CES Medicina Veterinaria y Zootecnia

Bienestar animal: más que una moda

In vitro methane production from two tropical grasses alone or in combination with Leucaena leucocephala or Gliricidia sepium

La percepción del cambio climático como uno de los grandes problemas ambientales del siglo XXI viene creciendo en las últimas décadas. La emisión de metano por fermentación ruminal es una pérdida de energía potencialmente utilizable. El objetivo fue estimar las emisiones de metano de forrajes usados en dietas para alimentar bovinos. Las dietas evaluadas provenían de un sistema silvopastoril intensivo (SSPi) con leucaena (Leucaena leucocephala; Leu) y pasto guinea (Megathyrsus maximus; Gui) y de confinamiento con matarratón (Gliricidia sepium; Mat) y pasto ángleton (Dichantium aristatum; Ang). Muestras representativas de los forrajes fueron analizadas por su contenido de nutrientes; las emisiones de metano de los forrajes solos y sus mezclas (90:10, 80:20 y 70:30, teniendo mayor participación las gramíneas) fueron medidas in vitro, mediante la técnica de producción de gas. La degradación de la materia seca se midió a las 24, 48, 72 y 96 h. Las leguminosas tuvieron mayores contenidos de proteína y grasa bruta; mientras que las gramíneas, mayores contenidos de fibra insoluble en detergente neutro y ácido y cenizas. La mayor producción de gas a las 96 h fue para Gui70-Leu30 (156 ml) y la menor fue Leu100 (P≤0,05; 121 ml). Para el sistema en confinamiento, la acumulación de gas de Ang70-Mat30 y Ang80-Mat20 a partir de a las 48 horas fueron superiores a los demás tratamientos (P<0,05). Las leguminosas mostraron mayores tasas de degradación que las gramíneas (P≤0,05). En ambos sistemas de producción no se encontraron diferencias significativas en la pérdida de energía digerida en forma de metano.

Climate change perception in recent decades has been growing as one of the major environmental issues of the XXI century. Methane emissions by rumen fermentation represent a loss of potentially usable energy. The objective of this study was to estimate methane emissions from various forages used in beef cattle diets. The diets evaluated corresponded to an intensive silvopastoral system (SSPi) with Leucaena (Leucaena leucocephala, Leu) and Guinea grass (Megathyrsus maximus; Gui) and a confinement system with Matarratón (Gliricidia sepium; Mat) and Angleton grass (Dichanthium aristatum; Ang). Representative forage samples were analyzed for nutrient contents. Methane emissions of individual forages and forage mixtures (90:10, 80:20, and 70:30, for grass:forage, respectively) were measured in vitro using the gas production technique. Dry matter degradation was measured at 24, 48, 72, and 96 h. Legumes had higher protein and crude fat content than grasses, while grasses had higher neutral detergent fiber, acid detergent fiber, and ash. The mixture composed by Gui70 - Leu30 had the highest gas production at 96 h (156 ml), while the lowest corresponded to Leu100 (P≤0.05; 121 ml). Regarding the confinement system results, gas accumulation after 48 hours by Ang70 - Mat30, and Ang80 - Mat20 were higher than the other treatments (P<0.05). Legumes had higher degradation rates than grasses (P≤0.05). No significant differences were found for methane losses between both production systems.

A percepção da mudança climática como um dos grandes problemas ambientais do seculo XXI está aumentando nas últimas décadas. A emisão de metano por fermentação ruminal é uma perda de energia potencialmente utilizavel. O objetivo foi estimar as emisões de metano de forragens utilizados em dietas para alimentar bovinos. As dietas avaliadas vieram de um sistema silvopastoril intensivo (SSPi) com leucaena (Leucaena leucocephala; Leu) e capim-mombaça (Megathyrsus maximus; Gui); e de confinamento com gliricídia (Gliricidia sepium; Mat) e a pastagem ángleton (Dichantium aristatum; Ang). Amostras representativas das forragens foram analisadas por seu conteúdo de nutrientes; as emissões de metano das forragens semeadas em monocultivo e misturadas (90:10, 80:20 e 70:30, tendo maior participação às gramíneas) foram medidas in vitro, mediante a técnica de produção de gás. A degradação da matéria seca estimou-se ás 24, 48, 72 e 96 h. As leguminosas tiveram maiores conteúdos de proteína e gordura bruta; enquanto as gramíneas tiveram maior fibra insolúvel em detergente neutro e azedo e cinzas. A maior produção de gás ás 96 h foi para Gui70-Leu30 (156 ml) e a menor foi Leu100 (P≤0,05; 121 ml). Para o sistema em confinamento, a acumulação de gás de Ang70-Mat30 e Ang80-Mat20 a partir das 48 horas foram superiores aos demais tratamentos (P<0,05). As leguminosas demonstraram maiores taxas de degradação que as gramíneas (P≤0,05). Nos dois sistemas de produção não se encontraram diferenças significativas na perda de energia digerida em forma de metano.

Molecular expression of villin in jejunum of weaned pigs after oral intake of LPS from E. coli

Resumen Con el objetivo de evaluar el efecto la adición de lipopolisacárido LPS de E. coli sobre la expresión molecular de vilina en yeyuno de lechones posdestete, se sacrificaron 52 lechones escalonadamente los días 1 (21 días de edad, día del destete), 5, 7 y 10 posdestete, y se les extrajo completamente el yeyuno para la evaluación de la expresión molecular de vilina. Para inducir la inflamación intestinal los animales fueron alimentados con una dieta basal, adicionada con cuatro niveles de LPS (0, 0.3, 0.5 y 1.0 µg/mg de alimento). El diseño estadístico utilizado fue de bloques al azar en arreglo factorial de 4X4. Se observó una disminución (P<0.01) en la expresión molecular de vilina en los animales que consumieron la dieta con mayor nivel de inclusión de LPS. El LPS de E. coli disminuye la expresión de vilina, lo que está directamente implicado en los cambios morfológicos intestinales, específicamente en la disminución de la altura y el aumento del el ancho de las vellosidades. Este efecto probablemente contribuye a la disminución de la absorción intestinal de nutrientes y a la presentación del síndrome de diarrea posdestete.

Abstract This experiment evaluated the effect of oral intake of E. coli lipopolysaccharide (LPS) by weaned pigs on the molecular expression of villin in jejunum. A total of 52 pigs were used. Pigs were sequentially slaughtered to take the jejunum on days 1 (weaning day, at 21 days of age), 5, 7, and 10 post-weaning. Intestinal inflammation was induced by feeding the animals a basal diet supplemented with one of four LPS levels (0, 0.3, 0.5, and 1.0 µg/mg feed). A completely randomized block design was used in 4X4 factorial arrangement. Animals fed the diet with the highest LPS level of inclusion showed a decreased (P<0.01) molecular expression of villin. In conclusión, LPS from E. coli decreases villin expression, which is directly implicated in intestinal morphology changes, specifically decreasing height and increasing the width of the villi. This effect probably contributes to decreased intestinal absorption of nutrients and also to ocurrence of postweaning diarrhea syndrome.

Resumo Teve-se como objetivo avaliar a adição de lipopolissacarídeos LPS de E. coli sobre a expressão molecular da Vilina no jejuno de leitões pós-desmame. Para isto, abateram-se 52 leitões nos dias 1, 5, 7 e 10 após desmame (desmame aos 21 dias de idade, este é o dia zero) e extraiu-se lhes completamente o jejuno para fazer a avaliação da expressão molecular da Vilina. Para induzir a inflamação intestinal os animais foram alimentados com uma dieta basal, adicionada com quatro níveis de LPS (0, 0.3, 0.5 y 1.0 µg/mg de alimento). O delineamento estatístico utilizado foi de blocos ao acaso com desenho fatorial de 4x4. Observou-se uma diminuição (P<0.01) na expressão molecular da Vilina nos animais que consumiram a dieta com maior nível de inclusão de LPS. O LPS da E. coli diminuiu a expressão da Vilina, fato este que explica as mudanças morfológicas intestinais, especificamente na diminuição da altura e o aumento da largura das vilosidades. Este efeito provavelmente contribuiu com a diminuição da absorção intestinal de nutrientes e à apresentação da síndrome de diarreia pós-desmame.

Ruminal degradation kinetics of the corn silage with different levels of inclusion of vinasse

Resumen La cinética de degradación ruminal de los componentes nutricionales del ensilaje depende de los cambios bioquímicos durante el proceso de fermentación. Estos cambios afectan la tasa de degradación y el valor nutricional del material ensilado. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto de la adición de vinaza en el ensilaje de maíz sobre la cinética de degradación de la materia seca (MS), proteína cruda (PC), fibra detergente neutra (FDN), fibra detergente ácida (FDA) y hemicelulosa (HEM). La inclusión de vinaza en el ensilaje de maíz disminuyó la fracción soluble y la degradabilidad efectiva de la MS cuando comparada con el tratamiento control. La extensión de la degradación de la PC fue favorecida por la participación de la vinaza en el ensilaje. No fue verificado un claro efecto de la inclusión de vinaza sobre la degradación de los componentes de la pared celular del maíz.

Abstract The ruminal degradation kinetics of silage depends on the biochemical changes occurring during the fermentation process. These changes affect the rate of degradation and the nutritional value of silage. The objective of this work was to determine the effect of the addition of vinasse in corn silage on the kinetics of degradation of dry matter (DM), crude protein (CP), neutral detergent fiber (NDF), acid detergent fiber (FDA) and hemicellulose (HEM). The inclusion of vinasse in corn silage decreased the soluble fraction and effective degradability of DM when compared to control treatment. The PC degradation was enhanced by the participation of vinasse in the silage. It wasn't verified a clear effect of the vinasse inclusion on cell wall degradation in the corn silage.

Resumo A cinética de degradação ruminal dos componentes nutricionais da silagem depende das mudanças bioquímicas ocorridas durante o processo de fermentação. Estas mudanças afetam a taxa de degradação e no conteúdo nutricional do material ensilado. O objetivo deste trabalho foi determinar o efeito da inclusão de vinhaça na silagem de milho sobre a cinética de degradação da matéria seca (MS), proteína bruta (PC), fibra detergente neutro (FDN), fibra detergente ácido (FDA) y hemicelulose (HEM). A inclusão de vinhaça na silagem de milho diminuiu a fração solúvel e a degradabilidade efetiva da MS quando comparada com o tratamento controle. A extensão da degradação da PC foi favorecida pela participação da vinhaça na silagem. Não foi verificado um claro efeito da inclusão da vinhaça sobre a degradação dos componentes da parede celular do milho.

Evaluation of screening tests for antimicrobial residues in milk from individual cows treated with a combination of penicillins G and streptomycin

Abstract Background: in Colombia, the law (Resolution 1382, 2013) prohibits the sale of milk that contains any antimicrobial drug residues, although no specific official screening tests and detection limits have been specified. At present, milk with positive results to both the Delvotest® and Snap® assays is simply rejected. To avoid contaminating bulk tanks with milk from individually treated cows, producers would benefit from having on-farm screening tests to conduct their own quality controls. In addition, on-site testing would allow farmers to check if the withdrawal times of commercially-available generic products are in accordance with labeled recommendations. Material and Methods: In this study, two commonly used rapid detection tests (Delvotest® and SNAP® specific for beta-lactams) were used on milk from 39 subclinical mastitic Holstein cows that were prescribed with daily intramuscular injections of a commercial suspension containing 8.000.000 IU of penicilin G (75% procaine penicilin G, 25% potasium penicillin) and 8 g of streptomycin sulfate, for a total of 4 days. Cows were individually milked and samples collected every 12 hours the day before, and for 3 days after the recommended withdrawal time of three days post-treatment. To inactivate the potential action of natural inhibitors of microbial growth that may be present in milk (ie., lysozyme and lactoferrin), the results of the Delvotest® were compared before and after milk samples were subjected to heat treatment (82°C for 5 minutes). Results: When the Delvotest® was used as per manufacturer's instructions (i.e., without heating), 7 of 39 cows were positive for one more day past the recommended withdrawal period. However, the results of the Snap® specific for beta-lactams and Delvotest® post-heating showed that only 2 of those 7 cows were positive, suggesting that 5 animals gave false positive results. For the 312 milk samples analyzed, a high degree of concordance was observed (Kappa coefficient=0.74±0.1) between the Snap® and Delvotest® post-heating. Conclusions: Considering that the streptomycin in this product is known to be eliminated faster than penicillin-G, the results suggest that the efficacy of the Delvotest® (after heat treatment) is similar to that of the Snap® beta-lactams for the detection of penicillin residues. However, when the Delvotest® was not preceded by heat treatment to inactivate potential natural inhibitors, it yielded a high number of false-positive results. The results also showed that in 95% (37/39) of the cows treated with this commercial product, the labeled instructions of a 3 day withdrawal period were adequate for compliance within the law.

Resumen En Colombia, la ley (Resolución 1382, 2013) prohíbe la venta de leche que contenga residuos de cualquier medicamento antimicrobiano, aunque no se especifican pruebas oficiales ni límites de detección que deban cumplir. Actualmente, la leche que emite resultados positivos a los kits del Delvotest® y Snap® simplemente es rechazada. Para evitar contaminar tanques de acopio con leche de vacas tratadas, los productores se beneficiarían de tener pruebas in situ que les permitan hacer sus propios controles. Además, ello permitiría comprobar si los tiempos de descarte de productos comerciales cumplen con las recomendaciones de los insertos. En este estudio se evaluaron dos pruebas de detección rápida (Delvotest® y SNAP® específico parar beta-lactámicos) en leche de 39 vacas con mastitis subclínica que fueron tratadas con inyecciones diarias intramusculares de una suspensión comercial de 8.000.000 UI de penicilina G (75% penicilina procaínica G, 25% penicilina potásica) y 8 g de sulfato de estreptomicina, durante 4 días. Las vacas se ordeñaron manualmente y recolectaron muestras de leche, cada 12 horas, por 1 día antes y 3 después del tiempo de retiro recomendable de 3 días post-tratamiento. Para inactivar la acción de inhibidores naturales del crecimiento bacteriano que pueden estar presentes en leche (ej, lisozima y lactoferrina), los resultados del Delvotest® se compararon antes y después de que las muestras de leche fuesen sometidas a calentamiento (82°C por 5 minutos). Cuando el Delvotest® se usó de acuerdo a las instrucciones de la compañía, es decir, sin calentamiento, 7 de 39 vacas dieron positivas por ≥ 1 días pasado el tiempo de retiro recomendado. Sin embargo, los resultados del Snap® y Delvotest® post-calentamiento mostraron que sólo 2 de las 7 vacas eran positivas, sugiriendo que 5 animales estaban dando falsos positivos. En las 312 muestras de leche analizadas se obtuvo un alto grado de concordancia (coeficiente Kappa = 0.74±0.1) entre el Snap® y el Delvotest® post-calentamiento. En conclusión, los resultados sugieren que la eficacia del Delvotest® (post-calentamiento) es similar a la del Snap® específico para beta-lactámicos en lo que respecta a detección de residuos de penicilina. Sin embargo, cuando el Delvotest® no iba precedido de calentamiento para inactivar inhibidores naturales, se produjeron demasiados falsos positivos. Los resultados también mostraron que en el 95% (37/39) de las vacas tratadas con este producto, la recomendación de descarte por 3 días cumplía con la legislación vigente de no contener residuos.

Resumo Na Colômbia, a lei (Resolução 1382 de 2013) proíbe a venda do leite que tenha resíduos de qualquer medicamento antimicrobiano, embora não se especifiquem testes oficiais nem limites de detecção que devam se cumprir. Atualmente, o leite que emite resultados positivos aos Kits de Delvotest® e Snap® simplesmente é rejeitado. Para evitar contaminar os tanques de armazenamento com leite de vacas tratadas, os produtores beneficiar-se-iam de ter os testes in situ que lhes permita fazer seus próprios controles. Além, isto permitiria comprovar se os tempos de retiro do leite ao utilizar produtos comerciais cumprem com as recomendações da vide bula. Neste estudo avaliaram-se dois testes de detecção rápida (Delvotest® e SNAP® especifico parar beta-lactâmicos) no leite de 39 vacas com mastite subclínica que foram tratadas com injeções diárias intramusculares de uma suspensão comercial de 8.000.000 UI de penicilina G (75% penicilina procaína G, 25% penicilina potássica) e 8g de sulfato de estreptomicina durante quatro dias. Extraiu-se o leite das vacas com ordenha manual e se fez uma amostragem de leite (cada 12 horas) um dia antes e três dias depois do tempo de retiro do leite, que tinha como recomendável, na vide bula, três dias após final do tratamento. Para inativar a ação de inibidores naturais do crescimento bacteriano, que possam estar presentes no leite (ex. lisozima e lactoferrina), os resultados do Delvotest® compararam-se antes e depois de que as amostras de leite fossem sometidas a aquecimento (82°C durante 5 minutos). Quando o Delvotest® usou-se de acordo com as instruções da companhia, quer dizer, sem aquecimento, sete das 39 vacas deram positivas por ≥ 1 dia passado o tempo de retiro recomendado. Embora, os resultados do Snap® e Delvotest® após aquecimento do leite mostraram que só dois das sete vacas eram positivas, sugerindo que cinco animais estavam apresentando falsos positivos. Nas 312 amostras de leite analisadas obteve-se um alto grau de concordância (coeficiente Kappa = 0.74±0.1) entre o Snap® e o Delvotest® após aquecer o leite. Em conclusão, os resultados sugerem que a eficácia do Delvotest® (após o aquecimento do leite) é similar á do Snap ou especifico para beta-lactâmicos no que respeita a detecção de resíduos de penicilina. Embora, quando o Delvotest® não ia precedido do aquecimento do leite para inativar inibidores naturais, produziram-se muitos falsos positivos. Os resultados também demonstraram que o 95% (37/39) das vacas tratadas com este produto, estavam de acordo com a recomendação de descarte por três dias e cumpria com a legislação vigente de não conter resíduos.

Liver immunolocation of CYP P450 in an subacute toxicity experiment with Clorpirifos o,o-(3, 5, 6- trichloride -2-pyridyl phosphorotioato in young male tilapia **(Oreochromis spp)**

Resumen En Colombia son escasas las técnicas de diagnóstico implementadas con biomarcadores inmunohistoquímicos para realizar biomonitoreo de contaminación ambiental. Objetivo: Implementar una técnica inmunohistoquímica para inmunolocalizar CYP 1A en tejidos de peces, luego de realizar un experimento de exposición subaguda al Clorpirifos en tilapias juveniles machos. Métodos: el experimento de dosis subletal, se realizó en un sistema semiestático, con recambio diario del 50% del volumen de agua manteniendo la concentración correspondiente en cada grupo experimental mediante la adición de la mitad de la dosis hasta el día 28. Las concentraciones de Clorpirifos para la exposición fueron 4, 8, y 12 μg/L, en los grupos tratados y 0,0 μg/L en el grupo control. Se tomaron muestras para estudio histopatológico e inmunohistoquímico. Resultados: se encontró diferencia significativa (p<0,05) para algunas lesiones en el hígado, confirmando que este es un órgano de impacto de los efectos del Clorpirifos a bajas dosis. Se verificó la inducción de CYP 1A en el hepatocitos, endotelio y células biliares tanto de los animales expuestos como en los no expuestos. Desde el punto de vista multidimensional no se encontró diferencia estadística entre los tratamientos para las variables estudiadas. Conclusión: se implementó y normalizó una técnica de inmunohistoquímica para la inmunolocalización tisular de CYP 1A, que podrá utilizarse en futuras investigaciones para realizar biomonitoreo de contaminación en las cuencas hidrográficas de Colombia.

Abstract In Colombia the diagnostic techniques for implementing immunohistochemical biomarkers to fulfill biomonitoring of environmental contamination are limited. Objective: To implement an immunohistochemical technique to immunolocate CYP 1A in the tissue of fish, performing a subacute exposition experiment of Clofopirifos in the liver of young male tilapia. Methods: the sublethal dosage was carried out in semi-static state, with a daily refill of 50% of the water volume, maintaining the corresponding concentration in each group through the addition of half of the dosage until the 28th day. The Cloropirifos concentrations for the exposition were 4, 8, and 12 μg/L in the treated groups and 0.0 μg/L in the control group. Samples were taken for histopathological and immunohistochemical study. Results: A significant difference (p<0.05) for some liver lesions, confirming that it is an organ affected by low dosages of Cloropirifos. It verified that the induction of CYP 1A in hepatocyte, endothelium and biliary cells equally in exposed animals and those that weren't exposed. From a multidimensional perspective, no statistical difference was found between the treatments for the variables under study. Conclusion: this study implemented and normalized an immunohistochemical technique for the tissue immunolocation of CYP 1A that could be used in future investigations to fulfill biomonitoring of contamination in Colombia's hydrographic basins.

Resumo Na Colômbia são escassas as técnicas de diagnóstico realizadas com biomarcadores imuno-histoquímicos para realizar biomonitoramento da contaminação ambiental. Objetivo: Estandardizar uma técnica imuno-histoquímica para fazer imunolocalização do CYP 1ª em tecidos de peixes, logo de realizar um experimento de exposição subaguda ao Clorpirifós em machos juvenis de tilápia. Métodos: O teste da dose subletal realizou-se num sistema semiestático, com recambio diário de 50% do volume de água mantendo a concentração correspondente em cada grupo experimental mediante a adição da metade da dose até o dia 28. As concentrações de Clorpirifós para a exposição dos peixes foram 4, 8 e 12 μg/L, nos grupos tratados e 0,0 μg/L no grupo controle. Tomaram-se amostras para o estudo histopatológico e imuno-histoquímico. Resultados: Encontrou-se diferença significativa (p<0.05) para lesões no fígado, confirmando que este é um órgão que recebe diretamente o impacto dos efeitos do Clorpirifos em baixas doses. Verificou-se a indução de CYP 1A nos hepatócitos, endotélio e células biliares tanto nos animais que estiveram expostos ao Clorpirifós quanto nos animais que não estiveram expostos. Desde o ponto de vista multidimensional não se encontrou diferença estadística entre os tratamentos para as variáveis estudadas. Conclusão: Estandardizou-se e normalizou-se uma técnica de imuno-histoquímica para a imunolocalização tissular de CYP 1A, que poderá se utilizada em futuras pesquisas para realizar biomonitoramento da contaminação das bacias hidrográficas da Colômbia, além disto.

Design and evaluation of a PCR test for detection of Brucella spp. and Brucella abortus

Resumen Problema: el diagnóstico oportuno de la brucelosis, zoonosis que afecta ganado y trabajadores pecuarios, es difícil. Las pruebas serológicas Rosa de Bengala y ELISA, el hemocultivo y mielocultivo, tienen sensibilidades entre 15-70% dependiendo del estadío de la infección. El desarrollo de métodos diagnósticos rápidos, sensibles y específicos utilizando técnicas moleculares como la PCR, permite diagnosticar y tratar oportunamente esta enfermedad. Objetivo: Desarrollar y evaluar dos pruebas de PCR para detección de Brucella spp. y B. abortus. Materiales y métodos: se diseñaron y evaluaron iniciadores para detectar el gen ugpA utilizando Primer3, y otros reportados en la literatura. Se calculó sensibilidad y especificidad, usando 3 grupos (G) de muestras humanas y bovinas utilizando el teorema de Bayes: G1:30 muestras de suero y 30 de sangre de humanos sanos y 30 de suero y 30 de sangre de bovinos sanos, inoculadas con Brucella abortus; G2: 30 muestras de suero y 30 de sangre de humanos sanos y 30 de suero y de 30 sangre de bovinos sanos inoculadas con Salmonella Typhi, Escherichia coli, Klebsiella sp., Psudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae y Enterococcus sp. G3: 60 muestras de suero y 60 sangre de bovinos y 60 muestras de suero y 60 sangre de humanos asintomáticos. Resultados: se obtuvo una sensibilidad y especificidad de detección de Brucella sp. y Brucella abortus del 100% en muestras humanas y bovinas. Conclusiones: por la alta sensibilidad y especificidad encontradas en las pruebas de PCR estudiadas, se recomienda continuar un estudio clínico de aplicación para evaluar su comportamiento en muestras de pacientes y animales infectados.

Abstract Problem: brucelosis is a zoonosis that affects livestock and livestock workers. This disease is characterized by the difficulties for its early diagnosis. Sensitivity of marrow and blood cultures as well as serological tests (Rose Bengal and ELISA) ranges between 15 and 70%, depending on the stage of infection. Development of rapid, sensitive, and specific diagnostic methods using molecular techniques such as PCR would allow timely diagnose and treatment of the disease. Objective: To develop and evaluate two PCR tests for detection of Brucella spp. and B. abortus. Materials and methods: primers to detect ugpA gene were designed and evaluated using Primer3 and others reported in the literature. Sensitivity and specificity were calculated for 3 groups (G) of human and bovine samples using Bayes' theorem. G1 consisted of healthy human and healthy bovine samples (30 serum and 30 blood samples of each species); bovine blood samples were inoculated with Brucella abortus. G2 consisted of healthy human and healthy bovine samples (30 serum and 30 blood samples of each); bovine blood samples were inoculated with Salmonella typhi, Escherichia coli, Klebsiella sp., Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumonia, and Enterococcus sp. G3 consisted of 60 serum and 60 blood samples from asymptomatic bovines, as well as 60 serum and 60 blood samples from asymptomatic humans. Results: sensitivity and specificity of the PCR test to detect Brucella sp. and Brucella abortus reached 100% in human and bovine samples. Conclusiones: considering the high sensitivity and specificity observed in the PCR tests studied, we recommend doing a follow up of the test in a clinical trial to evaluate its performance in infected humans and animals.

Resumo Problema: é difícil o diagnostico oportuno da brucelose, zoonose que afeta o gado e os trabalhadores pecuários. Os testes serológicos Rosa de Bengala e ELISA, e a hemocultura e mielocultura têm sensibilidades entre 15 e 70% dependendo do estádio da infecção. O desenvolvimento de métodos diagnósticos rápidos, sensíveis e específicos utilizando técnicas moleculares como a PCR, permite diagnosticar e tratar oportunamente esta doença. Objetivo: desenvolver e avaliar dois testes de PCR para a detecção de Brucella spp. e B. abortus. Materiais e métodos. Desenharam-se e avaliaram-se iniciadores utilizando o software Primer3 para detectar o gene ugpA, também se avaliaram outros iniciadores reportados previamente na literatura. Calculou-se a sensibilidade e especificidade do teste por PCR usando três grupos (G) de amostras humanas e bovinas utilizando o teorema de Bayes: G1: 30 amostras de soro e 30 de sangue de humanos sãos e 30 de soro e 30 de sangue de bovinos sãos, inoculadas com Brucella abortus; G2: 30 amostras de soro e 30 de sangue de humanos sãos e 30 de soro e de 30 sangue de bovinos sãos inoculadas com Salmonella Typhi, Escherichia coli, Klebsiella sp., Psudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae e Enterococcus sp. G3: 60 amostras de soro e 60 de sangue de bovinos e 60 amostras de soro e 60 sangue de humanos assintomáticos. Resultados. Obteve-se uma sensibilidade e especificidade de detecção da Brucella spp. e Brucella abortus de 100% em amostras humanas e bovinas. Conclusões: pela alta sensibilidade e especificidade encontrada com o teste de PCR estudado, recomenda-se continuar um estudo clínico de aplicação para avaliar seu comportamento em amostras de pacientes e animais infetados.

Laparoscopy versus parapreputial laparotomy for the treatment of abdominal cryptorchidism in dogs

Resumen Objetivo: determinar diferencias en tiempo de cirugía, dolor y complicaciones entre criptorquidectomía por laparoscopia (CL) y criptorquidectomía por laparotomía medio ventral (CLMV) en caninos con criptorquidismo unilateral abdominal. Materiales y métodos: se utilizaron 11 pacientes, con peso promedio de 20 ± 9.6 kg y edad promedio de 21 ± 12.8 meses, distribuidos en grupos de 6 y 5 animales para realizarles CL y CLMV respectivamente. Se midió el tiempo quirúrgico total, el tiempo de extracción del testículo abdominal y el escrotal. La evaluación del dolor se realizó a las 0, 1, 2, 4, 6, 12 y 24 horas poscirugía, usando la escala de la Universidad de Melbourne (UMPS). Las complicaciones se monitorearon hasta 24 horas mediante valoración clínica y ultrasonografía. Resultados: la criptorquidia fue más común en razas puras y afectó principalmente el testículo derecho. El tiempo de cirugía fue significativamente menor usando CLMV para extraer el testículo abdominal. En la evaluación cualitativa del dolor, todos los pacientes presentaron nivel leve, excepto un paciente del grupo CLMV que presentó mayor dolor. Se encontró una diferencia estadística significativa a favor del grupo CL en la valoración del dolor a las 2 horas posquirúrgicas. Se detectó una complicación en un paciente del grupo CL a las 4 horas y tuvo que ser reintervenido. Conclusiones: ambos procedimientos produjeron dolor leve con diferencias estadísticamente significativas solo a las 2 horas. Se requirió menor tiempo de cirugía para la extracción del testículo abdominal realizando CLMV. La hemorragia posquirúrgica es una complicación a tener en cuenta al realizar CL.

Abstract Objective: to determine differences in the length of time of surgery, pain, and complications between laparoscopic cryptorchidectomy (CL) and cryptorchidectomy through mid-ventral laparotomy (CLMV) in dogs suffering from unilateral abdominal cryptorchidism. Materials and methods: 11 patients were used. The average weight of the dogs was 20 ± 9.6 kg, and the average age was 21 ± 12.8 months. Six and five dogs were assigned to CL and CLMV, respectively. Total surgery time and extraction time of abdominal and scrotal testis were measured. Pain evaluation was performed at 0, 1, 2, 4, 6, 12, and 24 hours after surgery using the pain scale developed by the University of Melbourne (UMPS). Complications were monitored during 24 hours by clinical assessment and ultrasonography. Results: cryptorchidism was more common in pure breeds and it affected mainly the right testicle. The operating time to remove the abdominal testis was significantly less using CLMV. Qualitative assessment of pain showed that all patients had mild pain, except for a patient in the CLMV group that showed higher pain. A statistically significant difference was found favoring the CL group in the assessment of pain at 2 h after surgery. A complication was detected in one patient of group CL four hours after surgery and was re-intervened. Conclusions: both procedures resulted in mild pain, with statistically significant differences only at 2 hours. CLMV took less time for removal of the testis. Post-surgery bleeding is a complication to consider when performing CL.

Resumo Objetivo: determinar diferenças no tempo de cirurgia, dor e complicações entre criptorquidectomia por laparoscopia (CL) e criptorquidectomia por laparotomía média ventral (CLMV) em caninos com criptorquidismo unilateral abdominal. Materiais e métodos: utilizaram-se 11 pacientes, com peso médio de 20 ± 9,6 kg e idade promedio de 21 ± 12,8 meses, distribuídos em grupos de seis e cinco animais para realizar lhes CL e CLMV respectivamente. Mediou-se o tempo quirurgico total, o tempo de extração do testículo abdominal e o escrotal. A avaliação da dor realizou-se as 0, 1, 2, 4, 6, 12 e 24 horas após cirurgia, utilizando uma escada de referencia da Universidade de Melbourne (UMPS). As complicações foram monitoradas ate às 24 horas mediante valoração clinica e ultrassonografia. Resultados: a criptorquidia foi mais comum em raças puras e afetou principalmente o testículo esquerdo. O tempo de cirurgia foi significativamente menor usando CLMV para extrair o testículo abdominal. Na avaliação qualitativa da dor, todos os pacientes apresentaram nível leve, exceto um paciente do grupo CLMV que apresentou muita dor. Encontrou-se uma diferença significativa (P<0,05) sendo menor a dor no grupo CL às 2 horas após cirurgia. Detectou-se uma complicação num paciente do grupo CL às 4 horas e teve que ser reintervenido. Conclusões: os dois procedimentos produziram dor leve com diferenças significativas só às 2 horas. Requereu-se menor tempo de cirurgia para a extração do testículo abdominal realizando CLMV. A hemorragia pós-operatória é uma complicação que deve ser tida em conta para realizar CL.

Indirect ELISA for diagnosing bovine fasciolosis from milk samples

Resumen Se estandarizó una prueba de ELISA para la detección de anticuerpos anti-F. hepatica en leche de bovinos. Se emplearon 80 muestras, de las cuales 44 se usaron como control positivo y 36 como control negativo. Como control de reactividad cruzada se utilizaron muestras de bovinos que presentaron en las heces huevos de un paramphistomido. La sensibilidad y especificidad diagnóstica de la prueba fueron del 80% y del 72,2% respectivamente, con un intervalo de confianza del 95%. Los resultados obtenidos son comparables con los reportados en estudios realizados en otros países. Se propone la prueba estandarizada como herramienta diagnóstica alternativa y de tamizaje en estudios epidemiológicos de fasciolosis.

Abstract We standardized an ELISA test for the detection of anti-F. hepatica antibodies in bovine milk. A total of 80 samples were used, of which 44 were used as positive controls and 36 as negative controls. Milk samples from bovines presenting paramphistomidae eggs in feces were used as cross-reactivity controls. Sensitivity and specificity of the diagnostic test were 80 and 72,2%, respectively, with 95% confidence interval. These results are comparable with those reported in studies conducted in other countries. We propose this standardized test as an alternative diagnostic and screening tool in epidemiological studies of fasciolosis.

Resumo Estandardizou-se um teste de ELISA para a detecção de anticorpos anti Fasciola hepatica no leite de bovinos. Empregaram-se 80 amostras, das quais 44 usaram-se como controle positivo e 36 como controle negativo. Como controle da reatividade cruzada utilizaram-se amostras de bovinos que apresentaram ovos de um paramphistomido nas fezes. A sensibilidade e especificidade diagnosticam do teste foi de 80 e 72% respectivamente, com um intervalo de confiança de 95%. Os resultados obtidos são comparáveis com os reportados em estudos realizados em outros países. Propõe-se o teste estandardizado como ferramenta diagnostica alternativa e de tamisado em estudos epidemiológicos de fasciolíase.

Serological evaluation of Leptospira interrogans in horses from an equestrian center in Linares province, Chile

Resumen La leptospirosis es una enfermedad bacteriana caracterizada por producir clínicamente en equinos signos clínicos inespecíficos como fiebre, anemia, depresión, y otros específicos, como aborto, muerte neonatal y uveítis recurrente. La finalidad del trabajo fue determinar la seroprevalencia en 55 equinos pertenecientes al Centro Ecuestre de la Escuela Artillería de Linares, Región del Maule. Las muestras (suero), fueron obtenidas de animales sin distinción de sexo o edad y analizadas mediante el método de Aglutinación Microscópica (MAT) para nueve serovares a títulos de dilución de 1/100 o superiores. Determinando una seropositividad general del 65,4%, distribuido en los serovares: Autumnalis (54,5%), Bratislava (52,7%), Canicola (20%), Copenhageni (12,7%) y Hardjo (7,3%), mientras que para Pomona, Grippothyphosa, Bataviae y Ballum no se obtuvieron sueros reaccionantes. Finalmente, no se observó diferencia estadística significativa (P≥0,05) en los individuos reaccionantes según sexo y edad, demostrándose que a mayor edad menor es la seropositividad.

Abstract Leptospirosis is a bacterial disease characterized in horses by nonspecific clinical signs such as fever, anemia, depression; and specific signs such as abortion, neonatal death, and recurrent uveitis. The objective was to determine seroprevalence in 55 horses from the equestrian center of Linares Artillery School, located in the Maule region. Serum samples were obtained from animals of both sexes and several ages. Samples were analyzed by Microscopic agglutination (MAT) for nine serovars with dilution titles of 1:100 or higher. The overall seropositivity was 65.4%, distributed in the following serovars: autumnalis (54.5%), bratislava (52.7%), canicola (20%), copenhageni (12.7%), and hardjo (7.3%); whereas reacting sera were not obtained for pomona, grippothyphosa, ballum, or bataviae. Finally, no statistically significant difference was observed between sex or age (P≥ 0.05). Seropositivity was lower in older than in younger horses.

Resumo A leptospirose é uma doença bacteriana caracterizada por produzir em equinos alguns signos clínicos inespecíficos, como febre, anemia, depressão; e outros específicos, como aborto, morte neonatal e uveíte recorrente. A finalidade deste trabalho foi determinar a soroprevalência em 55 equinos pertencentes ao Centro Equestre da Escola de Artilharia de Linares, região de Maule no Chile. As amostras (soro) foram obtidas de animais sem distinção de sexo ou idade e analisadas pelo método de aglutinação microscópica (MAT) para nove serovares a títulos de diluição de 1/100 ou superiores. Determinando uma seropositividade geral de 65,4%, distribuído nos serovares: Autumnalis (54,5%), Bratislava (52,7%), Canicola (20%), Copenhageni (12,7%) e Hardjo (7,3%), enquanto que para Pomona, Grippothyphosa, Bataviae e Ballum não se obtiveram soros reacionantes. Finalmente, não houve diferença significativa (P≥0,05) nos indivíduos reacionantes segundo sexo e idade, conferindo que a maior idade menor é a seropositividade.

X chromosome inactivation in mammalian embryonic development

Resumen La regulación de la expresión génica durante el desarrollo embrionario temprano requiere de múltiples y ordenados procesos epigenéticos que garanticen una correcta diferenciación y proliferación celular. La inactivación del cromosoma X es un proceso multiepigenético estrechamente ligado al desarrollo embrionario, que involucra el silenciamiento transcripcional de uno de los dos cromosomas X en las células de hembras mamíferas. El modelo embrionario mejor estudiado es el de ratón, donde se observan ciclos de inactivación y reactivación durante la formación del trofoectodermo y el epiblasto. En el trofoectodermo y el endodermo primitivo se observa una inactivación preferencial por el X paterno, mientras en la masa celular interna se observa una inactivación aleatoria, pudiendo inactivarse tanto el cromosoma X materno como el paterno. La inactivación del cromosoma X se observa también en la meiosis masculina, donde se observa un silenciamiento del cromosoma X, que perdura hasta la fertilización. En este artículo revisamos los eventos moleculares en la progresión de la inactivación, desde la gametogénesis hasta el blastocisto, y las características que regulan los procesos de inactivación y reactivación del cromosoma X en embriones de hembras mamíferas.

Abstract The gene expression regulation during embryonic development early requires multiple and ordered epigenetic processes that ensure a correct differentiation and cellular proliferation. The inactivation of the X chromosome is a multiepigenetic process closely linked to embryonic development, involving the transcriptional silencing of one of the two X chromosomes in mammalian females cells. The best studied embryonic model is the mouse, where inactivation and reactivation cycles are observed during the formation of the trophoectoderm and the epiblast. The trophoectoderm and primitive endoderm shows a preferential inactivation by the paternal X, while the mass cell internal observed one random inactivation, and can inactivate both the paternal and the maternal X chromosome. X chromosome inactivation is also observed in male meiosis, showing silencing of the X chromosome, which lasts until fertilization. Here we review the molecular events in the progression of inactivation, from gametogenesis to the blastocyst, and the characteristics that regulate the processes of inactivation and reactivation of the X chromosome in female mammalian embryos.

Resumo A regulação da expressão génica durante o desenvolvimento embrionário nos primeiros estádios requer de muitos e organizados processos epigenéticos que garantissem uma correta diferenciação e proliferação celular. A inativação do cromossomo X é um processo complexo que esta fortemente ligado ao desenvolvimento embrionário, este processo involucra o silenciamento transcripcional de um dos cromossomos X nas células das fêmeas mamíferas. O modelo embrionário do rato é o melhor estudado, onde se observam ciclos de inativação e reativação durante a formação do trofoectodermo e o epiblasto. No trofoectodermo e o endodermo primitivo se observa uma inativação preferencial pelo X paterno, enquanto na massa celular interna se observa uma inativação aleatória, conseguindo inativar-se tanto no cromossomo X materno quanto no paterno. A inativação do cromossomo X se observa também na meiose masculina onde se observa um silenciamento do cromossomo X, que permanece até a fertilização. Neste artigo revisamos os eventos moleculares na progressão da inativação, desde a gametogênese até o blastocisto, e as características que regulam os processos de inativação e reativação do cromossomo X em embriões de fêmeas mamíferas.

Scratching, cleaning and social bonding: grooming and their biological meaning in ruminants

Resumo A palavra grooming vem do inglês "groom", que significa "cuidar da aparência". O grooming ou catação é um comportamento que está presente em muitos grupos taxonômicos de animais; sendo um comportamento antigo que faz parte da história evolutiva deles. Reconhecem-se três tipos básicos desse comportamento: autogrooming, allogrooming e grooming baseado com o contato ambiental. A presente revisão de literatura objetiva aprofundar na análise desse comportamento nos ruminantes, com o intuito de oferecer uma visão geral que contempla aspectos da historia evolutiva, do valor adaptativo e da fisiologia dessa conduta. Também são feitas algumas referências sobre possíveis relações entre esse comportamento com o enriquecimento ambiental e o bem-estar animal dos ruminantes. Finalmente, é apresentada uma conclusão sobre as potencialidades que o estudo dessa conduta oferece para o fortalecimento do conhecimento científico desde diferentes áreas da ciência: evolução, fisiologia veterinária e zootecnia.

Abstract Grooming behavior is common in multiple animal species; apparently it has been present for a long time during evolutionary history. There are three basic types of this behavior: autogrooming, allogrooming, and grooming based on environmental contact. The aim of this review is to present a general analysis of this behavior in ruminants, including aspects related with evolution, adaptation, and physiology. Some references are made about possible relationships between grooming, environmental enrichment, and welfare in ruminants. Finally, it is concluded that the study of this behavior could enhance scientific knowledge from several areas: physiology, evolution, veterinary, and animal science.

Resumen Grooming es un comportamiento presente en diferentes grupos taxonómicos de animales y, al parecer, es un carácter bastante ancestral en la historia evolutiva de dichos grupos. Son reconocidos tres tipos básicos de este comportamiento: autogrooming, allogrooming y grooming basado en contacto ambiental. La presente revisión pretende profundizar en el análisis de dicho comportamiento en los rumiantes, con la idea de ofrecer un panorama general que contempla aspectos de la historia evolutiva, del valor adaptativo y la fisiología de esta conducta. De la misma manera, son discutidas algunas referencias sobre las posibles relaciones entre grooming, enriquecimiento ambiental y bienestar en rumiantes. Finalmente, se presenta una conclusión sobre las potencialidades que ofrece el estudio de esta conducta para el fortalecimiento del conocimiento científico desde diferentes áreas del conocimiento: evolución, fisiología, veterinaria y zootecnia.

Cryopreservation of boar semen: progress and perspectives

Resumo A criopreservação de sêmen suíno é uma técnica ainda não consolidada devido à alta sensibilidade do espermatozoide da espécie ao processo de congelamento e descongelamento. Ainda assim, a utilização do sêmen criopreservado é altamente desejável para o intercâmbio genético e manutenção da biossegurança. Esta revisão tem como objetivo ressaltar alguns fatores limitantes do processo e apontar os consideráveis avanços desenvolvidos nos últimos anos, principalmente devido ao aperfeiçoamento das técnicas já existentes, como caracterização das proteínas do ejaculado, ajustes na remoção do plasma seminal e uso de adjuvantes na confecção dos diluentes. Todas estas técnicas tornarão a criopreservação do sêmen suíno mais aplicável nos próximos anos para que possa ser finalmente uma técnica de uso comercial.

Abstract Biotechnology of boar semen cryopreservation has not succeeded due to the high sensitivity of swine sperm to the freezing and thawing process. However, its use is highly desirable for genetic improvement and maintenance of biosecurity. This review aims to highlight some limitations of the process and point out important advances obtained in recent years, including the improvement of existing techniques, such as protein characterization of the ejaculate, adjustments in the removal of seminal plasma, and use of adjuvants in the manufacture of diluents; all of which will make cryopreservation commercially available in the near future.

Resumen La criopreservación del semen de porcino es una técnica aún no consolidada debido a la alta sensibilidad del espermatozoide de esta especie al proceso de congelación y descongelación, aun así, el uso de semen criopreservado es altamente deseable para el intercambio genético y el mantenimiento de la bioseguridad. Esta revisión tiene por objeto poner de relieve algunos factores limitantes del proceso y señalar las importantes avances desarrollados en los últimos años, debido principalmente al mejoramiento de las técnicas existentes, entre ellas, la caracterización de las proteínas de la eyaculación, los ajustes de extracción del plasma seminal y el uso de adyuvantes en la producción de los diluyentes. Todas estas técnicas harán que la criopreservación del semen de porcino sea más aplicable en los próximos años, para ser finalmente una técnica de uso comercial.

Osseous metaplasia in the deep digital flexor muscle of a Neapolitan Mastiff

Resumen Se describe el caso de una metaplasia ósea en un canino, hembra, de raza Mastín Napolitano, con historia de cojera intermitente del miembro anterior izquierdo. En el examen ortopédico se evidenció una claudicación del miembro afectado, molestia a la flexión y extensión pasiva de la articulación del codo izquierdo. A la palpación se detectó una masa de consistencia sólida a nivel medio-distal del codo, en el examen radiológico del miembro afectado se observó una estructura radiodensa medial a la articulación, en la zona de los músculos flexores del miembro anterior izquierdo sin evidencia de adhesión o contacto con huesos. La estructura fue resectada quirúrgicamente y evaluada histológicamente, diagnosticando una alteración en la reparación tisular de tipo metaplasico, con la formación de tejido óseo. Tanto en el postquirúrgico, como en la reevaluación a los 12 meses, la paciente mostró una marcada mejoría en la claudicación. En el presente reporte, se discute el caso clínico de un paciente con metaplasia ósea a nivel de los músculos flexores del miembro anterior, siendo este el primer caso reportado por tal patología a nivel sudamericano y el segundo caso reportado mundialmente en un perro de raza Mastín Napolitano.

Abstract We describe a case of osseous metaplasia in a canine. A female Neapolitan Mastiff with a history of intermittent left forelimb lameness was evaluated. Orthopedic examination revealed the animal was not standing on the affected limb and had signs of pain on passive flexion and extension of the left elbow joint. A solid mass mass medial of the left elbow was detected on palpation. Radiological examination showed a radiopaque structure medial to the joint, at the level of flexor muscles of the left forelimb, without evident adhesion or contact with bone. The mass was surgically removed and histologically examined. The mass was diagnosed as an altered metaplasic regeneration with formation of bone tissue. The patient showed marked improvement of the lameness few days after surgery and at reevaluation 12 months post-surgery. This report describes a case of osseous metaplasia at the level of the forelimb flexor muscles in a canine patient. To the author's knowledge, this is the first case of such pathology reported in South America, and the second case reported worldwide in a purebred Neapolitan Mastiff.

Resumo Descreve-se o caso de uma metaplasia óssea de uma fêmea canina da raça Mastim Napolitana, com historia de dificuldade intermitente para caminhar no membro anterior esquerdo. No exame ortopédico evidenciou-se uma claudicação do membro afetado, moléstia na flexão e extensão passiva da articulação do cotovelo esquerdo. À palpação detectou-se uma protuberância de consistência solida no nível médio-distal do cotovelo, no exame radiológico do membro afetado observou-se uma estrutura radiodensa medial á articulação, na região dos músculos flexores do membro anterior esquerdo não se encontrou evidencia de adesão ou contato com os ossos. A estrutura foi resectada cirurgicamente e avaliada histologicamente, diagnosticando uma alteração na reparação tissular de tipo metaplásico com a formação de tecido ósseo. Tanto no post-cirúrgico, quanto na reavaliação aos 12 meses, a paciente teve uma marcada melhoria na claudicação. No presente reporte, se discute o caso clínico de uma paciente com metaplasia óssea no nível dos músculos flexores do membro anterior, sendo este o primeiro caso reportado por esta patologia em toda América do Sul e o segundo caso do mundo num cachorro da raça Mastim Napolitano.