Resumo

ZAPATA, Margarita M et al. Identificação de Mycobacterium avium subespécie paratuberculosis por PCR e definição do programa de controle da paratuberculose em rebanhos bovinos leiteiros. Rev Colom Cienc Pecua [online]. 2010, vol.23, n.1, pp.17-27. ISSN 0120-0690.

O objetivo deste estudo foi estabelecer um sistema de detecção e amplificação do Mycobacterium avium paratuberculosis (MAP) a partir de amostras fecais bovinas, utilizando a técnica de PCR em tempo real, como uma estratégia para apoiar o estabelecimento de um programa rastreio para a prevenção e controle de la paratuberculosis bovina no rebanho leiteiro da Universidade de Antioquia. Foram colhidas amostras de fezes de gado bovino a partir de uma fazenda enzoótica para a doença de Johne, e foram cultivadas em meio de cultura líquida Middlebrook 7H9 suplementado com micobactina, sob dois protocolos de isolamento: com ou sem inibidores. Foram utilizadas como controle negativo amostras fecais de bovinos saudáveis. Além disso, as amostras de DNA isoladas e cultivadas a partir de amostras fecais foram realizadas testes de PCR convencional e em tempo real, para amplificação elemento de inserção IS900 no MAP. Foi utilizado como controle positivo do teste DNA de uma estirpe de referencia. Os resultados foram avaliados por estatística descritiva e as comparações entre os resultados de cultura e teste PCR foram avaliadas por regressão simple. Os resultados de cultura bacteriológica mostraram 100% de crescimento em amostras com MAP, que foi verificada por PCR em 13,3% dos casos. Não houve correlação entre o resultado do cultivo e teste PCR ou entre a clínica e a positividade para MAP. Os resultados confirmam a necessidade de combinar o diagnóstico molecular com cultura bacteriológica para identificação positiva de vacas em um rebanho. Finalmente, uma estratégia de prevenção e controle da doença aplicável neste rebanho enzoótico e os rebanhos leiteiros e na Colômbia é discutida.

Palavras-chave : a doença de Johne; caquexia em vacas; cultura bacteriológica; gado leiteiro; paratuberculose bovina; real-time PCR.

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