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Revista Colombiana de Biotecnología

Print version ISSN 0123-3475

Abstract

PARRA-FUENTES, M.; REYES-PERDOMO, C.  and  HERNANDEZ-FERNANDEZ, J.. Detección molecular de potyvirus en hojas y minibulbillos de ajo, Allium sativum, asociados a un programa de producción de semilla limpia. Rev. colomb. biotecnol [online]. 2014, vol.16, n.2, pp.30-36. ISSN 0123-3475.  http://dx.doi.org/10.15446/rev.colomb.biote.v16n2.47237.

El ajo (Allium sativum L) se reproduce vegetativamente utilizando bulbillos, condición que favorece la propagación de enfermedades, especialmente bacterias, hongos y virus que afectan la calidad y el rendimiento del cultivo. Por este motivo se implementó la identificación molecular por RT-PCR de los potyvirus LYSV y OYDV en el sistema de producción de semilla limpia de ajo en tres clones nacionales. En la fase de producción de semilla limpia mediante micropropagación, se estandarizó el establecimiento de meristemos de ajo. La presencia de potyvirus se analizó en 586 plántulas mediante ELISA y en 70 por RT-PCR. Para la RT-PCR se extrajo ARN a partir de microbulbillos y hojas de plántulas, obteniéndose 1.7 a 226 ng/microlitro de ARN y se sintetizó entre 35 a 50 ng de cADN. Los resultados obtenidos mostraron que el protocolo de desinfección produjo una viabilidad del 73.6%. El análisis ELISA presentó un saneamiento del 96.1% de las plántulas a potyvirus, mientras que con RT-PCR se identificó la presencia de LYSV en el 8.6% de las muestras evaluadas. El virus del enanismo amarrillo de la cebolla (OYDV) no fue detectado en ninguna de las muestras. Los resultados muestran que el cultivo in vitro de meristemos de ajo es una excelente alternativa para la producción de semilla, mostrando un 92% de eficiencia. Además, validan el diagnóstico eficiente del potyvirus LYSV en hojas y microbulbillos de ajo.

Keywords : Allium sativum; ELISA; micropropagación; LSYV; potyvirus; OYDV; RT-PCR.

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