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Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias
Print version ISSN 0120-0690On-line version ISSN 2256-2958
Abstract
CONTRERAS-BENICIO, Daniel; CASTRO-VALENZUELA, Beatriz Elena; GRADO-AHUIR, Juan Alberto and BURROLA-BARRAZA, María Eduviges. Well-of-the-well (WOW) versus malha de poliéster (PM): uma comparação de sistemas de cultura de um único embrião em bovinos. Rev Colom Cienc Pecua [online]. 2022, vol.35, n.2, pp.93-108. Epub July 31, 2023. ISSN 0120-0690. https://doi.org/10.17533/udea.rccp.v35n2a03.
Antecedentes:
O México está inovando na indústria pecuária por meio da geração in vitro de embriões bovinos com tecnologias de cultura de embriões individuais, bem como em poço (WOW) e malha de poliéster (PM). Estes mantêm os embriões em áreas separadas, enquanto compartilham o mesmo meio de cultura de células.
Objetivo:
Comparar a quantidade e a qualidade de embriões bovinos produzidos nos sistemas de cultura WOW e PM com o sistema convencional de cultura em grupo (CG).
Métodos:
No total, 345 embriões fertilizados in vitro foram avaliados para determinar a produção de blastocistos gerados nos três sistemas. O número de células por blatocisto foi contado, 69 embriões em cada sistema foram diferencialmente corados para trofectoderme (TE), massa celular interna (ICM) e células apoptóticas. Uma análise de expressão gênica qPCR foi realizada para os embriões obtidos nos três sistemas.
Resultados:
Os sistemas WOW, PM e CG desenvolveram quantidades semelhantes de blastocistos (41, 35 e 36%, respectivamente; p>0,05). Os blastocistos nos três sistemas mostraram quantidades adequadas de ICM e células apoptóticas. Os blastocistos no sistema PM mostraram um número maior de células TE [63,7 versus 58,6% no sistema CG (p<0,05)]. A expressão relativa do mRNA dos genes embrionários POUF5F1, GNAS e TP53 não diferiu significativamente entre os sistemas (p>0,05). A expressão de ATP5B foi maior no WOW do que no PM (p<0,05), mas semelhante ao GC (p<0,05). A expressão de TJP3 foi maior no PM do que no WOW e CG (p<0,05). A expressão de ID2 e CLDN4 foi maior no WOW do que no PM e CG (p<0,05). O gráfico biplot da análise de componentes principais revelou que CG foi encontrado próximo a embriões degenerados, enquanto PM foi encontrado próximo a embriões presos, ICM, TE e TJP3. WOW foi encontrado para ter blastocistos, mórulas e a expressão de CLDN4, ID2 e GNAS.
Conclusão:
Em comparação com o CG, os sistemas PM e WOW são boas opções para a cultura de embriões individuais no modelo bovino. Além disso, os resultados da PCA sugerem que embriões individuais desenvolvidos no sistema WOW têm maior capacidade de desenvolver blastocistos com maior capacidade de formar as camadas TE e ICM, o que poderia melhorar seu sucesso de implantação.
Keywords : cultura em tela de poliéster; cultura individual; cultura in vitro; cultura well-in-well; embriões bovinos; qualidade embrionária; produção de embriões in vitro; recuperação embrionária.
