Infectio

Acinetobacter baumannii: problemátic and multiresistant

V National Metting of Investigation on Infectious Diseases: standing surety for future

Scientific therapeutic in Colombia: 19th century

**Molecular characterization of Acinetobacter baumannii isolations from a burns unit in a third level attention hospital in Bogotá**

Objetivo. En este estudio se realiza una descripción fenotípica y genética de aislamientos de Acinetobacter baumannii provenientes de la Unidad de Quemados del hospital Simón Bolívar de Bogotá durante diez meses de seguimiento. Materiales y métodos. Se tipificaron 25 aislamientos provenientes de pacientes y 3 ambientales mediante REP-PCR. Para la detección microbiológica de carbapenemasas se realizó la prueba de Hodge y el sinergismo de doble disco. Se determinaron los puntos isoeléctricos con isoelectroenfoque de las betalactamasas producidas. La detección de los genes bla OXA23, bla OXA24, bla VIM, bla IMP se realizó mediante PCR. Resultados. Según su genotipo, los aislamientos se reunieron en nueve grupos La genotipificación clasificó los aislamientos en nueve grupos relacionados con un índice de similitud superior a 0,85. En el grupo E, constituido por el 39,2% de los aislamientos, se detectó un clon conformado por los tres aislamientos ambientales y dos recuperados de pacientes. Se presentó resistencia a los carbapenémicos en 64,2% de los 28 aislamientos; de éstos, el 66,6% fueron resistentes, además, a todos los betalactámicos, aminoglucósidos y fluoroquinolonas probados. En 17 de los 18 aislamientos resistentes a imipenem se evidenció la presencia de carbapenemasas del tipo oxacilinasa. En todos los aislamientos resistentes a imipenem se detectó el gen bla OXA23 y la presencia de dos betalactamasas con puntos isoeléctricos de 6,3 y 6,9. Conclusiones. Se detectó un grupo endémico de A. baumannii que permaneció durante los 10 meses del estudio. La presencia de una carbapenemasa del grupo OXA23 fue un factor determinante de la resistencia a los carbapenémicos. Sin embargo, los resultados microbiológicos permiten suponer la presencia de otros posibles mecanismos de resistencia.

Objective.This study is a fenotypical and genetical description of Acinetobacter baumannii carried out in a ten month follow-up at the Unidad de Quemados from the Hospital Simon Bolívar in Bogotá. Materials and methods. 25 patient and 3 environmental isolates were typified by REP-PCR. Hodges test and double disc sinergy were done for microbiologic carbapenemase detection. Isoelectric points were determined by betalactamases isoelectric focusing. Gene bla OXA23, bla OXA24, bla VIM, bla IMP detection was carried out through PCR. Results. Isolate genotypification allowed their classification in nine groups based on similarities greater than 0.85. The E group consisted of 39.2% of the isolates, a clone formed by three environmental isolates and two recovered from patients. 64.2% out 28 isolates displayed carbapenem resistance, and 66.6% of them were also resistant to betalactams, aminoglycosides and fluoroquinolones. Oxacilinase carbapenemase presence was evident in 17 of 18 isolates resistant to imipenem. Gene bla OXA23 and two betalactamases were detected in isolates resistant to imipenen, with 6.3 and 6.9 isoelectric points. Conclusions. An endemic group of A. baumannii was detected in the 10 month study duration. OXA23 carbapenemase presence was an important factor for carbapenem resistance; however, microbiologic results allow us to assume the possible presence of other resistance mechanisms.

The rabbit as animal model of corneal infection by Acantamoeba polyphaga

Objetivo. Evaluar el conejo inmunosuprimido sistémica y tópicamente, como modelo animal en infecciones de la córnea por Acanthamoeba castellani y Acanthamoeba polyphaga. Materiales y métodos. El trabajo se realizó en dos etapas. La primera fue exploratoria, para observar la virulencia de las dos especies de Acanthamoeba, para las córneas de conejos. Se seleccionaron dos machos de raza Nueva Zelanda, de un mes de edad y 2 kg de peso. Los ojos de cada animal se inocularon con diferentes concentraciones de trofozoítos obtenidos de cultivo axénico. Como en esta fase la especie que mostró mayor virulencia fue A. polyphaga, en la segunda fase se les aplicó una concentración de 10(6) trofozoítos de esta especie, previa inmunosupresión tópica con betametasona subconjuntival y acetato de prednisolona, y sistémica mediante aplicación intramuscular de dexametasona. La inoculación de A. polyphaga se realizó a los 15 días después de la inmunosupresión, con 1 x 10(6) trofozoítos en el ojo derecho de 20 conejos; el ojo izquierdo se tomó como control. A los 90 días después de la infección, se sacrificaron los conejos, se enuclearon los ojos y se disecó la córnea para el estudio histopatológico. Resultados. La manifestación clínica fue una opacidad que persisitió hasta los 90 días después de la inoculación. En la histopatología se encontró una reacción inflamatoria inespecífica, con macrófagos, linfocitos y monocitos rodeados por material eosinofílico, hallazgo diferente a lo registrado por otros autores, pero no se observaron quistes ni trofozoítos. Conclusión. A pesar del esquema de inmunosupresión utilizado y de que la cepa de A. polyphaga invadió las córneas de hámster in vitro, no fue posible hacerlo en el conejo. La opacidad de la córnea no coincide con la respuesta descrita por otros autores.

The purpose of this work was to evaluate both the systemic and topical immunosupressed rabbit as an animal model for corneal infections by Acanthamoeba castellani and A. polyphaga. Materials and methods. The study was carried out in two phases, an initial exploratory one two observe the virulence of the two Acanthamoeba species studied, for which two male New Zealand rabbits were used, and in the second one rabbits were inoculated with A. polyphaga trohozoites, which showed the greatest virulence in the first phase, after immunosuppressive topical treatment with subconjunctival betametasone and topical prednisolone acetate. A. polyphaga was inoculated 2 weeks after immunosuppression with 1 x 10 6 trophozoites in the right eye of 20 rabbits; the left eye was left as a control. 90 days postinoculation the rabbits were euthanized, their eyes enucleated and studied through histopathology. Results. The clinical presentation was a corneal opacity persisting until 90 days postinoculation. The histological study showed an unspecific inflammatory reaction, with macrophages, lymphocytes and monocytes, surrounded by eosinophilic material, findings that differ to those reported by other authors, but no trophozoites nor cysts were observed. The corneal opacity did not coincide with the response decribed by other authors. Conclussion. Despite the immunosuppressive drug regime used, the experimental infection could not be achieved in rabbits. The corneal opacity did not coincide with the response decribed by other authors.

**Resistance mechanisms to carabapenems in P. aeuriginosa, Acinetobacter baumannii and Enterobacteriaceae and strategies for prevention and control**

La resistencia a carbapenem es un evento poco común, especialmente en miembros de la familia Enterobacteriaceae. Sin embargo, en los últimos años han aumentado los reportes de cepas de Enterobacteriaceae resistentes a carbapenem. Por otro lado, la resistencia a carbapenem es más frecuente en Pseudomonas aeruginosa y Acinetobacter baumannii. Las investigaciones han demostrado que para adquirir resistencia a los carbapenem se requiere de la combinación de varios mecanismos de resistencia. La combinación más importante reportada hasta el momento ha sido la producción de una ß-lactamasa junto a la disminución de la permeabilidad de la membrana externa por la pérdida de porinas. Las ß-lactamasas implicadas en la resistencia han sido principalmente AmpC y carbapenemasas. Las estrategias actuales para el control de la resistencia dentro de los hospitales siguen basandose en la estricta implementación de las barreras de contacto y el lavado de manos junto con el uso adecuado de los antibióticos disponibles.

Resistance to carbapenems is rare, particularly among members of the Enterobacteriaceae family. However, over the last years, reports of Enterobacteriaceae strains resistant to carbapenems have increased. On the other hand, carbapenem resistance in Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii is much more frequent. Research on the topic has demonstrated that to acquire carbapenem resistance, a combination of various resistance mechanisms is needed. The most important combination described to date has been the production of a ß-lactamase together with a decreased permeability through the outer membrane secondary to the loss of porins. The ß-lactamases involved in this resistance have been mainly the AmpC type ß-lactamases and the carbapenemases. Current strategies for resistance control within hospitals are still based on a strict implementation of contact barriers and hand washing associated with a correct use of the available antibiotics.

Zoonotic **bacteremia caused by Bergeyella zoohelcum in a newborn from Monteria**

Bergeyella zoohelcum es un patógeno zoonótico principalmente asociado a mordeduras causadas por perros o gatos y es el único representante del género Bergeyella. En este estudio se reporta el aislamiento de B. zoohelcum de un neonato con bacteriemia. Las pruebas de identificación bioquímica demostraron que el aislamiento fue B. zoohelcum, un bacilo Gram negativo que pocas veces se asocia con infecciones en humanos. La capacidad de diseminación e invasión de este patógeno oportunista mostrada en este estudio y la posibilidad de infectar heridas por mordedura de perros o gatos es alta y debe tenerse en cuenta.

Bergeyella zoohelcum is a zoonotic pathogen mainly associated with dog or cat bites and, at present, it is the only representative of the genus Bergeyella. We report the isolation of Bergeyella zoohelcum from a newborn with bacteremia. Biochemical analysis indicated that this isolate was B. zoohelcum, a gramnegative bacillus that is rarely associated with infections in humans. The ability for dissemination and invasion of this opportunist pathogen is shown in this study and, also, the possibility of dog or cat bite wound infection is high and must be taken into consideration.