Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias

Evaluation of foot and mouth disease oil bivalent vaccines (O1 Campos and A24 Cruzeiro) produced by different purification and concentration methods.

El presente estudio evaluó el efecto de la masa antigénica y de diferentes métodos de purificación y concentración del virus de Fiebre Aftosa en la inducción de respuesta de anticuerpos específicos contra proteínas asociadas a la cápside (PC) y no asociadas a la cápside (PNC) en bovinos inmunizados con vacuna oleosa bivalente (A24 Cruzeiro y O1 Campos). Se formularon cuatro vacunas con diferente carga viral por dosis (Vacuna 1, 16.9; Vacuna 2, 8.8; Vacuna 3, 17.9; y Vacuna 4, 7.7 ug/dosis). Se inmunizaron 32 bovinos de 12 a 24 meses de edad (ocho por cada vacuna) a los días 0 y 30. La respuesta serológica contra PC fue evaluada con la prueba de ELISA CFL en términos de Expectativa de Protección Porcentual (EPP) al día 30 y la reactividad a PNC se determinó con el sistema ELISA-I 3ABC/EITB al día 60. Las vacunas formuladas con antígenos virales purificados con sales indujeron mayor EPP promedio tanto para virus A24 Cruzeiro (Vacuna 3, 89.8%; Vacuna 4, 83.4%) como O1 Campos (Vacuna 3, 92.6%; Vacuna 4, 82.2%) en comparación con los antígenos tratados con Polietilen Glicol cuyos resultados de EPP para virus A24 Cruzeiro fueron: Vacuna 1, 80.2%; Vacuna 2, 71.8%; y para virus O1 Campos: Vacuna 1, 78.1%; Vacuna 2, 73.7%. Adicionalmente, un bovino inoculado con la vacuna 3 fue positivo a PNC a los 60 días post vacunación (dpv). En este estudio se encontró que, dependiendo del proceso de concentración y purificación de antígenos, se pueden obtener resultados diferentes así: para los virus tratados con sales, con una baja (vacuna 4) y alta (vacuna 3) carga antigénica, es posible lograr muy buena inmunogenicidad, mientras que con alta carga antigénica se tiene mayor riesgo de inducir reactividad a PNC; y en el caso de los virus tratados con PEG se obtuvo buena protección, sin evidencia de interferencia en la determinación de los animales infectados cuando fueron evaluados por el sistema de detección de anticuerpos contra PNC.

This project evaluated two methods for viral concentration and purification and the effect of antigenic mass of Foot and Mouth Disease Virus (FMDV) in the capacity of bivalent vaccine products (A24 Cruzeiro y O1 Campos) to induce antibodies against proteins associated to the capsid (CP) and proteins non associated to the capsid (NCP) of the virus, in cattle. Groups of 8 bovines (aged 12 to 24 months ) were immunized on day 0 an 30 with one of four vaccines that were formulated with a different viral load (vaccine 1, 16.9; vaccine 2, 8.8; vaccine 3, 17.9 and vaccine 4, 7.7 ug/dose). The antibody response against CP detected by ELISA CF,L was evaluated on days 30 and 60; the reactivity against NCP was measured by ELISA-I 3ABC/EITB. Antigens treated with salts induced higher reactivity against CP compared those treated with PEG. One of the animals vaccinated with salt treated antigens was positive to NCP. We found that different results could be obtained depending of the process for antigen concentration and purification: virus treated with salts, with either a high or a low antigenic load (vaccines 3 and 4) induced a strong immunity, but with a high antigenic load there is a major risk of inducing reactivity against NCP. In the PEG treatment (vaccines 1 and 2), we obtained good protection, without interference in the assessment of the infected animals when they were evaluated by ELISA-3ABC-I/EITB for epidemiological purposes.

Tales of mice and men: Natural History of Arenaviruses

Nowadays, Arenaviruses are among the most feared viruses due to their potential as weapons for bioterrorism purposes. This potential is based on their increasing diversity and the fact that they are carried by rodentswhose biologic success compares only wit insects and humans. The prototype of this family is Lymphocytic Choriomeningitis Virus which has been and excellent tool for a myriad of discoveries in immunology. Arenaviruses have been known for over 70 years but the number of members of the family is growing thanks to their insidious subsistence in third world countries and to the nature of their genome, that makes of them sorts of skilful machines for evolution This review collects some of the work of the authors about the best-known features described for this group of viruses, among the many still-to-be discovered characteristics of this puzzling, and hard-to-study, group of zoonotic viruses.

En la actualidad, los arenavirus son considerados uno de los grupos de virus más temidos debido a su potencial uso como armas para el bio-terrorismo, debido a su diversidad creciente y a que son portados por roedores, cuyo éxito para sobrevivir, y adaptarse, solo puede compararse con el de los mosquitos y los seres humanos. El prototipo de esta familia viral, el virus de la coriomeningitis linfocítica, ha servido como herramienta para una gran cantidad de descubrimientos sobre la respuesta inmune. Los arenavirus han sido conocidos por más de 70 años, pero la familia aún sigue creciendo, gracias a su subsistencia insidiosa en los países del tercer mundo, y a su naturaleza genética, que les permite comportarse como máquinas “habilidosas” para la evolución. Esta revisión, recoge algunos de los resultados de los autores sobre los rasgos mejor conocidos, entre los muchos que aún no han sido descubiertos en grupo de virus zoonóticos, intrigante y muy difíciles de estudiar.

Genotipificación de la región 3´UTR del gen Nramp1, en ganado Holstein y en criollo Hartón del Valle

En investigaciones sobre respuesta a infecciones por diferentes patógenos intracelulares en humanos y en ratones, el gen Nramp1 se ha descrito como un gen controlador de la resistencia y de la susceptibilidad a algunasenfermedades. En el presente trabajo se genotipificaron 151 bovinos criollosHartón del Valle, y 128 Holstein, para un microsatélite de la región 3’ UTR(que no transcribe), en la posición 1745-1955 del gen Nramp1. Sedeterminaron variaciones de tamaño para éste microsatélite en ambos grupos y se encontró que los más frecuentes son el de 209 y el de207 pares de bases. Los resultados de secuenciación mostraron modificaciones en el número de GTs y se encontraron los polimorfismos (GT)12, (GT)11, previamente reportados por Feng et al, y Horín et al; además se encontraron (GT)14 y (GT)10.

NRAMP1: Genetic characterization at the 3´UTR region in Holstein and creole Hartón del Valle cattle Summary In studies of natural resistance or susceptibility to different intracellular pathogens the Nramp1 gene has been described as controlling this characteristic in mouse and in the humans. In this project we genotyped 151 Harton of the Valle bovine individuals and 128 Holstein, for a microsatellite of the 3’ untranslated region of Nramp1 gene, in position 1745-1955 and found that the most frequency size of microsatellite were 207 and 211 bp. The sequencing results indicate that there is polymorphim in the number of GT repetitions and (GT)12 and (GT)11 were present as reported previously, as well as (GT)14 y (GT)10.

**Relationship between pressure and volume for the implementation of the gas production technique, in vitro, in Medellín, Colombia.**

La técnica de producción de gases es un método in vitro que permite determinar la extensión y la cinética de degradación del alimento mediante el volumen de gas producido durante el proceso fermentativo. La cuantificación de los gases puede realizarse mediante el empleo de transductores que miden la presión originada por los gases acumulados en la parte superior de los frascos de fermentación. El objetivo de este trabajo fue establecer una ecuación de regresión que relacione presión (P) y volumen de gas (V), para la implementación de la técnica de producción de gases, in vitro, en las condiciones de altura sobre el nivel del mar, del laboratorio de Biotecnología Ruminal (UN, sede Medellín, 1538 msnm). Para este propósito se utilizaron seis forrajes diferentes, que fueron inoculados con líquido ruminal y heces provenientes de vacas Holstein. La presión generada por los gases acumulados en la parte superior de los frascos de incubación fue medida con un transductor de presión conectado a un lector digital. El volumen de gas fue determinado mediante extracción con jeringa hasta el momento en que la presión registrada en el lector fue cero. La ecuación fue obtenida utilizando PROC REG del programa estadístico SAS y correspondió a: V= -0.1375+(5.1385*P)+(0.0777*P2), R2 = 0.99. El establecimiento de esta ecuación es necesario, puesto que la ley general de gases de Boyle y Gay-Lussac no permite estimar el volumen de gas diluido en la fase líquida. De igual manera el volumen de gas acumulado en la parte superior de los frascos varía en función de la presión atmosférica, lo que hace necesario el ajuste. La ecuación obtenida es representativa de las dos fuentes de inóculo y de una amplia gama de sustratos forrajeros con diferente potencial de fermentación. Así se consolida la utilización de esta ecuación en futuros trabajos de investigación.

The in vitro gas production technique is a method that allows the determination of the extent and kinetics of degradation of food as a function of the gas volume obtained during fermentation. Gas quantification can be done with the use of transducers measuring the pressure originated by the gas in fermentation flasks. The objective of this work was to establish a regression equation that relates gas pressure (P) and volume (V), for the implementation of in vitro gas production technique, according to the height over the sea level condition of our laboratory, in Medellín, Colombia. For this purpose, six different tupes of forage were inoculated with ruminal liquor and feces from Holstein cows. The pressure generated by the gas accumulated in the upper part of the incubation flasks was measured through a pressure transducer connected to a digital reader. Gas was extracted with a syringe until the pressure registered in the reader was zero. The equation was obtained using PROC REG of the SAS program: V = -0,1375+(5,1385*P)+(0,0777*P2), R² = 0,99. Establishing this equation is necessary because the Boyle and Gay-Lussac´s law doesn’t allow the estimation of the volume of gas diluted in the liquid phase. Similarly, the volume of gas accumulated in the upper part of the flasks varies as a function of the atmospheric pressure, therefore demanding the respective adjustment. The obtained equation is representative for ruminal liquor, feces and a wide range of forages with different fermentation potential. Thus, the equation was standardized for future research.

Anatomopathologic study of aortic swine valves for heart bioprothesis

En el ámbito mundial, las investigaciones sobre la patología valvular porcina se limitan casi enteramente a la válvula mitral y existe muy poca información sobre alteraciones de la válvula aórtica. Las válvulas aórticas porcinas son utilizadas comúnmente como bioimplantes en humanos. Por esta razón en este estudio se propusieron los siguientes objetivos: caracterizar la patología valvular aórtica en cerdos seleccionados para la elaboración de bioprótesis valvulares cardíacas, discutir los mecanismos involucrados en el desarrollo de dichas lesiones y analizar los criterios de selección para determinar la confiabilidad del implante. Para esto se recolectaron al azar 50 corazones con lesiones evidentes de la válvula aórtica y 50 sin lesiones evidentes. Las válvulas se procesaron por el método histopatológico de rutina y se realizaron las tinciones de Hematoxilina-Eosina y azul alciano-PAS. Los resultados se evaluaron mediante estadística descriptiva e inferencia estadística; además, se realizó un análisis mediante la prueba de Chi-cuadrado utilizando el programa SPSS versión 1.0 para determinar asociaciones entre las variables macroscópicas y microscópicas. Las lesiones microscópicas y su frecuencia en los dos grupos estudiados fueron, respectivamente, las siguientes: trastornos vasculares 84% y 38 %; endocardiosis 80% y 4%; fenestraciones 48%, únicamente en las que tenían lesiones obvias; valvulitis 42% y 24%. Se presentan y se correlacionan las principales alteraciones macro y microscópicas; así como los posibles mecanismos implicados en su desarrollo. Este estudio es el primero, en Colombia, que caracteriza las alteraciones patológicas de la válvula aórtica porcina.

Research on swine valvular pathology around the world is restricted almost entirely to the mitral valve and there is very little information about the alterations of the aortic valve. Aaortic swine valves are commonly used as bioimplants for humans. For this reason in this study we decided to pursue the following aims: to characterize alterations of the aortic valve in pigs selected for the elaboration of hearth valvular bioprothesis, to discuss the mechanisms involved in the development of these lesions and to analyze the selection criteria to ensure the safety of the implants. Fifty hearts random with evident lesions, and 50 without evident lesions, of the aortic valve were randomly collected. The valves were processed by the histopathologic routine method and stained with Hematoxylin and eosin and blue alciano-PAS. The results were evaluated by descriptive statistic and statistical inference, and Chi-square test using the program SPSS version 1.0 was also run to determine possible associations among the macroscopic and microscopic variables. The microscopic lesions and their frequency for each one of the two groups studied were, respectively, as fallows: vascular dysfunctions 84% and 38%, endocardiosis 80% and 4%, fenestrations 48% only in obviously altered hearts, and valvulitis 42% and 24%. Macro and microscopic lesions are described and correlated and the possible mechanisms involved are discussed. This is the first study dwelling with alterations of aortic swine valves, in Colombia.

El espermatozoide, desde la eyaculación hasta la fertilización

En los últimos años se ha hecho un inmenso progreso en el entendimiento de los mecanismos moleculares involucrados en la maduración del gameto masculino y su tránsito desde la gónada hasta la fertilización del oocito. A lo largo de este trayecto el espermatozoide modifica su morfología y sus componentes moleculares especialmente, y además ocurren procesos que conducen a la activación para la entrada al oocito, para activar a su vez los mecanismos que conducen a la formación del zigoto. Este artículo presenta, a partir de la interpretación de la literatura actual un modelo de los eventos que se suceden a partir de la eyaculación hasta la fertilización, con énfasis en los mecanismos celulares y moleculares conocidos, y señala algunos vacíos de información aún existentes.

The sperm cell: from eyaculation to fertilization During the last recent years there has been a great increase of information regarding the molecular mechanisms involved in the maturation of the male gamete as well as its progression from the gonad up to fertilizing the oocyte. Along this way the sperm completes its maturation adding some molecular components; additionally along this trail take place all the processes leading to activation of the sperm for the entrance into the oocyte to initiates molecular cascades for the formation of a zygote. This article, based on updated literature proposes a model that integrates known cellular and molecular interactions and pinpoints some steps still requiring further research.

Pituitary tumor diagnosis using gadolinium-enhanced magnetic resonance imaging in a dog with hyperadrenocorticism: A case report

Cushings disease is a common endocrine disorder of dogs, caused by persistent high concentration of cortisol in circulating blood. Almost eighty five percent of the cases of spontaneous hyperadrenocorticism in dogs are the result of a functional pituitary tumor or hyperplasia. Advanced imaging techniques like computed tomography (CT) or magnetic resonance imaging (MRI) are the best means to obtain a diagnosis of a pituitary tumor in dogs with pituitary-dependent hyperadrenocorticism (PDH). Moreover these imaging techniques are required to asses the size and location of the pituitary tumor when planning surgical removal of the tumor mass or of the complete pituitary gland. In Colombia, the use of these imaging techniques is very limited in the small animal practice, but it has recently become available for veterinary patients thanks to agreements with human clinical institutions. This report describes the case of an eleven year-old golden retriever with PDH as a result of a functional pituitary tumor, visualized by magnetic resonance imaging using gadolinium as contrast agent.

La enfermedad de Cushing es un trastorno endocrino común en perros causado por altas y persistentes concentraciones de cortisol en sangre. Casi el 85% de los casos de hiperadrenocorticismo espontáneo en perros son el resultado de un tumor funcional o una hiperplasia pituitaria. Las técnicas avanzadas de diagnóstico por imagen como la tomografía axial computarizada (TAC) o la resonancia magnética (RM) son los mejores métodos para obtener el diagnóstico de un tumor pituitario en pacientes con hiperadrenocorticismo dependiente de la hipófisis (PDH). Además estas técnicas son necesarias para determinar el tamaño y localización del tumor pituitario cuando se planea la extracción quirúrgica de la masa o la hipófisis completa. En nuestro país, el uso de estas técnicas por imagen está muy restringido en la práctica de pequeñas especies, sin embargo recientemente han estado disponibles para los pacientes veterinarios gracias al uso de instituciones médicas humanas. En este reporte se describe el caso de un Golden retriever de 11 años con PDH como resultado de un tumor funcional pituitario, que fue visualizado usando RM utilizando gadolinio como medio de contraste.

Prolonged pregnancy associated to an inappropriate medroxiprogesterone acetate prescription in a bitch: Is rational and ethics the use of exogenous progestin in the bitch?

Los progestágenos sintéticos como la medroxiprogesterona acetato (MPA) y el proligestone (PRO) son usados en caninos como medicamento para prevenir la presentación del celo en perras, a pesar de existir abundante evidencia de su asociación con el aumento de la presentación de tumores mamarios y uterinos, complejo hiperplasia quística endometrial-piómetra y alteraciones de la hormona del crecimiento que cursan con acromegalia. En el presente estudio se informa de un caso de gestación prolongada asociada con la administración de MPA para prevenir la gestación después de una monta no deseada, en una perra de raza Fox terrier pelo de alambre de cinco años de edad a quien se le prescribió de manera errónea MPA para la monta no deseada. La paciente se recibió a los 74 días postmonta, con abdomen distendido pero sin dificultad respiratoria ni cambios importantes en el hemoleucograma; el examen clínico y la radiografía revelaron la presencia de seis fetos en proceso de maceración; la paciente fue sometida a operación cesárea para la extracción de los fetos macerados seguida de ovariohisterectomía. La evolución clínica fue favorable. En la discusión se hacen unos planteamientos críticos sobre la racionalidad y la ética del uso de los progestágenos exógenos, al igual que de la aplicación de productos estrogénicos, para el control de eventos reproductivos en perras, como la monta no deseada o la supresión del celo, y se proponen otras alternativas terapéuticas.

Medroxiprogesterone acetate (MPA) has been commonly used as a contraceptive in bitches by its effect on preventing estrous presentation, instead of abundant evidence on undesirable collateral effects such as uterine and mammary tumors and nodules, Cystic endometrial hyperplasia-pyometra complex, as well as acromegaly-like lesions. In this report a 6 year -old Fox-terrier wire coat bitch is presented which was administered a depot MPA formulation in order to prevent an undesired mating-related pregnancy that was attended at the by a prolonged pregnancy at day 74 after the undesired mating. The patient showed distended abdomen, dyspnea, with no changes in hemoleukograms values, but with macerated fetuses as diagnosed by clinical and radiographic findings. An elective cesarean operation followed by ovary hysterectomy was performed. The patient showed an optimal clinical evolution. Several aspects related to the use of MPA in canine reproduction, the recommendation to cautiously prescribe its use as contraceptive agents in bitches, as well as the consideration of other alternatives for management of undesired mating in dogs, are discussed.

Computer axial tomografhy and magnetic resonance for elaborating a segmentary anatomy atlas of dogs

El artículo describe el método ara la elaboración de un atlas digital de la anatomía segmentaria del perro, por crioseccionamiento, mediante las técnicas de tomografía axial computarizada y de resonancia magnética. Dicho atlas es una herramienta didáctica y de apoyo diagnóstico para estudiantes de pre y posgrado, y para los profesionales del área. Para el procedimiento se utilizó una hembra canina, adulta, criolla, de color negro, clínicamente sana, de aproximadamente 4 años de edad, 22 kg de peso y de tamaño mediano (50 cm de altura a la cruz). Los exámenes imagenológicos de tomografía axial computarizada y de resonancia magnética se llevaron a cabo en el Hospital San Vicente de Paúl y en el Instituto de Alta Tecnología Médica de Antioquia (IATM), respectivamente. Se obtuvieron imágenes segmentarias de la estructura corporal total del animal en sus planos frontal, sagital y transverso o axial. Con base en estas imágnes se compararon las estructuras anatómicas con los cortes del cadáver del animal. Además de la utilidd para el atlas digital, las imágenes formarán parte de una base de datos a utilizar en el laboratorio de anatomía animal de la Universidad de Antioquia.

This article describes the process of creation of a digital atlas of canine anatomy by criosectioning with computed tomography and magnetic resonance. The atlas is intended to be of help for students and practitioners. A medium size, adult, healthy creole, black colored bitch was used, weighing 22 Kg. Computed tomography and magnetic resonance were performed at the San Vicente de Paul Hospital and at the Instituto de Alta Tecnología Médica de Antioquia (IATM), respectively. Segmentary images (frontal, sagital and transverse) of the complete body were obtained and analyzed by comparison with real cuts of the dog’s body. Besides its use for the atlas these images are available in the animal anatomy laboratory at the Universidad de Antioquia.