x103 and 3x105 conidia/ml (Z = 0 97 E = 0 33) TIte conicliation of both fungi in the dead termites was higher at the concentration of 3x108 conidiaiml (P0 001) The DL50 was 1 78x108 conidia/ml for P Iilacrnus at two days and O 69x102 conidia/rnl for ti. anisopliae at seven days.

Susceptability of fifth instar nymphs Rhodnius prolixus (Hemiptera Reduviidae) to the action of the fungus Beauveria bassiana

Se evaluó el efecto del hongo Beauveria bassiana (cepa UdeA13) en ninfas de quinto estado de desarrollo de Rhodnius prolixus bajo condiciones de laboratorio. El hongo se aisló de R. pallescens de la region de San Onofre (Sucre) y se cultivo en Agar Sabouraud Dextrosa (SDA) Las colonias de Insectos se criaron y mantuvieron en condiciones controladas de temperatura de 25-27°C y a una humedad relativa de 80% en oscuridad para Su crecimiento y reproducción Los insectos se alimentaron con sangre de gallina (Gallus gaitas) semanalmente durante 1 h. Los tratamientos consistieron en suspensiones de conidios del hongo entomopatogeno B bassiana en concentraciones de 3x10(5) 1x10(7)3x10(8) y 3x10(9) conidios/ml las cuales se asperjaron sobre los insectos utilizando un sistema emulador de la Torre de rulverizacion de Burgerjon A los insectos testigo se les asperjo una solucion acuosa de TWeen 80 (0 01%) Los efectos de las dosis del hongo B. bassiana se compararon entre ellas y los testigos Se encontraron diferencias significativas (P0,01) entre todos los tratamientos y el control así como entre todos los tratamientos sin el control. Las concentraciones 3x10(8)y 3x10(9) conidios/ml produjeron entre un 90 y 100% de mortalidad entre los dias 7 y 9 despues del tratamiento Los resultados hallados en esta investigacion indican que el hongo B bassiana cepa UdeA13 puede ser considerado como agente de control biologico del vector R prolixus .

The effect of the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana (strain UdeA13) was evaluated on fifth instar nymphs of Rhodnius prolixus under laboratory conditions. The strain was isolated from fi. pallesceris in the region of San Onofre (Sucre) and cultivated on Sabouraud Dextrosa Agar (SDA). The insect colonies were propagated and reared under controlled conditions of ternperature (25 27°C) and relative humidity (80%) in darkness for growth and reproduction. The insects were feed weekly for 1 h with hens blood (Gallus gaitas). The treatments consisted of conidial suspensions of the entomopathogenic fungus B. bassiana at concentrations of 3x10(5), 1x10(7), 3x10(8) y 3x10(9) conidia/ml which were sprayed on the insects using the Pulverization Tower emulator system Control insects were sprayed with an aqueous solution of Tween 80 (0,0l%). Effects were compared among fungus treatments and the controls Significative differences (P0,01) were found among ah treatments regardless of whether the control group was included in the analysis The concentrations of 3x10(6) y 3x10(9) conidia/ml produced 90 to 100% of mortality between 7 and 9 days after treatment. The results of this research indicate that fi bassiana (UdeA13) can be considered as a possible agent for the biological control of the vector R. prolixus.

The B biotype of Bemisia tabaci (Ilomoptera: Aleyrodidae) becomes more important in the Cauca ValIey

Para actualizar la informacion obtenida en el año 1997 sobre la composicion de especies y biotipos de moscas blancas en cultivos anuales en el Valle del Cauca, se hizo un nuevo reconocimiento en 37 localidades de 23 municipios del departamento. Se tomaron muestras de adultos y pupas en once cultivos. Por observación de las características morfológicas de las pupas se hizo la diferenciación entre las especies Bemisia tabaci (Gennadius) y Triateurocles vaporariorum (Westwood). La reconfirmación de la identidad de especies y la diferenciación entre los biotipos A y B de B. tabaci se realizó por medio de polimorfismo en ADN amplificado al azar (RAPD-PCR). T. vaporariorum, predominante en 1997 con 73% de las muestras ocupa ahora un lugar secundario con apenas 22 7% de las muestras El biotipo A de B. tabaci (en 1997 con 15,5°k de las muestras) no fue encontrado en ninguno de los muestreos realizados en 2002-2003. Por el contrario, la incidencia del biotipo B se incrementó de 11,5% en 1997 a 62,6% en 2003 Su mayor presencia se evidencio ademas por la comun ocurrencia de desordenes fisiologicos como la maduracion desuniforme en frutos de tomate el plateado de las hojas del zapallo y la clorosis de peciolos y vainas en habichuela que no habian sido senalados en el departamento Habichuela soya pimentón, batata y uva fueron registrados como nuevos hospedantes del biotipo B. En 14,6% de las muestras se hallo mezcla de biotipo B y T vaporariorum El biotipo B mostro altos niveles de resistencia a insecticidas convencionales y susceptibilidad a insecticidas novedosos (neonicotinoides y reguladores de crecimiento). Se discute la importancia que estos cambios en la composición de especies y biotipos de moscas blancas pueden tener para la agricultura de la región.

Fo update information on whitefly species composition and occurrence of whitefly biotypes affecting annual crops in the Cauca Valley of Colombia, a new survey was coriducted in 2002-2003. Thirty-seven sites in 23 differerit locations were visited. Adult and pupal samples were taken from 11 crops. Differentiation between the species Ilemisia tabaci (Gennadius) and frialeurodes vaporariorurn (Westwood) was based on morphological characteristics of the pupae. Reconfirmation of species identity and differentiation between biotypes A and B was done by means of random amplified polymorphic DNA (RAI'D's-PCR analysis). T. uaporariorum, the predominant species in 1997 (present iii 73% of the samples), now occupies a secondary place detected in only 22,7% of the samples. The Biotype A of B. tabaci (15,5% of the samples in 1997) was not found in any samples taken in 2002 2003 On the contrary the incidence of the B biotype increased from 11 S% in 1997 to 62 6% in 2003 Increased incidence of the B biotype was also evidenced by the common occurrence of such physiological disorders as irregular ripening of tomatoes, silver-leaf symptoms on squash and pod chlorosis on snap beans. These disorders had not been recorded in the Cauca Valley before. Snap beans, soybeans, pepper. sweet potato, and grapes were recorded as new host planta for the ¡3 biotype. A mix of T vaporariorum and biotype B was found in 14,6% of the samples The B biotype showed high levels of resistance to conventional insecticides and susceptibility to novel insecticides (neonicotinoids and insect growth regulators) The importance that these changes in species composition and biotypes of whitefly have to the regions agriculture are discussed.

**Observations on the biology and natural enemies of Saccahricoccus sacchari and Puluinarza pos elongata two homopterans associatecl with the crazy ant in sugar cane**

La hormiga loca es un insecto que adquiere importancia económica agrícola cuando establece relaciones simbioticas con insectos chupadores fitofagos En cana de azucar se asocia con dos de ellos Saccliaricoccus sacchari y Pulvinaria pos elongata Cuando los niveles de infestacion son extre mos Pulinnaria en asociacion con la hormiga puede llegar a causar perdidas severas tanto en la concen tracion de azucar como en el tonelaje de la cana Con el objeto de conocer el ciclo de vida de ambas especies se establecieron ensayos bajo condiciones de laboratorio e invernadero y se observo la inciden cia de enemigos naturales en campo S .sacchari tuvo un ciclo de vida promedio de 54 8 dias pasando por dos instares y el estado adulto el numero de crias promedio por hembra es de 219 son gregarios y se ubican en los entrenudos del tallo Dos especies de la familia Encyrtidae aun sin identificar parasitan a S saccharz con un porcentaje de parasitismo del 47% Una especie de Dzadoplosis (Cecidomyiidae) se alimenta de los huevos de las hembras maduras, además un hongo identificado como Aspergillus pos pai asiticus afecto el 53 2% de los individuos en campo Puluinaria sp tuvo un ciclo de vida promedio de 77 días y pasa por dos ínstares y el adulto. EJ número de crías por hembra en promedio fue de 179, se ubican en el enves de las hojas y son poco moviles En invernadero se encontro a Diadoplosis coccidivora (Cecidomyiidae) alimentándose de la progenie de las hembras de ,Puluinaria sp. con porcentajes hasta del 85% En campo se encontro una avispa (Encyrtidae) emergiendo de individuos de segundo instar de esta ultima especie.

The crazy ant is an insect that becomes economically important to agriculture when it establishes symbiotic relationships with sap sucking insects. In sugar cane, it is associated with two of them: Sacctiaricoccus sacchan and Pulvinaria pos elongata When infestation levels are very high Pulvinaria in association with the ant can induce severe losses in both sugar concentration and tonnage of cane loorder to understand the life cycle of each species. experiments were set up under laboratory and green house conditions and the incidence of natural enemies was determined in the field S saccharz had a mean life cycle of 548 days, passing through two instars and the adult stage; mean progeny per female was 219 they are gregarious and concentrate on the stem internodes Two species of unidentified Encyrtidae parasitized S. sacchari, with a parasitism rate of 47%. A species of Diadoplosis (Cecidomyiidae) eats eggs of the mature females and a fungus identified as Aspergillus pos parasiticus affected 53 2% of individuals in the fleld, Pulvinaria sp. had a mean lite cycle of 77 days and passed through two instars and tlie adult. Mean progeny per female was 179; they are located on the underside of the leaf and are not very mobile ln the greenhouse Dzadoplosis coccidwora (Cecidomyiidae) fed on eggs of Pulvinaria sp females at rates up t 85%. ln the field, a wasp (Encyrtidae) was found emerging from second instar individuals of Putvinaria sp.

**Fixed precision level sequential sampling for Thripspalmi (Thysanoptera: Thripidae) on potato**

A partir del conocimiento del patrón espacial de poblaciones de Thrips palmi karny coleccionadas en plantaciones de papa (Solanum Solanum L.) bajo condiciones de producción y de indicadores para su descripción, estimados mediante la Ley Potencial de 1ylor. se diseñó un procedimiento de muestreo secuencial con niveles fijos de precisión. Los resultados se validaron con 46 conjuntos de datos de campo y se demostró la eficiencia del mismo al reducir en 34% los tamaños de muestras indicados por el Ministerio de Agricultura en el Programa de Defensa Fitosanitario para la papa. Se propone incorporar este procedimiento de muestreo al Programa de Manejo Integrado existente para el monitoreo de esta plaga agrícola importante.

Starting from the knowledge of the spatial pattern of Thrips palmi Karny populations collected in potato fields (Solanum Solanum L.) under production conditions and indicators for their description. estimated by means of 1ylors Power Law, a fixed-precision-level sequential sampling plan was designed. The results were validated with 46 sets of fleid data and the efficiency was demonstrated from the same group by reducing the sample size 34% as indicated by the Ministry of Agriculture in the Phytosanitary Defense Program for potato. It is proposed that this sampling procedure be incorporated into the existing Integrated Management Program for the monitoring of this important agricultural pest.

Rove beeties (Coleoptera Staphyiinidae) in dry forest fragments of the Cauca river valley

Se estudió la composición de los coleópteros de la familia Staphylinidae en diez fragmentos de bosque seco localizados en los departamentos del Valle del Cauca y Risaralda. El muestreo se realizó mediante el sistema de transectos, marcando estaciones cada 20 m. Tres métodos de colecta se implementaron en cada estación: 1. Cernido de hojarasca con extracción de estafilínidos en saco Winkler, 2. Trampa de caída, 3. Búsqueda directa. Un total de 1.463 individuos, agrupados en ocho subfamilias y 78 morfoespecies. se colectaron en 694 estaciones de muéstreo. Este número de morfoespecies corresponde al 10.7°% de las especies registradas para Colombia. Las subfamilias Paederinae y Staphylininae se ubican como las dominantes en los bosques estudiados A nivel regional los estimadores Chao 2 Jacknife 2 y ICE, indicaron que entre el 90,7, 83,0 y el 87,7% respectivamente, de la riqueza de especies esperada se registro en el estudio El fragmento de Alejandria presento la riqueza mas alta con 51 especies, seguido en orden descendente por los fragmentos de El Medio y El lHatico con 36 especies cada uno Los indices de complementariedad mostraron valores altos y similares indicando que la composicion de especies entre los diferentes fragmentos es relativamente diferente.

The composition of beeties frorn the family Staphylinidae was studied in ten dry forest fragmenta located in the departrnents of Valle del Cauca and Risaralda Sampling was carried out with a transect system wtth stations spaced every 20 m Three collection methods were used at each station (1) Leaf litter sifting and staphylinid extraction with Winkler sacs, (2) litfall traps and (3) Visual searching. A total of 1.463 individuals, grouped in eight subfamilies and 78 morphospecies, were collected in 694 sampling stations This number of morphospecies corresponds to 10 7% of the species reported in Colombia. Subfamilies Paederinae and Staphylininae are the most dominant in the studied forests. At the regional level, the estimators Chao2, Jacknife 2 and ICE indicated that 90,7, 83,0 and 87,7% respectively of the expected species richness was reported in this study The Alejandria forest fragment showed the highest diversity with 51 species, followed in descending order by El Medio and El [latico fragments with 36 staphylinid species each. Cornplementarity indices showed high and similar values, indicating that species composition among the diíferent fragrnents is relativel different.

**Tansformation of Beauveria bassiana Bb9205 with pr1A, pr1J, and ste1 genes of Metartzizium anisopliae and evaluation of the pathogenicity on the coffee berry borer**

Beauveria bassiana cepa Bb92O5 fue transformada con genes de proteasas tipo subtilinas (pr1A, pr1J) y esterasa (ste 1) aislados de Metarhizium anisopUae que están involucrados en la patogenicidad contra insectos. El objetivo del experimento fue aumentar la patogenicidad de la cepa contra la broca del caté, flypotheriemus hampei. Para esto, se donaron los genes en el plásmido pl3arOPEl que confiere resistencia al herbicida glufosinato de amonio. Se obtuvo un cultivo monoespórico de la cepa bb9205, cuya patogenicidad fue riel 78% de mortalidad contra ti. ¡lampe), usando 1 x 10(6) esporas/ml. Con este monoespórico se produjeron protoplastos. Con respecto a la producción de protoplastos se optimizó la metodología obteniendo una concentración de 3 x l0 protoplastos/mi después del pre-tratamiento enzimático, durante 4 horas en agitación lenta a 37°C. Se realizó la transformación con los plásrnidos pbarofEl-pr 1A, pBarOEEl-pr1J y p8arOPE1-ste mediante los métodos de PEO y electroporación. Dos transformantes con el gen pr1A y uno con el gen ste 1 resistentes a 25 µ/ml del herbicida glufosinato de amonio exhibieron incremento de actividad proteolítica y esterolítica, respectivamente. Se evaluó, en pruebas de laboratorio, la patogenicidad de las cepas de . bassiana transformadas comparándolas con la cepa 13b9205 no transformada monoespórica. La expresión constitutiva de la proteasa en la cepa transgénica Bb9205-pr 1A mejoró su actividad insecticida al demostrar un incremento de mortalidad del 21,7% y una disminución del 14,3% en el tiempo de mortalidad sobre la broca del café. El transformante Bb9205-ste 1 disminuyó en un 9,5% el tiempo de mortalidad sobre broca al compararse con Bb9205 sin transformar. Los resultados indican que con el mejoramiento de cepas de &auveria, por medio de transformación genética, se puede lograr un control biológico mejor.

Beauveria bassiana strain 9205 (Bb9205) was transformed with protease genes (pr1A and pr1J ) and one sterase gene (ste 1) isolated from fletartiizium anisopliae that are involved in insect pathogenicity. The goal of this research was lo increase the pathogenicity of the strain against the coffee berry borer. !iypothenemus hampei. To do this, genes were cloned into the plasmid pBarOFEl that confers resistance to the herbicide ammonium-gluphosinate. A monosporic une of strain Bb9205 was obtained with pathogenicity of 78% mortality against 11. hampei, using 1 x 106 spore/ml. Protoplasts were produced from this monosporic line. The methodology for the protoplast production was optimized obtaining 3 x 10 protoplasts/ml after enzymatic pretreatment for 4 hours under slow agitation at 37°C. flEansformation was carried out with the plasmids pBarGPEl- pr1A, pBarOPEI-priJ and pBarGPF.1-ste 1 by PEO and electroporation. Two strains transformed with the pr1A gene and one strain transformed with the .ste 1 gen were obtained, that showed resistance to 25 ¡tg/ml of ammonium glufosinate. These strains showed increased proteolytic and sterolytic activity, respectively. Under laboratory conditions, pathogenicity tests of 13. bassiana transformants was compared to untransformed monosporic 13b9205. Constitutive over-expression of protease in the transgenic strain Bb9205-pr 1A improved its insecticidal activity. The transformed strain showed a 21,7% increase in the insect mórtality rate with 14,3% reduction in the time of mortality. The Bb9205-ste 1 transformant strain showed a 9,5% reduction of the time of mortality compared with the untransforrned strain. The results indicate that breeding of 13eauveria strains by genetic transformation can be achieved for purposes of better biological control.

Fruitflies of the genus Dasiops (Diptera: Lonchaeidae) associated with banana passionfruitand general recommendations for their agroecological management in vereda Cañón, municipio de Sutamarchán - Boyacá

Se realizó una identificación de las especies del género Dasiops en cultivos de curuba, en donde se encontraron dos especies: Dasiops caustonae y D. curubae que atacan los botones florales y frutos en desarrollo, respectivamente. La estimación del daño que ocasionan estas especies fue de un 2 a un 3% en botones y de un 23,7% en frutos. El trampeo como método de control fue igual de efectivo al tratamiento químico. Se estableció que la longitud crítica en la cual las moscas atacan el botón floral es de 25 a 45 mm. Por último se plantearon algunas recomendaciones para el manejo agroecológico de estas plagas. El aniquilamiento de larvas y pupas mediante la destrucción de residuos de cosecha, un biopreparado de albahaca y control biológico son algunas de estas medidas.

An identification was conducted of species in the genus Dasiops in crops of banana passionfruit where two species were found: Dasiops caustonae and D. curubae that attack the developing flower buds and fruíts, respectively. An estímate of the damage caused by these pests was 2 to 3% in flower buds and 23.7% in fruits. Trapping as a control method was equally effective as the chemical treatment. The critical length in which the flies attack was established as 25 to 45 mm. Finally, some recommendations were proposed for the agroecological management of these pests. The killing of pupae and larvae by destroying fallen flower buds and fruits, a biopreparation of basil and biological control are some of these measures.

**A new species of Anastrepha from Colombia related to Mexican fruit fly (Díptera: Tephritidae)**

Anastrepha manizaliensis Norrbom & Korytkowski, new species, is described from Colombia. lt breeds in fruit of Juglans neotropica Diels (Juglandaceae), commonly known in Colombia as "cedro negro". The new species was previously confused with Mexican fruit fly, Anastrepha ludens (Loew), a major pest of citrus and mango, leading to quarantine problems, bul true A. ludens does not occur in Colombia.

Se describe una nueva especie de Anastrepha de Colombia, Anastrepha manizaliensis Norrbom & Korytkowski. Esta especie se crió en frutos de Juglans neotropica Diels (Juglandaceae), comúnmente conocido en Colombia como "cedro negro". La nueva especie fue previamente confundida con la mosca Mexicana de la fruta, Anastrepha ludens (Loew), la principal plaga que ataca cítricos y mangos, lo cual indujo un problema cuarentenario pero realmente A. ludens no se presenta en Colombia.

**Development of Leishmania mexicana and Leishmania amazonensis in Lutzomyia evansi (Díptera: Psychodidae, Phlebotomine)**

El objetivo de este trabajo consistió en estudiar los cambios morfológicos que ocurren durante el desarrollo de Leishmania mexicana (MHOM/VE/72/AZV) y Le. amazonensis (IFLA/BR/67/PI18) en Lutzomyia euansi. Hembras de Lu. evansi se alimentaron a partir de una lesión tarsal de hámster y se examinaron en busca de infección cada 24 h hasta las 168 h posalimentación. El patrón de desarrollo de Le. mexicana y Le. amazonensis en Lu. euansi fue de tipo suprapilórico, de acuerdo con lo descrito para las especies del complejo Le. mexicana. La transformación de formas amastigotas a procíclicos ocurrió para ambas especies entre las 24 - 48 h postinfección. Los parásitos mostraron su adaptación al microambiente del tracto digestivo de Lu. euansi y desarrollo hacia formas maduras: nectomonas, haptomonas y paramastigotas. La forma paramastigota se observó, en bajo porcentaje, a las 120 h postingesta infectiva en ambas especies. La disminución temprana de nutrientes en Lu. euansi, debido al rápido proceso de digestión de sangre ( 3 a 4 días), pudiera explicar el bajo porcentaje de desarrollo alcanzado hacia las formas paramastigotas y la ausencia de formas metacíclicas en este modelo.

The aim of this paper was to study the morphological changes in the development of Leishmania mexicana (MMOM/VE/72/AZV) and L. amazonensis (IFLA/BR/67/PI18) in Lutzomyia euansi. Pernales of Lu. euansi fed on a hámster tarsal lesión and were examined for infection at 24 h intervals from 24 h to 168 h post- feeding. The pattern of development of Le. mexicana and Le. amazonensis in Lu. euansi was suprapylarian consistentwith what has been described forspecies of the Le. mexicana complex. Transformaron from amastigote to procyclical forms occurred in both species at 24 - 48 h post-infection. The parasites showed their adaptaüon lo the gut environment of Lu. euansi and development to mature forms: nectomonads, haptomonads and pararnastigotes. The paramastigote form was observed in low percentage at 120 h post-infected ingestión in both species. The early depletion of nutrients in Lu. euansi, due to a faster rate of digestión (3 to 4 days), could explain the low percentage of development reaching the paramastigote forms and the absence of the metacyclical forms in this model.

**Levéis of resistance to two insecticides in populatíons of Aedes aegypti (Díptera: Culicidae) from Perú**

El propósito del presente trabajo consistió en determinar los niveles de resistencia a temefos y deltametrina en dos poblaciones naturales de Aedes aegypti del Perú. Los bíoensayos en larvas y adultos se realizaron siguiendo la metodología de la Organización Mundial de la Salud. La visualización de bandas de Besterasas se hizo por electroforesis en gel de poliacrilamida (PAQE) en larvas de cuarto estadio. Las poblaciones naturales de Sullana (Piura) y El Porvenir (La Libertad) presentaron factores de resistencia para temefos de 1,67 X y 1,45 X, respectivamente, indicando susceptibilidad en ambas poblaciones; para deltametrina la población de Sullana presentó resistencia con un KDT50 de 106 min y 68% de mortalidad a las 24 h, en la población de El Porvenir se observó susceptibilidad con un KDT5() de 36,9 min y 99% de mortalidad. Se identificó la esterasa B2 con un Rf de 0,23 sólo en la población El Porvenir. El insecticida temefos puede seguir siendo utilizado en los programas de control del vector Aedes aegypti ya que la especie aún es susceptible a este organofosforado; caso contrario sucede con deltametrina donde se debe evaluar su efecto en poblaciones naturales ya que algunas deben estar presentando resistencia, como en el caso de la población de Sullana.

The purpose of this study was to determine resistance levéis to temephos and deltametrine in two natural populations of Aedes aegypti from Perú. Bioassays in larvae and adults were carried out following the methodology of the World Health Organization. The visualization of Besterase bands was made by poliacrylamide gel electrophoresis (PAQE) in fourth instar larvae. Natural populations from Sullana (Piura) and El Porvenir (La Libertad) presented resistance ratios to temephos of 1.67 X and 1.45 X, respectively, indicating susceptibility in both populations; for deltametrine the Sullana population presented resistance with a KDT50 of 106 min and 68% mortality at 24 h; in the El Porvenir population susceptibility was observed, with a KDT S0 of 36.9 min and 99% mortality. Esterase B., was identified with a Rf of 0.23 only in El Porvenir population. The insecticide temephos can continué being used in control programs of the Aedes aegypti vector because the species is still susceptible to this organophosphorate; on the contrary with deltametrine, where its effects should be evaluated in natural populations since some of them should be presenting resistance, as in the case of the Sullana population.

**Effect of the culture médium in the virulence of nomuraea rileyi on Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Moctuidae)**

En un estudio previo en laboratorio, se seleccionó el aislamiento Mm005 del hongo por ocasionar una mortalidad del 95% sobre el gusano cogollero del maíz Spodoptera frugiperda, la plaga más importante de este cultivo. Con miras a la producción de conidios de alta calidad y virulencia que permitan desarrollar un bioplaguicida eficiente, el objetivo del presente trabajo fue el de determinar el efecto del medio de cultivo y de algunos potenciales inductores de virulencia sobre las características microbiológicas de los conidios de fiomuraea rileyi y su actividad biocontroladora sobre S. frugiperda. Para tal fin, el hongo fue crecido en los sustratos millo, arroz, avena y soya. Se evaluó el rendimiento de conidios en los sustratos, la germinación y actividad biocontroladora de los mismos, seleccionándose el medio a base de soya, en el cual se obtuvieron los conidios con las mejores características. Adicionalmente, el hongo fue crecido en medio extracto de levadura-malta suplementado con potenciales inductores de virulencia que consistieron en dos inductores proteicos, un homogeneizado de larvas, un inductor no específico, un inductor a base de un polímero y un control sin inductor. Mediante un bioensayo se seleccionaron los inductores proteico 1 y polímero 1 por causar un aumento en la actividad biocontroladora. Posteriormente, se evaluó el efecto combinado del sustrato de producción masiva y los potenciales inductores de virulencia seleccionados sobre la germinación y actividad biocontroladora del hongo. Se encontró que el inductor polímero 1, combinado con el medio de producción, presentó un efecto positivo sobre las características evaluadas. Los resultados obtenidos sugirieren que el tipo y composición del medio de cultivo, determinan las características microbiológicas y la virulencia de la biomasa producida.

Isolate Nm005 of nomuraea rileyi was selected in a previous study by causíng 95% mortality in the fall armyworm Spodoptera frugiperda, the most important pest in maize crops. In order to produce hígh quality conidia for developing an efficient biopesticide, the objective of the present worK was to determine the effect of the culture médium and some potential virulence inductors on the microbiological characteristics and biocontrol activity of the ¡i. rileyi conidia. The fungus was grown on miliet, rice, oat and soybean substrates. After evaluating yield, germination and biocontrol activity of produced conidia on the substrates, the soybean médium was selected because the conidia presented the best characteristics. In addition, the fungus was grown on yeast-malt extract agar médium supplemented with several potential inductors of virulence that consisted of two proteic inductors, a homogenization of larvae, a non specific inductor, an inductor based on a polymer and a control with no inductor. By using a bioassay, the proteic inductor 1 and polymer inductor 1 were selected because they caused an increase in biocontrol activity. Afterwards, the combined effect of the selected substrate for mass production and the selected potential inductor of virulence on the germination and biocontrol activity of the fungus was evaluated. The polymer inductor 1, combined with the culture médium, liad a positive effect on the characteristics evaluated. The results obtained suggest that the type and composition of the culture médium determines the microbiological characteristics and virulence of the biomass produced.

Diversity of three ant guilds in shade and sun coffee plantations and forests of Risaralda

Durante 2001-2002 se realizó un estudio de la mirmecofauna (Hymenoptera: Formicidae) en cafetales del municipio de Apía (Risaralda), para evaluar el impacto que las técnicas modernas de cultivo de café tienen sobre la biodiversidad asociada. Se seleccionaron 12 fincas clasificadas en tres sistemas de manejo de sombra de café (tratamientos) y un control compuesto por parches de bosque. Se ubicaron 20 parcelas de 1 m² por finca en las cuales se realizó colecta manual de hormigas en hojarasca y con mini-wiñkler además de muestreo de hormigas en el cafeto más cercano a cada parcela. Por último se midieron variables bióticas y abióticas en el área. Las hormigas registradas se agruparon en gremios seleccionados según la clasificación de Delabie et al. para Sur América. Se registraron 22.983 individuos pertenecientes a 115 morfoespecies donde los cafetales orgánicos de sombra poligenérica demostraron contener la riqueza mayor. Las hormigas se agruparon en tres gremios: crípticas de hojarasca, abundantes y de cafetos. Las especies crípticas fueron las más sensibles a los cambios en el manejo, mostrándose muy reducidas en cafetales de sol, mientras que las hormigas abundantes y de cafeto no fueron afectadas en la misma manera. Se encontró que la presencia de este gremio está afectada positivamente por la cobertura vegetal y negativamente por la temperatura del suelo. Se concluye que un manejo agrícola ambientalmente amigable como es el cafetal orgánico de sombra diversa, se constituye en una matriz favorable para la biodiversidad de hormigas propias de parches de bosque en el paisaje rural cafetero.

During 2001-2002, a study on the myrmecofauna (Hymenoptera: Formicidae) in coffee plantations was conducted int the Apía municipality (Risaralda) in order to evalúate the impact of modern agricultural practices on the associated biodiversity. TWelve coffee farms were selected and classified into three shade managements (treatments) and a control consisting of forest patches. TWenty Im² -plots were located on each farm and at each plot ants were collected manually and with a mini-Winkler from the leaf litter. Ants were also sampled from the nearest coffee bush. Finally, biotic and abiotic variables in the área were measured. The ants were grouped into guilds according to the classification of Delabie et al. for Soulh América. A total of 22.983 individuáis belonging to 115 morphospecies was recorded. Polygeneric shaded coffee (organic managed coffee) had the greatest species richness. Ants were grouped into three guilds: cryptic litter-dwelling, abundant and coffee bush. The cryptic guild was the most sensitive to changes in coffe management, being very reduced in sun plantations, while abundant ants and ants on coffee bushes were not affected in the same way. The presence of the cryptic guild was positively affected by vegetation cover and negatively by soil temperature. We concluded that an environmentally friendly agricultural management, like organic coffee with diverse shade, is a matrix that favors the diversity of ants from forest patches in the rural coffee landscape.

Contribution to knowledge of the myrmecofauna in the municipality of San Antero, Córdoba, Colombia

El trabajo de campo realizado en el municipio de San Antero, departamento de Córdoba, Colombia, entre los meses de febrero y agosto de 2002, permitió identificar y comparar la diversidad, composición, potencial de bioindicación y aspectos ecológicos de las comunidades de hormigas que habitan en dos biotopos con distinto grado de intervención antrópica, un pastizal y un bosque secundario de galería. En cada sitio se ubicaron 20 estaciones de muestreo, en las que se implementaron 5 tipos de trampas: Cebos hipogeo (15 cm de profundidad), epígeo y al árbol, trampa de caída, y colecta manual. Para las comparaciones entre las áreas se aplicaron estimadores de riqueza (Jacknife 1), índices de diversidad (Shannon), especies exclusivas, número de especies por subfamilia, equidad, uniformidad, similaridad y los números de Hill. En total se colectaron 54 especies agrupadas en 16 tribus, 32 géneros y 6 subfamilias. El estimador Jacknife 1 Indicó que se muestreo el 73% de la mirmecofauna existente en cada biotopo. Aunque la riqueza y número de especies exclusivas capturadas fue mayor en el bosque secundario que en el pastizal, no se encontró una diferencia significativa entre los valores de diversidad. El coeficiente de similaridad de Sorenson registró que los sitios no son muy similares en relación con su riqueza, pues de las 54 especies colectadas sólo 15 fueron comunes a ambos biotopos. La comparación de medias entre la riqueza de los sitios permitió determinar que las subfamilias Ponerinae y Myrmicinae poseen una alta y mediana sensibilidad, respectivamente, ante el aumento en el grado de disturbio.

Field work conducted in the municipality of San Antero, department of Córdoba, Colombia, between the months of February and August of 2002, led to the identification and comparison of the diversity, composition, bioindication potential and ecological aspects of the communities of ants that live in two systems with distinct degrees of human intervention, a pasture and a secondary gallery forest. Twenty sampling stations were located at each site, and 5 types of traps were used: baits 15 cm below ground, on the soil surface and in trees, pitfall traps, and manual collection. For the comparisons between áreas, we applied species richness estimators (Jacknife 1),, diversity índices (Shannon), exclusive species, number of species by subfamily, equítability, evenness, similarity and Hill numbers. Altogether 54 species grouped in 16 tribes, 32 genera and 6 subfamilies were collected. The eslimator Jacknife 1 indicated that 73% of the myrmecofauna in each system was sampled. Although richness and the number of exclusive species captured were greater in the secondary forest than in the pasture, no significant differences between the diversity valúes were detected. The Sorenson similarity coefficient showed that the sites are not very similar in relation to their richness because of 54 collected species only 15 were common to both systems. The comparison of averages between the richness of the sites determined that the subfamilies Ponerinae and Myrmicinae have a high and médium sensitivity, respectively to increasing degree of disturbance.