Abstract

OTERO-ARROYO, RAFAEL; HERNANDEZ-HERRERA, DARWIN  and  PEREZ, JAIR. Produção de embriões transgênicos bovinos por microinjeção de um vetor lentiviral pré e pós-fertilização. Rev.Bio.Agro [online]. 2020, vol.18, n.1, pp.64-73. ISSN 1692-3561.  https://doi.org/10.18684/bsaa.v18n1.1412.

O objetivo desta pesquisa foi comparar a eficiência da microinjeção de um vetor lentiviral portador do gene eGFP em oócitos maduros (PRE) e zigotos ( POS) seis horas após a fertilização in vitro (FIV). Para isso, 1777 oócitos maduros foram distribuídos em 7 tratamentos, um controle (T1), três PRE (T2PRE, T3PRE e T4PRE) e três POS (T2POS, T3POS e T4POS) que foram microinjetados antes (PRE) e depois (POS ) da fertilização in vitro. Os tratamentos T4PRE e T4POS foram microinjetados com o vetor lentiviral. A taxa de produção de blastocistos no dia oito e a expressão da proteína eGFP em T4PRE e T4POS foram avaliadas. Não foram encontradas diferenças na taxa de produção de blastocistos entre o tratamento T1 (20,2%), nos controles da cultura (T2PRE e T2POS) e nos controles de microinjeção (T3PRE e T3POS). A presença do vetor lentiviral diminuiu (p<0,05) a taxa de formação de blastocistos nos grupos T4PRE e T4POS (5,5 e 3,5%, respectivamente). Todos os blastocistos produzidos em T4PRE e 71,4% produzidos em T4POS expressaram a proteína eGFP (p<0,05), principalmente na trofoectoderma e na massa celular interna do blastocisto.

Keywords : Modificação genética; Proteína fluorescente verde; Transgênese.

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