Resumo

VEGA-OLIVEROS, Carolina; CHEGWIN-ANGARITA, Carolina  e  ARDILA-BARRANTES, Harold D.. Condições para a análise de proteínas do micélio de Lentinuia edodes obtidas por fermentação em estado líquido. Rev.Colomb.Quim. [online]. 2019, vol.48, n.3, pp.3-12. ISSN 0120-2804.  https://doi.org/10.15446/rev.colomb.quim.v48n3.74843.

Lentinuia edodes é um cogumelo comestível com potencial para o desenvolvimento de nutracêuticos. Entretanto, os trabalhos voltados para a produção biotecnológica e o desenvolvimento de ferramentas analíticas que permitem aprofundar sua composição são incipientes. Nesta pesquisa, a produção de biomassa do fungo ao longo do tempo por meio de fermentação no estado líquido foi estudada e as condições que permitem obter extratos para a aplicação de ferramentas para análise proteômica foram selecionadas. Os métodos de extração de proteínas usados foram ácido tricloroacético (TCA) - acetona e TCA - acetona - fenol e comparada em termos de rendimento de extracção e perfis de separação utilizando electroforese 1D (SDS-PAGE) e 2D (IEF-SDS PAGE). Foi determinado que após 10 dias de crescimento, a maior produção de biomassa e proteína total foi obtida. A extração com TCA - acetona - fenol apresentou maior rendimento, maior resolução e número de bandas em eletroforese 1D. No 2DE os dois métodos permitiram a extração de proteínas com pontos isoelétricos na faixa de pH 3-10, mas o método TCA - acetona - fenol levou a uma extração diferencial, favorecendo a faixa de 33 a 113 kDa. Estes resultados constituem uma primeira aplicação de técnicas de separação eletroforética para futuros estudos proteômicos.

Palavras-chave : ácido tricloroacético; fenol; eletroforese; macromicetos; shiitake.

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