Biomédica

The drama of neglected tropical diseases

Cutaneous leishmaniasis and pregnancy

Resumen Se estudió a una mujer de 19 años, con embarazo de cuatro meses, que presentaba cuatro úlceras cutáneas de tres meses de evolución, diagnosticadas por biopsia como leishmaniasis cutánea. El frotis directo y la leishmanina fueron negativos. Dado que todos los medicamentos usuales para la leishmaniasis cutánea están contraindicados en el embarazo, la paciente no recibió tratamiento, aunque curó espontáneamente durante el embarazo. Se cree que la leishmaniasis cutánea no tiene peligro para la mujer embarazada y que no hay transmisión de la madre al feto en el humano, aunque se ha detectado en animales en condiciones experimentales. La paciente tuvo un parto sin complicaciones y la condición de salud tanto de ella como de su hijo era normal a los dos años de seguimiento.

Abstract We studied a 19-year-old woman, with a 4-month pregnancy who presented with four cutaneous leg ulcers of three months of evolution diagnosed by biopsy as cutaneous leishmaniasis. Direct smear and the leishmanin skin test were negative. Since all the usual medications for cutaneous leishmaniasis are contraindicated in pregnancy, she did not receive any treatment but cured spontaneously of her lesions during pregnancy. It is believed that cutaneous leishmaniasis does not carry danger for pregnant women and that there is no maternal-fetal transmission in humans, though it occurs in experimental animals. The patient gave birth without complications and both she and her son remained normal after two years of follow-up.

First report of Dioctophyma renale (Nematoda, Dioctophymatidae) in Colombia

ABSTRACT Dioctophymosis is a zoonotic parasitic disease caused by Dioctophyma renale (Goeze, 1782). It is distributed worldwide and it affects a large number of wild and domestic mammals. Here we report the first confirmed case of canine dioctophymosis in Colombia. The animal was found dead in the streets of the municipality of Yondó, Antioquia, and its dead body was taken to the Instituto Universitario de la Paz (UNIPAZ) to carry out a necropsy. A parasite worm was found in the right kidney and sent for identification to the Laboratorio de Parasitología of the Universidad de Santander (UDES). The specimen was identified as a male of D. renale upon observing the typical oval and transversely elongated bell-shaped bursa copulatrix with a spicule and no rays. Another important factor to confirm the diagnosis was the anatomical location in the kidney. This is the first time D. renale is reported in a stray dog in Colombia.

RESUMEN La dioctofimosis es una enfermedad parasitaria zoonótica causada por Dioctophyma renale (Goeze, 1782), de amplia distribución mundial, que afecta a un gran número de mamíferos silvestres y domésticos. Se reporta el primer caso de dioctofimosis canina en Colombia. El animal fue encontrado muerto en las calles del municipio de Yondó, Antioquia. Su cadáver fue llevado al Instituto Universitario de la Paz (UNIPAZ) donde se practicó la necropsia. En el riñón derecho se encontró un parásito, el cual fue enviado al Laboratorio de Parasitología de la Universidad de Santander para su identificación. El espécimen se identificó como un macho de D. renale por la típica bursa copulatriz oval y alargada transversalmente en forma de campana, sin rayos y con una espícula. Otro factor importante para confirmar el diagnóstico fue la ubicación anatómica en el riñón. Se reporta por primera vez la presencia de D. renale en un perro mestizo callejero en Colombia.

Severe disseminated acute toxoplasmosis in an adult immunocompetent patient from the Colombian Pacific

Resumen Se presenta el caso de una paciente inmunocompetente de 72 años de edad, proveniente del departamento del Chocó, con un cuadro clínico de 12 días de fiebre, cefalea, deterioro neurológico progresivo y rápida evolución a falla orgánica múltiple y muerte. En el estudio histopatológico de los tejidos obtenidos en la necropsia, se identificaron quistes tisulares morfológicamente sugestivos de ser bradizoítos de Toxoplasma gondii, lo que se confirmó mediante inmunohistoquímica en corazón, cerebro y músculo estriado.

Abstract We present the case of a 72-year-old immunocompetent patient from Chocó, Colombia, with a 12-day course of fever, headache, progressive neurological deterioration, and rapid evolution to multiorgan failure and death. In the histopathological study of tissues obtained at necropsy, tissue cysts morphologically suggestive of being bradyzoites of Toxoplasma gondii were identified and confirmed by immunohistochemistry in heart, brain, and striated muscle.

In vitro culture of L3 larvae of nematodes obtained from the African giant snail Lissachatina fulica (Mollusca: Gastropoda) in Santa Fe de Antioquia

Resumen Introducción. Más de 170 municipios colombianos están invadidos por Lissachatina fulica, caracol africano que puede portar larvas de nematodos de interés en salud humana y veterinaria. Los parásitos entran al caracol huésped intermediario en el estadio de larva L1, y allí cambian a L2 y L3, formas estas capaces de infectar a vertebrados. Objetivo. Estandarizar el cultivo in vitro de las L3 portadas por especímenes de L. fulica recolectados en Santa Fe de Antioquia. Materiales y métodos. Entre julio y noviembre de 2014 se recolectaron 10 caracoles, se sacrificaron y se digirieron con ácido clorhídrico al 0,7 %. Las larvas se recuperaron mediante la técnica de Baermann; se cultivaron 36 días en los medios Schneider, mínimo esencial de Eagle modificado por Dulbecco (Dulbecco’s Modified Eagles Minimal Essential Medium, DMEM), y Roswell Park Memorial Institute (RPMI), con suero fetal bovino (SFB) al 20 % y sin este, y agua destilada con SFB al 20 %. Los medios de cultivo se cambiaron cada 36 horas. Las larvas se midieron con el microscopio utilizando reglilla ocular, y se evaluaron la supervivencia, la longitud y el ancho. Se calcularon datos estadísticos de resumen y se hicieron gráficos de cajas y bigotes, así como la prueba t de Student. El nivel de significación (p) se estableció como menor de 0,05. Resultados. El 50 % de las larvas sobrevivió, 85 % en DMEM con SFB al 20 %, el 70 % con RPMI más SFB al 20 %, el 60 % en RPMI, el 50 % en Schneider más SFB al 20 %, el 45 % en Schneider y el 40 % en DMEM. El control sobrevivió diez días. Hubo diferencias significativas entre la longitud inicial promedio de las larvas y la longitud final promedio en los medios con suplementos: inicial, 645,83 μm; final en DMEM más SFB al 20 %, 732,65 μm (p<0,001); en RPMI más SFB al 20 %, 718,79 μm (p<0,001), y en Schneider más SFB al 20 %, 696,12 μm (p<0,01). No hubo diferencias significativas entre la anchura inicial promedio, de 24,99 μm, y la final. Conclusiones. El mejor medio para cultivar las L3 de L. fulica fue el DMEM más SFB al 20 %. En la evaluación del crecimiento larval, la longitud fue más informativa que la anchura. Las larvas estudiadas no correspondieron a Angiostrongylus cantonensis, A. costaricensis ni Aelurostrongylus abstrusus.

Abstract Introduction: Over 170 municipalities in Colombia have been invaded by Lissachatina fulica, an African snail that can carry larvae of nematodes of interest in human and veterinary health. Nematodes enter the host snail as larvae L1 and then change to L2 and L3, the infectious form for vertebrates. Objective: To standardize culture in vitro of L3 carried by L. fulica from Santa Fe de Antioquia. Materials and methods: Between July and November, 2014, 10 snails were collected, killed, and conserved with HCl 0.7%. Larvae were recovered using the Baermann technique and cultured for 36 days in Schneider, DMEM and RPMI media, with and without SFB 20% and distilled water with SFB 20%. Replacements were made every 36 hours; larvae were measured with an ocular micrometer on a microscope. Summary statistics were estimated; box and whisker plots were made; the t Student test was performed in SPSS 18™. A p-value below 0.05 was assumed as significant. Results: Fifty per cent of the larvae survived. The highest survival and growth was 85% in supplemented DMEM. The final average length of larvae in supplemented media exceeded the initial one. There were significant differences between the average length of larvae cultured in supplemented media and the initial length. The initial width of larvae did not change. Conclusions: The best medium for the culture of L3 larvae was supplemented DMEM. The length provided more information than the width for the larval growth evaluation. The larvae studied did not correspond to Angiostrongylus cantonensis, A. costaricensis or Aelurostrongylus abstrusus.

Molecular detection of Salmonella spp., Listeria spp. and Brucella spp. in fresh artisanal cheese marketed in the city of Barranquilla: A pilot study

Resumen Introducción. Cada año mueren, aproximadamente, tres millones de personas como consecuencia de las enfermedades transmitidas por alimentos. El queso artesanal fresco que se produce y distribuye en la región Caribe colombiana es un producto autóctono de los departamentos de Córdoba, Sucre, Bolívar, Atlántico, Magdalena, Cesar y La Guajira. Su consumo masivo aumenta el riesgo de infección con salmonelosis, listeriosis y brucelosis debido a que es elaborado con una tecnología muy rústica, con leche de vaca no pasteurizada, sin procedimientos estandarizados e higiénicos, y a que su almacenamiento no es adecuado. Objetivo. Detectar la presencia de Salmonella spp., Listeria spp. y Brucella spp. en muestras de queso artesanal costeño fresco procedente de los departamentos de la región Caribe colombiana. Materiales y métodos. Mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR), se analizaron 27 muestras de queso proveniente de cinco departamentos de la región Caribe: Atlántico (n=6), Bolívar (n=2), Córdoba (n=1), Magdalena (n=16) y Sucre (n=2). Del total de las muestras, 17 eran de queso blando, cinco de queso semiduro y cinco de queso duro. Resultados. En el 62,9 % de las muestras se detectó Salmonella spp. (17/27), en el 70,4 %, Listeria spp. (19/27), y en el 22,2 %, Brucella spp. (6/27). Las muestras provenían principalmente del departamento del Magdalena y, en 62,5 % (10/16) de ellas, se encontró Salmonella spp. y Listeria spp., en tanto que en el 50 % (3/6) de las muestras del departamento del Atlántico se detectó Brucella spp. Conclusión. Los resultados evidenciaron la presencia de estos microorganismos en todas las muestras de queso costeño blando.

Abstract Introduction: Each year approximately 3 million people die as the result of foodborne diseases. The fresh artisan (handmade) cheese produced and distributed in the Colombian Caribbean region is a native product from the departments of Córdoba, Sucre, Bolívar, Atlántico, Magdalena, Cesar, and La Guajira. Its mass consumption increases the risk of infection with Salmonella spp., Listeria spp., and Brucella spp., as it is made with a very rustic technology, with unpasteurized cow milk, without standardized and hygienic procedures and its storage is inadequate. Objective: To detect the presence of Salmonella spp., Listeria spp., and Brucella spp. in samples of fresh artisan cheese from the Colombian Caribbean region. Materials and methods: Twenty-seven samples of cheese from five departments of the Caribbean Region (Atlántico (n=6), Bolívar (n=2), Córdoba (n=1), Magdalena (n=16), and Sucre (n=2)) were analyzed by real-time polymerase chain reaction (qPCR). Seventeen of the samples corresponded to soft cheese, five to semi-hard cheese and five to hard cheese. Results: In 62.9% (17/27) of the samples we detected Salmonella spp., in 70.4% (19/27), Listeria spp., and in 22.2% (6/27), Brucella spp., mainly from the department of Magdalena. In 62.5% (10/16) of the samples we detected Salmonella spp. and Listeria spp. while in the department of Atlántico, 50% (3/6) of the samples corresponded to Brucella spp. Conclusion: The results confirmed the presence of these microorganisms in all the samples of soft cheese from the Colombian Caribbean region.

Genetic variability in coding regions of the surface antigen and reverse transcriptase domain of hepatitis B virus polymerase, Colombia, 2002-2014

Resumen Introducción. Se estima que 240 millones de personas en el mundo tienen infección crónica con el virus de la hepatitis B (HBV). En Colombia, la endemia es variable y circulan diferentes genotipos virales. Las mutaciones a lo largo del genoma se han asociado con resistencia antiviral, el escape ante la reacción de anticuerpos neutralizadores tras la vacunación o a la infección natural, la infección oculta y la progresión a carcinoma hepatocelular. Objetivo. Identificar los genotipos y las mutaciones presentes en la región codificante del antígeno de superficie (S) y del dominio de la transcriptasa inversa (reverse transcriptase, RT) de la polimerasa del HBV en muestras de suero remitidas al Instituto Nacional de Salud de Colombia para el diagnóstico de hepatitis B, entre el 2002 y el 2014. Materiales y métodos. En 495 muestras de suero positivas para el antígeno de superficie de la hepatitis B (HBsAg) se buscó el ADN viral, se amplificó y secuenció un fragmento de 1.591 nucleótidos y, posteriormente, se hizo el análisis filogenético correspondiente. Resultados. En 66 de las muestras se logró detectar el genoma viral y 28 de ellas se secuenciaron exitosamente. El análisis filogenético permitió identificar los genotipos y subgenotipos F3 y A2. Una muestra presentó simultáneamente las sustituciones de resistencia L180M y M204V, otra presentó la sustitución I169L y en una se identificó la mutación P120Q, previamente asociada con variantes de escape. Dos muestras presentaron una deleción de 105 nucleótidos en la región preS1-preS2. Conclusiones. Se corroboró la circulación en Colombia de los genotipos y subgenotipos F3 y A2, así como la presencia de mutaciones de resistencia y escape. El presente estudio constituye un aporte a la epidemiologia molecular del HBV en Colombia.

Abstract Introduction: Despite the availability of an effective vaccine and treatment to reduce the viral load and progressive hepatocellular injury, approximately 240 million people worldwide are chronically infected with the hepatitis B virus (HBV). In Colombia, the circulation of different viral genotypes has been confirmed. Mutations in the genome have been associated to antiviral therapy resistance, viral escape to neutralizing antibodies, occult infection and progression to hepatocellular carcinoma. Objective: To identify the genotypes and the presence of mutations in the coding region of the surface (S) antigen and the reverse transcriptase (RT) domain of the polymerase of HBV obtained from serum samples for hepatitis B diagnosis received by the Instituto Nacional de Salud during the period 2002-2014. Materials and methods: A total of 495 serum samples with previous HBsAg reactive result were used for molecular detection. A fragment of 1,591 nucleotides was sequenced, and the corresponding phylogenetic analysis was performed. Results: We detected the viral genome of HBV in 66 samples and 28 were successfully sequenced. The phylogenetic analysis allowed the identification of subgenotypes F3 and A2. The L180M and M204V resistance mutations were simultaneously identified in one sample, while the I169L resistance mutation was identified in another one. A single escape mutation, P120Q, was identified in one more. Two samples showed a deletion of 105 nucleotides in the preS1-preS2 region. Conclusions: The circulation of genotypes/subgenotypes F3 and A2 of HBV in Colombia was corroborated, as well as the presence of some resistance and escape mutations. The present study constitutes a contribution to the molecular epidemiology of HBV in Colombia.

Molecular detection of pathogenic Leptospira in synanthropic and wild rodents captured in Yucatán, México

Resumen Introducción. La leptospirosis es una enfermedad zoonótica endémica en México, ocasionada por la bacteria del género Leptospira, la cual constituye un problema de salud pública y veterinaria. Los roedores son los reservorios más relevantes de Leptospira spp., debido a que la bacteria se establece y se reproduce en su tejido renal y es excretada por la orina. Objetivo. Identificar la presencia de Leptospira spp. en tejido renal de roedores capturados en Yucatán, México. Materiales y métodos. Se capturaron roedores sinantrópicos y silvestres en el municipio rural de Cenotillo, Yucatán, México. Se tomó un riñón de cada roedor y se extrajo el ADN total. La identificación de Leptospira spp. se hizo mediante la detección de dos fragmentos del gen 16S rRNA con una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) de punto final. Los productos positivos se secuenciaron y se analizaron con herramientas de alineamiento. Resultados. Se capturaron 92 roedores pertenecientes a siete especies distintas. La PCR arrojó 5,4 % (5/92) de positividad global. El análisis del alineamiento de los aislamientos de los roedores infectados demostró 100 % de cobertura e identidad con la especie Leptospira interrogans. Esta es la primera evidencia molecular de la circulación de Leptospira spp. en Heteromys gaumeri capturados en Yucatán, México. Conclusión. Se evidenció que los roedores de Yucatán, México, son reservorios de Leptospira spp. y participan en el ciclo de infección de la leptospirosis en la región.

Abstract Introduction: Leptospirosis is a zoonotic disease caused by bacteria of the genus Leptospira, which is endemic in México and considered a public and veterinary health problem. Rodents are the most relevant reservoirs of Leptospira spp. because the bacteria establish and reproduce in its renal tissue and are excreted through the urine. Objective: To identify the presence of Leptospira spp. in renal tissue from rodents captured in Yucatán, México. Materials and methods: Synanthropic and wild rodents were captured in the rural municipality of Cenotillo, Yucatán, México. We collected one kidney from each rodent and extracted the total DNA. The identification of Leptospira spp. was done by detecting two fragments of the 16S rRNA gene using end-point polymerase chain reaction (PCR). We sequenced and analyzed positive products using alignment tools. Results: A total of 92 rodents belonging to seven different species were captured. The PCR yielded a global positivity of 5.4% (5/92). The alignment analysis of the sequenced products demonstrated a 100% of coverage and identity with Leptospira interrogans. This is the first molecular evidence of Leptospira spp. circulation in Heteromys gaumeri captured in Yucatán, México. Conclusion: Our results evidenced that rodents of Yucatán are reservoirs of Leptospira spp. and participate in the infection cycle of leptospirosis in the region.

Current characteristics of tuberculosis and human immunodeficiency virus co-infection in a cohort of hospitalized patients in Medellín, Colombia

Abstract Introduction: Tuberculosis (TB) is an important cause of morbidity and mortality in HIV patients. It is unknown if the advent of molecular diagnostic methods and a greater availability of antiretroviral therapy (ART) in our country have changed some characteristics of the TB/HIV co-infection. Objective: To describe the epidemiology, clinical features, diagnosis, resistance patterns, tuberculosis drug effects and mortality in co-infected patients. Materials and methods: Retrospective study based on the review of medical records of hospitalized co-infected adults in a university hospital in Medellín, Colombia. Results: A total of 178 patients was included in the study. TB and HIV diagnosis was simultaneous in 49.4%. In the moment of TB diagnosis, the median CD4 count was 61 cells/μL (27-145). Pulmonary tuberculosis (PTB) occurred in 28% of patients, extrapulmonary (EPTB) in 23%, and mixed TB in 48.9%. The main EPTB affectations were lymphatic (55.4%), gastrointestinal (35.9%), and of the central nervous system (18.7%). Ziehl-Neelsen stain was positive in 137 patients (77%), mycobacterium culture in 121 (68%), and TB-PCR, in 85 of those patients in whom the test was done. Rifampicin resistance was detected in six cases (4.9%). Transaminases (ALT) increased in half of the patients during TB treatment, but only 10% met liver-toxicity criteria. In-hospital mortality was 11.3%. The single risk factor associated with mortality was CD4 count <50/μL (RR=3.9; 95% CI: 1.36-11.37; p=0.01). Conclusions: When it occurs as an opportunistic infection, TB usually leads to the diagnosis of advanced HIV disease. If used appropriately, TB diagnosis in these patients can be done by conventional methods. It is always necessary to monitor liver function during TB treatment and to rule out drug resistance.

Resumen Introducción. La tuberculosis es una causa importante de morbilidad y mortalidad en pacientes positivos para el HIV. Los métodos de diagnóstico molecular y una mayor disponibilidad del tratamiento antirretroviral en el país pueden haber cambiado las características de la infección concomitante. Objetivo. Describir la epidemiología, las características clínicas, el diagnóstico, los patrones de resistencia, los efectos secundarios de los medicamentos antituberculosos y la mortalidad, en pacientes con las dos infecciones. Materiales y métodos. Se hizo un estudio retrospectivo basado en la revisión de historias clínicas de adultos hospitalizados en un hospital universitario de Medellín, Colombia. Resultados. Se incluyeron 178 pacientes en el estudio. El diagnóstico de tuberculosis e infección por el HIV fue simultáneo en 49,9 %. En el momento del diagnóstico, la mediana de CD4 fue de 61 células/μL (rango de 27 a 145). La tuberculosis pulmonar ocurrió en 28 % de los pacientes, la extrapulmonar en 23% y la mixta en 48,9%. En la tuberculosis extrapulmonar, el compromiso fue principalmente linfático (55,4 %), gastrointestinal (35,9%) y del sistema nervioso central (18,7 %). La tinción de Ziehl-Neelsen fue positiva en 137 pacientes (77 %), en tanto que el cultivo para micobacterias lo fue en 121 (68 %). La reacción en cadena de la polimerasa para detectar la tuberculosis fue positiva en 85 de los pacientes a quienes se les hizo la prueba. Se detectó resistencia a la rifampicina en seis casos (4,9 %). Al iniciar el tratamiento antituberculoso, las transaminasas se elevaron en la mitad de los pacientes, pero solo 10 % cumplieron los criterios de hepatotoxicidad. La mortalidad hospitalaria fue de 11,3 %. El único factor de riesgo asociado con la mortalidad fue un conteo de CD4 menor de 50/μL (RR=3,9; IC95% 1,36-11,37; p=0,01). Conclusiones. Cuando la tuberculosis se presenta de manera oportunista, comúnmente lleva al diagnóstico de enfermedad avanzada por el HIV. Su diagnóstico en estos pacientes puede hacerse con los métodos convencionales. Es necesario vigilar la función hepática durante el tratamiento y excluir la resistencia a los medicamentos.

Tuberculosis and human immunodeficiency virus coinfection: Epidemiological situation in the department of Meta, 2010- 2015

Resumen Introducción. Una tercera parte del incremento de los casos de tuberculosis se atribuye a la propagación del HIV. Objetivo. Describir la infección concomitante de tuberculosis y HIV en el departamento del Meta durante el periodo de 2010 a 2015. Materiales y métodos. Se hizo un estudio observacional, descriptivo y retrospectivo. Se seleccionaron los 219 casos de análisis y se elaboraron dos nuevas bases de datos que fueron analizadas en tres fases: determinación de las características sociodemográficas y clínicas, construcción de indicadores por municipio (prevalencia y éxito terapéutico) y estratificación en situaciones epidemiológicas según la prevalencia (carga) de la enfermedad. Resultados. El 60 % de los municipios se ajustó a la situación designada como 2. El tratamiento de las personas con infección concomitante de tuberculosis y HIV cuya condición de ingreso era nueva, tuvo 2,39 veces más probabilidades de ser exitoso que el de los previamente tratados, siendo esta asociación estadísticamente significativa (razón de posibilidades, RP=2,39; IC95% 1,3-9,6; p=0,01). Conclusión. La estratificación por situaciones epidemiológicas es útil para planificar actividades de prevención y control.

Abstract Introduction. One third of the increase in tuberculosis cases is attributed to the spread of HIV. Objective. To describe the Tb/HIV coinfection in the department of Meta from 2010 to 2015. Materials and methods. We conducted an observational, descriptive and retrospective study. After selecting 219 cases for analysis, two new databases were constructed and analyzed in three phases: Identification of sociodemographic and clinical characteristics, indicators by municipality (prevalence and therapeutic success) and stratification in epidemiological scenarios according to the prevalence (burden) of the illness. Results. Sixty percent of the municipalities corresponded to scenario 2. People with Tb/HIV coinfection who had not been treated previously, had 2.39 times more probability of having therapeutic success compared to those previously treated, this association being statistically significant (RP=2,39; 95% CI 1,3-9,6; p=0,01). Conclusion. Stratification by epidemiological scenarios is useful for planning prevention and control activities.

Exposure and sensitization to insects in allergic patients in the tropics

Resumen Introducción. Los ácaros son una importante fuente de alérgenos en el trópico, pero poco se han estudiado otras fuentes potenciales de alérgenos prevalentes en la zona, como los insectos. Objetivo. Determinar la relación entre la exposición y la sensibilización alérgica a cucarachas, mosquitos y hormigas, y su interacción con la sensibilización a los ácaros. Materiales y métodos. Se incluyeron pacientes con pruebas de alergia para Blatella germanica, Aedes aegypti, Solenopsis invicta, Blomia tropicalis, Dermatophagoides farinae y D. pteronyssinus. Se determinó la sensibilización mediada por inmunoglobulina E (IgE) mediante pruebas intraepidérmicas. Para la exposición a los insectos en las casas, se utilizaron trampas para insectos rastreros y voladores. Resultados. Se incluyeron 186 pacientes, de los cuales 73 (39,2 %) presentaron sensibilidad a uno de los insectos (cucarachas: 21 %, mosquitos: 29 %, hormigas: 26,3 %). De estos, 71 (97,2 %) presentaron sensibilización a los ácaros, en tanto que de los 148 pacientes sensibilizados a algún ácaro, solo el 47,9 % lo estaba a algún insecto. Se evaluaron 104 casas: en el 74 %, se encontraron cucarachas, en el 22%, hormigas, y en el 52 %, mosquitos. En los pacientes sensibilizados a los insectos, el número de insectos por casa tuvo una relación directa con el tamaño del habón aparecido durante la prueba cutánea: cucaracha, r=0,781 (p<0,001), mosquito, r=0,811 (p<0,001), hormiga, r=0,840 (p<0,001). Conclusión. La sensibilización a los insectos es frecuente en la población alérgica del trópico y está fuertemente asociada con la sensibilización a los ácaros.

Abstract Introduction: Mites are an important source of allergens in the tropics. Other potential sources of allergens prevalent in the region such as insects have been poorly studied. Objective: To determine the relationship between exposure and allergic sensitization to cockroaches, mosquitos, ants and the interaction with mite sensitization. Materials and methods: We included patients with allergy tests for Blatella germanica, Aedes aegypti, Solenopsis invicta, Blomia tropicalis, Dermatophagoides farinae and D. pteronyssinus. IgE sensitization was evaluated by intraepidermal tests. Exposure to insects in houses was evaluated using traps for crawling and flying insects. Results: A total amount of 186 patients were included; 73 (39.2%) of them were sensitized to an insect (cockroaches: 21%, mosquitoes: 29%, ants: 26,3%), 71 (97.2%) also had sensitization to mites. Of the 148 patients sensitized to mites, only 47.9% were sensitized to an insect. In total, 104 houses were evaluated: 74% had cockroaches, 22% ants, and 52% mosquitoes. Among insect-sensitized patients, the number of insects at home was directly related to the size of the weal generated during the skin test: Cockroaches, r=0.781, p<0.001; mosquitoes, r=0.811, p<0.001, and ants, r=0.840, p<0.001. Conclusion: Sensitization to insects is frequent in allergic populations of the tropics and is strongly associated with sensitization to mites.

Mycobacterioses identified in the National Reference Laboratory of Colombia from 2012 to 2016

Resumen Introducción. En los últimos años se ha observado un aumento en la prevalencia de micobacteriosis ocasionadas por micobacterias no tuberculosas, las cuales hoy se consideran como agentes patógenos emergentes. Su presencia depende de varios factores, como los antecedentes clínicos, el estado de salud de la persona afectada y la presencia de estos microorganismos en el agua, el suelo y los animales, entre otros. Objetivo. Describir las micobacteriosis identificadas en el Laboratorio Nacional de Referencia de Micobacterias del Instituto Nacional de Salud, entre 2012 y 2016. Materiales y métodos. Se hizo un análisis retrospectivo que incluyó 273 pacientes con micobacteriosis. Las variables analizadas fueron el tipo de micobacteriosis, el agente etiológico y los factores de riesgo asociados. Resultados. El 57,1 % de los casos presentó micobacteriosis pulmonar, el 26 %, cutánea, el 10,6 %, diseminada, y el 2,6 %, linfática. La comparación entre la forma pulmonar y la extrapulmonar evidenció que el complejo Mycobacterium avium se presenta con mayor frecuencia en las micobacteriosis pulmonares, en tanto que M. abscessus fue más frecuente en las extrapulmonares. Los pacientes con micobacteriosis pulmonar presentaban antecedentes de tuberculosis con mayor frecuencia que aquellos con las formas extrapulmonares. Conclusión. Estos hallazgos resaltan la importancia del diagnóstico diferencial entre las especies del complejo M. tuberculosis y las micobacterias no tuberculosas, ya que estas últimas son resistentes genéticamente a los fármacos convencionales contra la tuberculosis.

Abstract Introduction: In recent years, there has been an increase in the prevalence of mycobacterioses caused by non-tuberculous mycobacteria, which are considered as emerging pathogens. Their presence depends on several factors such as the clinical history, the health status of the affected person, and the presence of these microorganisms in the water, the soil, and the animals, among others. Objective: To describe the mycobacteria and the etiological agent identified in isolates received at the Laboratorio Nacional de Referencia de Micobacterias of the Instituto Nacional de Salud between 2012 and 2016. Materials and methods: We conducted a retrospective analysis of samples from 273 patients with mycobacterioses. We analyzed the following variables: mycobacteriosis type, etiological agent, and associated predisposing factors. Results: 57.1% of the cases presented pulmonary mycobacteriosis; 26%, cutaneous; 10.6%, disseminated, and 2.6%, lymphatic. We found the Mycobacterium avium complex more frequently in pulmonary mycobacteriosis, while M. abscessus was more frequent in the extrapulmonary types of the disease. Patients with pulmonary mycobacteriosis had a history of tuberculosis more frequently than those with extrapulmonary forms. Conclusion: These findings highlight the importance of the differential diagnosis between M. tuberculosis complex species and non-tuberculous mycobacteria since the latter are genetically resistant to conventional antituberculosis drugs.

Novel larvicide tablets of Bacillus thuringiensis var. israelensis: Assessment of larvicidal effect on Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) in Colombia

Abstract Introduction: Aedes (Stegomyia) aegypti is the vector for dengue, chikungunya, and Zika arboviruses. Bti-CECIF is a bioinsecticide designed and developed in the form of a solid tablet for the control of this vector. It contains Bacillus thuringiensis var. israelensis (Bti) serotype H-14. Objective: To evaluate under semi-field and field conditions the efficacy and residual activity of Bti-CECIF tablets on Aedes aegypti larvae in two Colombian municipalities. Materials and methods: We tested under semi-field conditions in plastic tanks (Rotoplast™) four different Bti doses (0.13, 0.40, 0.66 and 0.93 mg/L) in the municipality of Apartadó, department of Antioquia, to assess Bti-CECIF efficacy (percentage of reduction of larval density) and the residual activity in water tanks containing A. aegypti third-instar larvae. The efficacy and residuality of the most lethal dose were subsequently evaluated under field conditions in cement tanks in the municipality of San Carlos, department of Córdoba. Results: Under semi-field conditions, the highest tested dose exhibited the greatest residual activity (15 days) after which larval mortality was 80%. Under field conditions, the highest tested Bti-CECIF doses showed 100% mortality and exhibited a residual activity of seven days in 90% of the tanks. Conclusion: Bti-CECIF tablets effectively controlled A. aegypti larvae under field conditions for up to seven days post-treatment.

Resumen Introducción. Aedes (Stegomyia) aegypti es el vector de los arbovirus del dengue, el chikungunya y el Zika. Para el control de este vector, se diseñó y desarrolló un bioinsecticida en presentación de tableta sólida, el Bti-CECIF, que contiene Bacillus thuringiensis var. israelensis (Bti) de serotipo H-14. Objetivo. Evaluar en condiciones de ‘semicampo’ y de campo, la eficacia y la actividad residual de las tabletas de Bti-CECIF en larvas de A. aegypti en dos municipios colombianos. Materiales y métodos. En el municipio de Apartadó, departamento de Antioquia, se probaron bajo condiciones de ‘semicampo’ en tanques de plástico de 250 l (Rotoplast™) cuatro dosis diferentes de Bti (0,13, 0,40, 0,66 y 0,93 mg/l) para evaluar la eficacia del Bti-CECIF (porcentaje de reducción de la densidad larvaria) y la actividad residual en tanques de agua que contenían larvas de tercer estadio de A. aegypti. La eficacia y el efecto residual de la dosis más letal fueron posteriormente evaluadas en tanques de cemento bajo condiciones de campo en el municipio de San Carlos, departamento de Córdoba. Resultados. Bajo condiciones de ‘semicampo’, la mayor dosis probada exhibió la mayor actividad residual (15 días), después de lo cual la mortalidad de las larvas fue de 80 %. Bajo condiciones de campo, la máxima dosis probada de Bti-CECIF mostró una mortalidad de 100 % y exhibió una actividad residual de siete días en el 90 % de los tanques. Conclusión. Las tabletas Bti-CECIF controlaron eficazmente A. aegypti en condiciones de campo durante siete días a partir de su aplicación.

Knowledge, practices and entomological aspects of dengue in Medellín, Colombia: A comparative study of neighborhoods with high and low incidence

Resumen Introducción. El dengue, transmitido principalmente por Aedes aegypti, es una enfermedad viral de gran importancia en salud pública. Colombia es un país endemoepidémico para el dengue y, en ciudades como Medellín, hay barrios con alta y baja incidencia. Las diferencias en cuanto a los conocimientos, las prácticas y los aspectos entomológicos podrían estar determinando la dinámica de la enfermedad en los barrios. Objetivo. Determinar los conocimientos y prácticas en torno al dengue de los habitantes de barrios con alta y baja incidencia y explorar los aspectos entomológicos relacionados con la presencia del vector. Materiales y métodos. Se hizo un estudio transversal y se compararon dos barrios con alta incidencia y dos con baja incidencia durante el trienio de 2013 a 2015. Se seleccionó una muestra aleatoria de 100 viviendas por barrio para evaluar los conocimientos, las prácticas y los aspectos entomológicos. Se hicieron el análisis descriptivo, el bivariado y el multivariado (regresión logística). Resultados. En los barrios con alta incidencia, los participantes se caracterizaron por no haber realizado estudios o haber cursado únicamente primaria (odds ratio, OR=1,69; IC95%=1,09-2,63), así como por pertenecer al régimen subsidiado del sistema de seguridad social en salud o no estar afiliado (OR=2,16; IC95% 1,41-3,32) y, además, presentaron un mayor conocimiento del vector (OR=1,53; IC95% 1,00-2,35). En cuanto a las prácticas, la posibilidad de encontrar viviendas en donde se almacenaba el agua fue mayor (OR=1,69; IC95% 1,11-2,57) y, en lo relacionado con los aspectos entomológicos, se encontraron más viviendas con mosquitos adultos (OR=2,13; IC95% 1,29-3,50). Conclusiones. En este estudio se encontraron diferencias importantes entre los barrios en cuanto a los conocimientos, las prácticas y la presencia de estados adultos del vector, lo cual contribuye a explicar la epidemiología del dengue en estos lugares.

Abstract Introduction: Dengue, mainly transmitted by Aedes aegypti, is a very important viral disease in terms of public health. Colombia is an endemoepidemic country for dengue and, in cities like Medellín, there are neighborhoods with high and low incidence. The disease dynamics in the neighborhoods might be determined by differences in the knowledge, practices and entomological aspects of the vector among the communities. Objective: To identify the knowledge and practices of residents of neighborhoods with high and low incidence of dengue, and to explore the entomological aspects related to the presence of the vector. Materials and methods: We conducted a cross-sectional study comparing two neighborhoods with high incidence and two with low incidence during the triennium of 2013-2015. A random sample of 100 houses per neighborhood was selected in order to evaluate the knowledge, practices and entomological aspects related to dengue. In addition, descriptive, bivariate and multivariate analyses (logistic regression) were performed. Results: In neighborhoods with high incidence, participants had not attended school or had only a primary school level of education (OR=1.69; 95% CI: 1.09-2.63). Additionally, they did not have health coverage or belonged to the subsidized regime (OR=2.16; 95% CI: 1.41-3.32). In contrast, they had a greater knowledge of the vector (OR=1.53; 95% CI: 1.00-2.35). In terms of practices, there was a greater chance of finding houses where water was stored (OR=1.69; 95% CI: 1.11-2.57) and regarding the entomological aspects, more houses with adult mosquitoes were found (OR=2.13 95% CI: 1.29-3.50). Conclusions: We found important differences among the neighborhoods regarding knowledge, practices, and the presence of adult stages of the vector, which helps to explain the epidemiology of dengue in these sites.

Genetic diversity and population structure of Anopheles triannulatus s. l. in the department of Córdoba, Colombia, using DNA barcoding

Resumen A pesar de los recientes reportes de infección con Plasmodium spp. en poblaciones relacionadas con los linajes noroeste y sureste, Anopheles triannulatus no está incriminado como vector de la transmisión de malaria en Colombia. La diversidad genética puede delimitar la información sobre el flujo génico y la diferenciación poblacional entre localidades con malaria. Objetivo. Estimar la diversidad genética de An. triannulatus en cinco municipios con alta y baja incidencia de malaria en el departamento de Córdoba. Materiales y métodos. La recolección entomológica se hizo entre agosto y noviembre de 2016 en los municipios de Tierralta, Puerto Libertador, Montelíbano, Sahagún y Planeta Rica. Como marcador genético, se utilizó la región de código de barras de ADN del gen mitocondrial COI. El análisis genético incluyó la estimación de los parámetros de diversidad haplotípica, estructura genética y flujo génico, la prueba D de neutralidad de Tajima, la red de haplotipos y las relaciones filogenéticas. Resultados. Se obtuvieron 148 secuencias parciales de 655 nucleótidos del gen COI, de los cuales se derivaron 44 haplotipos. Los haplotipos H2 y H21 fueron los más frecuentes en las poblaciones. Los valores de la prueba D de Tajima fueron negativos y no significativos (p>0,10). Los estimadores de estructura genética (FST=0,01427) y de flujo génico (Nm=17,27) evidenciaron que no hubo diferenciación genética en las poblaciones muestreadas debido al importante intercambio de migrantes. Mediante las inferencias filogenéticas y la red de haplotipos, se identificó una sola especie sin diferenciación geográfica o de linajes en el rango geográfico estudiado. Conclusión. La diversidad genética calculada para An. triannulatus en este contexto, indicó que las poblaciones están en un intercambio constante.

Abstract Introduction: Anopheles triannulatus is not incriminated as a vector of malaria transmission in Colombia despite recent reports of infection with Plasmodium spp. in populations related to the northwestern and southeastern lineages. Genetic diversity can delimit information about gene flow and population differentiation in localities with malaria. Objective: To estimate the genetic diversity of An. triannulatus in five municipalities with high and low incidence of malaria in the department of Córdoba. Materials and methods: The entomological collections were done between August and November, 2016, in Tierralta, Puerto Libertador, Montelíbano, Sahagún, and Planeta Rica. We used the COI barcoding fragment as molecular marker. The genetic analysis included the estimation of genetic parameters such as the diversity haplotype, the genetic structure, the gene flow, the Tajima’s D test, the haplotype network, and the phylogenetic relationship. Results: We obtained 148 sequences with a length of 655 nucleotides of the COI gene, from which we derived 44 haplotypes. The H2 and H21 haplotypes were the most frequent in the populations. The values of the Tajima’s D test were negative and not significant (p>0.10). The genetic structure index (FST=0.01427) and the gene flow (Nm=17.27) evidenced no differentiation between sampled populations due to the high exchange of migrants. Using phylogenetic inferences and the haplotype network, we identified one single species without geographic differentiation or lineages in the geographic range studied. Conclusions: The genetic diversity calculated for An. triannulatus in this context indicated stable populations in constant exchange.

Microcephaly in Colombia before the Zika outbreak: A systematic literature review

Abstract Introduction: Microcephaly is characterized by a smaller than normal head circumference. Recently, Zika virus (ZV) has been associated with microcephaly. Objective: To describe the prevalence of microcephaly in Colombia taking as the baseline the information from the period before the Zika virus infection epidemics. Materials and methods: We reviewed Medline, Scopus, Scielo, Lilacs and annual reports of congenital malformation monitoring systems across Latin America, among others sources, for articles published before April, 2015, reporting the prevalence of microcephaly in Colombia between 1982 and 2013. Results: We identified 32 non-duplicate articles; we selected 25 articles for revision of which 12 met the criteria for inclusion in the systematic review, including 2,808,308 births. Conclusions: The prevalence of microcephaly in Colombia from 1982 to 2013, before the introduction of ZV, ranged from 0.3 to 3.1 per 10,000 births, with an average of 1.8 (95% CI 1.7-1.8) per 10,000 births. These findings are important to determine if the prevalence after the introduction of the Zika virus infection registered significant changes.

Resumen Introducción. La microcefalia consiste en una circunferencia cefálica menor de la esperada. Recientemente, el virus del Zika se ha asociado con esta condición. Objetivo. Describir la prevalencia de la microcefalia en Colombia, estableciendo como línea de base el periodo anterior a la epidemia del virus del Zika. Materiales y métodos. Se revisaron las bases de datos Medline, Scopus, Scielo, Lilacs y el reporte anual de malformaciones congénitas en Latinoamérica, así como otras fuentes publicadas antes de abril de 2015 con los datos de prevalencia de la microcefalia en Colombia entre 1982 y 2013. Resultados. Se detectaron 32 artículos no duplicados, se revisaron 25 y se seleccionaron 12 que cumplían con los criterios de inclusión para la revisión sistemática, los cuales registraban 2’808.308 nacimientos. Conclusiones. La prevalencia de la microcefalia en Colombia entre 1982 y 2013, antes de la epidemia del virus del Zika, oscilaba entre 0,3 y 3,1 por 10.000 nacimientos, con un promedio de 1,8 (IC95% 1,7-1,8). Este dato es importante para determinar la diferencia en la prevalencia después de la introducción del virus del Zika en Colombia.

Nuclei ultrastructural changes of C6/36 cells infected with virus dengue type 2

ABSTRACT Introduction: Dengue virus replication has been considered mainly cytoplasmic, however, studies indicate that some flaviviruses may use the intranuclear pathway as part of the machinery that the virus uses to increase infection capacity in the host cell. This paper describes alterations at nuclear level in the cell infected with dengue, which are likely involved in the virus replication processes. Objective: This paper addresses the ultrastructural observations of C6/36 cells of the Aedes albopictus mosquito infected with dengue virus type 2. Materials and methods: C6/36 cells were infected in culture medium with the serum of a patient positively diagnosed for dengue 2. Subsequently, the cells were incubated for 10 days and the cytopathic effect was assessed. The cells were processed for immunofluorescence assays and transmission electron microscopy. Results: The immunofluorescence assays confirmed the presence of viral protein E associated with cellular syncytia in the culture. In the ultrastructural study, the infected cells showed vesicular-tubular structures and dilated cisterns of the endoplasmic reticulum at the cytoplasmic level. Viral particles were found exclusively in cytoplasm localized within the vacuoles. Nuclei of cellular syncytia showed membrane structures arranged in a circular shape and, in some cases, these syncytia displayed lysis; in no case viral particles were observed at the nuclear level. Conclusions: The ultrastructural alterations of nuclei in cells infected with the dengue virus using electron microscopy techniques had not been reported before, as far as we know. It is likely that such modifications are associated with replicative processes at an intranuclear level as an alternate replication mechanism.

RESUMEN Introducción. La replicación del virus del dengue se ha considerado principalmente citoplásmica; sin embargo, en diversos estudios se ha informado que algunos flavivirus pueden utilizar factores intranucleares como parte de la maquinaria que utilizan para aumentar la capacidad de infección en la célula huésped. En este trabajo se describen las alteraciones a nivel nuclear en células infectadas con dengue, probablemente involucradas en procesos de replicación viral. Objetivo. Presentar las observaciones ultraestructurales de células C6/36 de Aedes albopictus infectadas con el virus del dengue de tipo 2. Materiales y métodos. Se infectaron células C6/36 con suero de un paciente con diagnóstico de dengue 2; posteriormente, se mantuvieron en medio de cultivo durante 10 días y se evaluó el efecto citopático. Las células se procesaron para los ensayos de inmunofluorescencia y microscopía electrónica de transmisión, con el fin de hacer el estudio ultraestructural. Resultados. Los ensayos de inmunofluorescencia confirmaron la presencia de la proteína E viral asociada con sincitios celulares en el cultivo. En el estudio ultraestructural, las células infectadas tenían estructuras vesiculares y tubulares, y cisternas dilatadas del retículo endoplásmico en el citoplasma. Las partículas virales se encontraron exclusivamente en vacuolas localizadas en el citoplasma. Los núcleos de los sincitios celulares contenían estructuras de membrana dispuestas en forma circular y, en algunos casos, dichos sincitios presentaban lisis. En ningún caso se observaron partículas virales en el núcleo. Conclusiones. No se habían reportado alteraciones ultraestructurales en los núcleos de células infectadas con el virus del dengue detectadas mediante técnicas de microscopia electrónica. Es probable que tales modificaciones estén asociadas con procesos intranucleares de replicación como un mecanismo alternativo.

Cutaneous leishmaniasis during pregnancy