Resumen

DADE, Martín et al. ACTIVIDAD APOPTÓTICA DE DERIVADOS SEMISINTÉTICOS DEL ISOPENTANOL EN CÉLULAS POLIMORFONUCLEARES HUMANAS. Vitae [online]. 2016, vol.23, n.1, pp.11-17. ISSN 0121-4004.  https://doi.org/10.17533/udea.vitae.v23n1a02.

Antecedentes: La inflamación es una respuesta fisiopatológica compleja generada por diferentes estímulos. Recientemente, se han propuesto nuevas estrategias farmacológicas que podrían ser utilizadas para conducir a la resolución de la inflamación mediante el aumento de la apoptosis de células inflamatorias. Objetivos: Estudiar la actividad apoptótica in vitro del isopentanol [ISO] y dos derivados semisintéticos -bromuro de isoespintanol [BrI] e isoespintanol desmetilado [DMI] - en células polimorfonucleares humanas (PMN). Métodos: Las PMN fueron expuestas a diferentes concentraciones de los compuestos durante 30 min en una disolución salina tamponada con fosfato (pH 7,4). La viabilidad celular se evaluó utilizando el ensayo de 3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difenil tetrazolio (MTT). Para distinguir entre los dos modos de muerte celular, la apoptosis y la necrosis, se examinaron las diferencias en los cambios morfológicos y bioquímicos de las células teñidas con anexina V (An) y/o yoduro de propidio (PI) usando dos técnicas de citometría de flujo. Resultados: Mediante el ensayo con MTT, se demostró que los compuestos BrI y DMI disminuyeron significativamente y de manera concentración-dependiente la viabilidad celular. El ensayo de unión con la anexina V-FITC mostró una alta proporción de células apoptóticas en las células tratadas con BrI (An+/PI-: 62,3 ± 8,2% versus 2,1 ± 0,5% del control, P < 0,05). La población de células tratadas con DMI mostraron el porcentaje más alto de células necróticas (A+/PI+: 43,4 ± 5,2% versus 0,4 ± 0,3% del control, P < 0,05). El análisis de núcleos apoptóticos se llevó a cabo a través de tinción con PI. La población de células en la región sub G₀G₁ representa células con ADN hipodiploidal, que es un indicador de apoptosis. Cuando las células se incubaron con BrI, la población de células en la región sub G₀G₁ aumentó, confirmando su mecanismo citotóxico. En presencia de un inhibidor de caspasas (Z-VAD-FMK), se observó una reducción significativa en la población celular en la región sub G₀G₁, indicando una menor degradación del ADN. Conclusiones: El bromuro de isoespintanol [BrI], induce un proceso apoptótico en PMN que está mediado -al menos en parte- por la activación de las caspasas, aunque este compuesto probablemente podría actuar también a través de otros mecanismos independientes de las caspasas.

Palabras clave : Isoespintanol; inflamación; neutrófilos; apoptosis.

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