Biomédica

El acceso global a los medicamentos en el contexto internacional actual

Clinical application of diffusion tensor imaging and tractography in a child with holoprosencephaly

Las imágenes de resonancia magnética potenciadas en difusión y tractografía pueden emplearse en el estudio de las malformaciones congénitas del sistema nervioso central asociadas a anormalidades en los tractos de sustancia blanca. Presentamos un paciente con holoprosencefalia semilobar en quien la imagen potenciada en difusión y la tractografía demostró falla de la inducción ventral del prosencéfalo y fusión anormal de varios fascículos de la sustancia blanca en el cerebro y en el tallo encefálico. De esta forma, las anormalidades de los fascículos de la sustancia blanca en casos de holoprosencefalia se pueden identificar por medio de las imágenes potenciadas en difusión y tractografía fasciculografía.

Diffusion tensor imaging and fiber tracking can be methods used for the study of congenital brain malformations associated to white matter bundle abnormalities.Their use is illustrated in a child with semilobar holoprosencephaly in whom diffusion tensor imaging and tractography showed diencephalic ventral induction failure and abnormal white matter fascicles in brain and brainstem.

Cold urticaria: case series and literature review

La urticaria por frío es una de las cinco causas más frecuentes de urticarias crónicas; está incluida en el grupo de urticarias físicas y puede ocurrir luego de la exposición al frío, ya sea a través de un objeto, el aire o un líquido. Los pacientes pueden presentar síntomas de urticaria, angioedema, dificultad respiratoria e, incluso, anafilaxia al sacar objetos de la nevera, nadar en agua fría o al entrar a cuartos con aire acondicionado. A continuación se presentan cinco pacientes con diagnóstico de esta enfermedad y una breve revisión del tema.

Cold urticaria is one of the five most common causes of chronic urticaria and is grouped as a physical urticaria. It can occur after exposure to cold, either through solid objects, air or liquids. Patients may have symptoms of urticaria, angioedema, respiratory distress and even anaphilaxis when the skin is exposed to a cold environment, such as handling refrigerated objects, swimming in cold water or entering an air-conditioned room. Five cases of cold urticaria are presented, followed by a brief literature review.

Using S35-S36 and TcH2AF-R primer-based PCR tests to follow-up a Chagas´ disease patient who had undergone a heart transplant

Introducción. La cardiomiopatía es la forma clínica más común de la enfermedad de Chagas en Colombia, siendo el trasplante una opción para su tratamiento. Debido al riesgo de reactivación de la infección posterior al trasplante, es prioritario vigilar el comportamiento del parásito. Objetivo. Presentar el caso de un paciente con cardiopatía chagásica dilatada y falla cardiaca, a quien se le practicó trasplante de corazón y se le hizo seguimiento mediante PCR, análisis histopatológicos y ecocardiográficos. Materiales y métodos. Se tomaron muestras de sangre antes de la intervención y después de ella y de biopsias endomiocárdicas posteriores al trasplante. El ADN extraído fue amplificado con los iniciadores TcH2AF-R y S35-S36. La parasitemia se examinó mediante la técnica de microhematocrito. Se practicaron estudios histopatológicos para determinar la presencia del parásito o el rechazo del trasplante y, ecocardiográficos, para evaluar la función cardiaca. Resultados. De las muestras de sangre tomadas a los 83 y 48 días previos al trasplante, la última fue positiva por la PCR S35-S36. Hasta el segundo mes después del trasplante, ambas PCR fueron negativas. Al tercer mes después del trasplante, ambas PCR fueron positivas, por lo cual se inició tratamiento con nifurtimox. Tras 35 días de haberse iniciado el tratamiento, ambas pruebas presentaron resultados negativos, al igual que las tomadas a los 0, 3, 10 y 12 meses posteriores. Los resultados de la histopatología, del microhematocrito y de las PCR de las biopsias, fueron negativos en todas las fechas. Conclusiones. Las PCR permitieron sospechar la reactivación de la infección en el paciente, se le administró el tratamiento y posterioremente las pruebas se tornaron negativas. La evolución clínica del paciente ha sido favorable.

Introduction. Cardiomyopathy is the most common clinical form of Chagas´ disease in Colombia, and one treatment option is a heart transplant. Tracking the behavior of the Chagas´ parasite, Trypanosoma cruzi, is a priority due to the risk of post-transplant reactivation of the infection. Objective. A case is presented of a patient who had suffered from dilated chagasic cardiopathy and cardiac failure, and had subsequently undergone heart transplant. The case was monitored by PCR, histopathological and echocardiographic examinations. Materials and methods. Blood samples were drawn before and after the transplant, and post-transplant endomyocardial biopsies were taken. The extracted DNA was amplified with the TcH2AF-R and S35-S36 primers. Parasitemia was examined by the microhematocrit test. In addition, histopathological studies determined the parasite presence and transplant rejection status. Echocardiograms were administered to evaluate cardiac function. Results. Of the blood samples taken 83 and 48 days pre-transplant, the latter was positive by the S35-S36 PCR test. PCR tests in blood with both primers were negative up to the second month post-transplant. However, both PCR tests were positive by the third month post-transplant. Thereupon, the patient was treated with nifurtimox. Both tests presented negative results in blood 35 days after treatment was started and remained negative thereafter at 0, 3, 10 and 12 months post-treatment. The pathology, microhematocrit, and PCR test results from biopsies were negative on all the specified dates. Conclusions. PCR tests were used as indicators of a reactivation of trypanosomid infection in the patient. After treatment administration, PCR tests became negative. The patient´s clinical evolution was favorable.

Probable outbreak of oral transmission of Chagas disease in Turbo, Antioquia

Introducción. La enfermedad de Chagas es endémica en 21 países de América, incluyendo a Colombia, donde 700.000 a 1´200.000 personas se encuentran infectadas y ocho millones están en riesgo. En las áreas endémicas predominan los casos crónicos infectados por vía vectorial. Sin embargo, en los últimos años se han incrementado los reportes de casos agudos ocurridos por transmisión oral. Objetivos. Describir un brote agudo de enfermedad de Chagas en Turbo (Antioquia) y determinar la posible forma de transmisión para establecer mecanismos de prevención y control. Materiales y métodos. Se hizo un estudio descriptivo. Se verificó la documentación del diagnóstico en los casos y se hizo búsqueda activa de pacientes sintomáticos y de los contactos; se realizaron pruebas de laboratorio, identificación de factores de riesgo y búsqueda de reservorios y vectores. Resultados. Se evaluaron 156 personas, y se identificaron 11 casos agudos de enfermedad de Chagas, 10 con títulos de anticuerpos IgM e IgG contra Trypanosoma cruzi por IFI y ELISA, y un caso fallecido, asociado epidemiológicamente. En tres personas, la PCR para T. cruzi fue positiva, dos de ellas con miocardiopatía y otra con síndrome febril agudo. Cuatro casos requirieron manejo en hospital de tercer nivel por miocardiopatía aguda. Todos los casos positivos tenían fuente común de alimentación. Se recolectó un ejemplar de Panstrongylus geniculatus y uno de Caluromys lanatus, ambos negativos para T. cruzi. Conclusión. Se identificó un probable brote agudo de enfermedad de Chagas en Antioquia y se plantea como hipótesis la transmisión por vía oral, mediante la ingestión de T. cruzi en alimentos contaminados con restos de triatominos o excrementos de marsupiales.

Introduction. Chagas´ disease is endemic in 21 countries of South and Central America, including Colombia, where 700,000 to 1.2 million persons are infected and eight millions are at risk. In endemic areas, chronic cases are predominant. However, in recent years, increasing reports of acute oral transmission have appeared. Objective. An outbreak of acute Chagas´ disease was verified in the municipality of Turbo (Antioquia), and the most probable cause of transmission was determined in order to establish prevention and control measures. Materials and methods. A descriptive study was done. A search for information from local health authorities was conducted to uncover all case reports. Laboratory tests, risk factor analysis and search for vectors and reservoirs were undertaken in Turbo. Results. Of the156 people evaluated, 11 cases of acute Chagas´ disease were identified. Ten had significant titers of IgM and IgG antibodies against the Trypanosoma cruzi parasite by IFAT and Elisa tests; one fatal case was linked epidemiologically. In 3 cases, PCR was positive for T. cruzi, two of which displayed Chagas cardiomyopathy, and one with acute fever. Four cases required specialized health care for acute cardiomyopathy. All positive cases had a common source of food. One specimen of the triatomid vector species, Panstrongylus geniculatus, and one reservoir, the woolly opossum Caluromys lanatus, were collected; both were negative to T. cruzi. Conclusions. An outbreak of acute Chagas´ disease occurred in Turbo, Antioquia. The mode of transmission may have occurred by the ingestion of T. cruzi-contaminated food by infected triatomines or opossum feces.

Perirectal block for out-patient anorectal surgery: A new technique

Introduction. Perirectal block using four puncture places has been classically described for rectal surgery. Objective. This paper was aimed at showing the quality of anesthesia and postoperative analgesia using a new two-puncture-site technique. Materials and methods. Patients scheduled for ambulatory rectal surgery between January/2003 and December/2007 were included consecutively. The new two-puncture technique was used. Alternative anesthetic management and level of postoperative pain requirements were evaluated (rated visual analogue scale-VAS). Follow-up was done by telephone between 1st and 10th postoperative day to evaluate complications, pain (yes/no), and satisfaction level (1-5 points score). Results. Four hundred and nine subjects were included; 50.61% were female. Mean age was 43 (95%CI: 41-44; range: 17-85), 12.7% were aged over 60. According to the American Society of Anesthesiology (ASA), 72.6% were classified as ASA1 and 26.1% ASA2. External and internal hemorrhoidectomy was performed on 31% of patients; 61.6% had two or more procedures. Lidocaine was used on 406 subjects. Ropivacaine was added for 9.2% of them and levobupivacaine for 89.4%. 394 patients were followed-up. Median follow-up was 4 days. A response was obtained from 346 subjects (84.6%); 105 (30.3%) recalled having suffered pain during the post-operative period, being most frequent in the lidocaine+ropivacaine group (17/39, 43.5%) than in the lidocaine+bupivacaine group (88/307, 28.6%). Satisfaction was evaluated by 336 subjects (82.1%), 332 of them (98.8%) awarding a score of 5. Two subjects (0.6%) scored this 2 and 1. Subjects did not mention complications. Conclusions. The new peri-rectal two-puncture block technique is easy and also provides analgesia and a high degree of satisfaction.

Introducción. El bloqueo perirrectal de cuatro punciones ha sido descrito clásicamente para cirugía rectal. El objetivo de este artículo es describir la calidad de la anestesia y la analgesia posoperatoria cuando se utiliza una nueva técnica de dos punciones. Materiales y métodos. Se incluyeron, consecutivamente, los pacientes programados para cirugía rectal ambulatoria entre enero de 2003 y diciembre de 2007. Se utilizó la nueva técnica anestésica de dos punciones. Se registraron las necesidades de manejo anestésico alternativo y el nivel de dolor posoperatorio por medio de una escala visual análoga graduada. El seguimiento fue telefónico (1 a 10 días posoperatorios) para evaluar complicaciones, dolor (sí/no) y nivel de satisfacción (escala, 1 a 5). Resultados. Se incluyeron 409 sujetos. El 50,61 % eran mujeres. La edad promedio fue de 43 años, (rango, 17 a 85). El 12,7 % eran mayores de 60 años. De acuerdo con la clasificación de la American Society of Anesthesiology (ASA), el 72,6 % fueron ASA1 y 26,1 % ASA2. Se practicó hemorroidectomía externa e interna en 31 % de los pacientes; 61,6 % tuvo más de dos procedimientos. Se utilizó lidocaína en 406 sujetos. Se adicionó ropivacaína en 9,2 % y levobupivacaína en 89,4 %. La mediana de seguimiento fue de cuatro días. Se obtuvo respuesta de 346 sujetos (84,6 %); 105 (30,3 %) refirieron haber sufrido dolor durante el posoperatorio, lo que fue más frecuente en el grupo de lidocaína más ropivacaína (17/39, 43,5 %) que en el de lidocaína más bupivacaína (88/307, 28,6 %). La satisfacción se evaluó en 336 sujetos (82,1 %): 332 (98,8 %) la calificaron en 5, 2 sujetos (0,6 %) la calificaron en 2 y en 1. No hubo complicaciones. Conclusiones. El bloqueo perirrectal de dos punciones es una técnica fácil que, además, provee analgesia y un alto grado de satisfacción.

Venous thromboembolism prophylaxis in Colombian surgical and medical patients: Results for Colombia of the ENDORSE study

Introducción. La profilaxis en pacientes de tratamiento médico o quirúrgico con riesgo de tromboembolia venosa, requiere ser evaluada para obtener suficiente información que contribuya a mejorar estas prácticas, para que sean efectivas y eficaces, y ayudar con las medidas necesarias de prevención hospitalaria de la tromboembolia venosa. Objetivo. Evaluar el riesgo de tromboembolia venosa y de los hábitos de profilaxis en pacientes de tratamiento médico o quirúrgico hospitalizados en Colombia y compararlos con los de los centros internacionales participantes en el estudio ENDORSE. Materiales y métodos. Las instituciones fueron escogidas al azar. Se evaluaron todas las historias clínicas de pacientes de tratamiento médico o quirúrgico. Se utilizaron las guías del 2004 del American College of Chest Physicians para evaluar el riesgo de tromboembolia venosa y lo apropiado de la profilaxis. Resultados. Se evaluaron 761 pacientes: 218 de tratamiento quirúrgico y 543 de tratamiento médico, de cinco centros hospitalarios de Colombia. De esta población, 49 % se encontraba en riesgo de tromboembolia venosa (40 % de los de tratamiento médico y 72% de los de tratamiento quirúrgico), en comparación con 52 % de la muestra internacional. La profilaxis fue significativamente mayor en los pacientes de tratamiento médico en riesgo (63,7 %, n=137), que en los de tratamiento quirúrgico (48,4 %, n=76, P=0,01). En comparación con la muestra internacional, la profilaxis en los de tratamiento médico fue significativamente superior (63,7 % Vs. 39,5 %, P=0,003), a diferencia de los de tratamiento quirúrgico (48,4 % Vs. 58,5 %, P=0,02). Conclusiones. Los resultados muestran que en los centros hospitalarios de Colombia se trataron pacientes con riesgo de tromboembolia venosa en forma similar al resto de los países participantes en el estudio ENDORSE, y que se hizo más profilaxis apropiada en pacientes de tratamiento médico. Sin embargo, se requiere mejorar la utilización de profilaxis en pacientes hospitalizados.

Introduction. More information is needed on the risk of venous thromboembolism in the hospital setting, and on patterns of use of thromboprophylaxis, as advocated in consensus guidelines. ENDORSE was an international study aimed at evaluating hospital venous thromboembolism prevention practices in medical and surgical patientes. Objectives. The risk of venous thromboembolism was evaluated along with the use of thromboprophylaxis in hospitalized medical and surgical subjects; these data were compared with the international sample from the ENDORSE study. Materials and methods. Participating institutions in Colombia were selected arbitrarily. The medical charts for medical and surgical patients were evaluated randomly. The 2004 American College of Chest Physician guidelines were used to evaluate risk of venous thromboembolism and adherence to recommended thromboprophylaxis regimens. Results. The study included 761 subjects (218 surgical, 543 medical) located in five acute care hospitals; 49% of these subjects were considered at risk of venous thromboembolism (40% medical, 72% surgical), compared with 52% in the international sample. Prophylaxis use was higher in medical patients at risk (63.7%, n=137) than in surgical patients (48.4%, n=76; p=0.01). Compared with the international sample, the use of prophylaxis in Colombia was greater in medical patients (63.7% vs. 39.5%, p=0.003), but lower in surgical patients (48.4% vs. 58.5%, p=0.02). Conclusions. Participating Colombian centers treat patients at risk of venous thromboembolism similarly to other participant countries, but appropriate prophylaxis was prescribed more frequently to medical patients. Greater efforts are needed, both in Colombia and around the world, to improve rates of appropriate venous thromboembolism prophylaxis in at-risk subjects.

Paragonimus sp. in crabs and awareness of the educational community to aquatic ecosystems in La Miel and La Clara, Caldas, Antioquia

Introducción. Estudios previos demostraron la presencia de Paragonimus sp. en cangrejos de tres municipios en la cuenca del río Medellín. Para diseñar un plan para el control y la prevención de la paragonimosis, es necesario determinar la presencia del parásito en la parte alta del río, con la participación de la comunidad educativa, para dirigir su atención hacia el recurso hídrico. Objetivo. Establecer la presencia de metacercarias de Paragonimus sp. en cangrejos de las quebradas La Miel y La Clara, y sensibilizar a la comunidad educativa hacia el manejo adecuado de sus ecosistemas acuáticos. Materiales y métodos. En 2007 y 2008 se recolectaron cangrejos de quebradas de las veredas La Miel y La Clara. En el laboratorio se relajaron y sacrificaron para buscar metacercarias de Paragonimus sp. y determinar la especie. Con estudiantes de instituciones educativas de ambas veredas, se llevaron a cabo cinco talleres lúdicos, para mejorar la percepción de su relación con sus quebradas. Resultados. Se capturaron nueve cangrejos Hypolobocera bouvieri. En La Miel se halló uno con Paragonimus sp. En La Clara se encontró, además, Aroapyrgus colombiensis, molusco huésped del parásito. Con los estudiantes se estableció que los ecosistemas acuáticos ejercen una gran atracción sobre ellos; sin embargo, desconocen los riesgos y no sostienen una relación responsable. Conclusiones. Se señala la presencia de focos de Paragonimus sp. en la parte alta del río Medellín; por lo tanto, el municipio de Caldas debe incluirse en los programas de prevención y control. La población estudiantil requiere nuevos programas educativos para mejorar la interacción con los ecosistemas acuáticos y disminuir el deterioro de su salud.

Introduction. Previous research has demonstrated the presence of Paragonimus spp. in crabs of three municipalities located in the Medellín river basin. To design a plan for the control and prevention of paragonimosis, parasite presence must be demonstrated in the upper area of the river, and an awareness campaign of its risks must involve the participation of the educational community in focusing attention on the local aquatic resources. Objective. The presence of Paragonimus spp. metarcercariae was established in freshwater crabs from La Miel and La Clara streams, and an awareness campaign created public awareness to management of the aquatic ecosystems for risk reduction. Materials and methods. Nine crabs were collected from streams of La Miel and La Clara villages in 2007 and 2008. The crabs were indentified, sacrificed in the laboratory and examined for presence of Paragonimus spp. metacercariae. Five workshops were conducted with students of educational institutions of the two villages to improve the student perception of paragonimosis risks associated with the local streams. Results. The crabs were identified as Hypolobocera bouvieri. One crab was found with Paragonimus spp. in La Miel. A mollusk, Aroapyrgus colombiensis, another host of the parasite was found in La Clara. That aquatic ecosystems are a great attraction for the local was well established. Conclusions. Foci of Paragonimus spp. flatworms are present in the upper area of Medellín river which includes Caldas. However, local school children were uninformed about the risk of paragonimosis associated with the local aquatic ecosystem. Therefore this province must be included in programs for prevention and control of paragonimosis. The prevalence of this disease recommends educational programs that promote awareness of local aquatic ecosystems and their parasitic inhabitants.

**Surveillance of Rickettsia sp. infection in capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) a potential model of epidemiological alert in endemic areas**

Introducción. Los capibaras o chigüiros (Hydrochoerus hydrochaeris) son huéspedes amplificadores de Rickettsia sp. Usualmente se encuentran parasitados por la garrapata Amblyomma cajennense, principal vector de rickettsiosis en Suramérica. Los capibaras pueden ser usados como potenciales centinelas de la circulación de rickettsias. Objetivo. Detectar anticuerpos contra Rickettsia sp. del grupo de las fiebres manchadas en capibaras de una zona rural del municipio de Montería, departamento de Córdoba. Material y métodos. Se analizaron 36 sueros de capibaras de una zona rural de Montería (vereda San Jerónimo) en Córdoba. Para la detección de anticuerpos IgG se practicó inmunofluorescencia indirecta, que utilizó antígenos de la cepa Taiaçu de Rickettsia rickettsii de Brasil. Los sueros de los capibaras fueron diluidos 1:64. Se capturaron las garrapatas que se encontraban parasitando los capibaras y se clasificaron hasta su especie. Resultados. La seroprevalencia contra Rickettsia sp. del grupo de la fiebres manchadas encontrada fue de 22 % (8 capibaras); se encontraron cuatro sueros con título de 1:64, tres sueros con título 1:128 y un suero presentó titulación de 1:512. Todas las garrapatas (n=933) fueron identificadas taxonómicamente como A. cajennense. Conclusión. En Colombia existen zonas endémicas de rickettsiosis y la aparición de brotes anuales lo confirma (Necoclí, 2006; Los Córdobas, 2007, y Altos de Mulatos, 2008). El presente estudio reporta por primera vez la presencia de infección natural por rickettsia del grupo de las fiebres manchadas en capibaras de Colombia. Los hallazgos sugieren que los capibaras pueden ser usados como potenciales centinelas de la circulación de rickettsias y marcadores de las áreas de riesgo para la transmisión de rickettsiosis.

Introduction. Capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) are considered amplifying hosts of Rickettsia sp. These rodents are usually parasitized by the tick vector, Amblyomma cajennense, the main vector of rickettsioses in humans and animals in South America. Capybaras can be used as sentinels in detection of circulation of rickettsiae. Objective. Antibodies to rickettsiae of spotted fever group were detected in capybaras in a rural area of Cordoba Province, northern Colombia. Materials and methods. Sera were analyzed from 36 capybaras in a rural area of Monteria (village of San Jeronimo) in Córdoba. For the detection of IgG antibodies, indirect immunofluorescence was performed. The antigens were derived from R. rickettsia strain Taiaçu isolated in Brazil. Capybara sera were diluted 1:64 for IFA analysis. Ticks were collected from each capybara (also known as chigüiro) and identified to species. Results. The seroprevalence of spotted fever group Rickettsia was 22% (8 capybaras). Four sera had a titer of 1:64, 3 had a titer of 1:128 and one serum had a titer of 1:512. All ticks removed from the capybaras (n=933) were taxonomically identified as Amblyomma cajennense. Conclusion. Colombia has areas endemic for rickettsioses, as indicated by confirmed annual outbreaks. The current study reports the first evidence of natural rickettsial infection of the spotted fever group in capybaras from Colombia. The findings suggest that capybaras can be used as sentinels for the circulation of rickettsiae and can identify endemic areas for the transmission of rickettsial diseases.

**Microscopic diagnosis of Pneumocystis jirovecii pneumonia in bronchoalveolar lavage and oropharyngeal wash samples of immunocompromised patients with pneumonia**

Introducción. El diagnóstico de neumonía por Pneumocystis jirovecii se fundamenta en la visualización microscópica del hongo en secreciones respiratorias. Técnicas moleculares recientes también lo han detectado en muestras de orofaringe, pero su utilidad diagnóstica es discutible. En Colombia, hay poca información al respecto. Objetivo. Comparar el rendimiento de dos coloraciones, azul de toluidina O e inmunofluorescencia directa, en muestras de lavado broncoalveolar y lavado orofaríngeo en pacientes inmunocomprometidos con neumonía. Materiales y métodos. Se llevó a cabo un estudio transversal de evaluación de pruebas diagnósticas en 166 pacientes inmunocomprometidos con sospecha de neumonía por P. jirovecii. Por protocolo, las muestras de lavado broncoalveolar y orofaríngeo se citocentrifugaron y se colorearon con azul de toluidina e inmunofluorescencia. Se determinó la proporción de resultados positivos con ambas tinciones en cada una de las muestras, y la concordancia entre ellas. Resultados. Se detectaron 24 casos de neumonía por P. jirovecii en las muestras de lavado broncoalveolar (14,5 %), 21 de los cuales fueron positivos por ambas pruebas, mientras que tres casos se detectaron sólo por inmunofluorescencia. Ninguna de las 166 muestras de lavado orofaríngeo fue positiva por cualquiera de estas técnicas. Al comparar las proporciones de resultados positivos, no se encontraron desacuerdos significativos (p=0,63). La concordancia (coeficiente kappa) entre ellas fue de 0,92 (IC95%: 0,84-1). Conclusiones. Ambas coloraciones son útiles para diagnosticar neumonía por P. jirovecii en muestras de lavado broncoalveolar. Sin embargo, el azul de toluidina no detecta, aproximadamente, el 12 % de los casos positivos por inmunofluorescencia. Las muestras de lavado orofaríngeo no son apropiadas para detectar microscópicamente P. jirovecii.

Introduction. The diagnosis of Pneumocystis jirovecii pneumonia is based on observation of the microorganism using several staining techniques in respiratory samples, especially bronchoalveolar lavage and induced sputum. Recently, the fungus also has been detected in oropharyngeal wash samples, but only using molecular tests. Objective. The diagnostic yield of two microscopic stains, toluidine blue O and direct fluorescent antibody, was compared in bronchoalveolar lavage and oropharyngeal wash samples for the detection of P. jirovecii in immunocompromised patients with pneumonia. Materials and methods. Cross-sectional evaluation diagnostic tests were used in 166 immunossupressed patients with suspected P. jirovecii. By protocol, bronchoscopic bronchoalveolar lavage and oropharyngeal wash samples were prepared by cytocentrifugation, and slides were stained with toluidine blue and fluorescent antibody. The proportion of positive results from each stain and concordance between them were determined. Results. Twenty-four cases (14.5%) of P. jirovecii were detected in bronchoalveolar lavage samples. Of them, 21 were positive by both toluidine blue and fluorescent antibody stains, whereas 3 cases were detected by fluorescent antibody alone. None of the 166 oropharyngeal wash samples were positive by either of these techniques. No significant differences were found between proportions from positive results (p=0.63). Concordance (kappa coefficient) between both stains was 0.92 (95% CI: 0.84-1.00). Conclusions. Both techniques were useful to diagnose P. jirovecii in bronchoalveolar lavage samples. However, toluidine blue stain did not detect 12% of fluorescent antibody positive cases. Oropharyngeal wash samples do not provide sufficient material for the microscopic identification of this fungus.

Inotropic activity induced by carbamazepine-alkyne derivative in an isolated heart model and perfused to constant flow

Introducción. Existen pocos datos con respecto a los efectos de la carbamacepina y sus derivados en el aparato cardiovascular; además, el mecanismo molecular y su sitio de acción celular no son claros. Objetivo. Evaluar los efectos inducidos por el derivado carbamacepina-alquino sobre la presión de perfusión, la resistencia vascular y la presión ventricular izquierda. Materiales y métodos. Los efectos de la carbamacepina y del derivado carbamacepina-alquino sobre la presión de perfusión, la resistencia vascular y la presión ventricular izquierda fueron evaluados en un modelo de corazón aislado de rata (Langendorff). Resultados. Se encontró que: 1) el derivado carbamacepina-alquino (1x10-9 mM) incrementa la presión de perfusión y la resistencia vascular en comparación con la carbamacepina (1x10-9 mM); 2) los efectos del derivado carbamacepina-alquino (1×10-9-1×10-4 M) sobre la presión intraventricular no fueron inhibidos por metoprolol o prazosina (1×10-6 mM); 3); el nifedipino (1×10-6 mM) bloquea los efectos ejercidos por el derivado carbamacepina-alquino (1×10-9-1×10-4 M) sobre la presión intraventricular, y 4) el efecto del derivado de carbamacepina (1×10-9 mM) incrementa la concentración de calcio intracelular a través del tiempo (3 a 18 minutos); sin embargo, en presencia de nifedipino (1×10-6 mM), este efecto disminuye significativamente (p=0,005). Conclusiones. La actividad ejercida por el derivado carbamacepina-alquino sobre la presión de perfusión, la resistencia vascular y la presión intraventricular, involucra la activación del canal de calcio de tipo L, lo que trae como consecuencia indirecta cambios en los niveles de calcio intracelular y, subsecuentemente, induce un efecto inotrópico positivo.

Inotropic activity induced by carbamazepine-alkyne derivative in an isolated heart model and perfused to constant flow Introduction. Few data exist with respect to the effects of carbamazepine and its derivatives at cardiovascular level; furthermore, the molecular mechanisms and cellular site of action are still unclear. Objective. The effects induced by carbamazepine-alquine derivative on perfusion pressure, vascular resistance and left ventricular pressure were evaluated. Materials and methods. The effects of carbamazepine and carbamazepine-alquine on the perfusion pressure, vascular resistance and left ventricular pressure were examined in isolated rat hearts (Langendorff model). Results. Four results were obtained: (1) The carbamazepine-alquine derivative 10-9 mM increased the perfusion pressure and vascular resistance in comparison with the carbamazepine 10-9 mM; (2) the effect of carbamazepine-alquine derivative 10-9-10-4 mM on left ventricular pressure not was inhibited by metoprolol or prazosin at a dose of 10-6 mM; (3) nifedipine 10-6 mM blocked the effects exerted by the carbamazepine-alquine derivative 10-9-10--4 mM on left ventricular pressure, and (4) the carbamazepine-alquine derivative at dose of 10-9 mM increased the concentration of intracellular calcium over a time period of 3-18 min; nevertheless, in presence of nifedipine 10-6 mM this effect was inhibited significantly (p=0.005). Conclusions. The activity exerted by carbamazepine-alquine derivative on perfusion pressure, vascular resistance and left ventricular pressure involved activation of calcium channel type-L, brought indirectly changes in the intracellular calcium levels and subsequently induced a positive inotropic effect.

Percentile values for physical condition for Cali, Colombian children and adolescents

Introducción. Muchos estudios han mostrado la relación entre la condición física durante la infancia y adolescencia y el riesgo cardiovascular en la edad adulta. Objetivos. Determinar los valores por edad y sexo de la condición física de niños y adolescentes de 10 a 16 años de Cali, Colombia. Materiales y métodos. Se llevó a cabo un estudio descriptivo en 1.773 niños y adolescentes de ambos sexos, 865 niños y 908 niñas, pertenecientes al estudio Identificación de factores de riesgo de enfermedades crónicas no transmisibles del adulto en la población escolarizada de 10 a 16 años en el Municipio de Cali, Colombia (IFRECNTEC), a quienes se les determinó la condición física con la prueba de capacidad física de trabajo a una frecuencia cardiaca de 170 por minuto (Physical Working Capacity, the workload at a heart rate of 170 bpm, PWC170), como marcador del volumen máximo de oxígeno (VO2máx). Se calcularon los valores percentiles (5, 25, 50, 75, 90 y 95) con el método de los mínimos cuadrados (Least Mean Squares, LMS) por curvas centiles que representan la asimetría, la mediana y la viariabilidad, utilizando el paquete estadístico Growth Analyzer®. Resultados. Se presentan los datos percentiles de la condición física en menores de 10 a 16 años, por primera vez en esta población. En los de sexo masculino, el percentil 50 medido con la prueba de PWC170 (VO2máx) se situó entre 49 y 43 ml/kg por minuto, y en las de sexo femenino, entre 52 y 40 ml/kg por minuto. Por otro lado, hay una tendencia a la disminución (~10 %) en el percentil 50, en en adolescentes de ambos sexos de 16 años de edad por VO2máx estimado. En general, en el sexo masculino hay más heterogeneidad que en el femenino, en términos de condición física mediante el VO2máx. Conclusión. Los resultados obtenidos en el presente estudio permiten evaluar e interpretar correctamente la condición física de niños y adolescentes de 10 a 16 años. También, indican que la condición física de este grupo de edad en Colombia, se debe mejorar para ayudar a protegerlos contra las enfermedades cardiovasculares en la edad adulta.

Introduction. Baseline data for physical condition are not available for adolescents in Cali, Colombia. Objective. This study aimed to develop representative age- and sex- specific percentile baseline data for physical condition (mLkg-1min-¹) for urban adolescents aged 10-16 years. Materials and methods. The sample (n=1,773) consisted of 865 males and 908 females from the cross-sectional population survey, the IFRECNTEC Study (Identification of Risk Factors of Non-Transmissible Adult Chronic Diseases in School-age Populations in the City of de Cali), for whom the data for physical condition were recorded. Smoothed age- and sex- specific 5th, 25th, 50th, 75th, 90th and 95th centile values where derived using least mean squares regression analysis. Results. Percentile-based reference data for physical condition were presented for adolescent Colombian boys and girls for the first time. In males, the p50 of the PWC-170 (VO2max) ranged 49-43, and in females 52-40. A decreasing trend (~10%) in the p50 was seen in both sexes over 16 years of age. In general, more heterogeneity was present among males than females in terms of physical aptitude through VO2max test. Conclusion. The results established a baseline level of physical condition in adolescents that can be interpreted as an indicator of future cardiovascular health. They also recommend that the physical condition of Colombian adolescents must be improved to protect against cardiovascular disease in adulthood.

Perfil de utilización de los anti-factor de necrosis tumoral en pacientes de Colombia

Introducción. Los inhibidores del factor de necrosis tumoral alfa han presentado un consumo creciente y generan una importante carga económica para los sistemas de salud. Objetivo. Determinar los patrones de prescripción de inhibidores del factor de necrosis tumoral en una población de personas afiliadas al Sistema General de Seguridad Social en Salud de Colombia. Materiales y métodos. Se trata de un estudio descriptivo observacional, de 316 pacientes que recibieron inhibidores del factor de necrosis tumoral, entre enero de 2008 y junio de 2009. Se consideraron las indicaciones, criterios de inclusión, tiempo de evolución de enfermedad, enfermedades concomitantes y reacciones adversas. Se utilizaron las pruebas t de Student y de ji al cuadrado, para la comparación de variables cuantitativas y categóricas respectivamente; se hizo un análisis multivariado. Resultados. La edad promedio fue de 44,6±13,9 años; 63,9 % de los participantes fueron mujeres. El 17,1 % de los pacientes recibía monoterapia. El orden de prescripción de los medicamentos fue: adalimumab (37,3 %), infliximab (37,3 %) y etanercept (25,4 %), todos a dosis diarias definidas adecuadas. La medicación concomitante más frecuente fue: antirreumáticos modificadores de enfermedad (82,9 %), AINE (29,1 %), omeprazol (22,5 %), antihipertensivos (21,2 %) y ácido fólico (19,9 %). El 10,4 % de los pacientes tenía registro de alguna reacción adversa a los medicamentos. El costo promedio del tratamiento por paciente y año, fue de $23.464 dólares. Conclusiones. Los anti-TNF se emplearon a las dosis recomendadas, principalmente en artritis reumatoide y en combinación con otros antirreumáticos. El costo directo del tratamiento se consideró elevado para el sistema sanitario del país.

Introduction. Tumor necrosis factor-alpha antagonists (anti-TNFα) have shown an increasing consumption and generate a significant economic burden on health systems. Objectives. The prescribing patterns of tumor necrosis factor-alpha antagonists were determined in a patient population associated with the Sistema General de Seguridad Social en Salud in Colombia. Materials and methods. A descriptive observational study was conducted in 316 patients with respect to use of tumor necrosis factor-alpha antagonists during a treatment period from January 2008 to June 2009. The database examined contained indications of use, inclusion criteria to medication, duration of illness, co-morbidities and adverse reactions. The data were retrieved from the clinical histories. Student´s t test was used for the comparison of quantitative variables, and the chi-square test was used to establish associations between categorical variables and multivariate analysis were used. Results. Mean age was 44.613.9 years; 63.9% of participants were female. Of the 316 patients, 17.1% received monotherapy. The order of prescription drugs was as follows: adalimumab (37.3%), infliximab (37.3%) and etanercept (25.4%), all were prescribed in appropriately defined daily doses. Co-medication drugs most frequently prescribed were: disease-modifying anti-rheumatic (82.9%), NSAIDs (29.1%), omeprazole (22.5%), antihypertensives (21.2%), folic acid (19.9%) calcium plus vitamin D (9.8%), calcitriol (6.0%). 10.4% of patients had a record of some adverse drug reaction. The average cost of therapy per patient per year was US$23,464. Conclusions. Anti-TNFα are being used at recommended doses, particularly in rheumatoid arthritis and in combination with other anti-rheumatic drugs. The direct cost of therapy was high for the country's health system.

**Utility of nitrate reductase assay for detection of multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis in a low resource setting**

Introduction. The performance of a drug susceptibility test may change when moving from the research stage to implementation on a population level in actual public health practice. Objective. The performance of a rapid drug susceptibility test was described for detecting multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis when implemented in the routine workflow of a low-resource reference laboratory. Materials and methods. A prospective study was done comparing the performance of the nitrate reductase assay with the conventional proportion method for rifampicin and isoniazid on 364 isolates were obtained from multidrug-resistant tuberculosis risk patients referred from diffrent Colombian laboratories. Results. When compared with the proportion method, the nitrate reductase assay sensitivity was 86.8% and 84.9% for rifampicin and isoniazid, respectively, whereas nitrate reductase assay specificity was 100% for isoniazid and rifampicin. Nitrate reductase assay sensitivity was significantly higher when the age of isolate was less than 70 days. A sensitivity of 94.4% dropped to 78.1% for rifampicin resistance for fresh and old isolates, respectively (Fisher exact test, p=0.05). For isoniazid resistance using fresh and old isolates, 94.7% vs.74.3% sensitivities, were achieved (chi square test, p=0.03). The proportion of nitrate reductase assay ambiguous results was significantly higher in multidrug-resistant than in non-multidrug-resistant isolates (17.6% vs. 4.0%, chi square test, p<0.005). Conclusions. The nitrate reductase assay demonstrated provided reliable results for antibiotic resistance. However, using old cultures leds to a higher proportion of false sensitive results; furthermore, the nitrate reductase assay capability to detect multidrug-resistant tuberculosis decreased due to a higher proportion of non-interpretable results.

Introducción. El rendimiento de cualquier prueba rápida de sensibilidad a medicamentos para Mycobacterium tuberculosis puede cambiar cuando se pasa de la etapa de investigación a su implementación en la práctica de salud pública. Objetivo. Describir el rendimiento del ensayo de nitrato reductasa para detectar tuberculosis multirresistente en la rutina de trabajo de un laboratorio de referencia con recursos limitados. Materiales y métodos. Se comparó prospectivamente la utilidad del ensayo de nitrato reductasa con el método de las proporciones para la detección de resistencia a isoniacida y rifampicina en aislamientos de pacientes con riesgo de multirresistencia. Resultados. Comparando con el método de las proporciones, la sensibilidad del ensayo de nitrato reductasa fue de 86,8 % y 84,9 % para rifampicina e isoniacida, respectivamente; la especificidad fue 100 % para rifampicina e isoniacida. La sensibilidad del ensayo de nitrato reductasa fue significativamente mayor cuando se emplearon aislamientos en los cuales el tiempo entre la realización del cultivo y la inoculación del ensayo de nitrato reductasa no superaba 70 días: 94,3 % Vs. 78,1 % para resistencia a rifampicina usando aislamientos frescos o envejecidos, respectivamente; prueba exacta de Fisher, p=0,05; 94,4 % Vs. 74,3 % para resistencia a isoniacida usando aislamientos frescos o envejecidos, respectivamente, y prueba de ji al cuadrado, p=0,03. La proporción de resultados no interpretables en el ensayo de nitrato reductasa fue mayor en los aislamientos multirresistentes que en los otros Conclusiones. La experiencia con el ensayo de nitrato reductasa demuestra que produce resultados resistentes confiables. El uso de cultivos envejecidos conduciría a una mayor proporción de resultados falsos sensibles, mientras que su capacidad para detectar multirresistencia disminuye a consecuencia de una mayor proporción de resultados no interpretables.

New trap for the capture of triatomines in wild and peridomestic habitats

Introducción. Los triatominos silvestres han incrementado su importancia en la transmisión de la enfermedad de Chagas por su frecuente intrusión en la vivienda, los pocos conocimientos sobre su biología y la escasez de herramientas para su recolección y estudio, motivaron el diseño de una nueva trampa para obtener insectos vivos. Objetivo. Describir las características, forma de utilización y resultados preliminares de uso, de una nueva trampa con cebo vivo, diseñada para recolectar triatominos en sus hábitats naturales en diferentes regiones de Colombia. Materiales y métodos. Se describen las características físicas de una trampa que aloja un animal vivo como cebo y un refugio para los triatominos que se acercan atraídos por el cebo. Resultados. Se demostró una gran eficacia para la recolección de Rhodnius prolixus, Triatoma dimidiata y Rhodnius pallescens en sus hábitats silvestres en las regiones estudiadas. Se encontró un mayor rango de densidad en palmas en las dos regiones y un mayor promedio de triatominos por hábitat positivo en el peridomicilio en la región andina. Conclusiones. La nueva trampa para triatominos demostró ser útil en la recolección de triatominos silvestres vivos en las regiones de estudio; utiliza un cebo vivo que se obtiene en las mismas zonas; es fácil de transportar y colocar; evita la intervención de los hábitats, y muestra una mayor eficacia que la encontrada con otras trampas que utilizan cebo vivo.

Introduction. Wild triatomines have become increasingly important in the transmission of Chagas disease because of their frequent house entry behavior. Knowledge of their biology is limited, and few tools are available for their collection. These needs led to the design of a new trap for live triatomines. Objectives. The characteristics are described of a new bait trap designed for collecting triatomines. Trap usage and preliminary results are described for collections in several regional natural habitats in Colombia. Materials and methods. The trap houses a live animal as bait and provides a shelter for triatomines that are attracted by the bait. Results. The trap was very effective for collecting Rhodnius prolixus, Triatoma dimidiata and Rhodnius pallescens in the natural habitats of each species. Triatomine density ranged widely in palm environments in each of two regions, and a relatively higher density in areas surrounding dwellings in the Andean region. Conclusions. The new trap for collecting triatomines proved successful in collecting live wild triatomines, using live bait native to the study areas. It is easy to transport and place, it is functions well in a variety of habitats, and it is more effective than other traps using live bait.

Mechanisms of human natural resistance to HIV: A summary of ten years of research in the Colombian population

The natural history of human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) infection is a complex and variable process that, similarly to other infections, has clearly demonstrated the existence of mechanisms of human natural resistance. The resistance either inhibits the establishment of infection or delays disease progression. When there is continuous exposure to infectious viral particles, several genetic and immunological mechanisms are essential to lead to resistance to HIV-1 infection/progression. The objective of this manuscript was to review the different mechanisms so far proposed to be responsible for HIV-1 resistance and to present the main results derived from 10 years of research in this area among Colombian subjects. In particular, this review focuses on determining the mechanisms involved in the protection of a group of individuals repeatedly exposed to the virus but who remained exempt of serological and clinical evidence of HIV-1 infection. Although the studies carried out in our research group corroborated the protective role of some of the previously proposed mechanisms of protection, ongoing research worldwide has made it clear that the phenomenon of human natural resistance depends on multiple factors with an important genetic influence, and only multicenter studies involving individuals with different genetic backgrounds may determine more universal mechanisms of resistance. Increasing our knowledge in this field will contribute to the development of novel preventive and therapeutic measures.

La historia natural de la infección por el virus de la inmunodeficiencia humana de tipo 1 (VIH-1) es un proceso variable y complejo que, en forma similar a otras infecciones, ha hecho evidente la existencia de mecanismos de resistencia natural que pueden inhibir el establecimiento de la infección o su progresión hacia estadios avanzados. Cuando hay una exposición continua a partículas virales infecciosas, varios mecanismos genéticos e inmunitarios son esenciales para que se establezca la resistencia. El objetivo de este manuscrito fue revisar todos los mecanismos de resistencia al VIH-1, hasta el momento propuestos en seres humanos, y presentar los resultados más importantes que se han obtenido en diferentes estudios realizados en los últimos 10 años de investigación en esta área, en individuos colombianos, particularmente enfocados en determinar los mecanismos involucrados en la protección de un grupo de personas que se han expuesto repetidamente al virus, pero que han permanecido sin evidencia clínica ni serológica de infección por el VIH-1. Aunque los estudios llevados a cabo por nuestro grupo de investigación han corroborado el papel protector de algunos de los mecanismos de protección previamente propuestos, la investigación actual en esta área, a nivel mundial, ha hecho evidente que el fenómeno de resistencia natural depende de múltiples factores con una gran influencia genética, y que sólo mediante estudios multicéntricos que involucren individuos con diferente componente genético, podrán establecerse los mecanismos universales de protección. Profundizar en el conocimiento en esta área permitirá el desarrollo de nuevas medidas preventivas y terapéuticas para la infección por el VIH-1.

ILT3+/ILT4+ tolerogenic dendritic cells and their influence on allograft survival

Las células dendríticas son las células presentadores de antígeno más potentes y, por lo tanto, son importantes en el desencadenamiento de la respuesta inmunitaria frente a aloantígenos; sin embargo, también juegan un papel fundamental en el mantenimiento de la tolerancia periférica. La tolerancia es potenciada por la expresión en estas células de los receptores inhibidores ILT3 e ILT4, los cuales, mediante el reclutamiento de fosfatasas de tirosinas a sus dominios ITIM, inhiben la activación de la célula presentadora de antígeno y conducen a una débil respuesta de la célula T. Estos receptores propician, además, una interacción bidireccional con células T supresoras, T reguladoras o ambas, generando una cascada inmunorreguladora específica de antígeno, en la cual la célula dendrítica se comporta como una célula tolerogénica En esta revisión analizamos la biología y el comportamiento de las células dendríticas tolerogénicas que expresan altos niveles de ILT3 e ILT4, así como algunos aspectos moleculares y genéticos de estos receptores y su importancia en la modulación de las respuestas inmunitarias específicas de aloantígeno frente a un trasplante.

Dendritic cells, the most powerful antigen-presenting cells, are important for triggering of the immune responses to allo-antigens. However, they also play a fundamental role in the peripheral tolerance maintenance. Tolerance is enhanced by the presence on the dendritic cell surface of the inhibitor receptors ILT3 and ILT4. They recruit protein tyrosine-phosphatases to their ITIM domains and inhibit antigen-presenting cell activation, leading T cell hypo-responsivensess. Moreover, these receptors favor a bidirectional interaction with T-suppressor and T-regulator cells, generating an antigen-specific immunoregulator cascade, in which the dendritic cell behaves as a tolerogenic cell. In the current review, analysis is centered on the biology and behavior of the tolerogenic dendritic cells that express high levels of ILT3 and ILT4. Some molecular and genetics aspects of these receptors are discussed as well as their importance in the modulation of the allo-specific antigen immune response to transplants