Biomédica

Trachoma in Latin America: an opportunity for elimination

Síndrome miasténico de Eaton-Lambert

Cutaneous tuberculosis after mesotherapy: report of six cases

Introduction. Cutaneous tuberculosis as a result of a needle injection is a rare event; it generally occurs among medical and laboratory personnel and among patients receiving percutaneous treatment. Objective. Six patients are presented who developed cutaneous tuberculosis after mesotherapy cosmetic treatment. Material and methods. One to four months after injection of an unknown product as treatment for obesity and cellulites, five women and a man developed papules, nodules and drainage of wax like material at the inoculated sites; this was interpreted clinically as a non tuberculous mycobacterium infection. Skin biopsies were taken for a histopathologic study; the biopsy and exudates were cultured to make a phenotypic identification. Polymerase chain reaction and restriction enzyme pattern analyses (PCR-restriction pattern analysis)) procedures were applied to the skin biopsies. Results. Mycobacterium tuberculosis was confirmed in the culture and by PRA analysis in the paraffin-embedded biopsies. The patients had never had tuberculosis. Their thoracic X rays were normal and the size of the tuberculin reaction was 17 to 20 mm. Five patients recovered with antituberculosis treatment and the sixth spontaneously healed after the removal of the largest cutaneous module. No satellite adenopathy or recurrences were observed. Conclusions. A previously undescribed mode of acquisition cutaneous tuberculosis was described. This was the second incident of a demonstrated cutaneous tuberculosis following mesotherapy in Colombia. Skin lesions induced by injections must be tested to detect mycobacterias to include M. tuberculosis.

Introducción. La tuberculosis cutánea secundaria a la inyección con agujas es rara; se presenta en personal médico y de laboratorio, y en pacientes que reciben tratamientos percutáneos. Objetivo. Presentar seis pacientes con tuberculosis cutánea secundaria a tratamiento por mesoterapia. Materiales y métodos. Entre 1 y 4 meses después de la inyección en la piel glútea y abdominal de material no precisado, como tratamiento para la obesidad y la celulitis, cinco mujeres y un hombre desarrollaron pápulas, nódulos y senos de drenaje de material seroso en los sitios de inoculación, interpretados clínicamente como infección por micobacterias no tuberculosas. Se practicaron cultivos de las secreciones y de las biopsias de piel para la identificación fenotípica y estudio de histopatología. Con los resultados iniciales se realizaron pruebas moleculares de PRA (PCR-restriction pattern analysis) en las biopsias de piel y estudio ampliado de los pacientes. Resultados. Se demostró Mycobacterium tuberculosis en los cultivos, hallazgo confirmado por la técnica de PRA en las biopsias incluidas en parafina.Los pacientes no habían padecido tuberculosis. Las placas de tórax fueron normales y la tuberculina midió entre 17 y 20 mm. Cinco curaron con terapia antituberculosa y otro curó espontáneamente luego de la resección-biopsia de la lesión más grande. No se encontraron adenopatías satélites ni recurrencias. Conclusiones. Se demostró una nueva forma de adquirir la tuberculosis cutánea. Esta es la segunda demostración de tuberculosis cutánea por mesoterapia en Colombia. El estudio de las lesiones de la piel en el sitio de la inyección cutánea debe incluir pruebas para detectar micobacterias, entre ellas M. tuberculosis.Las autoridades sanitarias deben prestar atención y prevenir esta modalidad de adquirir la tuberculosis.

**Endophthalmitis by Pseudomonas aeruginosa. after penetrating keratoplasty, case report with an epidemiological investigation**

Introduction. An endophthalmitis following penetrating keratoplasty by Pseudomonas aeruginosa is a devasting case with very poor visual outcomes. Objective. To determine the origin of an infection after a penetrating keratoplasty. Materials and methods. After an endophthalmitis an epidemiological study was undertaken with the approval of the ethics committee and support of a medical team comprised of an epidemiologist, infectologist, bacteriologist and ophthalmologists specializing in cornea. Factors that may have contributed to the risk of infection were assessed, for example, the processing and preservation of the cornea in the moment of the extraction, the characteristics of the donor, recipient and infecting bacterium, as well as the details pertaining to the surgical operation. Results. No risks factors were found in the institution, in the eye bank facilities, in the donor or in the receptor. However, sterile technique could not be guaranteed in the morgue where the corneal extraction occurred, and other isolated cases of endophthalmitis post-keratoplasty had been documented involving tissues from the same morgue that had been processed by two eye banks in the same city. Characteristics of the multi-resistant Pseudomonas sp. demonstrated its origin from a hospital environment due to its previous exposure to a variety of antibiotics. Conclusions. Corneal extraction site must guarantee an antiseptic preparation and aseptic tissue donor recuperation; although in this study it was not feasible to accurately establish the infection source, all of the findings led to suspect a possible contamination at the morgue.

Introducción. Una endoftalmitis post-keratoplastia penetrante por Pseudomonas aeruginosa representa un caso devastador con muy pobre pronostico visual. Objetivo. Determinar el origen de una infección luego de una queratoplastia penetrante. Materiales y métodos. Se efectuó una investigación epidemiológica de un caso de endoftalmitis con el soporte de un equipo humano compuesto por epidemiólogo, infectólogo, bacteriólogo y oftalmólogos especialistas en córnea. Se evaluaron los aspectos en los cuales pudiera existir el riesgo de adquirirse la infección como en el momento de la extracción, el procesamiento y la preservación de la de la córnea, las características del donante, el receptor y la bacteria infectante, además de los detalles relacionados al evento quirúrgico. Resultados. No se encontraron riesgos en la institución, en las instalaciones del banco de ojos, en el donante ni el receptor. Se encontró que en el sitio de la extracción en la morgue no se podía garantizar una técnica esteril y se documento la presentación de otros casos aislados de endoftalmitis pos queratoplastia penetrante con tejidos de la misma morgue y procesados por dos bancos de ojos de la misma ciudad. Las características de la Pseudomonas multirresistente demostraban que venía de un medio hospitalario con exposición previa a múltiples antibióticos. Conclusiones. El sitio de la extracción de las corneas debe garantizar una preparación antiséptica y una recuperación aséptica del tejido donante pues en este estudio aunque no se pudo establecer con certeza la fuente de la infección, los hallazgos llevaron a sospechar una posible contaminación en la morgue.

**Disseminated mycobacteriosis affecting a prosthetic aortic valve: first case of Mycobacterium peregrinum type III reported in Colombia**

Rapidly growing mycobacteria are non-tuberculous mycobacteria amply present in the environment. Although they are not usually pathogenic for humans, they are opportunistic in that they can cause disease in people with disadvantageous conditions or who are immunocompromised. Mycobacterium peregrinum, an opportunistic, rapidly growing mycobacteria, belongs to the M. fortuitum group and has been reported as responsible for human cases of mycobacteriosis. A case of M. peregrinum type III is herein reported as the first in Colombia. It presented as a disseminated disease involving a prosthetic aortic valve (endocarditis) in a seventeen-year-old girl with a well-established diagnosis of prosthetic aortic valve endocarditis who was referred for a surgical replacement. Due to a congenital heart disease (subaortic stenosis with valve insufficiency), she had two previous aortic valve implantation surgeries. One year after the second implantation, the patient presented with respiratory symptoms and weight lost indicative of lung tuberculosis. A chest X-ray did not show parenchymal compromise but several Ziehl-Neelsen stains were positive. An echocardiography showed a vegetation on the prosthetic aortic valve. In blood and sputum samples, M. peregrinum type III was identified through culture, biochemical tests and hsp65 gene molecular analysis (PRA). The patient underwent a valve replacement and received a multidrug antimycobacterial treatment. Progressive recovery ensued and further samples from respiratory tract and blood were negative for mycobacteria.

Las micobacterias de rápido crecimiento son microorganismos pertenecientes a las micobacterias no tuberculosas que tienen amplia distribución ambiental. Aunque usualmente no son patógenas para los humanos, en condiciones desfavorables, pueden causar enfermedad en la población general o en huéspedes inmunocomprometidos, por lo cual se consideran oportunistas. Mycobacterium preregrinum es una micobacteria de rápido crecimiento perteneciente al complejo fortuitum que ha sido reportado como responsable de casos de micobacteriosis en humanos. Se presenta el caso de una micobacteriosis por M. peregrinum de tipo III, el primero reportado en Colombia, en una paciente de 17 años de edad con una endocarditis de una válvula aórtica protésica, implantada inicialmente por estenosis subaórtica congénita con insuficiencia y, posteriormente, por estenosis aórtica relacionada con la válvula inicialmente implantada. Un año después del segundo implante, presentó sintomas respiratorios y pérdida de peso sugestivos de tuberculosis pulmonar. Las coloraciones de Ziehl-Neelsen del esputo fueron positivas aunque la radiografía de tórax no mostró compromiso del parénquima. En el ecocardiograma se encontró una vegetación en la válvula aórtica. En las muestras de sangre y de esputo, se identificó M. peregrinum de tipo III por cultivo, pruebas bioquímicas y análisis molecular del gen hsp65 por PCR-restriction pattern analysis (PRA). La paciente se sometió a cambio de válvula y recibió tratamiento combinado contra la micobacteria, con rápida recuperación. Las muestras tomadas del sistema respiratorio y sanguíneo se tornaron negativas para micobacterias.

Clinical and microbiological profiles of anti-personnel mine injuries in the Medellín area of northwestern Colombia

Introducción. El problema de las lesiones por minas antipersonal crece cada día en el mundo, pero poco se conoce en Colombia sobre las características clínicas y microbiológicas de esas lesiones. Objetivos. Determinar las características clínicas y microbiológicas de las lesiones por minas antipersonal en los pacientes atendidos en el Hospital Pablo Tobón Uribe, durante los años 2003 a 2005. Materiales y métodos. Se revisaron las historias clínicas de 151 pacientes hospitalizados por lesiones causadas por minas antipersonal, entre el 1º de enero de 2003 y el 31 de julio de 2005, en un hospital universitario de alta complejidad de Medellín, Colombia. Resultados. Todos los pacientes eran de sexo masculino, con edad promedio de 24 años y 94,7% de ellos eran militares. La estancia hospitalaria promedio fue de 20 días y la mortalidad hospitalaria de 4%. El 66,8% presentaba lesiones múltiples, 88% compromiso de las extremidades y las amputaciones afectaron a 52,3% de los pacientes. Se realizaron 313 cultivos, 68,7% positivos, para un total de 386 microorganismos aislados. Las bacterias más frecuentes en el primer cultivo fueron Pseudomonas aeruginosa y Escherichia coli,y en los cultivos posteriores, P. aeruginosa y Enterococcus faecalis. El 93,4% de los pacientes recibió tratamiento antibiótico empírico; el más utilizado fue ampicilina/sulbactam. Conclusiones. Las características clínicas y microbiológicas de los pacientes atendidos están relacionadas con su ocupación y los complejos mecanismos de daño de las minas. Un mejor conocimiento de dichas características permitirá diseñar estrategias de manejo y tratamientos empíricos de acuerdo con la epidemiología local.

Introduction. The counts of antipersonnel mine injuries are increasing worldwide, but in Colombia, documentation of the clinical and microbiological characteristics of these lesions is lacking. Objectives. To determine the clinical and microbiological characteristics of antipersonnel mine injuries for patients admitted for treatment during a 2 and a half year period. Materials and methods. The medical records were reviewed for 151 patients hospitalized with injuries caused by antipersonnel mines. The admissions occurred between January 1st 2003 and July 31st 2005 at a highly specialized university hospital, the Pablo Tobón Uribe Hospital in Medellín, Colombia. Results. All patients were male, mean age 24 years old, and all but 8 of them military. The length of stay averaged 20 days and hospital mortality 4%. Multiple lesions occurred in 66.8% of the cases, 88.0% of the injuries affected the limbs, and amputations were mandated in 52.3% of patients. A total of 313 specimens were cultured--68.7% of cultures were positive, and 386 microorganisms were identified. The most prevalent bacteria in the first culture were Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli. In subsequent cultures, P. aeruginosa and Enterococcus faecalis appeared. Most of the patients (93.4%) received standard antibiotic therapy, ampicillin/sulbactam. Conclusions. The clinical and microbiological characteristics of patients were related to their military occupation and the complex injuries produced by the mines. Knowledge of these characteristics will permit the design of better management strategies and empirical treatments.

Serological, molecular and virological analyses associated with yellow fever surveillance in Colombia

Introducción. La fiebre amarilla es una fiebre hemorrágica viral inmunoprevenible que continúa causando importante morbilidad y mortalidad en regiones tropicales y subtropicales. En Colombia hay aproximadamente cinco millones de personas en riesgo de adquirir la infección. Objetivo. Describir la importancia de los análisis serológicos, moleculares y virológicos en la vigilancia de la fiebre amarilla en Colombia, con base en los resultados obtenidos de muestras recibidas en el Laboratorio de Arbovirus del Grupo de Virología del Instituto Nacional de Salud, entre 2006 y 2008, y recalcar la relevancia de una oportuna y adecuada recolección de muestras para la confirmación de casos. Materiales y métodos. Se procesaron 2.096 muestras de suero y tejidos utilizando las pruebas ELISA para IgM contra fiebre amarilla, aislamiento viral-inmunofluorescencia indirecta y transcriptasa inversa-reacción en cadena de la polimerasa. Las muestras positivas se correlacionaron con los hallazgos clínicos y epidemiológicos para su interpretación y confirmación. Resultados. El 82% de los casos confirmados por histopatología en este período también se confirmaron en nuestro laboratorio por técnicas serológicas y moleculares; estos casos provenían de zonas selváticas y del piedemonte de la Cordillera Oriental. Conclusión. Se observa la necesidad de seguir manteniendo y fortaleciendo los procesos de vigilancia en las regiones de mayor circulación del virus, para la captación oportuna de casos. Se recalca la importancia del diagnóstico por medio de las técnicas descritas, las cuales se pueden realizar en muestras de pacientes vivos, contrario a las pruebas histopatológicas que requieren muestras de casos fatales.

Introduction. Yellow fever is an immunopreventable viral hemorrhagic fever that causes high morbidity and mortality in tropical and sub-tropical regions. In Colombia, approximately 5 million persons are at risk of becoming infected with yellow fever virus. Objective. The serological, molecular and virological analyses on the yellow fever surveillance samples were summarized in order to indicate the importance of appropriate and timely sampling in the process of case confirmation. Materials and methods. The survey was based on samples received at the Arbovirus Laboratory, Virology Group, Instituto Nacional de Salud, Bogotá, during years 2006 to 2008. A total of 2,096 serum and tissue samples were tested for IgM antibodies against yellow fever by capture enzyme-linked immunosorbent assay, viral isolation-indirect fluorescence antibody technique, and reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Positive samples were correlated with the clinical and epidemiological findings for their interpretation and confirmation. Results. Of the 15 yellow fever cases confirmed in Colombia during 2006-2008 by histopathological techniques, 82% were confirmed at the Arbovirus Laboratory using serologic and molecular techniques. The positive cases were distributed in the rainforest region and in the foothills of the eastern chain of the Andes mountains. Conclusion. The case distribution and prognosis illustrated the necessity of maintaining and strengthening the surveillance processes in those regions where the yellow fever virus is circulating. The cases must be recruited and diagnosed sufficiently early in order to use the above techniques in samples from live patients, in contrast to the histopathological procedures that require samples from fatal cases.

**Methicillin-resistant Staphylococcus aureus colonization in a Colombian hospital intensive care unit: phenotypic and molecular characterization**

Introducción. Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (SARM) causa infecciones adquiridas en la comunidad y en el ámbito hospitalario. El ser portador de SARM se ha descrito como factor de riesgo para desarrollar infección clínica. Objetivo. Caracterizar la colonización por SARM en pacientes adultos de una unidad de cuidados intensivos colombiana, utilizando herramientas de biología molecular. Materiales y métodos. Entre febrero de 2007 y febrero de 2008 se tamizaron mediante hisopado nasofaríngeo, 705 pacientes al ingresar a la unidad de cuidados intensivos, de los cuales, 683 (96,9%) fueron seguidos semanalmente y al egreso de la unidad. Se determinó el perfil de sensibilidad de los aislamientos a 11 antibióticos por el método de dilución en agar; el 62,0% de los aislamientos de SARM fueron caracterizados genética y molecularmente. Resultados. Se tamizaron 705 pacientes al ingreso; 182 (25,8%) estaban colonizados por S. aureus, de los cuales, 51 (7,2%) eran resistentes a la meticilina. Se hizo el seguimiento durante la estancia en la unidad de cuidados intensivos a 683 pacientes, de los cuales, 62 (9,1%) fueron colonizados por SARM en dicha unidad. La prevalencia del clon chileno fue de 76,5% al ingreso y de 88,9% durante la estancia. El 16,0% de los pacientes colonizados desarrollaron algún tipo de infección por SARM. Se encontraron tres pacientes colonizados con SARM adquirido en la comunidad, los cuales fueron positivos para la leucocidina Panton-Valentine (Panton-Valentine leukocidin, PVL). Conclusiones. El 7,2% de los pacientes que ingresaron a la unidad de cuidados intensivos estaban colonizados con SARM. Éste es el primer reporte de colonización por aislamientos de SARM-ST8-SCCmec IVc adquirido en la comunidad y relacionado genéticamente con el clon pandémico USA300-0114 en Colombia.

Introduction. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) cause nosocomial and community infections. MRSA colonization in hospitals has been described as an important risk factor during hospitalization. Objective. The colonization characteristics of MRSA was described using the tools of molecular biology. Materials and methods. Between February 2007 and February 2008, 705 patients entering a Colombian intensive care unit (ICU) were screened for MRSA by taking nasopharyngeal samples. For 683 of these patients, a weekly follow-up was provided after they left the ICU. The susceptibility of each S. aureus isolate was tested against 11 antibiotics using agar dilution methods. Sixty two percent (62.0%) of the MRSA isolates were characterized at genetic and molecular level with the detection of resistant genes, SCCmec typing using PCR and the genetic profile with pulsed field gel electrophoresis (PFGE). Results. Of the 705 patients screened at entry to the ICU, 182 (25.8%) were colonized by S. aureus, and of these, 51 (7.2%) were MRSA. Of the 683 patients with follow-up, 62 (9.1%) were infected by MRSA contracted in the hospital ICU. The prevalence of the Chilean clone was 76.5% at entry and 88.9% for follow-up patients. Of the 113 patients colonized with MRSA, nosocomial infection was present in 18 patients (16.0%). Three community-acquired MRSA isolates related to the USA300-0114 pandemic clone were identified. These were also positive for Panton-Valentine leucidin cytotoxin genes of S.aureus. Conclusions. This is the first report in Colombia of patients colonized with CA-MRSA-ST8-SCCmec IVc isolates, and it is a probable source of dissemination of this bacteria in Colombian hospitals.

**Drug-resistant Mycobacterium tuberculosis in children under 15 years**

Introducción. La tuberculosis es una enfermedad infecciosa. Un tercio de la población mundial está infectada y cada año ocurren en el mundo nueve millones de casos, un millón en menores de 15 años y 719 en Colombia para el año 2008. Objetivo. Describir el comportamiento de la resistencia de Mycobacterium tuberculosis en menores de 15 años en Colombia. Materiales y métodos. Se analizó la información de las pruebas de sensibilidad de M. tuberculosis a los fármacos, realizadas desde 2001 hasta el 30 de junio de 2009 registradas en el Instituto Nacional de Salud. Se evaluó la distribución de casos por sexo, edad, localización de la enfermedad, tipo de muestra, infección concomitante tuberculosis/VIH, proporción de fármacorresistencia. Resultados. Se incluyeron 128 pacientes, 66 (52%) de sexo femenino y 62 (48%) masculino. En el grupo de edad de 0 a 5 años, hubo 59 (46%) casos, 21 (16,4%) de 6 a 10 y 48 (37,5%) de 11 a 14. Las formas de la enfermedad fueron: 89 (69,6%) pulmonar, 34 (26,4%) extrapulmonar y 5 (3,94%) casos sin dato. Se encontraron 7 (5,4%) casos con infección concomitante tuberculosis/VIH. Los casos no tratados fueron 123 (96%) y 5 (3,9%) fueron previamente tratados. La resistencia global en no tratados fue de 21,1% y la MDR-TB (multidrug-resistant tuberculosis) de 6,5%. Conclusiones. Este análisis demuestra que existen debilidades en el cumplimiento de las normas, lo que dificulta el diagnóstico y la identificación de los patrones de resistencia en menores de 15 años. Éste es un tema en el cual se debe explorar más.

Introduction. Tuberculosis is a widespread and increasingly important infectious disease. A third of the world-wide population is infected. Every year nine million cases occur in the world, one million of them appearing in children under 15 years old. In Colombia alone, 719 cases were reported for the year 2008. Objective. The incidence of Mycobacterium tuberculosis resistant forms was characterized in children under 15 years old in Colombia. Materials and methods. Mycobacterium tuberculosis drug susceptibility test data from 2001 to mid year 2009 were analyzed at the Laboratorio Nacional de Referencia, Instituto Nacional de Salud, Bogotá, Colombia. Cases were evaluated by patient age, disease geographic location, and type of sample, as well as the proportions of TB/HIV coinfections and drug resistance. Results. Of the 128 patients examined, 66 were female (52%) and 62 were male (48%). The age group 0 to 5 years old consisted of 59 cases (46%), 21 cases were 6 to 10 years old (16%) and 48 cases 11 to 14 years old (37.5%). The types of disease were 89 (69.6%) pulmonary, 34 (26.4%) extrapulmonary, and 5 (3.9%) cases without data. TB/VIH coinfection cases were 7(5.4%). 123 (96%) untreated cases and 5 (2.34%) cases previously treated. Global resistance among the untreated cases was 21.1% and MDR-TB was 6.5%. Conclusion. This analysis demonstrated weaknesses in following established procedures in the TB treatment process, thereby impeding the diagnosis and the identification of drug resistance s in children under 15 years old. Approaches to improving treatment standards is a topic which requires further exploration.

Antimicrobial resistance of Gram negative bacilli isolated from terciary-care hospitals in Colombia

Introducción. La resistencia a antimicrobianos se ha identificado como uno de los mayores problemas de salud pública, por lo cual debe ser vigilada permanentemente a través de sistemas efectivos de vigilancia. Objetivo. Describir el comportamiento de la resistencia antimicrobiana de bacilos Gram negativos, en las instituciones hospitalarias pertenecientes al Grupo para el Estudio de la Resistencia Nosocomial en Colombia, de enero 2006 a diciembre 2008. Materiales y métodos. Es un estudio descriptivo realizado con la información de los perfiles de sensibilidad bacteriana suministrada por 14 hospitales de tercer nivel en siete ciudades de Colombia, definidos como el Grupo para el Estudio de la Resistencia Nosocomial en Colombia, de enero de 2006 a diciembre de 2008. Usando el software WHONET 5.4, se describe el comportamiento de la resistencia bacteriana de las especies de Enterobacteriaceae (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae y Enterobacter cloacae) y bacilos Gram negativos no fermentadores (Pseudomonas aeruginosa y Acinetobacter baumannii) frente a antibióticos seleccionados como marcadores de resistencia en salas generales y unidades de cuidados intensivos de pacientes adultos. Resultados. En algunas Enterobacteriaceae se observó disminución de la frecuencia de resistencia antimicrobiana, mientras que P. aeruginosa se consolida como un germen multirresistente, cuyas frecuencias de resistencia continúan en aumento. Conclusiones. Los programas de vigilancia pueden tener un impacto en la disminución significativa de gérmenes multirresistentes, ya que contribuyen a la adecuada implementación de protocolos encaminados a fortalecer las estrategias de control de infecciones y el manejo racional de antibióticos en cada hospital.

Introduction. Antimicrobial resistance has been identified as one of the major public health problems worldwide. To facilitate its control, bacterial resistance levels must be monitored permanently by effective surveillance systems. Objective. To describe the antimicrobial resistance patterns of Gram negative bacilli in Colombian hospitals over a 3-year period. Materials and methods. This descriptive study used the bacterial susceptibility profiles provided by 14 tertiary-care hospitals belonging to the Colombian Nosocomial Resistance Study Group. The hospitals were located in 7 major cities in Colombia, and provided records over the period January 2006 to December 2008. Using WHONET 5.4, the antimicrobial resistance patterns were described for the Enterobacteriaceae (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae and Enterobacter cloacae) and non-fermenters (Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii). Comparisons were made in the bacterial responses to selected antibiotics in samples from general wards and from adult intensive care units. Results. The antimicrobial resistance frequencies of several Enterobacteriaceae species showed a decreasing trend. In contrast, P. aeruginosa was demonstrated to be a multidrug-resistance organism with increasing resistance frequencies. Conclusions. These data emphasize the importance of surveillance programs in detecting presence of multidrug-resistant organisms. This information will aid the implementation of protocols aimed to strengthen the infection control strategies and antibiotic stewardship in each hospital.

Distribution and ecoepidemiology of the triatomine fauna (Hemiptera: Reduviidae) in Margarita Island, Bolívar, Colombia

Introducción. Los reportes sobre la diversidad de triatominosy algunos aspectos ecoepidemiológicos en la Isla Margarita se han limitado sólo a dos de los cinco municipios que la conforman. El conocimiento de las especies, su hábitat y la infección, es fundamental para establecer el riesgo en áreas endémicas para la enfermedad de Chagas. Objetivo. Describir la fauna de triatominos, la distribución y la infección por Trypanosoma cruzi en la Isla Margarita, con el fin de aportar conocimientos que permitan establecer y estratificar el riesgo de transmisión de la zona. Materiales y métodos. Se realizó la captura de triatominos en las viviendas y el extradomicilio. En las viviendas se hizo búsqueda activa en el intradomicilio y el peridomicilio, mientras en el extradomicilio, se hizo en palmas y nidos de aves. La infección por T. cruzi se determinó por PCR a partir de las heces. Resultados. Se capturaron 1.154 insectos de cinco especies en los municipios de la isla, Triatoma maculata y Rhodnius pallescens mostraron altos índices de infección en el intra domicilio y en el peridomicilio en Mompós y Talaigua Nuevo. En las palmas, R. pallescens fue hallado infectado en todos los municipios y Eratyrus cuspidatus sólo en San Fernando y Margarita. Conclusión. La presencia de triatominos infectados en las viviendas y en las palmas en los cinco municipios de la isla, llama la atención sobre el potencial riesgo que representan estos insectos en la zona.

Introduction. Information concerning to triatomine diversity and some eco-epidemiologic aspects on Margarita Island has been recorded only from two of the five counties on the island. Knowledge about species habitat and their natural infection is essential to establish the risk for Chagas disease in endemic areas. Objective. The distribution of triatomine insect fauna and its infection with Trypanosoma cruzi was described in order to establish and to stratify the risk of Chagas disease transmission. Material and methods. Each of the 5 counties on Margarita Island were surveyed for triatomid insects inside and outside each dwelling. In the extradomicilary area, searches were conducted in the palms and bird nests located within forests and in pastures near domiciles. Infection with T. cruzi was determined amplifying by PCR the DNA extracted from triatomine feces. Results. Five species of Reduviidae were recovered among the 1,154 triatomines captured in the 5 counties. Triatoma maculata and Rhodnius pallescens showed high infection rates within dwellings and as well as in the peridomestic areas in Mompós and Talaigua Nuevo. On the palm trees, only R. pallescens and Eratyrus cuspidatus were found infected, and only in San Fernando and Margarita. In Cicuco, only R. pallescens was infected. Presence of Triatoma dimidiata was also ascertained.Conclusion. Infected triatomines were present in houses and on palm trees in all counties on the island. These observations indicate a potential risk of Chagas across the entire island; furthermore the presence of T. dimidiata, a very efficient Chagas vector, emphasizes the need to establish its epidemiological status on the island.

**Detection of chromosome 17 aneuplody and TP53 gene deletion in a broad variety of solid tumors by dual-color fluorescence in situ hybridization (FISH)**

Introducción. El TP53 es un gen supresor de tumores localizado en la región cromosómica 17p13.1; controla el ciclo celular y se encuentra alterado en cerca de 50% de todas las neoplasias. Objetivos. Determinar las aneuploidías del cromosoma 17 y la deleción en el locus 17p13.1 del gen TP53, en diversos tumores sólidos primarios utilizando la técnica FISH-bicolor. Materiales y métodos. Se analizaron 38 muestras de diversos tipos de tumores sólidos primarios. Todas las muestras se disociaron mecánica y enzimáticamente con colagenasa al 0,2%, antes de la obtención de los núcleos interfásicos. La técnica de FISH-bicolor se realizó en núcleos interfásicos, mediante sondas marcadas directamente con fluorocromos para el centrómero del cromosoma 17 (CEP 17; señal verde; VYSIS) y para el locus específico del gen TP53 (LSI 17p13.1; señal naranja; VYSIS). Resultados. Se encontró que 63% (24/38) de las muestras tenían aneuploidías del cromosoma 17. La monosomía fue la aneuploidía más frecuente (75%; 18/24), seguida de la trisomía (17%; 4/24); la nulisomía y la tetrasomía fueron menos frecuentes. El 89,5% (34/38) de los casos presentaron deleción del gen TP53. Sólo cuatro casos fueron normales para el número de copias del cromosoma 17 y del gen TP53. El estudio histopatológico mostró que la mayoría de las muestras eran tumores malignos. Conclusiones. La aneuploidía del cromosoma 17 y la deleción en el locus 17p13.1 del gen TP53 son alteraciones muy frecuentes en los tumores sólidos. La técnica FISH-bicolor permite detectar simultáneamente alteraciones cromosómicas numéricas y estructurales en núcleos interfásicos.

Introduction. TP53 is a tumor suppressor gene located on chromosome 17p13.1. This gene is essential for the control of cell cycle and has been found altered in about 50% of all tumor types. Objective. The presence of aneuploidy of chromosome 17 and TP53 gene deletion at 17p13.1 locus was determined in primary solid tumors using the dual-color FISH (fluorescence in situ hybridization). Materials and methods. Thirty-eight samples consisted of several types of primary solid tumors. All samples were mechanically and enzymatically disaggregated with 0.2% collagenase prior to obtaining interphase nuclei. The dual-color FISH was performed using direct fluorescent labeling probes for the chromosome 17 centromere (green signal) and for the TP53 gene locus-specific (orange signal). Results. Characteristic aneuploidy on chromosome 17 was found in 63% (24/38) of the samples. Monosomy occurred most frequently (75%, 18/24), followed by trisomy (17%, 4/24); nullisomy and tetrasomy were less frequent. TP53 gene deletion was found in 89.5% (34/38) of cases. Only four tumors were normal for copy number of chromosome 17 and TP53 gene. The histopathologic study showed that most of the samples were malignant tumors. Conclusions. Aneuploidy of chromosome 17 and deletion at 17p13.1 locus of TP53 gene were genetic alterations found to be very frequent in solid tumors. The dual-color FISH was able to detect both numerical and structural chromosomal abnormalities in interphase nuclei.

The salivary glands of two sand fly vectors of Leishmania: Lutzomyia migonei **(França) and Lutzomyia ovallesi (Ortiz)(Diptera: Psychodidae)**

Introduction. Leishmaniasis is a vector-borne disease transmitted by the intradermal inoculation of Leishmania (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) promastigotes together with saliva during the bite of an infected sand fly. Objective. The salivary glands were compared from two vector species, Lutzomyia ovallesi (Ortiz,1952) and Lutzomyia migonei (França,1920) (Diptera: Psychodidae). Material and methods. Protein profiles by SDS PAGE of salivary glands were compared among species as well as their development at several times post feeding. First, mice were immunized to salivary proteins by exposure to biting by L. ovallesi and of L. migonei. Antibodies in these mice against salivary gland-specific proteins were evaluated by immunoblotting. Results. No apparent change was revealed in the kinetic expression of salivary proteins induced by the different physiological states post feeding. Qualitative and quantitative variations were detected in16-18 polypeptides with molecular weights ranging from 6 to 180 kDa. Species-specific proteins were demonstrated for L. migonei and L. ovallesi. In addition, antibodies against salivary gland specific proteins were found in mice immunized by the saliva of both species. Conclusion. Basic information was obtained concerning the nature of salivary gland proteins of L. migonei and L. ovallesi. This information helps to elucidate the role of salivary proteins and their potential as effective tools in screening risk factors in human and other vertebrate hosts.

Introducción. La leishmaniasis es una enfermedad transmitida por la inoculación intradérmica de promastigotes de Leishmania (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) junto con la saliva del vector durante la picada de un flebotomino infectado. Objetivo. Comparar las glándulas salivales de Lutzomyia ovallesi (Ortiz, 1952) y Lutzomyia migonei (França, 1920) (Diptera: Psychodidae) vectores de Leishmania en América del Sur. Materiales y métodos. Se analizaron los perfiles proteicos por SDS-PAGE de las glándulas salivales de estas dos especies en los diferentes grupos y tiempos posteriores a la alimentación. Se evaluó la presencia de anticuerpos producidos en los ratones inmunizados por la picaduras de L. ovallesi y L. migonei por inmunotransferencia. Resultados. Los resultados mostraron que no hay cambio aparente en la cinética de expresión de las proteínas salivales, inducidas por los distintos estados fisiológicos, en las dos especies, presentándose variaciones cualitativas y cuantitativas. Los perfiles proteicos revelaron alrededor de 16 a 18 polipéptidos, con pesos moleculares entre 6 a 180 kDa. Los resultados mostraron proteínas específicas para L. migonei y L. ovallesi. También, se detectaron anticuerpos producidos en los ratones inmunizados por las picaduras deambas especies, contra proteínas específicas de las glándulas salivales. Conclusión. Los resultados proveen información básica sobre las proteínas salivales de las especies L. migonei y L. ovallesi que podrían ser importantes en futuros estudios como posible herramienta para estudiar los factores de riesgos en la población y en otros huéspedes vertebrados.

Genetic and bioenvironmental factors associated with warfarin response in Colombian patients

Introducción. La warfarina es un anticoagulante de difícil manejo por su estrecho margen terapéutico y los numerosos factores que influyen en la respuesta. Objetivo. Determinar la contribución de variables demográficas, clínicas y genéticas sobre las dosis de mantenimiento de warfarina en pacientes colombianos. Materiales y métodos. Se incluyeron 145 adultos de ambos sexos, en anticoagulación estable con International Normalized Ratio (INR) entre 2 y 3, al menos, durante dos meses, sin cambio en las dosis de warfarina ni en el preparado comercial. Previa firma del consentimiento informado de cada voluntario, se registró su edad, sexo, peso, talla, tabaquismo, enfermedades concomitantes, medicación simultánea, INR, dosis de warfarina, su indicación y nombre comercial. Cada paciente se tipificó para los genes CYP2C9, VKORC1, CYP4F2 y PROC, y en 59 de ellos, se cuantificaron las concentraciones séricas de warfarina. La genotipificación y la cuantificación sanguínea se hicieron mediante minisecuenciación y HPLC, respectivamente. Resultados. Los factores de edad, medicación simultánea con inhibidores (amiodarona, sertralina, fluoxetina) o inductores enzimáticos (fenitoína, carbamacepina), los alelos rs1799853 (*2) y rs1057910 (*3) del gen CYP2C9, así como rs9923231 del gen VKORC1, se asociaron con las dosis de warfarina requeridas para conseguir anticoagulación con INR de 2 a 3. Dichas variables se incluyeron en un modelo de regresión lineal múltiple que permitiera predecir la dosis semanal de warfarina, y se obtuvo un algoritmo que explica el 47,4% de la variabilidad en las dosis. Conclusión. La consideración de las variables clínicas y las farmacogenéticas puede mejorar la relación entre seguridad y eficacia de la warfarina, aunque la adopción de un algoritmo de dosificación farmacogenético requiere información obtenida con ensayos clínicos.

Introduction.Warfarin is an anticoagulant that is difficult to administer because of its narrow therapeutic margin and the numerous factors that influence patient response. Objective. Demographic, clinical and genetic variables were characterized to establish the appropriate maintenance dosages of warfarin. Materials and methods. The Colombian patients consisted of 145 adults of both sexes. They were in stable anticoagulation status with international normalized ratio between 2 and 3 for at least two months, and without changes in the warfarin commercial preparation or in the dosage. After signing the informed consent, the following data was recorded for each volunteer: age, gender, weight, height, smoker status, co-morbidity, co-medication, International Normalized Ratio (INR), warfarin dose, and commercial brand. Each patient was typed for genes CYP2C9, VKORC1, CYP4F2 and PROC; for 59 patients, the serum levels of warfarin were quantified. The genotyping and the blood quantification were performed by mini-sequencing and HPLC methods, respectively. Results. Age, co-medication with enzymatic inhibitors (amiodarone, sertraline, fluoxetine) or inducers (phenytoin, carbamazepine), and the alleles rs1799853 (*2) and rs1057910 (*3) of the CYP2C9 gene, as well as rs9923231 of the VKORC1 gene were associated with warfarin dose required to achieve anticoagulation with INR of 2-3. These variables were included in a multiple linear regression model for predicting the optimum dose/week of warfarin. This resulted in an algorithm that explained 47.4% of the variability in the dose responses. Conclusion: Clinical and pharmacogenetic variables provided a basis for improving the safety and effective dosage of warfarin; however, the use of a pharmacogenetic algorithm will require patient data obtained during clinical trials.

Microbiological and chemical quality of water used in Colombian food industries

Introducción. La inocuidad alimentaria ha sido reconocida mundialmente como una función esencial en salud pública. Una de las primeras causas de muerte en los países en desarrollo son las enfermedades transmitidas por alimentos, que afectan millones de personas en el mundo. El presente estudio fue realizado dentro del marco de un convenio interadministrativo planteado en Colombia para mejorar el estatus sanitario de la producción agroalimentaria del país. Objetivo. Evaluar la calidad higiénico-sanitaria del agua utilizada en una muestra aleatoria de productos de industrias colombianas de alimentos. Materiales y métodos. Se llevó a cabo un estudio descriptivo transversal. Incluyó 66 industrias localizadas en ocho departamentos y en el Distrito Capital. Se hicieron determinaciones analíticas de trece parámetros fisicoquímicos, tres parámetros microbiológicos, plaguicidas organofosforados y carbamatos, y diez tipos de metales. Resultados. La actividad económica de la mitad de las industrias provenía de la leche y sus derivados, y la otra mitad de productos cárnicos. Según las normas vigentes para el agua de consumo humano, el índice de riesgo de la calidad del agua fue alto en 4,5% de las industrias alimentarias, medio en 34,8%, bajo en 16,7%, y sin riesgo en 43,9%. Los parámetros con mayor número de muestras fuera de la norma fueron los microbiológicos (21,2%) y el cloro residual (28,8%). Conclusión. Aunque es un estudio preliminar, los resultados indican que el agua utilizada en la mayoría de las industrias participantes puede producir deterioro de los alimentos y ser una vía de transmisión de microorganismos patógenos; por lo tanto, es importante organizar un programa continuo de seguimiento y control.

Introduction. Food safety is a public health concern that is recognized worldwide. Food-borne diseases affect millions of people throughout the world, although mainly in developing countries. The current study was performed within the framework of an inter-administrative agreement in Colombia that considers decisions for improving the sanitary status of products from the agrofood industry in Colombia. Objective. Water used in Colombian food industries was assessed for its hygienic and sanitary qualities. Materials and methods. The descriptive cross sectional study included 66 industries located in eight geographic provinces across Colombia, including the Capital District of Bogotá. The analytical determinations included 13 physical-chemical parameters, three bacteriological parameters, organophosphate and carbamate levels and presence of 10 metals. Half of the industries were associated with production of dairy products and the other half with the meat-packing industry. Results. Using the the current standards for human drinking water, the risk index of the food industry water samples was high for 4.5% of these industries, moderate risk for 34.8%, low risk for 16.7% and for 43.9%, no risk. The parameters with the highest number of samples not in compliance with water health standards were microbiological (21.2%) and residual chlorine (28.8%). Conclusions. The results showed that the water used in most food industries can produce food spoilage and transmission of pathogen microorganisms. Importance is stressed for organizing a constant program of monitoring and control of water usage in food industries.

Clinical evidence of trachoma in Colombian Amerindians of the Vaupés Province

Introducción. El tracoma es la primera causa infecciosa de ceguera. En 2008 había 1´300.000 ciegos por su causa y 8 millones de personas tenían lesiones oculares que podrían conducirlos a la ceguera. En América Latina se ha documentado su presencia en Brasil, Guatemala y México. Objetivo. Informar por primera vez la presencia de tracoma en Colombia, en indígenas del departamento del Vaupés. Materiales y métodos. En 2003 y 2006 se visitaron las comunidades makú de San Joaquín y Santa Catalina, a 5 km de Brasil, y entre 2007 y 2009, las de San Gerardo, San Gabriel y Nuevo Pueblo, a 35 km de las anteriores. Resultados. En 2006, se examinaron 114 personas en San Joaquín y Santa Catalina. Se diagnosticó clínicamente tracoma en 21 (18,4%), 15 de ellas (13,2%) menores de 15 años. Se detectaron todas las fases de la enfermedad. Tres mujeres tenían opacidad corneal con notoria disminución de la agudeza visual. En las tres últimas comunidades se detectaron tres mujeres con tracoma avanzado, con opacidad corneal y ceguera. La vivienda precaria, la carencia de agua potable y de sistemas adecuados de disposición de los excrementos, y la abundancia de moscas domésticas del género Hippelates, constituyen factores de riesgo para la transmisión del tracoma. Discusión. El tracoma existe en Colombia, con incidencia frecuente en las comunidades estudiadas. Su localización definida hace posible su eliminación en programas de salud pública. Es necesario realizar una búsqueda del tracoma en otras comunidades indígenas del Vaupés con condiciones de vida similares.

Introduction: Trachoma is the leading cause of infectious blindness in the world. In 2008 there were 1,300,000 persons with blindness caused by trachoma and 8 million with trichiasis, which might eventually lead to blindness. In Latin America it has been documented in Brazil, Guatemala and México. Objective: To inform the presence of trachoma for the first time in Colombia, amongst Amerindians of the Department of Vaupés. Materials and methods: In 2003 and 2006 the Amerindian Makú communities of San Joaquín and Santa Catalina, located 5 km from the border with Brazil, were visited. From 2007 to 2009, San Gerardo, San Gabriel and Nuevo Pueblo, at a 35 km distance from San Joaquín were visited. Results: In 2006 114 people were examined in Santa Catalina and San Joaquin; 21 patients were clinically diagnosed with trachoma (18.4%), 15 (13.2%) of them children under 15 years old. All trachoma phases were observed. Three women had corneal opacity with poor vision. In the remaining three communities, three women with advanced trachoma with corneal opacity and blindness were detected. The poor quality of living conditions without fresh water and adequate sanitary disposal systems, and the abundance of flies identified as Hippelates sp., are risk factors for the transmission of the disease. Discussion: Trachoma exists in Colombia, and it is frequent among the studied communities. Its focalized distribution makes it amenable to elimination. It is advisable to search for trachoma in other indigenous communities in Vaupés with similar living conditions.

New approaches for allergen-specific immunotherapy

Las enfermedades alérgicas, como el asma y la rinitis, son un problema de salud de importancia en todos los países y con una tendencia global al aumento en su prevalencia. La inmunoterapia específica con extractos alergénicos naturales es el único tratamiento con antígenos dirigido a brindar una protección duradera y que beneficia a la mayoría de la población tratada. Sin embargo, este tratamiento presenta inconvenientes porque los extractos son preparaciones de difícil estandarización y gran complejidad en sus componentes, lo que aumenta los riesgos de que se presenten reacciones adversas y nuevas sensibilizaciones a otros antígenos presentes en el extracto. Por lo tanto, se ha planteado la necesidad de desarrollar nuevos esquemas de inmunoterapia específica con el alérgeno en los que se utilicen moléculas bien caracterizadas de fácil estandarización y manejo, con las que se puedan brindar tratamientos más seguros y eficaces. Con estos nuevos esquemas se han diseñado vacunas basadas en alérgenos recombinantes y variantes o péptidos derivados de éstos, para ser administrados solos o con adyuvantes en preparaciones que favorecen la captación y presentación antigénica por las células dendríticas o tienen como blanco las células efectoras, como mastocitos y basófilos. Los estudios in vitro, en modelos animales y algunos en fase clínica en humanos, indican que estas preparaciones pueden brindar protección frente a la exposición alergénica o mejorar la sintomatología, al inducir la producción de anticuerpos bloqueadores de la actividad de la IgE, de células T reguladoras y de citocinas del perfil Th1.

Rates of allergic diseases such as asthma and rhinitis are on the rise as important health problems in every country of the world. Allergen specific immunotherapy with natural allergenic extracts is a treatment directed to changing the natural course of these diseases, and is a treatment that has reported beneficial effects in a majority of allergic patients. However, this treatment is difficult because of the complex composition of the extracts. The composition is difficult to standardize and, consequently, the risk of anaphylactic shock is increased; furthermore, sensitization can occur to other antigens present in the extract. Therefore, new allergen specific immunotherapy approaches are needed. Chemically defined and standardized antigens are more easily managed and provide a safer and more efficient treatment. Vaccines for immunotherapy have already been designed, based on recombinant allergens, variants (or peptides derived from them), that can be administrated alone or in combination with adjutants. Some of these preparations are indicated for facilitating the uptake and antigenic presentation by dendritic cells, or by targeting the mast cells and basophiles. Studies in vitro, in animal models and clinical trials in allergic patients, indicate that these preparations may provide protection against the allergen exposure and improve the symptoms by inducing the production of blocking antibodies of the IgE mediated response, production of regulator T cells and cytokines of Th1 profile.

Malaria and social health determinants: a new heuristic framework from the perspective of Latin American social medicine?