Biomédica

Climate changes and human health

Make your own diagnosis. First part

Oral rehydration with a plantain flour-based solution precooked with standardized electrolytes

Objetivo. El objetivo del presente trabajo fue determinar si una solución de hidratación oral a base de harina de plátano precocida con electrolitos, además de ser efectiva para tratar la deshidratación, tiene propiedades antidiarreicas. Material y métodos. Se incluyeron 101 niños con edades entre 1 y 41 meses con diarrea de menos de una semana y deshidratación leve, y sin complicaciones asociadas. El grupo 1 (54 niños) recibió sales de rehidratación oral de la Organización Mundial de la Salud (SRO/OMS); el grupo 2 (47 niños) recibió solución con concentraciones de electrolitos similares pero que, en lugar de la glucosa, contiene 50 g de harina de plátano precocida (sales de rehidratación oral/plátano (SRO/plátano). Resultados. Se hidrató con éxito el 94,4% de los niños en el grupo SRO/OMS, y el 91,5% (p=0,70) del grupo SRO/plátano. El tiempo necesario para lograr la hidratación fue de 5,8 horas (DE=±3,0) en el grupo SRO/OMS y de 6,2 horas (DE:± 3,7) en el grupo SRO/plátano (p=0,31). El gasto fecal hasta alcanzar la hidratación en el grupo SRO/OMS fue de 7,5 g/kg por hora (DE=±7,6), y en el grupo SRO/plátano de 7,05 g/kg por hora (DE=±9,4) (p=0,78). No hubo diferencia significativa en el sodio plasmático. El período de observación para el grupo SRO/OMS fue de 22,3 horas (DE=±5,3), y de 22,7 horas (DE=±4,7) para el grupo SRO/plátano. El gasto fecal durante el período de observación fue de 5,7 g/kg por hora (DE=±4,7) para el grupo SRO/OMS y de 6,3 g/kg por hora (DE=±7,9) para el grupo SRO/plátano (p=0,67). La proporción de niños que necesitaron líquidos endovenosos durante las primeras veinticuatro horas fue de 11,1% en el grupo SRO/OMS y de 8,5% en el grupo SRO/plátano (RR=1,31; IC 95%: 0,39 a 4,35) Conclusiones. La solución a base de harina de plátano es efectiva y segura para corregir la deshidratación. No se pudo demostrar en este estudio el efecto antidiarreico de la solución a base de harina de plátano.

Aim: To determine if oral rehydration with a precooked plantain flour-based solution with standardized electrolytes, in addition to being effective in treating dehydration, also has anti-diarrhoeal properties. Methods: 101 children were included, ranging in age from 1 to 48 months, presenting diarrhoea for less than one week from onset, with mild dehydration and no associated complications. 54 children received ORS/WHO; 47 children received a solution with electrolytes similar to ORS/WHO, containing 50 grams of precooked plantain flour instead of glucose (ORS/plantain). Results: Successful rehydration wass achieved in 94.4% of the children in the ORS/WHO group, and 91.5% in the ORS/plantain group (p=0.70). Required time for rehydration was 5.8 (SD: ±3.0) hours in the ORS/WHO group and 6.2 (SD: ±3.7) hours in the ORS/plantain group (p=0.31). Stool output during rehydration was 7.5 g/kg body weight/hour (SD: ±7.6) in the ORS/WHO group, and 7.05 g/kg/hour (SD: ±9.4) in the ORS/plantain group (p=0.78). There was no significant difference in the concentration of plasma sodium. The observation period was 22.3 hours (SD: ±5.3) for the ORS/WHO Group and 22.7 hours (SD: ±4.7) for the ORS/plantain Group; Stool output during the observation period was 5.7 g/kg/hour (SD: ±4.7) in the ORS/WHO group and 6.3 g/kg/hour (SD: ±7.9) in the ORS/plantain group (p=0.67). The proportion of children requiring intravenous fluids during the first 24 hours was 11.1% in the ORS/WHO group and 8.5% in the ORS/plantain group (RR: 1.31; 95% CI:0.39 - 4.35) Conclusion: The plantain flour-based solution is effective and safe in correcting dehydration. The present study was unable to establish an antidiarrhoeal effect of a plantain flour-based solution.

Phenotypic and genotypic methods for detecting multidrug resistance in Mycobacterium tuberculosis

Introducción. La dificultad en el diagnóstico temprano y oportuno de la susceptibilidad a los medicamentos de Mycobacterium tuberculosis hace necesario el diseño y la evaluación de nuevas técnicas que superen la efectividad, reduzcan el costo y el tiempo que toman los métodos tradicionales. Objetivo. Evaluar y comparar dos metodologÍas fenotÍpicas y una genotípica, útiles en la determinación rápida de susceptibilidad de M. tuberculosis, teniendo el método de las proporciones múltiples como referencia. Materiales y métodos. Se incluyeron 21 cepas de M. tuberculosis para la evaluación de las metodologías fenotípicas de oxidación y reducción de Alamar azul (Maba) y el bromuro de 3-(4-5-dimetiletiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolio (MTT o Tema), frente a estreptomicina, isoniacida, rifampicina y etambutol. Mediante análisis ROC (receiver operative characteristic curves) se determinó el desempeño de las pruebas y se determinaron los valores pronósticos y el punto de corte para cada antibiótico. Además, mediante tablas de contingencia se determinó el desempeño y los valores predictivos de la metodología genotípica de PCR e hibridación reversa o rifoligotyping, versión 3, en la determinación de las cepas multirresistentes. Resultados. Los perfiles de susceptibilidad por las pruebas colorimétricas se obtuvieron a los 7 días, con valores de área bajo la curva menores de 0,9, sensibilidad de 100% y especificidad mayor de 80%. La metodología de rifoligotyping resultó eficaz en la detección de mutirresistencia, con sensibilidad de 100% y especificidad de 93%. Conclusión. Con los resultados obtenidos consideramos las pruebas Maba, Tema y rifoligotyping como alternativas rápidas y eficaces en la detección de farmacorresistencia de M. tuberculosis, aplicables a pacientes con alto riesgo de desarrollar tuberculosis multirresistente.

Background. Expeditious charactization of drug susceptibility in Mycobacterium tuberculosis is difficult and, calls for the design and evaluation of faster, cheaper and more effective new techniques. Objective. The aim of the current study was to compare one genotypic and two phenotypic methods for rapid susceptibility detection of M. tuberculosis. Material and methods. Twenty-one M. tuberculosis strains were evaluated by phenotypic methodologies of oxidation and reduction of Alamar blue and MTT in the presence of streptomycin, isoniazid, rifampin and ethambutol. In all tests, the proportion method was applied as the comparison standard. By means of receiver operative characteristic (ROC) analysis, the performance, predictive values and threshold values for all drugs were determined. In addition, the performance of PCR and reverse line blot hybridization in establishing predictive values for sensitivlity and resistance were compared in contingency tables. Results. The susceptibility patterns established by colorimetric techniques were obtained after seven days of incubation. The performances of these tests were excellent for all drugsó the areas under curves were >0.9, 100% of sensitivity (S) and specificity (E) >80%. The genotypic method of RFLP oligotyping detected multidrug resistance with S of 100% and E of 93%. Conclusion. The results indicated that Alamar blue, MTT and RFLP methodologies are rapid and useful tools for characterizing multidrug resistance in M. tuberculosis, particularly for those patients with high risk of developing multidrug resistant tuberculosis.

Hepatitis C virus Core protein production and purification in baculovirus expresión system for biological assays

Introducción. La infección por el virus de la hepatitis C (VHC) se caracteriza por la alta frecuencia de infección persistente. La capacidad del VHC para inducir alteraciones en la función de las células del sistema inmune, específicamente en las células dendríticas, parece ser una de las estrategias virales implicada en el establecimiento de la infección persistente. Esta estrategia parece estar mediada en gran parte por una de las proteínas estructurales codificada por el genoma del VHC, la proteína Core, unidad estructural de la cápside viral. Objetivo. Una de las limitantes para la evaluación de las propiedades de Core es la obtención y la purificación de la proteína nativa (191 aa). El objetivo de este estudio fue la producción y purificación de la proteína Core completa en un sistema eucariote para evaluar las propiedades de la proteína en cultivos de células dendríticas humanas. Resultados. En este estudio se logró la producción de la proteína Core completa en el sistema de expresión de baculovirus y su purificación por la técnica de separación por punto isoeléctrico y electroelución. La pureza de la proteína obtenida se confirmó por Western blot y tinción con plata. Estos análisis mostraron dos bandas únicas correspondientes a las isoformas p23 y p21 de la proteína Core, previamente descritas en la literatura. Conclusiones. La proteína obtenida posee varias de las condiciones de la proteína Core nativa, como peso molecular, isoformas y localización subcelular. Los procedimientos descritos en este artículo son aplicables a proteínas asociadas a membranas producidas en sistemas de expresión eucarióticos.

Introduction: The hepatitis C virus (HCV) commonly causes persistent infection. One of the viral mechanisms that could be involved in avoiding viral clearance is the ability of HCV to induce functional alterations of the immune system cells, specifically of dendritic cells (DCs). The studies to identify the viral proteins involved in DCs functional alterations have attributed these effects to the HCV Core protein, the capsid structural unit. Objective: One of the limitations to evaluate Core protein properties is the unavailability to obtain and purify the complete protein (191 aa). The aim of this study was to produce and purify the recombinant Core protein in a eukaryotic system, to evaluate the effect of the protein in human DCs cultures. Results: The Core protein p23 isoform was expressed in a baculovirus system, and then purified using isoelectric point separation and electroelution. The purity of Core protein was confirmed by silver stain and western blot. These analyses showed the presence of two bands that correspond to p23 and p21 isoforms of Core protein as previously reported. Conclusions: The protein obtained has several conditions of naïve Core protein as molecular weight, isoforms and subcellular localization. The procedures described in this paper could be applied to membrane associated proteins produced in eukaryotic systems.

Dental fluorosis in primary school students of the department of Caldas, Colombia Fluorosis dental

Objetivo. Determinar la prevalencia de fluorosis dental en los escolares del departamento de Caldas en el 2002. Materiales y métodos. Se realizó un estudio de corte transversal en escolares de las cuatro regiones del departamento, para lo cual se seleccionó una muestra probabilística para el área urbana y por conveniencia para la rural. Se examinaron 1.061 escolares en las mismas instalaciones de los establecimientos educativos, en condiciones de luz natural y utilizando los criterios de Dean. Se llevó a cabo análisis univariado y bivariado; para el último se empleó c² como prueba de independencia entre variables. Resultados. Se encontró que el 63,3% (IC95%: 60,0 a 66,1) de los escolares de Caldas estaba afectado por fluorosis dental en algún grado. El 56,3% (IC95%: 52 a 59) de los escolares se encontró en las categorías "muy leve" y "leve", mientras el 7% (IC95%: 2 a 16) se hallaba en las categorías "moderada" y "grave". Se observó asociación estadísticamente significativa de la variable "región con fluorosis dental", pero no con las variables "sexo", "área", "nivel de escolaridad" y "edad". La región Oriente mostró una menor prevalencia (47,9%) con relación a las otras tres áreas (Norte, Centro-Sur y Occidente) que presentaron prevalencias superiores al 68%. Conclusiones. La fluorosis dental se presenta en algún grado en dos de cada tres escolares.

Objective: To determine the prevalence of dental fluorosis in primary school students of the Department of Caldas, Colombia, in 2002. Materials and method: A cross-sectional study to determine the prevalence of dental fluorosis in primary school students in the four regions of the Department of Caldas was carried out. A probabilistic sample was selected for the urban area and, arbitrarily, for the rural area. One thousand and sixty-one students were examined at their own schools, in daylight conditions and the Dean index was applied. Univariate and bivariate analyses were made with a chi-squared test being applied for the latter to show independence among variables. Results: It was found that 63.3% (95% CI = 60.0-66.1) of primary school students in the Department of Caldas were affected by fluorosis in any degree of severity. Among them, 56.3% (95% CI = 52-59) were classified in the mild and very mild degrees, while 7% (95% CI = 2-16) were classified in the moderate or severe degrees of fluorosis. A statistically significant association of the region variable with dental fluorosis was observed. However no association with the gender, area, schooling and age variables was found. The Eastern region showed the lowest prevalence (47.9%) as compared to the other three areas (Northern, Center-Southern and Western), which showed prevalences above 68%. Conclusions: Two out of every three primary school students in the department of Caldas suffer from a certain degree of dental fluorosis.

Usefulness of a multiantigenic serological test for tuberculosis diagnostic

Introducción. La heterogeneidad en el patrón de reconocimiento antigénico observado en los enfermos infectados con Mycobacterium tuberculosis hace evidente la necesidad de contar con una técnica rápida y accesible para el diagnóstico de la enfermedad. La disponibilidad de pruebas que empleen diferentes antígenos podría ser de utilidad para aumentar la sensibilidad de la detección. Objetivo. Evaluar el uso de una prueba multiantigénica (Mapia) de fácil manejo y evaluación visual en el diagnóstico serológico de la tuberculosis. Metodología. Se estudiaron 66 sueros de pacientes con enfermedad tuberculosa comprobada y 47 sueros de individuos no tuberculosos, y se detectó la presencia de anticuerpos para 8 antígenos: 3 mezclas enriquecidas en antígenos y 5 antígenos recombinantes, incluidos en una matriz sólida cuya lectura se realizó cualitativamente. Los antígenos fueron evaluados por sus características de sensibilidad, especificidad y valores predictivos, confirmados mediante análisis de regresión logística del cual se obtuvo la razón de prevalencia utilizada para la selección de la combinación antigénica mas adecuada. Resultados. Los valores de sensibilidad y especificidad de los antígenos individuales variaron entre 5% y 83%, y 9% y 100%, respectivamente; los valores de las mezclas enriquecidas fueron mejores que los valores presentados por los antígenos recombinantes. La combinación de varios antígenos mejoró notablemente los valores de sensibilidad hasta 81%, pero en la mayoría de los casos se obtuvieron valores de especificidad menores al 57%. Conclusiones. Los resultados obtenidos sugieren que esta prueba podría ser útil como ayuda diagnóstica, especialmente para el tamizaje de poblaciones con sospecha de tuberculosis.

Introduction. The heterogeneity observed in the antigenic recognition pattern of tuberculosis patients makes evident the necesity to search for a fast and readily technique for tuberculosis diagnosis. A test which involves different antigens could improve the sensitivity of the assay. Objective. The main objective of the present work is to evaluate a multi-antigen printing immunoassay (MAPIA) for the serogical diagnosis of tuberculosis. Methodology: Sera were obtained from 66 patients with tuberculosis disease verified clinically and bacteriologically and from 47 healthy individuals (control group) .Sample sera were used for detection of antibodies against 3 enriched mixtures of proteins and 5 unique recombinant antigens. Antigens were included in a solid matrix. Sensitivity, specificity and predictive values of the test were evaluated and confirmed by a logistic regression analysis. From this analysis the reason of prevalence was obtained and used for the selection of the best antigenic combination Results: The sensitivity and specificity values of the individual antigens varied between 5-83% and 9-100%. The enriched mixtures values were better than those obtained with the recombinant antigens. The combinations of several antigens remarkably improved the sensitivity values until an 81%, but in most of the cases we obtained specificity values of 57%. Conclusions: the results obtained in the present work, suggest that this test could be useful for screening, but not like definitive test diagnostic.

**Characteristics of new cell cultures derived from embryonic tissues of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)**

Introducción. Los cultivos celulares de insectos son una metodología útil en estudios biomédicos y tecnológicos. Objetivo. El propósito principal del presente trabajo fue obtener y caracterizar cultivos celulares derivados de tejidos embrionarios de Aedes aegypti. Materiales y métodos. Se emplearon huevos embrionados para los explantes de tejidos en los medios de cultivos MM/VP12 y L-15/Grace, con suplemento de 20% de suero fetal bovino y una mezcla al 1% de antibiótico y antimicótico, con un rango de pH entre 6,8 y 7,0. Los cultivos se incubaron a una temperatura de 28ºC sin atmósfera de CO2. Resultados. El crecimiento celular se obtuvo en el medio L-15/Grace, 3 semanas después de haber sido sembrados los tejidos embrionarios; sin embargo, se necesitaron 6 meses para la formación de la monocapa confluente. Desde agosto de 2003 hasta junio de 2004, se habían realizado 28 subcultivos. Las células se caracterizaron morfológicamente; predominaron las formas epitelioides en subcultivos de pases altos. También se reconocieron las particularidades morfométricas del cariotipo y, además, se determinaron los perfiles isoenzimáticos y moleculares de los cultivos celulares, los cuales se compararon con muestras de adultos de la especie tomadas de la misma colonia y con líneas celulares derivadas de otros insectos. Discusión. Estas células representan, potencialmente, un importante sistema in vitro en investigaciones básicas y aplicadas.

Introduction. Cell cultures from insects are a useful methodology in technological and biomedical studies. Objective. The present work was aimed at obtaining and characterizing cell cultures derived from Aedes aegypti embryonic tissues. Materials and methods. Embryonated eggs were used for embryonic tissue explants in L-15/Grace and MM/VP12 culture media, supplemented with 20% fetal bovine serum and a mixture of 1% antimycotic and antibiotics, at a pH ranging from 6.8 to 7.0. The incubation temperature was 28º C; a CO2 atmosphere was not required. Results. Cell growth was obtained in L-15/Grace medium three weeks after embryonic tissues explants. Six months were required for achieving a confluent monolayer. Twenty eight serial cell subcultures were carried out from August 2003 to June 2004. Cell morphology was characterized as being epithelial in subcultures of high passages; karyotype morphometric characteristics were recognized and the molecular and isozymatic profiles were also established. The cultures were compared with adult samples from the species taken from the same colony and with cell lines derived from other insects. Discussion. These cells are an important in vitro system in applied and basic research.

**Genetic variability of Trypanosoma cruzi in blood and organs of infected mice determined by LSSP-PCR**

Introducción. La enfermedad de Chagas, causada por Trypanosoma cruzi, presenta un curso clínico variable que oscila desde casos asintomáticos a casos crónicos. T. cruzi tiene una estructura clonal y las cepas infectivas son a menudo multiclonales. La variabilidad genética de T. cruzi puede ser un determinante para el tropismo diferencial a tejidos y, consecuentemente, para las formas clínicas de la enfermedad. Objetivo. Caracterizar genéticamente los parásitos de sangre y órganos de ratones infectados con dos cepas colombianas de T. cruzi. Materiales y métodos. Se infectaron ratones con dos cepas colombianas de T. cruzi con el fin de determinar la infección en sangre y órganos. Para esto, se evaluó la sensibilidad de tres marcadores moleculares diferentes, y se determinó la variabilidad genética de los clones por la técnica de reacción en cadena de la polimerasa de baja astringencia con un único iniciador específico (LSSP-PCR), utilizando el marcador del ADN del cinetoplasto (kADN). Los perfiles de bandas obtenidos con la LSSP-PCR se analizaron por el método de neighbor-joining. Resultados y conclusiones. Nuestros resultados confirmaron la presencia de los dos grupos de T. cruzi en las cepas y el carácter policlonal de éstas. El marcador más sensible fue el kADN y el órgano más afectado, el corazón. Se encontraron diferencias genéticas entre los clones presentes en la sangre y los órganos de los ratones infectados. En conclusión, estos resultados apoyan el uso de la LSSP-PCR para el entendimiento de la epidemiología de la enfermedad de Chagas.

Introduction: Chagas disease, caused by Trypanosoma cruzi, has a variable clinical course, ranging from asymptomatic infection to chronic disease. T. cruzi has a clonal population structure and infecting strains are often multiclonal. Genetic variability of T. cruzi could be one of the determinant factors of differential tissue tropism and consequently of the clinical forms of the disease. Objective: To genetically characterize the parasites of two Colombian Trypanosoma cruzi strains in blood and organs of experimentally infected mice. Materials and methods: Mice were infected with two Colombian T. cruzi strains to determine the infection in blood and organs. The sensitivity of three different molecular markers was evaluated, and the genetic variability of the clones was determined. The latter was attained by means of low-stringency single specific primer polymerase chain reaction (LSSP-PCR) using kinetoplast DNA (kDNA) marker. The kDNA signatures obtained with the LSSP-PCR were analyzed by neighbor-joining. Results and conclusions: Our results confirmed the presence of the two lineages of T. cruzi and the multiclonal character of the two strains. The most sensitive marker was the kDNA. The most affected organ was the heart, which showed the greatest number of positive results with the three markers. There were genetic differences between the clones found in blood and organs of infected mice. Overall, these results support the use of the LSSP-PCR technique for the study of the molecular epidemiology of Chagas disease.

Identificación de la secuencia del gen de la subunidad catalítica de la telomerasa en Plasmodium falciparum

Introducción. La enzima telomerasa participa en la regulación de la longitud de los telómeros al sintetizar nuevas repeticiones teloméricas que compensan las pérdidas en cada ronda de replicación del ADN. Por esta razón, el bloqueo de su actividad se plantea como un posible blanco de acción para detener el crecimiento de células con altas tasas de crecimiento. Tal es el caso de Plasmodium falciparum, parásito causante de la forma más grave de malaria humana, en la cual se sabe que hay actividad de telomerasa pero no se tiene información sobre la enzima misma. Metodología. Para hacer un acercamiento al estudio de la telomerasa en P. falciparum, se realizó un alineamiento múltiple de las secuencias de la subunidad catalítica de la telomerasa disponibles en bases de datos y se obtuvo una secuencia consenso, la cual se comparó con las secuencias generadas en el proyecto de genoma de P. falciparum. Se encontró una secuencia que podría corresponder a parte del gen de la telomerasa de P. falciparum. Para comprobarlo, se diseñaron iniciadores que se utilizaron en ensayos de amplificación sobre el ADN y el ARN del parásito. Resultados. Se amplificaron fragmentos de ADN correspondientes a motivos conservados en las telomerasas y se detectó la presencia del ARNm mediante trascripción reversa y PCR sobre el ADNc generado. De esta manera, al combinar la utilización de herramientas de bioinformática y su posterior comprobación mediante técnicas de biología molecular, se obtuvo la secuencia del gen de la subunidad catalítica de la telomerasa en P. falciparum y se comprobó su presencia y trascripción en el parásito.

Identification of the gene sequence of telomerase catalitic subunit in Plasmodium falciparum. Introduction: The enzyme telomerase participates in the regulation of telomere length synthesizing new telomeric repeats to compensate the loss in each DNA replication cycle. Thus, telomerase is a possible target to stop the growth of cells with high replication rates. This is the case of Plasmodium falciparum, the parasite that causes the most severe kind of human malaria. It is known that it has telomerase activity but the information on the enzyme is very poor. Methods: In order to approach to the study of telomerase in P. falciparum, a multiple alignment was done using telomerase catalytic subunit sequences found in data bases. A consensus sequence was obtained, and it was compared with the sequences in the P. falciparum genome project and as a result, a sequence that could be part of the telomerase gene was found. To test that, a set of primers was designed and used to perform amplifications over DNA and RNA. Results: DNA fragments corresponding to telomerase conserved domains were amplified and by using reverse transcription and PCR over the cDNA, the presence of mRNA was detected. In this way, using bioinformatics tools and testing them with molecular biology techniques, the sequence of telomerase catalytic subunit gene (TERT) in P. falciparum was obtained and its presence and transcription were demonstrated.

Effects of vegetal oil supplementation on the lipid profile of Wistar rats

Introducción. Se informan efectos sobre el perfil lipídico por acción de los tocoferoles, tocotrienoles y ácidos grasos saturados, monoinsaturados y poliinsaturados. Objetivo. Evaluar el efecto del consumo de aceites vegetales de alta utilización en Colombia (palma, soya, maíz, girasol y canola) sobre las concentraciones sanguíneas de triglicéridos, colesterol total y colesterol-HDL en ratas Wistar. Metodología. Se cuantificaron tocoferoles, tocotrienoles y ácidos grasos de los aceites por cromatografía líquida de alta resolución. A los animales se les suministró un suplemento de 0,2 ml/día de aceite durante 4 semanas; se sacrificó un grupo de cada tratamiento (grupos tratados con aceite de palma, aceite de soya, aceite de maíz, aceite de girasol y aceite de canola) para obtener muestras de sangre y cuantificar triglicéridos, colesterol total y colesterol-HDL. Los datos se analizaron según media, desviación estándar, análisis de varianza y Bonferroni. Resultados. No se presentaron diferencias en los triglicéridos a excepción del grupo control versus soya en la tercera semana de tratamiento; se observó también una tendencia a la disminución en el grupo de palma y al aumento en los de girasol y canola. No se encontraron diferencias significativas en colesterol total en ninguna de las semanas de intervención. Se presentaron diferencias en las concentraciones de colesterol HDL en las semanas de tratamiento (p=0,005), una tendencia a la disminución en el grupo de palma y al aumento en el grupo de girasol y maíz. Conclusión. Los aceites modifican el perfil lipídico; el bajo contenido de ácidos grasos saturados, el contenido de tocoferoles y tocotrienoles son favorables para el aumento del colesterol HDL; los tocotrienoles probablemente disminuyen los troglicéridos y atenúan las respuestas desfavorables de los ácidos grasos saturados.

Introduction: Some effects on the lipid profile, due to the action of tocopherols, tocotrienols and saturated, mono and polyunsaturated fatty acids, have been reported. Objective: To evaluate the effect of vegetable oil consumption of high use in Colombia (palm, soy, corn, sunflower, and canola), on blood concentrations of triglycerides (TG), total cholesterol (TC) and HDL cholesterol (HDL-C) on male Wistar rats. Methods: The content of tocopherols, tocotrienols, and fatty acids in oils was quantified by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Animals were supplemented with 0.2 ml/day of oil. Weekly and during 4 weeks groups of animals were sacrificed, according to their treatment group, and blood samples were obtained to quantify TC, TG and HDL-C. Data were analyzed according to mean, standard deviation, ANOVA and Bonferroni comparisons tests. Results: The oils no affected the TG except in the control and the soy group in the third treatment week. A decrease tendency on the palm group and increase tendency on sunflower and canola groups were observed. No significant differences in TC were observed. In HDL-C significant differences were present on every treatment week (p= 0,005) and besides a decrease tendency on palm group and an increase tendency on sunflower and corn groups were observed. Conclusion: the oils change the lipid profile; a small amount of saturate fatty acids, the tocopherol and tocotrienol content are favourable for the HDL-C increase, and probably the tocorienols decrease the TG and attenuate the unfavourable effects of saturate fatty acids.

**Anti-glucuronoxylomannan IgG1 specific antibodies production in Cryptococcus neoformans resistant mice**

Introduction. Cryptococcus neoformans is a ubiquitous fungus which has been shown to be responsible for infections in individuals with impaired cell mediated immunity, such as patients infected with human immunodeficiency virus (HIV). C. neoformans has a polysaccharide capsule composed of glucuronoxylomannan (GXM), which acts as a major virulence factor and is considered to be a thymus independent type-2 antigen (TI-2). Objective. To study the production kinetics of IgG subclasses specific for GXM, the cross reactive antibodies to Streptococcus pneumoniae polysaccharide and to determine spleen B cell subpopulations in murine models of cryptococcosis with different susceptibilities to the infection. Materials and methods. Antibodies were detected by ELISA at different time intervals after C. neoformans infection in moderately resistant (Balb/c), highly resistant (CBA/j) and susceptible (C57BL/6) mouse strains. B cells subpopulations were determined by flow cytometry analysis. Results. Early production of IgG1, described as protector antibodies, coincided with a decrease of the number of C. neoformans colony forming units (CFU) in the lungs. Polysaccharide cross-reactive antibodies were detected in the three mouse strains, and were highest in the susceptible strain (C57BL/6), which showed the highest proportion of splenic CD5+ B lymphocytes. In contrast, CBA/J mice showed the highest levels of CD43+ B. Conclusions. These findings suggest that IgG1 antibodies specific for GXM, are implicated in host protection against C. neoformans infection, and might be regulated by CD43+ cells. They also suggest that cross reactivity antibodies are not important in the protection of C. neoformans infection.

Introducción. Cryptococcus neoformans es un hongo ubicuo que está relacionado con infecciones oportunistas en pacientes inmunocomprometidos, especialmente los pacientes infectados con el virus de la inmunodeficiencia humana. C. neoformans posee una cápsula que contiene principalmente glucuronoxilomanana que actúa como factor de virulencia y es considerado como antígeno timo independiente tipo-2. Objetivos. Determinar la cinética de producción de las subclases de IgG específicas para la glucuronoxilomanana, medir los anticuerpos de reactividad cruzada contra el polisacárido de Streptococcus pneumoniae y determinar las subpoblaciones esplénicas de linfocitos en tres modelos de criptococosis en ratones con diferentes susceptibilidades a la infección. Materiales y métodos. Los anticuerpos fueron detectados por la técnica inmunoenzimática ELISA después de la infección con C. neoformans en ratones moderadamente resistentes (Balb/c), resistentes (CBA/j) y susceptibles (C57BL/6). Las subpoblaciones de linfocitos B se determinaron por citometría de flujo. Resultados. Se observó la producción temprana de anticuerpos IgG1, que coincidía con una disminución en el número de unidades formadoras de colonias de C. neoformans en pulmón. Los anticuerpos de reactividad cruzada se detectaron en las tres cepas de ratones después de la infección; fueron mayores en la cepa susceptible C57BL/6, la cual mostró el porcentaje más alto de linfocitos B, CD5+ en el bazo. En contraste, los ratones CBA/J presentaron los mayores niveles de linfocitos B, CD43+. Conclusiones. Estos hallazgos sugieren que los anticuerpos IgG1 específicos para la glucuronoxilomanana están implicados en la protección del hospedero contra la infección por C. neoformans y podrían estar regulados por células CD43+. También sugiere que los anticuerpos de reactividad cruzada no poseen un papel relevante en el control de la infección.

**Análisis factorial y validación de la versión en español de la escala Brief Psychiatric Rating Scale en Colombia : Trabajo realizado en la Unidad de Salud Mental del Hospital Santa Clara de Bogotá y en la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Colombia, sede Bogotá.**

Antecedentes. Se llevó a cabo este estudio para validar la escala Brief Psychiatric Rating Scale (BPRS) en Colombia, usando una versión en lengua española. Utilizamos este instrumento por ser una de las escalas más ampliamente usadas en escenarios clínicos y de investigación en salud mental. Métodos. La estructura factorial y la consistencia interna se evaluaron en una muestra de 149 pacientes psiquiátricos hospitalizados. La confiabilidad prueba-reprueba e interevaluador se analizó en una submuestra de 30 pacientes. La validez concurrente se evaluó comparando los puntajes de la escala BPRS con los de la escala de impresión clínica global (ICG). La sensibilidad al cambio se evaluó comparando las puntuaciones en dos momentos clínicamente diferentes. Resultados. El análisis de los componentes principales indica una estructura conformada por tres dominios: esquizofreniforme, bipolaridad y depresión. El instrumento mostró una buena consistencia interna (alfa de Cronbach de 0,79). Los coeficientes correspondientes a la confiabilidad interevaluador y prueba-reprueba fueron de 0,94 y 0,82, respectivamente. La correlación entre la escala BPRS y la ICG fue de 0,7 (rho de Spearman). Un análisis de Anova de los sujetos mostró que la escala es un instrumento con buena sensibilidad para detectar cambios de las condiciones clínicas. Conclusión. A partir de este estudio concluimos que la versión en lengua española que se evaluó, es un instrumento de registro por parte del médico que es válido y tiene adecuadas propiedades psicométricas.

Factor analysis and validation of a Spanish version of the Brief Psychiatric Rating Scale in Colombia Background. This study was performed to validate the Brief Psychiatric Rating Scale (BPRS) in a Spanish-language version in Colombia. We used the BPRS because it is one of the most widely used scales in clinical and research settings in mental health. Methods. Factorial structure and internal consistency were studied on 149 psychiatric inpatients. Test-retest and inter-rater reliability were assessed in a sub-sample of 30 patients. Concurrent validity has been analyzed comparing scores on BPRS with scores on CGI Scale. Sensitivity to change has been evaluated comparing scores in two clinically different points. Results. Principal component factor analysis indicates a structure having three domains: schizophreniform, bipolarity and depression. The instrument showed good internal consistency (Cronbachs alpha=0.79). Coefficients corresponding to inter-rater and test-retest reliability were 0.94 and 0.82 respectively. Correlation between BPRS and CGI was 0.7 (Spearman). Within subjects analysis of variance showed that the scale is an instrument having good sensitivity to detect change of clinical characteristics. Conclusión. From this study we concluded that the Spanish language version evaluated in Colombia is a valid clinical-report instrument with adequate psychometric properties.

Utility of detection of circulating cytomegalic cells in HIV negative immunosuppressed individuals to follow up cytomegalovirus infection

Objetivo. Buscar la correlación entre la presencia de células citomegálicas circulantes con la antigenemia pp65 para citomegalovirus y el desarrollo de complicaciones clínicas inherentes a infección y enfermedad por citomegalovirus. Materiales y métodos. Entre diciembre de 2002 y julio de 2003 se procesaron 110 muestras de sangre periférica, obtenidas de 46 pacientes inmunosuprimidos. La antigenemia pp65 y la presencia de células citomegálicas circulantes se determinaron mediante inmunofluorescencia indirecta utilizando un estuche comercial para la detección del antígeno pp65 de citomegalovirus. En leucocitos de sangre periférica, la antigenemia fue positiva cuando se encontró una o más células con tinción fluorescente, multilobulada y homogénea en el núcleo celular. Se determinó la presencia de células citomegálicas circulantes cuando se observaron células de gran tamaño (35 a 50 mym) con un patrón de tinción fluorescente extendido en todo el citoplasma celular en células mononucleares de sangre periférica. Resultados. Se encontraron ocho pruebas con antigenemia positiva, procedentes de siete pacientes (15%). De éstos, cuatro (57%) también presentaron células citomegálicas circulantes, tres habían recibido un trasplante renal y uno un trasplante hepático. El número de células positivas en la antigenemia fue mayor en los pacientes con trasplante renal que en el resto de pacientes inmunosuprimidos (457 vs.1,96; p<0,005). No se encontró asociación entre la presencia de células citomegálicas circulantes, la morbilidad, la mortalidad y el desarrollo de enfermedad injerto contra huésped (GVHD) (p<0,001). Discusión. No encontramos correlación entre la detección de células citomegálicas circulantes, la antigenemia y la mortalidad en estos pacientes. Sin embargo, es necesario realizar estudios prospectivos con un mayor número de individuos para determinar mejor dicha correlación y definir su utilidad clínica en pacientes inmunosuprimidos.

Objective. To correlate the presence of circulating citomegalic cells (CCC) with CMV pp65 antigenemia with the development of clinical complications as a result of cytomegalovirus (CMV) infection and disease. Materials and methods. Between December-2002 and July-2003, 110 peripheral blood samples obtained from 46 immunosupressed patients were processed. pp65 antigenemia and the presence of CCC were determined by indirect immunofluorescence using a commercial kit to detect CMV pp65 antigen. In peripheral blood leukocytes, antigenemia was positive when there was one or more cells with multilobulated, homogenous fluorescent stain in the nucleus. The presence of CCC in peripheral blood mononuclear cells was determined when an extended pattern of fluorescent stain in all the cytoplasm was observed in cells of 35 to 50 micrometers from. Results. 8 antigenemias from 7 patients (15%) were positive. Out of these, 4 (57%) were also positive for CCC, corresponding to 3 kidney transplant recipients and to 1 liver transplant recipient. The number of positive cells in antigenemia was greater in kidney-transplant recipients than in the rest of immunosupressed patients (457 vs.1.96, p< 0.005). There was not association between the presence of CCC, morbidity, mortality and the development of GVHD (p<0.001). Discussion. There was not any correlation between the detection of CCC, antigenemia and mortality in these patients. Nevertheless, further prospective studies with a greater number of individuals are required to rule out this correlation and to define the clinical used of this CCC in immunosupressed patients.

The human inmunodeficiency virus type 1 and the developing central nervous system

Actualmente, hay más de 42 millones de infectados con el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1), de los cuales, 3,2 millones son niños y, de éstos, el 90% con transmisión vertical de la infección. Se considera que en Colombia más de 200.000 personas se han infectado desde el inicio de la pandemia y los estudios muestran una tendencia constante al aumento en las cifras de seroprevalencia en mujeres embarazadas y, por ende, en el número de recién nacidos infectados. El VIH-1 es primordialmente linfotrópico, pero su tropismo por el sistema nervioso central (SNC) es bien conocido, lo que genera múltiples alteraciones neurológicas, particularmente prominentes en niños, de las cuales la más prevalerte es la encefalopatía. Clásicamente, se reconocen dos tipos de encefalopatía en esta población: encefalopatía temprana y tardía, ambas con diferentes características clínicas e inmunológicas. La infección por el VIH-1 en el SNC está limitada a los macrófagos, la microglía y los astrocitos en menor escala. Las neuronas, células principalmente afectadas en los pacientes con sida, raras veces son infectadas, por lo que se postula que factores solubles, provenientes tanto del huésped como del virus, son los principales causantes del daño neuronal. Los hallazgos presentados en esta revisión sugieren la posibilidad de que el SNC, en etapas tempranas del desarrollo, sea especialmente susceptible a la infección por el VIH-1. Las cifras epidemiológicas sugieren que este tipo de alteraciones clínicas serán cada vez más frecuentes; de ahí, la importancia de conocer la neuropatogénesis de la infección por el VIH-1.

Nowadays, over 42 million people are infected with the human Immunodeficiency Virus type 1 (HIV-1), 3.2 million of them are children infected through vertical transmission in 90% of the cases. It is considered that in Colombia more than 200000 persons have been infected since the beginning of the pandemic, and the studies show a tendency toward a steady increase in the seroprevalence in pregnant women. Although HIV-1 is basically lymphotropic, its capacity to invade the Central Nervous System (CNS) is well known, generating multiple neurological alterations, especially prominent in children, with encephalopathy being the most prevalent. Classically, two types of neurological disorders are recognized in this population: early and late encephalopathies, each of them with different clinical and immunological characteristics. HIV-1 infection of the CNS is limited to macrophages, microglia and astrocytes in a restricted manner. Neurons, which are mainly affected in patients with the acquired immunodeficiency virus (AIDS), are rarely infected, suggesting that host and viral soluble factors, are responsible for the neuronal damage. The conclusion reached in this review is that the CNS, in its early stages of development, is especially susceptible to HIV-1 infection. The epidemiological trends allow to predict that these types of clinical alterations will increase in frequency; hence it is essential to understand HIV-1´s neuropathogenesis.

Vigilancia epidemiológica incompleta de la epidemia de dengue-2 en Ibagué, Colombia, 1995-1997