Resumo

RODRIGUEZ, M; BOTERO, E; IREGUI, CA  e  FIGUEROA, J. EXTRACCIÓN DE PRODUCTOS EXTRACELULARES DE Aeromonas hydrophila Y SUS EFECTOS EN TILAPIA ROJA (Oreochromis spp.) Y CACHAMA BLANCA (Piaractus brachypomus). Acta biol.Colomb. [online]. 2005, vol.10, n.2, pp.75-94. ISSN 0120-548X.

Se obtuvo un extracto crudo toxigénico (ECT) de A. hydrophila en diversos medios de cultivo como caldo BHI con extracto de levadura, soya tripticasa (TSB) y medio de sales mínimas (MSM). Además, se usaron diversas técnicas de concentración como la precipitación con solventes ácidos y concentración por deshidratación a 4 ºC; como técnica integrada de cultivo y concentración se usó el cultivo sobre papel celofán. Los extractos se pasaron por columna de cromatografía (QAE)-Sephadex A-50 y se les efectuó electroforesis en SDS-PAGE. Se midió la actividad biológica in vitro (actividad hemolítica y proteolítica) e in vivo (toxicidad en peces). Los resultados indican que para la cepa de trabajo utilizada y bajo nuestras condiciones de cultivo (28 ºC) el medio óptimo para la obtención de extracto es el MSM, y la técnica de concentración más adecuada es la deshidratación a 4 ºC. El extracto obtenido en TBS tuvo una actividad hemolítica de 128 UH/µL, proteolítica de 38,4 UP/µL, produjo alta mortalidad en peces y severas lesiones multiorgánicas. La electroforesis reveló bandas nítidas de 50 a 52 kDa y 63 a 68 kDa, que pueden corresponder a β hemolisina y a α hemolisina y otras tenues de 30 a 36 kDa que pueden corresponder a la metaloproteasa termoestable.

Palavras-chave : Aeromonas hydrophila; productos extracelulares (PEC); hemolisinas; septicemia hemorrágica.

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