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Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias

Print version ISSN 0120-0690
On-line version ISSN 2256-2958

Abstract

CORDERO CAMACHO, Claudia P et al. Detecção de sete vírus e de Mycoplasma em soro fetal bovino por PCR em tempo real. Rev Colom Cienc Pecua [online]. 2011, vol.24, n.4, pp.585-597. ISSN 0120-0690.

Objetivo: Foi utilizado o método de PCR em tempo real para detectar os vírus patogénicos bovinos: Adenovírus Bovino (BAdV), Vírus da Diarreia Viral (BVDV-1 e BVDV-2), Vírus Respiratório Sincicial Bovino (BRSV  ), Vírus  da  Estomatite  Vesicular (VSV),  Vírus  da  Parainfluenza  Bovina  tipo  3  (BPIV- 3),  Herpesvírus  Bovino-1  (BoHV-1) e Mycoplasma, em  soro  fetal  bovino  (FBS,  Microgen®) obtido  na Colômbia,  de modo a incluir esta  análise no controle de qualidade FBS.  Métodos: as linhas celulares de MDBK de origem bovina e HEp-2 de origem humana foram cultivadas com FBS Microgen® durante 21 dias, tomando amostras de cultura e sobrenadantes cada 7 dias. Uma vez retirado o DNA e RNA, foi sintetizado  o  cDNA  a  partir do  RNA.  Nos dois  tipos  de amostras  foram  analisadas  para  determinar a presença de patógenos mencionados por PCR em tempo real usando primers específicos para cada um e Resolight®(corante fluorescente de união à DNA). As curvas padrão foram geradas com diluições em série  de sequências virais específicas, clonadas em  Resultados: plasmídeos, que mostram  amplificação específica e altas eficiências.  a análise das culturas mantidas em FBS em estudo, não mostraram aumento no número de cópias virais detectadas ao longo do período de 21 dias de seguimento, exceto para o vírus da  estomatite  vesicular,  que  mostrou  um  aumento  transitório  nos  sobrenadantes  das  culturas de  duas linhas celulares aos 7 e 14 dias de cultura, que não foi considerado conclusivo para a presença do vírus. Conclusões: O método de PCR em tempo real foi útil para a detecção de vírus patogênicos e mycoplasma em FBS, e por este método foram obtidos resultados que demonstram que patógenos virais ou mycoplasmas estão presentes nas culturas mantidas com soro fetal bovino Microgen®.

Keywords : soro fetal bovino; vírus bovinos.

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