Acta Biológica Colombiana

**EXPORT AND TRAFFICKING OF Plasmodium PROTEINS WITHIN THE HOST ERYTHROCYTE**

The export and trafficking of parasite proteins within the infected erythrocyte is a complex process and not well understood. Export of proteins from the parasite was previously speculated to involve a specialized compartment originally designated as the secondary endoplasmic reticulum of the Apicomplexa, or sERA. The properties of this Plasmodium export compartment are reviewed in regards to more recent observations about the trafficking of Plasmodium proteins within the host erythrocyte. In addition, a calcium ATPase unique to the Apicomplexa and with homology to the sarcoplasmicendoplasmic reticulum calcium ATPase is discussed in the context of this unique export compartment. It is also speculated that the Plasmodium export element, PEXEL, may play a role in targeting proteins to this parasite export compartment. Exported proteins are then proposed to move into the parasitophorous vacuole and those destined for the host erythrocyte are transported to the erythrocyte cytoplasm as soluble proteins. Chaperones probably play a role in escorting parasite proteins to their final destinations and assembly on the erythrocyte membrane

El tráfico y exportación de proteínas del parásito dentro del citoplasma del eritrocito es un proceso complejo, que no es bien comprendido. Inicialmente se especuló sobre la manera como el parásito exporta éstas proteínas y se involucró un compartimiento que se denominó retículo endoplasmático secundario de los Apicomplexa (sERA). En este trabajo se revisan las propiedades de este compartimiento exportador de acuerdo con las observaciones más recientes del tráfico de proteínas de Plasmodium al salir del parásito. La discusión se enmarca dentro del contexto de este único compartimiento exportador relacionado con una ATPasa de calcio única de los Apicomplexa que presenta homología con la ATPasa de calcio del retículo endoplasmático sarcoplásmico (SERCA). Además, se especula que Plasmodium exporta elementos PEXEL, que podrían estar asociados con el direccionamiento de proteínas de Plasmodium hacia el compartimiento exportador y se propone que éstas proteínas van posteriormente a la vacuola parasitófora, y aquellas cuyo destino es la célula hospedera se transportan al citoplasma del eritrocito como proteínas solubles. Las chaperonas posiblemente escoltan las proteínas del parásito hasta su destino final y se ensamblan en la membrana del eritrocito

THREE-DIMENSIONAL STRUCTURE OF Bacillus thuringiensis TOXINS: A REVIEW

Structure-based protein engineering of Bacillus thuringiensis d-endotoxins may direct the search for variants with broader susceptible species spectra, optimal potency, and stability properties. Here, we revised the more important characteristics of the Cry and Cyt proteins three-dimensional structure; it is possible to conclude that an obvious general model exists with specific properties according to its function and target organism

La ingeniería de proteínas de las d-endotoxinas de Bacillus thuringiensis puede orientar la búsqueda de variantes con un espectro mayor de especies susceptibles, potencia optimizada, y estabilidad apropiada. Aquí, nosotros revisamos las características más importantes de la estructura tridimensional de las proteínas Cry y Cyt. Es posible concluir que existe un modelo general obvio con propiedades específicas de acuerdo a su función y organismo susceptible

Retention of Coarse Particulate Organic Matter in a Stream Tropical Mountain. Bogotá, Colombia

Se determinó el porcentaje de retención de tres fracciones de materia orgánica particulada gruesa (MOPG) y el efecto de la magnitud del caudal sobre la retención de la materia orgánica particulada (MOP), durante un período de cinco meses en tres sectores de una quebrada tropical de montaña ubicada en los Cerros Orientales de Bogotá Colombia. La condición tropical del sistema, mostró un patrón de caudal constante aunque pudo diferenciarse un período de alta y baja descarga. Los resultados mostraron que el valor promedio del porcentaje de retención fue relativamente alto, presentándose una asociación negativa entre la magnitud del caudal y el porcentaje de retención de las fracciones MOPG, siendo más evidente en partículas pequeñas (rs=0,74; p

Retention percentage of three fractions of coarse particulate organic matter (MOPG) and discharge effect over retention of particulate organic matter (MOP) were studied during five months in three sectors of a tropical mountain stream, at Eastern hills of Bogotá Colombia. The tropical condition of the system, showed a pattern of constant discharge although could be a different period from low and high discharge. Results showed as average value of retention percentage was high, with a negative association between flow magnitude and percentage of retention for each MOPG fraction, being more evident in small particles (rs=0.74, p

AEGY28 Cell Line of Aedes aegypti (Diptera Culicidae) is Infection Refractory to Dengue 2 and Yellow Fever Virus

Los cultivos celulares de mosquitos son frecuentemente utilizados para el aislamiento, identificación y caracterización de arbovirus. Para el estudio de los virus dengue (VDEN) y virus de fiebre amarilla (VFA) se emplean, principalmente, la línea celular C6/36 de Aedes albopictus y la línea celular AP61, obtenida de Aedes pseudoscutellaris. La línea celular de A. aegypti AEGY28, previamente obtenida a partir de tejidos embrionarios del vector, se utilizó en el presente trabajo para evaluar la susceptibilidad a la infección por VDEN y VFA. Para ello, los cultivos celulares se ensayaron a diferente multiplicidad de infección con los aislados clínicos de virus dengue tipo 2 (COL789, MOI: 1 y 5) y VFA (V341, MOI 0,02). Posteriormente se realizó la detección de antígenos virales por la técnica de inmunocitoquímica y su cuantificación por la técnica de CellELISA fluorométrica. Se usaron como controles positivos de infección, tanto células C6/36 como células VERO. Inesperadamente, no se observó inmunoreactividad en las células de A. aegypti infectadas con ambos tipos de virus en ninguno de los MOI o tiempos estudiados. Tampoco se evidenció antígeno por la técnica fluorométrica ni fue posible detectar RNA viral por RTPCR a partir de células infectadas. Por lo tanto, se puede concluir que la línea celular de A. aegypti no es susceptible a la infección por VDEN ni por VFA. Ello podría estar relacionado con características propias de la membrana celular o de la maquinaria enzimática necesaria para la replicación viral

Mosquito cell derived cultures are useful tools for arbovirus isolation, identification or characterization. For studying dengue (DENV) and yellow fever viruses (YFV) Aedes albopictus C6/36 or Aedes pseudoscutellaris AP61 cell lines, are normally used. The Aedes aegypti AEGY28 cell line was obtained from embryonic tissues and characterized previously by one of us. In order to evaluate its susceptibility to two Flavivirus, AEGY28 cells were inoculated with different multiplicity of infection (MOI) with type 2 DENV (COL789, MOI: 1 and 5) and YFV clinical isolates (V341, MOI 0,02) then processed at different times post infection (p.i.). Immunostaining and fluorometric cellELISA were carried out to identify and quantify viral antigens. C6/36 and Vero cells were used as positive controls. Unexpectedly, immunoreactivity was not found in inoculated AEGY28 cells, even in higher MOI or late times p.i., therefore antigen quantification using fluorometric cellELISA were not plausible. Reverse transcriptase PCR with specific primers did not detect viral RNA in AEGY28 inoculated cells. We can conclude that Aedes aegypti AEGY28 cell line is not susceptible to dengue and yellow fever Flavivirus, a finding possibly related with the lacking of specific molecules at the plasma membrane or absence of cell machinery necessary for viral replication

Approach to the Interaction Studies of Aristolochia maxima and the Caterpillars of Butterflies Battus polydamas polydamas and Parides panares erythrus

Las mariposas de la tribu Troidini (Lepidoptera: Papilionidae) capturan los ácidos aristolóquicos (AAs) provenientes de su alimentación larval en plantas de Aristolochiaceae para su protección. En este estudio se detectó la presencia de los ácidos aristóloquicos I y II (AAI y AAII) en hojas jóvenes de Aristolochia maxima (Aristolochiaceae) y en larvas de las mariposas Battus polydamas polydamas y Parides panares erythrus (Papilionidae, Papilioninae) por Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia (CLAE). De acuerdo con los resultados de los perfiles cromatógraficos por CLAE, el AAI fue el ácido aristolóquico mayoritario encontrado tanto en las larvas como en las hojas jóvenes de la planta, seguido por cantidades menores del AAII. Estos resultados permiten afirmar que la interacción plantaanimal entre las mariposas de las especies B. polydamas y P. panares y las plantas de A. maxima, está mediada, por los ácidos aristóloquicos I y II.

Most butterflies of the tribe Troidini (Lepidoptera: Papilionidae) sequester aristolochic acids (AA) for their protection. These acids are derived from their host plants family Aristolochiaceae upon which they feed on during their larval stages. Using analytical High Performance Liquid Chromatography (HPLC) methods we were able to detect the presence of aristolochic acids I and II both in the young leaves of Aristolochia maxima (Aristolochiaceae) and in the caterpillars of the butterflies Battus polydamas polydamas and Parides panares erythrus (Papilionidae, Papilioninae). Aristolochic acid I was the major constituent found, followed by lesser amounts of Aristoloquic acid II. These results confirm that the hostanimal interaction among butterflies of the studied species and A. maxima plants is mediated, by aristolochic acids.

Sharks and Rays (Subclass Elasmobranchii) Discarded from Commercial Shrimp Trawlers at the Caribbean Sea of Colombia

Con el fin de obtener una aproximación a la estructura del ensamblaje de peces cartilaginosos extraídos por la flota de arrastre camaronero en la costa norte de Colombia, se evaluó la composición y abundancia de tiburones y rayas descartados en dos sectores del Caribe colombiano, entre agosto y noviembre de 2004. Mensualmente se analizaron lances de la flota de arrastre camaronero al interior de cada sector (norte: La Virgen y Portete; sur: Barú, cabo Tiburón, Cascajal, Cispatá, Morrosquillo, Ceycén, Mestizo, río Cedro, Tigua y Tortuguilla). Observadores a bordo de la flota comercial de arrastre camaronero muestrearon 1/5 de la captura previamente homogenizada, tomada al azar de una de las cuatro redes de la embarcación. En 30 lances se registró la presencia de 47 peces cartilaginosos, correspondientes a seis familias y ocho especies. La mayor Captura por Unidad de Esfuerzo (CPUE) en términos de biomasa se registró en ambas zonas durante septiembre, la menor en noviembre en la zona sur; el mayor valor del número de individuos se presentó en septiembre en la zona sur y el menor en noviembre, lo cual puede atribuirse a la mayor disponibilidad del recurso objetivo que está asociado al periodo de mayores lluvias que enriquece las aguas de los ambientes costeros y son usados como hábitat y zonas de alimentación por los peces cartilaginosos

In order to have an approximation to the cartilaginous fishes assemblage structure exploited by commercial shrimp trawlers from the north coast of Colombia, composition and abundance of the discarded sharks and rays on two zones of the Colombian Caribbean, between August and November of 2004 were evaluated. Each month, a number of trawls were analyzed in each zone (north: La Virgen and Portete; south: Barú, Cabo Tiburón, Cascajal, Cispatá, Morrosquillo, Ceycén, Mestizo, Cedro river, Tigua and Tortuguilla). Observers were placed on board commercial shrimp trawlers, sampling 1/5 from the total capture, previously homogenized, which was randomly taken from one of the four nets of the vessel. Within 30 trawls, there were 47 cartilaginous fishes registered, belonging to six families and eight species. The largest capture per effort unit (CPUE) in biomass was registered on September in both zones, whereas the smallest happened on November in the south one. The greatest value in number of units was in September within the south zone and the opposite occurred in November, registering the smallest values. This could explain the great availability of the objective resource, directly associated with the heavier rainy season that enriches the waters of the coastal environment and characterizes the region, probably used as habitat and feeding grounds for the cartilaginous fishes

Isolation and Characterization of a Polyphenoloxidase Related with Carnation (Dianthus caryophyllus) Resistence to Fusarium oxysporum f. sp. dianthi raza 2

Se purificó y caracterizó bioquímicamente la enzima polifenoloxidasa (PFO) inducida en tallos de clavel (Dianthus caryophyllus L) de variedad tolerante por inoculación con el patógeno Fusarium oxysporum f. sp. dianthi raza 2 (FOD2), causante del marchitamiento vascular. La purificación se logró a través de procesos sucesivos de cromatografía en columna de intercambio iónico, de interacción hidrofóbica y de exclusión molecular. A través de éstos se logró un factor de purificación de 314 veces con respecto al extracto inicial. La proteína purificada mostró actividad PFO y una única banda en SDSPAGE correspondiente a 40 kDa. Usando catecol como sustrato, se determinó su temperatura óptima en 45 ºC y su pH óptimo en 7,5. La enzima presentó una cinética tipo MichaelisMenten con un valor Km de 249 mM y Vmáx 322 U/min. El punto isoeléctrico (PI= 5,0) permitió establecer que se trata de una proteína de tipo ácido. Con la enzima purificada se realizaron ensayos in vitro de actividad fungitóxica, usando sus productos de reacción enfrentados al hongo FOD2, encontrándose una actividad inhibitoria importante de cerca del 57% a las 24 horas, lo que permite postular su papel en los mecanismos de defensa del clavel contra este patógeno vascular

Polyphenoloxidase (PPO) was isolated and purified from stems of carnation (Dianthus caryophyllus L) after the inoculation with Fusarium oxysporum f. sp. dianthi race 2 (FOD2) of a tolerant variety. Purification was performed using column chromatography of ionic exchange, hydrophobic interaction and molecular exclusion. With these successive steps, a factor of 314 fold purification was achieved. The SDSPAGE analysis showed one band of 40 kDa. The purified enzyme was partially characterized using cathecol as substrate and determined the optimal temperature as 45ºC and 7.5 as optimal pH. The enzyme showed a MichaelisMenten kinetic with Km of 249 mM and Vmax 322 U/min. The IP was 5.0 indicating the acidic character of this protein. Using the purified enzyme and its reaction products, in vitro fungitoxic assays were realized indicating an important inhibitory activity against FOD2 of 57% at 24 hours. Then, it is possible to postulate that this enzyme is activated as a part of the defense mechanisms in this interaction model

Butterflies Community (Lepidoptera:Rhopalocera) Along an Altitudinal Gradient in Combeima River Canyon Tolima, Colombia

Se estudió la variación altitudinal de la composición, riqueza, diversidad y estructura de la comunidad de mariposas diurnas en un gradiente altitudinal en la cuenca del río Combeima (JuntasTolima, Colombia), desde los 1.800 m hasta los 3.000 m a lo largo del año en tres periódos de muestreo, mediante el uso de redes entomológicas y trampas VanSomerenRydon. Se encontraron 101 especies de mariposas distribuidas en 59 géneros y cinco familias cuyos parámetros poblacionales variaron espacial y temporalmente, mostrando marcada zonificación altitudinal en los 1.900 m la cual es una franja transicional de la composición faunística y en la que a partir de ella, existe un decremento en el número de especies exclusivas para cada estación de muestreo, las cuales podrían considerarse como especies indicadoras de disturbio ecosistémico.

Altitudinal variations in composition, richness, diversity and structure were studied in the butterflies’ communities along an altitudinal gradient in Combeima River basin (JuntasTolima, Colombia) from 1800 m until 3000 m during one year through three sampling times, using insect nets and VanSomerenRydon traps. 101 butterflies species were collected that were classified into 59 genera and five families. Butterflies population values changed through altitude and year season, and showed important ecological changes in 1900 m where we found a transition zone in fauna composition and where exclusive fauna decrease in each sampling station. This exclusive fauna could be named as indicator of ecological disturbances.

SOME ASPECTS OF THE BIOLOGY OF Macrobrachium dux (LENZ, 1910) (CRUSTACEA:DECAPODA:NATANTIA) IN RIVER OROGODO, NIGER DELTA, NIGERIA

Preliminary investigation into some aspects of the biology of the palaemonid prawn, Macrobrachium dux (Lenz, 1910) in River Orogodo at Abavo, southern Nigeria was carried out between March and August 1995. The freshwater prawns were collected with properly baited cage traps and scooping with hand basket. The study revealed that the prawn species were widespread and abundant in the river. Abundance in terms of number and biomass was more during the wet season with a peak in August. Both adults and juveniles showed a progressive increase from late dry season to midrainy season (August). The malefemale ratio was 1:1.2. The fluctuation in the number and percentage of ovigerous females indicated that the prawn spawned during the midrainy season (JuneAugust). Ovigerous females ranged from 4.6 to 7.5 cm and egg size varied from 1.5 to 1.7 mm. The prawn attained a maximum total length and weight of 7.5 cm and 7.0 g respectively. Its growth pattern was allometric. The mean monthly condition factor (k) ranged from 1.43 to 2.37 and generally showed a monthly fluctuation with a peak in July.

Una investigación preliminar de algunos aspectos de la biología del langostino Macrobrachium dux (Lenz, 1910) fue realizada en el río Orogota en Abavo, sur de Nigeria entre marzo y agosto de 1995. Los langostinos de agua dulce fueron recolectados con trampas y removidos con una canasta de mano. Este estudio reveló que las especies de langostinos se encontraban distribuídas ampliamente y en abundancia en este río. La abundancia en términos de número y biomasa fue mayor en la estación lluviosa con un pico en agosto. Tanto adultos como juveniles mostraron un crecimiento progresivo desde el final de la estación seca hasta la mitad de la estación luuviosa (agosto). La relación machoshembras fue de 1:1,2. La fluctuación entre el número y porcentaje de hembras ovígeras que los langostinos depositan sus huevos durante la mitad de la estación lluviosa. Hembras ovígeras oscilaron entre 4,6 y 7,5 cm y el tamaño de los huevos varió entre 1,5 y 1,7 cm. Los langostinos alcanzaron longitudes y pesos totales de 7,5 cm y 7 g respectivamente. Su patrón de crecimiento fue alométrico. El promedio mensual del factor de condición osciló entre 1,43 y 2,37 y mostró fluctuación mensual con el pico en julio.

THE PERCEPTION OF DIPLOPODA (ARTHROPODA, MYRIAPODA) BY THE INHABITANTS OF THE COUNTY OF PEDRA BRANCA, SANTA TERESINHA, BAHIA, BRAZIL

This paper deals with the conceptions, knowledge and attitudes of the inhabitants of the county of Pedra Branca, Bahia State, on the arthropods of the class Diplopoda. Data were collected from February to June 2005 by means of openended interviews carried out with 28 individuals, which ages ranged from 13 to 86 years old. It was recorded some traditional knowledge regarding the following items: taxonomy, biology, habitat, ecology, seasonality, and behavior. Results show that the diplopods are classified as “insects”. The characteristic of coiling the body was the most commented, as well as the fact that these animals are considered as “poisonous”. In general, the traditional zoological knowledge of Pedra Branca’s inhabitants concerning the diplopods is coherent with the academic knowledge.

Este artículo registra las concepciones, los conocimientos y los comportamientos que los habitantes del poblado de Pedra Branca, en el estado de Bahía, poseen sobre los artrópodos de la clase Diplopoda. Los datos fueron obtenidos desde febrero hasta junio de 2005 a través de entrevistas abiertas y semiestructuradas realizadas con 28 individuos de ambos sexos, con edades que variaron de 13 a 86 años. Se registraron los conocimientos tradicionales relacionados con taxonomía, biología, hábitat, ecología, estacionalidad y comportamiento. Los resultados muestran que los diplópodos son clasificados como “insectos”. La característica de enrollar el cuerpo fue la más comentada, así como el hecho de que la mayoría de los individuos cree que estos animales son ponzoñosos. En general, el conocimiento zoológico tradicional que los pobladores de Pedra Branca tienen acerca de los diplópodos se mostró coherente con el conocimiento académico.

DNA Repair: A Link Between Folate Deficiency and Neuronal Cell Death

El presente artículo explora el papel que desempeña el folato como conocido metabolito del ciclo de un carbono (OCM, del inglés onecarbon metabolism) en la alteración de la integridad de las células nerviosas. Aquí se discute evidencia reciente de la literatura que muestra la reparación del ADN como un proceso relacionado con la apoptosis neuronal inducida por ausencia de folato.

This essay explores the role of folate in disruption of neural cell integrity. Here, it is discussed recent evidence which shows DNA reparation as a process related to neuronal apoptosis induced by folate depletion.

New Geographic Records of Warileyaand Brumptomyia (Diptera: Psychodidae) in South Western Colombia

Se informa la presencia de Warileya nigrossaculus y Warileya rotundipennis en nuevas localidades de Buenaventura, y se registra por primera vez Brumptomyia beaupertuyi para el occidente de Colombia, en una zona rural de Tuluá, Valle del Cauca, Colombia.

The presence of Warileya nigrossaculus and Warileya rotundipennis is informed in new localities of Buenaventura. Brumptomyia beaupertuyi is registered for the first time in western Colombia, in a rural area of Tuluá, Valle del Cauca, Colombia.