INTRODUCCIÓN

La carnitina está químicamente en forma de D y L y sólo existe en la naturaleza y es importante para la nutrición humana y animal ^[1]. La L-carnitina es un polvo blanco, altamente soluble en agua, caracterizado por una alta estabilidad térmica (hasta 200°C). Su nombre químico es p-hydroxy-Y-trimetil-amino butirato. La L-carnitina también se conoce como vitamina BT ^[2]. La L carnitina tiene un efecto importante en la producción de energía y el metabolismo de la grasa en el cuerpo al proporcionar transporte mitocondrial de ácidos grasos de cadena larga y eliminación mitocondrial de ácidos grasos de cadena corta y media ^[3]. Además de su uso en la alimentación animal ^[4], la L-carnitina también se ha utilizado en varios sectores de la salud, como la prevención de ataques cardíacos y otras afecciones cardíacas ^[5], la hemodiálisis ^[6] y el tratamiento de la infertilidad ^[7].

La ascitis (hipertensión pulmonar) es un síndrome multifactorial resultante de las interacciones entre factores genéticos, ambientales, dietéticos y fisiológicos ₍₈₎. La ascitis es un trastorno cardiovascular que se observa predominantemente en pollos de crecimiento rápido más que en pollitos. En pollos de crecimiento rápido, la hipoxia hipobárica (falta de oxígeno) causa hipertrofia del ventrículo derecho (agrandamiento anormal) y expansión. Como resultado, el líquido se acumula en la región abdominal, lo que provoca la muerte por deficiencia de oxígeno ^[9]. Existen dos hipótesis sobre el síndrome de ascitis: Hipótesis 1: En el desarrollo del síndrome de ascitis, las lesiones primarias se producen en los pulmones (hipertensión pulmonar) y, en consecuencia, el corazón se ve afectado (hipertrofia del ventrículo derecho). Hipótesis 2: La lesión primaria en el desarrollo del síndrome de la ascitis es causada por insuficiencia ventricular izquierda inducida por hipertensión sistémica que conduce a hipertrofia ventricular derecha y acidosis ^[10]. Se ha informado que la prevalencia de la ascitis ha aumentado en los últimos años. Las selecciones realizadas para lograr un crecimiento más rápido de los pollos han mejorado el potencial genético, pero también han causado algunas limitaciones anatómicas y fisiológicas, y la misma mejora ha tenido un impacto negativo en la salud de los animales. Un posible deterioro de los recursos de oxígeno (altitud, ventilación) estimulará el desarrollo de muchos mecanismos en el sistema cardiopulmonar, lo que desencadenará el síndrome de ascitis.

Se considera que la administración de suplementos de L-carnitina está relacionada con el síndrome de ascitis debido a su efecto sobre el metabolismo energético. Este estudio pretendió investigar los efectos de la L-carnitina como un medio potencial para reducir la incidencia de ascitis en pollos de engorde provocada por la altitud y su relación con parámetros fisiológicos y bioquímicos.

MATERIAL Y MÉTODOS

Animales, piensos y alimentación. En el ensayo se utilizaron 300 pollos de engorde machos (Ross 308) de un día de edad con similar peso corporal. En el ensayo, los animales fueron separados en 5 grupos, cada uno de los cuales fue dividido en 3 subgrupos. El grupo sin suplemento de L-carnitina fue el control, y los grupos suplementados con 100, 150, 200 y 250 mg/l de L-carnitina en agua potable fueron los grupos de tratamiento. La L-carnitina se utilizó en su forma de polvo blanco y puro; se obtuvo de Vimar Food Agriculture and Livestock Industry Trade Inc. Turquía. La L-carnitina se añadió al agua potable diariamente. La prueba se llevó a cabo en noviembre de 2014 y enero de 2015 a una altitud de 1.727 metros en Van-Turquía.

En la tabla 1 se presentan los ingredientes y los resultados de los análisis de nutrientes de los piensos utilizados en el ensayo. Los pollos de engorde fueron alimentados con alimento inicial durante los días 1 a 10, seguidos por alimento de los productores durante los días 10 a 21, y alimento de los acabadores durante los días 21 a 35. Se formuló una dieta basal de harina de maíz y soja de acuerdo con la NRC (1994). Los pollos de engorde recibieron alimento en pellets durante todo el período. Los alimentos y el agua se ofrecieron libremente a todos los grupos. El ensayo duró 35 días. Se aplicó un programa de iluminación de 24 horas durante todo el ensayo.

Tabla 1 Composición (g/kg) y contenido de nutrientes (%) de los piensos mezclados utilizados en el ensayo. 

^1: Por 1 kg de dieta: 12.500.000 IU Vitamina A, 3.500.000 IU Vitamina D3, 100.000 mg Vitamina E, 4.000 mg Vitamina K3, 3.000 mg Vitamina B1, 8.000 mg Vitamina B2, 5.000 mg Vitamina B6, 20 mg Vitamina B12, 70.000 mg Niacina, 20.000 mg Ácido pantoténico, 2.000 mg Ácido fólico, 250 mg Biotina, 100.000 mg Vitamina C, 125.000 mg Antioxidante.

^2: Por 1 kg de dieta: 120.00 mg Manganeso, 40.000 mg Hierro, 110.00 mg Zinc, 16.00 mg Cobre, 500 mg Cobalto, 1.250 mg Yodo, 300 mg Selenio.

Bioquímica sanguínea, valores minerales, hormonales y de gases sanguíneos. Para los análisis bioquímicos de la sangre se tomaron muestras de sangre durante el sacrificio de 6 animales de cada subgrupo. Treinta minutos después de obtenidas las muestras de sangre, los sueros fueron separados por centrifugación durante 5 minutos a 4000 rpm y se almacenaron en tubos ependorfs a -20°C hasta su análisis. El análisis bioquímico de la sangre fue realizado por el dispositivo de recuento sanguíneo completo marca Swelab Alfa (Suecia) en muestras de sangre total. Todas las muestras fueron analizadas el mismo día. Las hormonas T3 y T4 se detectaron en el plasma con el autoanalizador de hormonas Elecsys e-411 de Roche Diagnostic (Estados Unidos) utilizando los kits de la marca Roche. En el día 35 del ensayo, se tomaron muestras de sangre de las venas alares de 3 ascitis y 3 pollos sanos de cada subgrupo en jeringas que contenían heparina para evitar la formación de coágulos. Los parámetros de gasometría, oximetría, electrolitos y metabolitos se midieron con el Radiómetro ABL-700 analizador de gas sanguíneo.

Estadísticas. Se empleó el análisis de varianza basado en el procedimiento del Modelo Lineal General (PROC GLM) de acuerdo con el diseño del ensayo (diseño experimental de parcelas aleatorias) y se utilizó la Prueba de Rango Múltiple de Duncan para comparar los promedios de los grupos. Los análisis estadísticos fueron realizados por el software del paquete estadístico SAS (versión 9.2).

RESULTADOS

Parámetros de rendimiento. En la tabla 2 se indican los pesos en vivo de los grupos de tratamiento semanalmente. Cuando se compararon los grupos en términos de aumento de peso vivo, las diferencias entre los promedios del grupo sólo a los 7°, 14° y 28° días resultaron ser estadísticamente significativas (p<0.05). A los 35 días, al final del ensayo, no se registraron diferencias significativas entre los grupos con respecto al peso vivo (p>0.05).

Tabla 2 Los efectos de la suplementación con L-carnitina en el agua sobre los parámetros de rendimiento y los valores de consumo de agua (ml) de los pollos de engorde. 

^*: Las diferencias entre los promedios de los grupos denotados por diferentes letras en la misma fila son estadísticamente significativas (p<0.05).

SEM: Error estándar de diferencia entre medias.

La suplementación de L-carnitina en agua no tuvo efectos significativos en el consumo acumulado de alimento de pollos de engorde por semanas y al final del ensayo (p>0.05). Sin embargo, al final del ensayo, la mayor cantidad de consumo de alimento se observó en el grupo que recibió 100 mg/l de L-carnitina, mientras que la menor cantidad se observó en el grupo que recibió 150 mg/l de L-carnitina.

Como se observa en la tabla 2, no se detectaron diferencias significativas en las tasas de conversión alimenticia entre grupos a lo largo del ensayo (p>0.05). Sin embargo, en el grupo que recibió un suplemento de L-carnitina de 200 mg/l, la relación de eficiencia alimenticia mejoró numéricamente (1.38).

Como se observa en la tabla 2, no se registraron diferencias significativas en los valores de consumo de agua entre los grupos a lo largo del ensayo (p>0.05). Por otro lado, aunque no fue estadísticamente significativo, la ingesta total de agua fue mayor en el grupo suplementado con 100 mg/l de L-carnitina en comparación con los otros grupos al final del ensayo.

Tasas de mortalidad. Los efectos de la administración de suplementos de L-carnitina en las tasas de mortalidad de los pollos de engorde se presentan en la tabla 3. La tasa de mortalidad más baja (18.33%) se registró en el grupo suplementado con 100 mg/l de L-carnitina, mientras que la tasa de mortalidad más alta (28.33%) se registró en los grupos suplementados con 200 y 250 mg/l de L-carnitina.

Tabla 3 Los efectos de la suplementación con L-carnitina en las tasas de mortalidad por ascitis en pollos de engorde. 

Plasma sanguíneo y parámetros del hemograma. Los efectos de la suplementación de L-carnitina en el agua sobre el plasma sanguíneo seleccionado y los parámetros del hemograma se muestran en la tabla 4. Al final del ensayo, la suplementación con L-carnitina no dio lugar a diferencias significativas entre los grupos en los parámetros del plasma sanguíneo aspartato aminotransferasa (AST), alanina aminotransferasa (ALT), fosfatasa alcalina (ALP), proteína total, colesterol, concentración de lipoproteínas de baja densidad (LDL), triyodotironina (T3) y parámetros del hemograma volumen corpuscular medio (MCV), ancho de distribución de glóbulos rojos (RDW), ancho de distribución real de glóbulos rojos (RDWa), concentraciones de hematocrito, plaquetas y hemoglobina (p>0.05). Por otro lado, se registraron diferencias significativas en los valores de lipoproteínas de alta densidad (HDL), triglicéridos, creatina cinasa, glucosa, tiroxina (T4), recuento de glóbulos rojos (RBC), hemoglobina corpuscular media (HCM) y concentración media de hemoglobina corpuscular (HCMc) entre los grupos (p<0.05).

Tabla 4 Los efectos de la suplementación con L-carnitina en el agua en el plasma sanguíneo seleccionado y los parámetros de hemografía de los pollos de engorde. 

^*: Las diferencias entre los promedios de los grupos denotados por diferentes letras en la misma columna son estadísticamente significativas (p<0.05).

SEM: Error estándar de diferencia entre medias

Parámetros de gases sanguíneos. Se midieron gases sanguíneos, oximetría, electrolitos y metabolitos en las muestras de sangre tomadas de 3 pollos con ascitis y 3 pollos sanos de cada subgrupo. Los efectos de la suplementación con L-carnitina sobre los parámetros de gases en sangre de los pollos de engorde ascíticos y sanos se presentan en la tabla 5. La suplementación de L-carnitina en agua no tuvo efectos significativos sobre el hematocrito, sodio (Na), potasio (K), calcio (Ca), bicarbonato de plasma (HCO₃ p), bicarbonato estándar (HCO₃ pst), exceso de base (C Base B), el gas sanguíneo, los electrolitos y los valores de metabolitos de pollos de engorde asciticos y sanos (p>0.05). Por otro lado, los valores de Pouvoir hidrógeno (pH), presión parcial de dióxido de carbono (pCO₂), presión parcial de oxígeno (pO₂), cloro (Cl), hemoglobina (Hb), concentración respiratoria de dióxido de carbono (ctCO₂B), presión parcial de concentración de dióxido de carbono (ctCO₂P), anión K, separación del anión, saturación de oxígeno (SO₂) y contenido de oxígeno (ctO₂) se vieron afectados de forma significativa por los tratamientos (p<0.05). El valor del pH de la sangre disminuyó significativamente en los pollos ascíticos en comparación con los sanos.

Tabla 5 Los efectos de la suplementación con L-carnitina en el agua sobre los parámetros de gases en sangre de pollos de engorde ascíticos y saludables. 

^*:x Las diferencias entre los promedios de grupo indicados por letras pequeñas diferentes en la misma fila son estadísticamente significativas (p<0.05).

^**: Las diferencias entre los promedios de grupo denotados con letras mayúsculas diferentes en la misma columna son estadísticamente significativas (p<0.05).

SEM: Error estándar de diferencia entre medias.

DICUSIÓN

Similar a nuestros hallazgos de peso vivo, se ha reportado que la suplementación de 100 mg/kg de L-carnitina en las raciones de pollos de engorde con diferentes niveles de energía ^[11]; 900 mg/kg de suplementación de L-carnitina en el 5% de la grasa animal que contiene las raciones de pollos de engorde ^[4]; y 400, 600 y 800 mg/kg de suplementación de L-carnitina líquida y de potencia en las raciones de pollos de engorde ^[12], que el aditivo de L-carnitina no tiene ningún efecto significativo sobre el aumento de peso vivo al final del ensayo (p<0.05). Contrario a la investigación actual, hay estudios que reportan que la L-carnitina contribuye significativamente al aumento de peso vivo. Parsaeimehr y et al ^[13] informaron de que la adición de 300 mg/kg de L-carnitina a las raciones que contenían diferentes niveles de grasa animal mejoró significativamente el aumento de peso vivo. Jalali et al ^[14] reportaron aumentos significativos en el peso vivo al final de la prueba de 35 días de adición de L-carnitina (120 mg/ kg) a raciones que contenían aceite de soja y aceite de girasol. Las diferencias observadas entre estos hallazgos de la investigación pueden atribuirse a las diferencias en las raciones, los niveles de dosis utilizados y las combinaciones de otros aditivos utilizados junto con los suplementos de L-carnitina. En resumen, el hecho de que no haya diferencias estadísticas entre los grupos, tal como revelan los datos de peso en vivo obtenidos al final del ensayo, indica que las dosis de los suplementos de L-carnitina utilizados no están en las concentraciones que cambiarán el valor del peso en vivo positiva o negativamente.

Murali et al ^[4] y Corduk et al ^[11] informaron que la suplementación con L-carnitina en las raciones de pollos de engorde no tuvo un efecto significativo en el consumo de alimento. Los resultados de estos investigadores están acordes con nuestros hallazgos que indican que la adición de diferentes niveles de L-carnitina en el agua potable no afecta significativamente el consumo de alimento de los pollos de engorde. Por otro lado, también hay estudios que demuestran que el suplemento de L-carnitina afecta significativamente el consumo de alimento. Wang et al ^[15] informaron que el suplemento de L-carnitina (100 mg/kg) redujo significativamente el consumo de alimento en pollos de engorde criados a bajas temperaturas ambientales. Tales diferencias entre los resultados de las investigaciones pueden atribuirse a los niveles de dosis del suplemento de L-carnitina utilizado, los niveles de energía de la ración y las especies animales utilizadas. El hecho de que no haya diferencias estadísticas entre los grupos referidos a partir de los valores de ingesta de alimento obtenidos al final del estudio indica que los niveles de dosis de L-carnitina utilizados no tienen un efecto significativo sobre el apetito en los pollos de engorde.

Murali et al ^[4]; Taklimi et al ^[12] y Wang et al ^[15] reportaron que el suplemento de L-carnitina no tuvo un efecto significativo en la eficiencia alimenticia de los pollos de engorde. Asimismo, Geng et al ^[16] realizaron un estudio para determinar los efectos de los aditivos de L-carnitina y coenzima Q10 sobre el sistema inmunológico y el rendimiento de crecimiento de los pollos contra la ascitis. Se utilizó L-carnitina a dosis de 0, 75 y 100 mg/kg y coenzima Q10 a dosis de 0 y 40 mg/kg, respectivamente. Como resultado de la prueba, el ratio de eficiencia alimenticia en el grupo suplementado sólo con L-carnitina mejoró numéricamente. Michalczuk et al ^[17] informaron que la L-carnitina complementada con agua potable (62.5 g/100 litros) mejora numéricamente la eficiencia alimenticia. Los hallazgos de estos investigadores están de acuerdo con los hallazgos de este estudio. Esta coherencia puede atribuirse al hecho de que los niveles de aditivos de L-carnitina utilizados no afectan al consumo de piensos. Contrariamente a estos hallazgos, los estudios han demostrado que la L-carnitina contribuye significativamente a la relación de eficiencia alimenticia. Sharifi et al ^[18] encontraron que el suplemento de L-carnitina (100 mg/kg) con proteína reducida (3%) mejoró significativamente la eficiencia alimenticia. Las diferencias observadas entre los resultados de estas investigaciones pueden atribuirse a las diferencias en las especies animales y en la ración utilizada.

La ingesta total de agua fue numéricamente mayor en el grupo suplementado con 100 mg/L-carnitina en comparación con los otros grupos al final del ensayo. Esto puede atribuirse al hecho de que el grupo que recibió un suplemento de L-carnitina de 100 mg/l consumió una mayor cantidad de alimento en comparación con los otros grupos. Aunque no se encontró ninguna diferencia estadísticamente significativa entre los grupos en términos de consumo de agua, se observó que el consumo de agua disminuyó numéricamente con el aumento de los niveles de suplementación de L-carnitina. Esta conclusión sugiere que los pollos de engorde serán de gran importancia para determinar los requisitos de L-carnitina.

En el estudio actual se encontró que la tasa de mortalidad en el grupo que recibió un suplemento de L-carnitina de 100 mg/l era menor que la del grupo de control. El aumento de las tasas de mortalidad por ascitis en la quinta semana y hacia el final del ensayo puede atribuirse al aumento de la demanda de oxígeno debido al aumento del peso vivo de los animales y a la incapacidad de satisfacerlos adecuadamente, así como al uso de alimento en forma de gránulos. Zohair et al ^[19] reportaron que en comparación con el alimento en polvo, el alimento en gránulos desencadena ascitis en pollos de engorde criados a grandes altitudes. La tasa de mortalidad por ascitis en el estudio actual es menor. Esto puede atribuirse al hecho de que los animales no fueron sometidos a estrés por frío, lo que desencadena la ascitis. En contraste con el presente estudio, la tasa de mortalidad por ascitis fue de 3.75% para el grupo criado en condiciones normales de temperatura; 12.5% para el grupo de estrés por frío y 8.75% para el grupo expuesto al estrés por frío y que recibió L-carnitina (100 mg/kg) en el el estudio de Tan et al ^[20]. Estas tasas de mortalidad por ascitis son más bajas que las obtenidas en el ensayo actual.

Çördük et al ^[11] informaron que la suplementación con L-carnitina en las raciones de pollos de engorde no afectó significativamente los niveles de glucosa en sangre, colesterol y triglicéridos. Asimismo, los niveles de colesterol total, LDL y triglicéridos ^[21]; los niveles de hemoglobina y MCV ^[22]; los niveles de colesterol y LDL en suero ^[23]; los niveles de glucosa en sangre, LDL, colesterol, triglicéridos y proteína total ^[13] y el valor de hematocrito en suero ^[18] no se vieron afectados de manera significativa por el aditivo de L-carnitina en las raciones de pollos de engorde. Estos resultados concuerdan con las conclusiones del presente estudio.

Contrariamente a los hallazgos existentes, Çördük et al ^[11] reportaron un aumento significativo en los niveles de AST de pollos alimentados con raciones de alta energía. Simsek et al ^[24] reportaron que los valores de WBC, RBC, hemoglobina y hematocrito fueron mayores en ratas suplementadas con L-carnitina. Elgazzar et al ^[25] revelaron que la suplementación con L-carnitina redujo significativamente los niveles de colesterol, triglicéridos, LDL, AST, ALT y ALP en conejos de Nueva Zelanda. Jali et al ^[14] encontraron que el suplemento de L-carnitina en las raciones que contenían aceite de soja y aceite de girasol redujo significativamente los niveles de triglicéridos al tiempo que aumentaba significativamente los niveles de proteína total en la sangre, colesterol, HDL y LDL. Las diferencias entre estos resultados pueden atribuirse a las diferencias en los niveles de energía de las raciones utilizadas, las fuentes de energía y el material animal.

Geng et al ^[16], Yousefi et al ^[26] reportaron que el suplemento de L-carnitina redujo significativamente el valor del hematocrito en pollos de engorde. En el presente estudio, con el suplemento de L-carnitina, el valor del hematocrito en sangre tendió a disminuir numéricamente, aunque no estadísticamente. Las hormonas de la glándula tiroides (T3,T4) están directamente relacionadas con el desarrollo de los animales, ya que aumentan el metabolismo basal. Cuando la glándula tiroides está funcionando mal, hay una desaceleración en el desarrollo de los animales debido al trastorno que ocurre en el metabolismo basal ^[27]. En el presente estudio, los niveles plasmáticos de T4 se redujeron significativamente con altas dosis de suplemento de L-carnitina (250 mg/L). Esto puede estar relacionado con el hecho de que el aumento de peso vivo también es el más bajo de este grupo.

Mientras que el valor de pH de la sangre fue de 7.21 en pollos de engorde ascíticos, y de 7.48 en pollos de engorde sanos. Se observó que una dosis baja de suplemento de L-carnitina (200 mg/l) aumenta el valor del pH en la sangre en pollos de engorde ascíticos (p<0.05). Como se esperaba, el valor de pCÜ₂ se encontró más alto en animales ascíticos en comparación con animales sanos, mientras que el valor de pÜ₂ se encontró más bajo. Sin embargo, estos valores no fueron resultado de efectos estadísticamente significativos de la administración de suplementos de L-carnitina. El valor de pCÜ₂ más bajo para los animales sanos fue de 37.00 y el valor más alto para los animales ascíticos fue de 69.80. El valor máximo de pO₂ para los animales sanos fue de 43.50 y el valor mínimo para los animales ascíticos fue de 4,43. Van As et al ^[28] reportaron que mientras que los niveles de pCO₂ aumentaron significativamente en la ascitis, los niveles de pO₂ se redujeron significativamente. Hafshejani et al ^[29] reportaron una disminución significativa en el valor del pH en animales ascíticos. Los hallazgos de estos investigadores son consistentes con los hallazgos del presente estudio. Aunque el valor de concentración de cloro no fue significativo para todos los grupos entre todos los animales sanos y ascíticos, fue estadísticamente significativo en el grupo de control y en el grupo que recibió 100 mg/l de suplemento de L-carnitina. No hubo diferencias estadísticas entre los otros grupos de tratamiento que puedan atribuirse a la gran varianza intragrupal. Las concentraciones de SÜ₂ y ctÜ₂ fueron mayores en animales sanos, mientras que las concentraciones de ctCÜ2P y hemoglobina fueron mayores en animales ascíticos (p<0.05). El valor del hematocrito sanguíneo también aumentó numéricamente en animales ascíticos. Estos resultados concuerdan con las conclusiones de Tekeli ^[30]. En pollos de engorde a gran altitud, el SÜ₂ y el FÜ₂Hb disminuyen la saturación de oxígeno en la sangre y aumentan los valores de cTHb y Hctc (hematocrito), lo que conduce a la ascitis.

En conclusión, el valor del pH de la sangre disminuyó significativamente en los pollos de engorde ascíticos en comparación con los pollos de engorde sanos. Se encontró que la administración de suplementos de L-carnitina es beneficiosa para disminuir las tasas de mortalidad por ascitis (hipertensión pulmonar). Estos efectos positivos pueden lograrse utilizando dosis bajas de suplementos de L-carnitina. Se espera que la administración de suplementos de L-carnitina en el agua de pollos de engorde alimentados con dietas de bajo contenido energético y proteínico pueda ser más eficaz para reducir las tasas de mortalidad por ascitis. Se necesita más investigación para confirmar estos beneficios.