Lugar y época de estudio.

El seguimiento, las filmaciones y observaciones de los adultos de A. klugii y la colecta de los individuos como parte de la muestra se hicieron en dos centros de investigación, el Centro de Investigación Frutícola Olerícola (CIFO-UNHEVAL) (09°95′03″S, 76°15′09″O, altitud 1941 m s.n.m.) y el Centro de Investigación y Experimentación de Canchan (09°58′50″S, 79°11′20″O, altitud 2020 m. s.n.m.), ubicados en la región Huánuco, Perú. Durante los meses de septiembre a noviembre 2021 y septiembre a noviembre 2022 aprovechando los brotes poblacionales de los adultos de A. klugii a diversos cultivos.

El centro de Investigación CIFO-UNHEVAL, alberga entre sus parcelas al banco de germoplasma de 22 variedades de palto, P. americana así como el cultivo de las chirimoyas, Annona spp. (Annonaceae), mangos, Mangifera indica (Anacardiaceae), la vid, Vitis vinifera (Vitaceae) y otros frutales, diversas hortalizas, alfalfa, M. sativa, maíz morado y maíz chala, Zea mays (Poaceae) y camote, I. batatas; abarcando un aproximado de 7 hectáreas de terreno de cultivo permanente. En tanto, el centro experimental Canchan dentro de sus más de 25 hectáreas de terreno cuenta con cultivos de alfalfa, cítricos, maíz y otros. Ambos espacios albergan cultivos anuales de distintos estados fenológicos y frutales de diferentes edades y de períodos de floración-fructificación.

Observaciones del comportamiento y registro en campo de Ancistrosoma klugii.

Las observaciones de los hábitos del estado adulto de A. klugii durante el día se hicieron en condiciones de campo. El observador se ubicó a una distancia de 1 m para poder observar, fotografiar y realizar las filmaciones de la actividad de los individuos. Esta labor se realizó por 25 veces en los horarios de entre 8:00 am hasta 10:30 am y en el horario de la tarde entre las 4:00 a 6:00 pm, aprovechando el menor despliegue de vuelo de los individuos, el tiempo de filmación fue de 30 minutos en la mañana y 30 minutos en la tarde.

Recolección y manipulación de insectos.

Se colectaron 152 adultos de A. klugii, y se tuvo particular cuidado de colectar especímenes encontrados en actividad de cópula, separándolos según la ubicación en el acople, para realizar la separación por sexos. Los especímenes fueron almacenados en frascos etiquetados con los que fue posible hacer dos grupos. En total se colectaron 35 pares de adultos provenientes de los campos cultivados con cítricos Citrus sinensis (L.) Osbeck (Rutaceae) del Centro de Investigación y Experimentación de Canchan, 18 pares de adultos de los cultivos de palto, P. americana variedad Nabal y 23 pares de adultos colectados en las parcelas de alfalfa, del Centro de Investigación Frutícola Olerícola (CIFO)-UNHEVAL.

Los individuos fueron examinados mediante un estereomicroscopio y fotografiados con una cámara Nikon Coolpix L320 de 16,1 megapíxeles y las mediciones desde la parte anterior a posterior del cuerpo y entre los lados laterales, largo y ancho del cuerpo del insecto fueron hechas en milímetros (mm) utilizando un micrómetro ocular. A fin de detectar diferencias entre sexos, se observaron los esternitos ventrales de la parte abdominal del cuerpo del insecto adulto, los ejemplares almacenados forman parte de la colección entomológica del grupo investigador. También, fue parte de la metodología la recopilación de información a través de la revisión y un análisis bibliométrico.

Hábitos de Ancistrosoma klugii durante el día en campo.

Se observó grupos de A. klugii acentuados en las estructuras florales, follajes y ramas completas de los cítricos, mangos, paltos, la vid y cultivos de alfalfa, hortalizas y de preferencia en el horario matutino entre 8:00 am a 10:00 am, simultáneo a la actividad de la cópula y la alimentación; en todas las veces observadas no fue posible detectar una actividad grupal de solo alimentación o cópula. Siempre se encontraron algunos especímenes dentro del grupo en actividad de cópula sobre los follajes, mientras que el resto se alimentaba del cultivo en todos los horarios en que se realizaron las observaciones. La cópula ocurre cuando el macho se coloca en la parte posterior de la hembra y se sujeta con sus patas delanteras en el abdomen y se superpone dorsalmente sobre el cuerpo del insecto. Por el corto tiempo de filmación en horario mañana y tarde no fue posible evidenciar el tiempo de duración de la cópula, esto amerita un nuevo estudio de comportamiento sexual del insecto. El tiempo de duración de cópula puede variar, ^{Gonzáles y Cabrera (2015)} registraron un tiempo aproximado de 37 minutos de cópula para la Gymnetis bonplandii Schaum (Coleoptera: Scarabaeidae).

Los grupos de A. klugii son capaces de esqueletizar por completo las hojas dejando las ramillas severamente afectadas (Figura 1A), o dejan botones florales sin pétalos o sépalos. Daños similares han sido registrados con otra especie de Ancistrosoma, A. rufipes en el cultivo de café, donde los adultos se alimentan del follaje hasta esqueletizar y dejar solamente la nervadura principal, además de dañar las flores y el epicarpio de los frutos (^{Infante et al., 2023}; ^{Waller et al., 2007}). Para el caso de A. vittigerum Erichson se ha evidenciado la presencia de daños en el cultivo de la quinua desde el inicio y durante la floración (^{Valoy et al., 2011}). En otras investigaciones para la familia Scarabaeidae, se ha reportado que el daño ocasionado por el insecto adulto se centra en la esqueletización de las hojas jóvenes al masticar los tejidos de la lámina foliar (^{Hernández-Cruz et al., 2021}; ^{Holguín & Mira, 2021}; ^{Mateos-Escudero et al., 2021}) y en ataques severos afectan los meristemos apicales de las plantas tiernas (^{Cárdenas & Posada, 2001}; ^{Londoño et al., 2014}). Los estados larvales de los melolóntinos son frecuentemente observados a nivel de las raíces de las plantas; esta estructura vegetal es el alimento indiscutible para la mayoría de las especies (^{Aragón-Sánchez et al., 2021}; ^{Muscarella et al., 2022}).

En la zona del estudio, se ha observado que, en cada planta hospedante, los grupos invasores en los frutales ascienden a más de 200 individuos que permanecen varios días sobre el árbol, aprovechando al máximo la disponibilidad del alimento. Es frecuente observar subgrupos de hasta 6 a 8 (Figura 1B), la congregación en grupos considerables es similar a lo descrito para la especie A. rufipes (^{Constantino et al., 2013}). Cuando las visitas a campo de alfalfa fueron realizadas a tempranas horas del día, entre las seis a ocho de la mañana, se pudo encontrar grupos conformados de puramente machos y solamente hembras, respectivamente, este peculiar comportamiento es inusual dentro de la familia Scarabaeidae, lo que amerita nuevas evaluaciones en diferentes cultivos.

La presencia de adultos también fue notoria con la llegada de la estación primaveral, con el aumento de procesos de emergencia de nuevos adultos que tienen preferencia por el consumo de hojas tiernas cercanas a los puntos de crecimiento vegetativo. Se observaron comportamientos de vuelo por distancias cortas sobre los árboles y búsqueda de refugio en las partes de mayor follaje a partir de las 11:00 am aproximadamente o cuando las temperaturas se incrementan sobrevuelan entre y sobre los árboles a distancias cortas y se localizan en las partes de mayor follaje protegidos por las hojas de las ramas. Este comportamiento coincide con lo reportado por ^{Holguín y Mira (2021)} para los coleópteros de la subfamilia Melolonthinae que, durante la cópula la hembra se alimenta de las hojas, logrando esqueletizar el follaje por completo. Por su parte, ^{Ugarte y Alonso-Zarazaga (2002)} asociaron a algunas especies de escarabajos adultos polífagos a similares hábitos.

Durante el periodo del estudio se pudo observar y contabilizar en los cultivos de alfalfa, M. sativa hasta un promedio de 42 individuos adultos por metro cuadrado (m²), en una relación de tres hembras por cada cinco machos.

Figura 1 Infestación de Ancistrosoma klugii. A. Insectos adultos en pleno acto de alimentación en una planta de cítricos. B. Adultos de A. klugii sobre una planta de cítricos. 

El listado de las especies vegetales donde se observó a A. klugii en su actividad diurna se puede observar en la Tabla 1.

Dimensiones corporales del estado adulto.

Los machos adultos colectados en plantas de Citrus spp. Y M. sativa presentaron una longitud promedio de 27,2 mm y las hembras adultas 24,4 mm, con una diferencia entre géneros en el rango máximo de 30,3 mm y el rango mínimo de 9,85 mm, respectivamente. ^{Pathania y Chandel (2017)} al describir las características de una especie de la subfamilia Melolonthinae (Coleoptera: Scarabaeidae), reportaron que los escarabajos machos eran de menor tamaño que las hembras. En la Tabla 2 se presenta un resumen de las medidas resultantes en milímetros y en la Figura 2 se muestra en vista dorsal las formas de los machos y hembras estudiados.

Figura 2 Fotos de Ancistrosoma klugii hembra (izquierda) y macho (derecha) con la diferenciación de tamaño entre ambos sexos. 

Antenas en machos y hembras de A. klugii.

Ambos sexos disponen antenas de 7 artejos de la misma coloración y morfología (lamelada), por lo que la antena no es el apéndice que se pudiera utilizar para separar los sexos. Además, se han evidenciado que los coleópteros de la subfamilia Melolonthinae por lo general presentan antenas con 10 artejos y algunos de 7 a 12 (^{Ratcliffe et al., 2015}).

Los élitros.

Élitros de color negro brillante provistos de tres estrías de color blanco cremoso, de 6 mm de ancho y 15 mm de largo (machos), 5 mm ancho y 14 mm de largo (hembras), extendiéndose la estría 1 desde la proximal basal hasta la zona apical, la estría 2 extendida desde la zona basal hasta la proximal de la zona apical y la estría 3 extendida en la zona discal, pronotum-scutellum de color blanco cremoso y sinuesidad preapical del mismo color y presencia de sedas apicales; similar a lo descrito por ^{Katovich (2008b)}, información que corrobora la presencia de la misma especie en la zona. Los élitros vistos dorsalmente con los lados regularmente arqueados, ligeramente estrechados hacia el ápice, truncados, dejando visible el ápice del abdomen que presentan pelos cromáticos más finos. Los élitros convexos con estrías y el pigidio con ligera visibilidad y por lo general oculto por los élitros, como ha sido ampliamente descrito para algunas especies de la subfamilia Melolonthinae (^{Ratcliffe et al., 2015}) y con estas observaciones queda confirmada la característica descrita para A. klugii. Pronoto de color negro brillante con único proceso medial, con seda lateroposterior pronotal de color blanco cremoso y el vértice provisto de sedas finas color crema. Esta descripción coincide con las claves de identificación propuestas por ^{Katovich (2008a)} y las descripciones de ^{Neita y Ocampo (2012)} para el género Ancistrosoma. Además de estas características, el cuerpo visto ventralmente posee pelos cromáticos finos en cada sutura y patas largas de color anaranjado.

Abdomen.

Abdomen recumbente, con 6 esternitos (Figura 3A). De los 152 adultos examinados en 76 de ellos se pudo apreciar una espina ventral bien definida en la parte media de los dos esternitos abdominales anteriores, reduciendo a los demás esternitos a la espina, siendo más estrechas y con apariencia de una fusión de esternitos ventralmente. Con pigidio encorvado ventralmente y hacia la parte anterior, facilitando la protección del aparato genital, edeago encorvado fuertemente esclerotizado (Figura 3B); la hembra con abdomen sin la espina, con el margen anterior del pigidio sinuoso (Figura 3A). Estas observaciones son similares a los mencionados en la clasificación de los escarabajos de la subfamilia Melolonthinae (^{Fuhrmann & Vaz-De-Mello, 2017}; ^{Katovich, 2008}a; ^{Pathania & Chandel, 2017}; ^{Ratcliffe et al., 2015}).

Figura 3 Morfología de Ancistrosoma klugii. A) vista ventral de la hembra con abdomen sin la espina y pigidio sinuoso. B) vista ventral y lateral del macho con provisto de una espina bien definida en la parte media de los dos esternitos abdominales. C) Ancistrosoma klugii con alas desprovistas. D) Edeago, vista lateral. Fotos tomadas por Agustina Valverde. 

En las 76 hembras observadas, la parte media de los esternitos abdominales vista dorsalmente es de formación plana o con una ligera convexidad. Esta observación es similar a lo reportado por ^{Fuhrmann y Vaz-de-Mello (2017)} quienes propusieron cambios taxonómicos para el género Ancistrosoma y en la propuesta de ^{Bousquet y Bouchard (2013)} de una clave para la identificación del género.

Color del cuerpo.

No está marcadamente acentuado en la coloración el dimorfismo sexual para la especie. Según lo observado en el presente estudio, existe una ínfima diferencia entre los machos y hembras en el color de las estrías, siendo generalmente en los machos más claros y en las hembras de coloración más oscura. ^{Ratcliffe et al. (2015)} y ^{Katovich (2008b)} mencionaron que los Scarabaeidae de la subfamilia Melolonthinae se presentan en formas y colores variables, con o sin reflejos metálicos y con o sin estrías en los élitros.

El presente estudio se ha limitado a la descripción observacional de los hábitos del adulto y una diagnosis de las características morfológicas del estado adulto con base en especímenes no tipo. Los estudios posteriores deberán iniciarse con la búsqueda de información cuantitativa relacionada con la alimentación, cortejo, cópula y oviposición. Información que va a servir para crear modelos de simulación de actividades específicas del insecto, además de diseñar estrategias de control basadas en el comportamiento de la especie.