Acta Biológica Colombiana

Behavioral Evaluation of hMSC-GFP+ Transplantation in an Hemiparkinson Experimental Model in Wistar Rat

RESUMEN Se evaluó el efecto del trasplante de hMSC-GFP+ en un modelo experimental de Enfermedad de Parkinson (EP) en 27 ratas Wistar con tres grupos experimentales: control: animales sin cirugía, (CON n=7), lesionado: animales lesionados intracerebralmente con 6-OHDA a nivel de SNpc (LES n = 10) y trasplantado: animales LES con trasplante de hMSC-GFP+ intraestriatalmente (LES-T n = 10). Con el fin de evaluar la influencia del trasplante en el comportamiento motor, un mes después de la lesión, se desarrolló una batería comportamental compuesta por Test Neurológico (compuesto también por Pole Test y Test de Barra transversal, además, de inmunofluorescencia para células de SNpc con TH). Utilizando el test de Anova, se demostró una disminución en el número de giros en animales trasplantados (p=0,005), así como en el test neurológico (p=0,0004) y en el Test de barra transversal, que colocan a este grupo en una posición intermedia con respecto a LES y CON. Existe una posible recuperación de la vía nigroestriatal mediada por el trasplante de hMSC-GFP+.

ABSTRACT The effect of hMSCs-GFP+ transplantation was evaluated in an experimental model of Parkinson's disease (PD) in 27 Wistar rats, or in three experimental groups: control (CON n=7), injured (LES n = 10) and transplanted (LES+T n = 10). In order to evaluate the influence of the transplantation on the motor behavior, one month after the injury, rotation behavior induced by apomorphine, neurological test, transversal bar and SNpc cells positive to TH were developed. Using the Anova test, there was a decrease in the number of turns in transplanted animals (p=0,005) as well as in the neurological test (p=0,0004) and in the transverse bar that lead to this group in an intermediate position regarding LES and CON groups. There is a possible recovery of the transplantation-mediated nigroestriatal pathway of hMSC-GFP +.

Effect of Extracellular Zinc Chelator on Rat Retinal Ganglion Cell Number, and Taurine and Zinc Transporters in These Cells

RESUMEN La deficiencia de zinc en humanos produce disminución de antioxidantes, asociados a taurina, en la retina y se relaciona con adaptación anormal a la oscuridad, cataratas, ceguera y degeneración macular. Existe escasa evidencia acerca del efecto del zinc sobre el sistema de taurina en retina de mamíferos, por lo cual estudiamos el efecto del zinc sobre el transportador de taurina (TAUT) y los transportadores de zinc (ZnT-1 y 3) usando el quelante de zinc extracelular, ácido dietileno-triamino-penta-acético (DTPA), mediante inmunocitoquímica e inmunohistoquímica fluorescentes en células ganglionares (CG) y en las capas de la retina de ratas. Tres días después de la administración de DTPA (10μM) se utilizaron anticuerpos primarios y secundarios conjugados con rodamina o fluoresceína-5-isotiocianato (FITC) según fuera el caso. Para el marcaje inmunocitoquímico se contaron trescientas células por condición y la intensidad de fluorescencia se midió como densidad óptica integrada (DOI) en cuatro áreas por cada capa del tejido. El DTPA produjo una disminución en un 32 % y 29 % de las CG del total de células marcadas con los anticuerpos contra glicoproteína Thy 1.1 y γ-sinucleína, respectivamente. También produjo una disminución significativa de la distribución de TAUT en un 27 y 28 % respecto a los controles. DTPA disminuyó la localización de ZnT-1 y ZnT-3 en las capas de retina (células ganglionares, CCG y en las plexiformes externa e interna, CPE y CPI). El estudio de estos transportadores en la retina resulta relevante para entender las interacciones de taurina y de zinc en esta estructura.

ABSTRACT Zinc deficiency in humans causes decreased antioxidants in the retina and is related with abnormal darkness adaptation, cataracts, blindness, and macular degeneration. There is little information about the effects of zinc on the taurine system in mammalian retinal cells. Therefore, we studied the effect of zinc on the taurine transporter (TAUT) and zinc transporters (ZnT-1 and 3) using the extracellular zinc chelator, diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA) by fluorescence immunocytochemistry and immunohistochemistry in the ganglion cells (CG) and cell layers of the retina of rats. Three days after administration ofDTPA (10μM) primary antibodies and secondary antibodies conjugated with rhodamine or fluorescein isothiocyanate (FITC) were used as required. For immunocytochemical labeling approximately three hundred cells per condition were counted. For immunohistochemical labeling, the fluorescence intensity was measured as integrated optical density (DOI) in four areas for each layer of tissue. DTPA produced a decrease of 32 % and 29 % in GC of the total cells labeled with antibody against glycoprotein Thy 1.1 and γ-synuclein, respectively. It also produced a significant decrease in TAUT localization in 27 and 28 % compared to controls. DTPA produced a decrease in the localization of ZnT-1 and ZnT-3 in the retina layers (ganglion cells, GCC and the outer and inner plexiform, CEP and CIP). The study of these molecules in the retina is relevant to understanding the interactions of taurine and zinc in this structure.

**Evaluation of Anti-Trichinella spiralis Obtained by Sublingual and Conventional Immunizations with the 45kDa Protein**

RESUMEN La trichinellosis es una enfermedad parasitaria zoonótica y cosmopolita, se debe al consumo de carne deficientemente cocida, principalmente proveniente del cerdo, diversos estudios avalan la eficacia de la administración de inmunoterapia. Se ha caracterizado un antígeno inmunodominante de 45 kDa y se plantea como objetivo evaluar la presencia de anticuerpos IgA, IgM e IgG antti-Trichinella spiralis a lo largo de la infección, así como el comportamiento en la administración de la inmunización de 45 kDa de Trichinella spiralis (T. spiralis) administrado por vía sublingual y vía parenteral. Se utilizaron 36 murinos (Long Evans), seis para la infección y purificación del antígeno de 45 kDa, 30 para formar los grupos de trabajo, control sano (cinco murinos), control infectado (cinco murinos), y 20 para los grupos experimentales, se inmunizaron dos grupos con cuatro dosis (0, 7, 14 y 21 días) del inmunógeno de 45 KDa de T. spiralis, uno por vía sublingual y otro por vía parenteral y se retaron con 500 larvas infectantes (LI) de T. spiralis siete días después de la ultima inmunización y dos grupos más se infectaron con 500 LI y se inmunizaron a las cuatro semanas postinfección por ambas vías. La respuesta se evaluó por inmunofluorescencia indirecta (IFI) por microscopia confocal para determinar la respuesta humoral con anticuerpos de clase IgG, IgM e IgA.

ABSTRACT Trichinellosis is a cosmopolitan zoonotic disease produced mainly by the consumption of poorly cooked swine meat. Several studies have probed the efficiency of immunotherapy as a method for the treatment of trichinellosis. In this work, a 45 kDa immunodominant antigen was characterized, and the presence of IgA, IgM and IgG antti-Trichinella spiralis antibodies was evaluated during the course of the infection. In addition, the differences between sublingual and parenteral administration of the 45 kDa T. spiralis antigen were determined. Long Evans rats were used both to purify the 45 kDa antigen and to evaluate the immune response produced in six different groups: healthy and infected controls; two groups of immunized murines (sublingually and parenterally) with four doses of the 45 kDa T. spiralis immunogen administered at days 0, 7, 14 and 21 and challenged with 500 T. spiralis infective larvae (IL) 7 days after the last immunization; and finally, two groups of murines infected with 500 IL ofT. spiralis, immunized at week 4 post infection by the same two routes. The humoral response was evaluated by indirect immunofluorescence by confocal microscopyin order to determine the presence of IgA, IgM and IgG antibodies.

Antimicrobial Activity of Cationic Peptides Designed from Neutral Peptide

RESUMEN Los péptidos antimicrobianos (PAMs) juegan un papel importante en la inmunidad innata de la mayoría de los organismos; ellos pueden tener actividad en bacterias, hongos, virus y parásitos. El mecanismo de acción de los PAMs catiónicos yace en la capacidad de interactuar con membranas microbianas, debido a la superficie aniónica de dichas membranas. La familia de las cecropinas fue identificada como una de las familias peptídicas más importantes en los insectos. Los péptidos de esta familia, no contienen residuos de cisteína y son clasificados como helicoidales. Para estudiar el efecto de la carga sobre la estructura, nosotros introducimos residuos cargados positivamente en los primeros 18 aminoácidos de la región N-terminal de la cecropina-D (WT), y se evaluó la actividad biológica de los péptidos modificados. Dos análogos de la cecropina-D con cargas netas de +5 y +9, fueron obtenidos por síntesis de fase sólida (SSP). Los cambios en los péptidos análogos fueron generados de la siguiente manera: péptido +5 con tres sustituciones (E6R, E8R and Q12K) y péptido +9 con cinco sustituciones (E1R, E6R, E8R, Q12K, and D16K). La actividad antibacteriana fue evaluada en dos grupos de bacterias, con el fin de investigar los efectos de las cargas positivas en dicha actividad. Los péptidos catiónicos mostraron una mayor actividad antimicrobiana tanto en bacterias Gram-negativas como en Gram-positivas, a diferencia del péptido WT. Las representaciones en 3D de los péptidos mostraron que ellos tienen una estructura α-hélice. Nuestros resultados demostraron que cambios en la carga de los péptidos incrementa la actividad antibacteriana.

ABSTRACT Antimicrobial peptides (PAMs) play an important role in the innate defense systems of most organisms; they act against bacteria, fungi, viruses and parasites. The mechanism of action of cationic PAMs rely on their capacity to interact with the anionic microbial membrane surface. The cecropin family was identified as one of the most important peptides in insects. Such peptides do not contain cysteine residues and are classified as α-helical. To study the effect of the charge on the peptide structure, we introduced positive charge residues in the last 18 residues at the N-end of cecropin-D (WT) and evaluated the biological activity of the modified peptides. Two analogous peptides from cecropin-D were obtained by synthesis of a solid phase (SSP) with charges of+5 and +9. The analogous peptides were generated as followed: peptide +5 with three substitutions (E6R, E8R and Q12K) and peptide +9 with five substitutions (E1R, E6R, E8R, Q12K, and D16K). Antibacterial activity was evaluated to investigate the effects of the positive charge in these two analogue peptides against two groups of bacteria. The cationic peptides showed higher antimicrobial activity against Gram-negative and Gram-positive bacteria than the WT peptide. The 3D representations of the peptides showed that they have α-helical structure. Our results demonstrate that changes in the charge of peptides increase the antibacterial activity.

**Assessment of (Fouquieria splendens ssp. breviflora) Cell Cultures Response Under Water Stress**

RESUMEN Los cultivos de células vegetales son sistemas experimentales homogéneos altamente controlables que permiten el estudio de adaptaciones bajo condiciones de estrés hídrico, sin la interferencia de los diferentes tejidos y estados del desarrollo vegetal. Una aproximación para comprender esas adaptaciones, es la aparición de proteínas inducidas, resultado de la alteración en la expresión génica. El presente trabajo analizó la respuesta de cultivos de células de Fouquieria splendens ssp. breviflora, expuestos a ácido abscísico (ABA), mediante la caracterización electroforética en cantidad y calidad de las proteínas inducibles de estrés. Se registraron polipéptidos de bajo peso molecular (< 35kDa), comunes bajo la exposición a 10 mM, seguida la asociación con 20 y 30 mM de ABA, quedando aislada la respuesta de la condición de células en cultivo sin la presencia de éste.

ABSTRACT Plant cell cultures are homogenous experimental systems, highly controllable that allow the study of short and large water stress adaptations without the interference of the different tissues and development ofplants. An approach to understand these adaptations is through the presence of induced proteins; as a result of changes in genetic expression. This work analyze the response of Fouquieria splendens ssp. breviflora cell cultures exposed to abscisic acid (ABA), through the electrophoretic characterization of quantity and quality of stress induced proteins. There were recorded low molecular weight polypeptides (< 35kDa), common in experiments under ABA 10mM, followed by the association with 20 and 30mM ABA conditions, with a particularly response of cell cultures without the stress agent.

**ECOLOGICAL ASPECTS OF THE PARASITES IN Cichlasoma bimaculatum (CICHLIDAE), ORNAMENTAL FISH FROM THE BRAZILIAN AMAZON**

ABSTRACT This study investigated the parasitic fauna of Cichlasoma bimaculatum of a tributary from the Amazon River system, northern Brazil. The prevalence of infection was 94.6 % and, in total, 428 267 parasites, such as Ichthyophthirius multifiliis, Piscinoodinium pillulare (Protozoa), Gussevia arilla (Monogenoidea), Posthodiplostomum sp. (Digenea) and Procamallanus (Spirocamallanus) inopinatus (Nematoda) were collected. However, the dominance was mainly of I. multifiliis, while P. (S.) inopinatus was the parasite species with the lower levels of prevalence and abundance of infection. These parasite species showed an aggregated dispersion pattern. The parasitic fauna was characterized by the presence of few species of parasites with high prevalence and abundance, specifically ectoparasites, and a low number of endoparasites. The observed pattern is explained by the mode of life of the host and it is suggested that C. bimaculatum occupies a low trophic level at the food web.

RESUMEN Este estudio investigó la fauna parasitaria de Cichlasoma bimaculatum (Cichlidae) en un afluente del sistema del Río Amazonas, en el norte de Brasil. La prevalencia parasitaria fue del 94,6 % y en total, 428267 parásitos fueron colectados, entre estos Ichthyophthirius multifiliis, Piscinoodinium pillulare (Protozoa), Gussevia arilla (Monogenoidea), Posthodiplostomum sp. (Digena) y Procamallanus (Spirocamallanus) nopinatus (Nematoda). Aunque el predominio fue de I. multifiliis, el nematodo P. (S.) inopinatus fue la especie menos frecuente y abundante. Estas especies de parásitos mostraron un patrón de dispersión agregada. La fauna parasitaria se caracterizó por la presencia de algunas pocas especies de parásitos con mayor prevalencia y abundancia de ectoparásitos y una baja presencia de endoparásitos. Se discute que lo anterior puede deberse al modo de vida del hospedero y sugieren que C. bimaculatum ocupa un bajo nivel en la cadena trófica.

Changes in the Avifauna of a Relict Forest in the Peri-Urban Area of Bogota Throughout Fourteen Years

RESUMEN A lo largo de varios siglos, la vegetación nativa de la parte plana de la Sabana de Bogotá ha sido casi completamente sustituida por cultivos, potreros y urbanizaciones. El último relicto de esta vegetación es un pequeño bosque (ca 10 ha), ubicado en la Hacienda Las Mercedes en el borde norte de la ciudad de Bogotá. El tamaño reducido y aislamiento del bosque, agravado por el crecimiento descontrolado de vegetación invasiva (lianas y zarzamora silvestre) ha generado la pérdida de muchas especies. Sin embargo, en los últimos años el bosque ha sido objeto de acciones de rehabilitación y actualmente la zona está inmersa en una reserva en donde se prevén programas de restauración más amplios. Con el objetivo de evaluar los cambios en la comunidad de aves para estimar los efectos de las acciones de restauración, se registró la avifauna presente en 2001-2002 y en el 2014, mediante registros visuales y auditivos en puntos fijos en el bosque. En el primer censo se encontraron 27 especies de bosque y en el segundo 30, y las abundancias relativas de por lo menos la tercera parte de ellas también aumentó en los 13 años, indicando un resultado positivo en la recuperación del bosque. Los resultados resaltan la capacidad de recuperación de los ecosistemas degradados y la importancia de continuar con las acciones de restauración en el área de reserva.

ABSTRACT The native vegetation of the Sabana de Bogota's flat area has been replaced by agricultural lands, pastures and urbanizations over the years. The last relict of this native vegetation is a small forest (ca 10 ha) at Hacienda Las Mercedes, in the northern border of Bogota. The forest's small size and isolation from other areas of natural vegetation have resulted in the loss of many species. The problem was exacerbated by uncontrolled growth of invasive vegetation (vines and wild blackberry). However, in recent years restorative action including control of these vegetation has been undertaken and the forest is now immerse in a natural reserve where more restorative actions are being planned. Using point count stations the authors recorded all the birds seen and heard in 2001-2002 and in 2014 in order to evaluate the changes in the bird community and estimate the effects of the restorative actions. We recorded 27 forest species in the first census and 30 in the second. The relative abundance of at least 1/3 of the species also increased indicating a positive result in the forest restoration. The results highlight the capacity of degraded ecosystems to recover and the importance of continuing the restorative actions in the reserve area.

**Response of Chlorophyll and Metabolism of an Andean Stream to a Temperature Increase in an ex situ Experiment**

RESUMEN En los trópicos, el cambio climático puede significar un incremento en la temperatura que puede afectar la diversidad biológica de los ecosistemas fluviales, favoreciendo la llegada de especies propias de aguas más cálidas. La variación de temperatura puede también afectar las relaciones tróficas y el metabolismo del sistema. En el presente estudio, se analizó el efecto de 2-4 °C de aumento de la temperatura del agua sobre el ensamble de diatomeas y el metabolismo del río Tota (alta montaña andina). Para este propósito, se utilizaron canales artificiales de recirculación, en los que diariamente se midieron variables fisicoquímicas (pH, conductividad, temperatura, oxígeno disuelto y velocidad del agua), se recolectaron e identificaron diatomeas, se midió la clorofila-a y el metabolismo mediante cámaras recirculantes. Se encontraron diferencias significativas entre las variables fisicoquímicas medidas. Aunque no se pudo detectar diferencias significativas en la variables respuesta atribuibles al aumento de la temperatura, si hubo respuestas cualitativas en la clorofila y en el metabolismo. El trabajo experimental representa un aporte para el estudio del impacto del aumento de temperatura sobre los sistemas lóticos de alta montaña en Colombia. Los resultados ilustran los posibles cambios que se pueden registrar en los sistemas de alta montaña andina como consecuencia del cambio climático.

ABSTRACT The variation in temperature associated with climate change in the tropics may affect biodiversity of river ecosystems, favoring the arrival of warmer water species. The variation in temperature can also affect the trophic relationships and metabolism of the river ecosystem. In the present study, we sought to determine the effect of 2-4 °C increase of water temperature in the river Tota (Andean high mountain) on the diatoms assemblage and river metabolism. For this purpose, artificial recirculation channels were used, and physicochemical variables (pH, conductivity, temperature, dissolved oxygen and water velocity) were daily measured, diatoms were collected and identified, chlorophyll-a was measured, and metabolism was estimated by means of recirculating chambers. We find significant differences in the physicochemical variables. Qualitative changes in chlorophyll and metabolism were observed, but significant differences in response variables attributable to the increase in temperature could not be detected. The experimental work represents an input to studies about temperature increase impact over high mountain lotic systems. The results illustrate the possible changes that can be recorded in the Andean high mountain systems as a result of climate change.

Measuring of the Chlorophyll a Fluorescence in Calcium Alginate-Encapsulated Algae

RESUMEN La inmovilización de las algas tiene múltiples aplicaciones, tales como la biorremediación del agua y la producción de metabolitos. Una de las variables que se puede determinar en las algas inmovilizadas es la fluorescencia de la clorofila a, debido a que este parámetro está relacionado con la respuesta fisiológica de estos organismos. Por ello, el objetivo de este estudio fue explorar un método para la medición de la fluorescencia de la clorofila a en algas encapsuladas en esferas de alginato de calcio. Con este fin, se cultivaron dos especies de microalgas (Scenedesmus ovalternus LAUN 001 y Parachlorella kessleri LAUN 002) en monocultivos, tanto en condiciones de cultivo libres (10 mL de la preparación algal en 250 mL de Medio Básico de Bold), como encapsuladas (250 esferas de alginato de calcio en 250 mL de Medio Básico de Bold). Se realizaron diferentes protocolos de medición de la fluorescencia de la clorofila a del fotosistema II (PSII) variando a) el tiempo de preadaptación a la oscuridad (10, 15 y 30 min), b) la intensidad de luz generada por fluorómetro no modulado (entre 1000 y 3500 |jmoles m-2 s-1), y c) el tiempo de exposición a la luz actínica (1, 2 y 5 s). Se lograron establecer como condiciones óptimas para la medición de la eficiencia cuántica potencial del fotosistema II (Fv/Fm) en las algas encapsuladas las siguientes: a) 30 min de preadaptación a la oscuridad; b) 3000 |jmoles m-2 s-1, de intensidad lumínica generada desde el fluorómetro; y c) 1 o 2 s de exposición a la luz actínica. Se encontraron los siguientes valores en la Fv/Fm en condiciones no estresantes: 0,760 a 0,764 para S. ovalternus y 0,732 a 0,748 para P. kessleri. Esta metodología permite observar algunos cambios en la actividad fotoquímica relacionados con variaciones de los factores bajo los cuales se encuentran las algas inmovilizadas.

ABSTRACT Immobilization of algae has many applications, such as water bioremediation and production of metabolites. One of the variables that can be determined in the immobilized algae is chlorophyll a fluorescence, because this parameter is related to the physiological response ofthese organisms. Therefore, the objective ofthis study was to explore a method for measuring the chlorophyll a fluorescence in calcium alginate-encapsulated algae. To do this, two species of microalgae (Scenedesmus ovalternus LAUN 001 and Parachlorella kessleri LAUN 002) were grown in monocultures in both free culture conditions (10 mL of algae preparation in 250 mL of Basal Bold Medium) and encapsulated (250 spheres in 250 mL of Basal Bold Medium). Different measurement protocols of chlorophyll a fluorescence of photosystem II (PSII) were performed by varying a) the preadaptation time to darkness (10, 15 and 30 min), b) the light intensity of the non-modulated fluorometer (between 1000 and 3500 Llmoles m-2s-1), and c) the time of exposure to actinic light (1, 2 and 5 s). The optimal conditions for the measurement of the maximum quantum yield ofPSII (Fv/Fm) in encapsulated algae were established as follow: a) 30 min of preadaptation time; b) 3000 Llmoles m-2s-1 of the fluorometer light intensity; and c) 1 to 2 s of exposure to actinic light. The following values in the photochemical activity of algae in non-stressful conditions were found: 0.760 - 0.764 for S. ovalternus, and 0.732 - 0.748 for P. kessleri. This methodology allows to observe some changes in the photochemical activity related with variations in the factors under which are the immobilized algae.

**Spatial Analysis of Diseases Incidence in Different Cocoa Genotypes (Theobroma cacao L.) in Yopal (Casanare), Colombia**

RESUMEN Las enfermedades "pudrición negra del fruto" y "moniliasis" son reportadas como limitantes en plantaciones de cacao en Colombia. Fueron evaluados los patrones espaciales de incidencia para estas dos enfermedades en un cultivo de cacao durante un monitoreo de trece semanas en campo. Semivariogramas e interpolación kriging fueron usados para analizar el comportamiento espacial de "pudrición negra del fruto", los estadísticos Join Count e Indice de Moran se emplearon para estudiar el comportamiento espacial de "moniliasis". La incidencia de "pudrición negra del fruto" presentó estructura de dependencia espacial de acuerdo a los semivariogramas durante el tiempo de evaluación, mientras que la autocorrelación espacial de sitios de infección de "moniliasis" se distribuyó de forma aleatoria entre las plantas de cacao según el Indice de Moran. El rango de dispersión estimado de "pudrición negra del fruto" varió entre 21,74 y 40,23 m y los mapas kriging evidenciaron el progreso espacio-temporal de la enfermedad durante las semanas evaluadas. Las condiciones experimentales dadas y la aproximación de los análisis espaciales, contribuyeron al entendimiento de la dinámica espacial de dos enfermedades limitantes en tres clones de cacao en la Orinoquía Colombiana.

ABSTRACT "Black pod" and "frosty pod" diseases are reported as limiting in cocoa plantations in Colombia. Spatial patterns of incidence for these two diseases were evaluated during a thirteen weeks long period of monitoring in the field. Semivariogram and kriging interpolation were used to analyze the spatial behavior of "black pod" and Join Count and Moran's Index statistics were used to analyze the spatial behavior of "frosty pod". The incidence of "Black pod" has a spatial dependence structure according to semivariogramas during the evaluation time, while spatial autocorrelation of "moniliasis" infection sites was randomly distribuited among cocoa plants according to the Moran's Index. The estimated dispersion range of "Black pod" was from 21.74 to 40.23 m y the kriging maps showed the spatio-temporal progression of the disease during the evaluated weeks. The experimental conditions given and spatial analysis approach, contributed to the understanding of the spatial dynamics of two limiting diseases in three clones of cocoa in the Colombian Orinoquia.

**Bee pollination in Syagrus orinocensis (Arecaceae) in the Colombian Orinoquia**

RESUMEN La ecología de la polinización de Syagrus orinocensis fue estudiada durante tres períodos reproductivos, en un bosque de piedemonte en Casanare, Orinoquia colombiana. Syagrus orinocensis crece hasta 10m., produce de una a cuatro inflorescencias bisexuales aunque ocasionalmente son unisexuales. Las bisexuales presentan flores estaminadas y pistiladas agrupadas en tríadas, y las unisexuales llevan sólo estaminadas en díadas. Las inflorescencias protándricas abren de día, y permanecieron activas 26 días; la fase masculina se extendió los primeros 15 días, siguió una fase inactiva por ocho días, y finalmente, la fase pistilada por tres días. Las inflorescencias fueron visitadas por 43 especies de insectos de los órdenes Coleoptera, Hymenoptera y Diptera. Los insectos visitaron las inflorescencias en fase masculina, donde buscaban polen y lugares para reproducirse, mientras que en la fase femenina buscaban néctar. Los polinizadores más efectivos fueron abejas meliponinas (Apidae, Meliponini), que transfirieron adherido a su cuerpo el 83 % del polen. La presencia, constancia y eficiencia de abejas durante el estudio son evidencia sólida de melitofilia en palmas. Este caso de melitofilia permitió proponer los criterios para redefinir este tipo de polinización en palmas silvestres neotropicales.

ABSTRACT The pollination ecology of the Syagrus orinocensis was studied in the course of three consecutive yearly flowering seasons in a foothill forest in Casanare, Colombian Orinoco region. Syagrus orinocensis palms grow up to 10 m high and produce one to four bisexual, occasionally unisexual, inflorescences. The bisexual inflorescences bear staminate and pistillate flowers arranged in triads, whereas the unisexual inflorescences carry only staminate flowers in dyads. The inflorescences are protandric and open during daytime, remaining active for 26 days. The male phase extends for the first 15 days, which are followed by 8 days of an inactive phase; the pistillate phase lasts up to three days. The inflorescences of S. orinocensis were visited by 43 species of insects belonging to the orders Coleoptera, Hymenoptera and Diptera. The presence of anthophilous insects was primarily restricted to the male phase of anthesis, during which the visitors searched for pollen and breeding sites; those which visited inflorescences during the female phase seeked out nectar. The most effective pollinators of S. orinocensis were stingless bees (Apidae, Meliponini), as they transferred in average 83% of the pollen that reached receptive inflorescences. The presence, constancy and efficiency of stingless bees during this study constitute solid evidence of melittophily in S. orinocensis and allows us to propose criteria to redefine this pollination syndrome in Neotropical wild palms.

**Liver Melanomacrophages and Gluthation S-Transferase Activity in Leptodactylus chaquensis (Anura, Leptodactylidae) as Biomarkers of Oxidative Stress Due to Chlorpyrifos Exposition**

RESUMEN Se cuantificaron y compararon los melanomacrófagos (MM) y la actividad de la enzima Glutatión S-Transferasa (GST) en hígados de ejemplares adultos de Leptodactylus chaquensis (Anura, Leptodactylidae) colectados en un cultivo de arroz (CA) (siete días posteriores a la aplicación de clorpirifos, CPF) y en un sitio de referencia (SR) en el departamento San Javier, provincia de Santa Fe (Argentina). El análisis histológico reveló una mayor cantidad (p = 0.028) y área ocupada por MM (p = 0.017) y se registró una inhibición en la actividad de la GST (p = 0.030) en individuos del CA respecto a los del SR. Los efectos descriptos evidencian el riesgo ecotoxicológico para los anuros en los cultivos de arroz con aplicaciones de CPF.

ABSTRACT We quantified and compared the hepatic melanomacrophage (MM) and glutathione S-transferase (GST) enzyme activity (two oxidative stress biomarkers) in the liver of Leptodatylus chaquensis adults (Anura, Leptodactylidae) collected in a rice field (CA) in San Javier department, Santa Fe (Argentina), seven days after the application of chlorpyrifos and in a reference site (SR). The histological analysis revealed a significant amount (p = 0.028) and area occupied by MM (p = 0.017) in livers of CA compared to SR. Furthermore, a significant inhibition of GST activity was recorded in the CA frogs compared to the SR (p = 0.030). The histopathological and enzymatic effects provide evidences of ecotoxicological risk for anurans in rice field with CPF application.

**NOTES ON THE MARINE ALGAE OF THE INTERNATIONAL BIOSPHERE RESERVE SEAFLOWER, CARIBBEAN COLOMBIA VI: NEW RECORDS OF BROWN ALGAE (PHAEOPHYCEAE)**

ABSTRACT Two species ofbrown algae (Phaeophyceae), Bachelotia antillarum and Dictyota humifusa are reported for the first time for the Archipelago of San Andrés, Providencia and Santa Catalina, part of the International Biosphere Reserve Seaflower.

RESUMEN Dos nuevos registros de algas pardas (Phaoephyceae), Bachelotia antillarum y Dictyota humifusa son registradas por primera vez para el Archipiélago de San Andrés, Providencia y Santa Catalina, Reserva Internacional de la Biosfera Seaflower.

Kinosternon scorpioides scorpioides (Testudines: Kinosternidae): A New Record from Northeastern Colombia

RESUMEN Presentamos un nuevo reporte de la tortuga escorpión Kinosternon scorpioides scorpioides para el departamento de Norte de Santander, Colombia. Este espécimen fue colectado en el bosque seco tropical del departamento, el cual es uno de los ecosistemas más amenazados y menos protegidos del país; esto agravado por problemas locales de contaminación y de transformación del uso del suelo, motivos por los que la presencia y conservación de K. s. scorpioides se encuentra en riesgo.

ABSTRACT We present a new record of the Scorpion Turtle Kinosternon scorpioides scorpioides for the department of Norte de Santander, Colombia. This specimen was collected in the tropical dry forest of the department, which is one of the most threatened and least protected ecosystems in the country; this exacerbated by local problems related with pollution and land-use transformation, threatening the presence and conservation of K. s. scorpioides.

**FIRST REPORT OF Chalepus dorni (Coleóptera: Chrysomelidae: Cassidinae) IN MAIZE CROPS OF MINAS GERAIS, BRAZIL**

ABSTRACT Chalepus dorni larvae were observed in commercial maize crops in the central region of the state of Minas Gerais, Brazil, during 20062007, 2008-2009 and 2010-2011 harvests. Early symptom of attack was characterized first by mines in the lower leaves of maize plants and later by the formation of necrotic areas. Although, there are reports of genus Chalepus in maize, this is the first record on the presence of C. dorni in maize in Minas Gerais, Brazil.

RESUMEN Se observaron larvas de Chalepus dorni en los cultivos comerciales de maíz en la región central de Minas Gerais durante los ciclos agrícolas 2006-2007, 2008-2009 y 2010-2011. El síntoma inicial se caracterizó por la presencia de minas en las hojas inferiores de plantas de maíz y la formación de áreas necróticas. Aunque existen informes de la presencia del género Chalepus en maíz, este es el primer registro de C. dorni en maíz en Minas Gerais, Brasil.