Efecto de entomonematodos sobre poblaciones de la broca del cafe, Hypothenemus hampei (Coleoptera: Scolytidae), en frutos en el suelo

Effect of entomopathogenic nematodes on populations of the coffee berry borer, Hypothenemus hampei (Coleoptera: Scolytidae), in berries on the soil

JUAN CARLOS LARA G.¹, JUAN CARLOS LOPEZ N.², ALEX E. BUSTILLO P.³

1 Estudiante de Ingenieria Agronomicas. Universidad de Caldas, Manizales. Trabajo de Grado. E-mail: Juan.Carlos.Lara@cafedecolombia.com

2 Autor para correspondencia: Asistente de Investigacion. Entomologia. Centro nacional de Investigaciones de cafe. Cenicafe - Plan Alto. Chinchina, Caldas, Colombia. Tel: (850) 65 50. E-mail: JuanCarlos.Lopez@cafedecolombia.com

3 Investigador Principal I. Entomologia. Centro riacional de Investigaciones de Cafe. Cenicafe. Chinchina, Caldas, Colombia. E-mail: Alex.Bustillo@cafedecolombia.com

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Resumen. Se estudio el efecto de dos entomonematodos nativos, Heterorhabditis sp. (Rhabditida: HeteroRhabditidae) y Steinernema sp. (Rhabditida: Steinernematidae) en dosificaciones de 125.000, 250.000 y 500.000 Juveniles Infectivos (JI) por plato del arbol sobre poblaciones de la broca del cafe, Hypothenemus hampei. Durante la primera cosecha de cafe del año 2001, no se encontraron diferencias estadisticas entre tratamientos en cuanto al nivel de infestacion por broca en el arbol debido a la alta variabilidad del numero de frutos con los que se inicio el experimento. Para la segunda cosecha de cafe del año 2001, se encontraron porcentajes de mortalidad de broca con las dos especies entre el 53 y el 88%, un mes despues de aplicacion, siendo diferentes esladisticamente (p<0,05) en relacion con el testigo (6%). Cinco de los seis tratamientos evaluados presentaron porcentajes promedios de infestacion por broca en el arbol (PPIA), inferiores al testigo 9,93 ± 1,81 (prom ± E. E), destacandose las aplicaciones de Steinernema sp. (500.000 Jl/plato) con una infestacion por broca de 4,17 ± 0,57 y para Heterorhabditis sp. (250.000 Jl/plato) con una infestacion por broca de 5,62 ± 1,24. Esta reduccion para cada uno de los casos equivale al 58 y 43,4%, respectivamente con relacion al testigo. Dicha disminucion puede explicarse, al observar los porcentajes de mortalidad promedios de estados de broca en frutos del suelo (PMB), que fluctuaron entre el 13,64 y el 42,27% para ambas especies de nematodos. A los 30 dias despues de la aplicacion, esta diferencia es notoria, encontrando diferencias signiflcativas con el testigo (p<0,05). En conclusion estos nematodos penetran los frutos brocados en el suelo, parasitan principalmente estados inmaduros, se reproducen en estos insectos parasitados y reducen poblaciones de broca en los cafetales.

Palabras clave: Steinernema. Heterorhabditis. Juvenil infective

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Summary. The effect of two native entomopathogenic nematodes Heterorhabditis sp. (Rhabditida: HeteroRhabditidae) and Steinernema sp. (Rhabditida: Steinernematidae) was studied in doses of 125.000, 250.000 and 500.000 infective juvenils (U) per tree base on populations of the coffee berry borer, llypothenemus hampei. During the first coffee harvest of 2001, there were no statistical differences between treatments for infestation level in the tree due to the high variability of the number of fruits with which the experiment began. For the second coffee harvest of 2001, percentage of mortality of the coffee berry borer with the two species was 53 and 88%, a month after their application, statistically different (p<0,05) in relation to the control (6%). Five of the six evaluated treatments had average percentages of borer infestation in the tree (PPIA) lower than the control 9,93 ± 1,81 (mean ± S. E), particularly the applications of Steinernema sp. (500.000 U/plate) with a PPIA of 4,17 ± 0,57 and Heterorhabditis sp. (250.000 U/plate) with PPIA of 5,62 ± 1,24. This reduction is equivalent to 58 and 43,4%, respectively, in relation to the control. This reduction can be explained by observing the mean percentages of mortality of coffee berry borer life stages in fruits on the ground (PMB), which fluctuated between 13,64 and 42,27% for each species of nematodes. Thirty days after application, this difference is well established, with significant differences compared to the control (p<0,05). In conclusion, these nematodes penetrate the fallen fruits on the ground, mainly parasitize immature stages and reproduce in these insects within the fruit to reduce the populations of coffee berry borer in coffee plantations.

Key words: Steinernema. Heterorhabditis. Infective juvenile.

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Introduccion

La broca del fruto del cafe, Hypothenemus hampei (Ferrari) introducida a Colombia en 1988, es la plaga mas importante que afecta el cafe. Actualmente infesta cerca de 800.000 hectareas de cafe, afectando el patrimonio de mas de medio millon de familias cafeteras (Bustillo 2002). En Colombia, el cafe presenta multiples floraciones (Camayo y Arcila 1997) como respuesta a las condiciones climaticas, lo cual causa que, en zonas como el eje cafetero, se encuentren durante todo el año frutos susceptibles de ser atacados, incrementandose considerablemente la frecuencia de las aspersiones de insecticidas para su control (Velez et al. 2000).

En condiciones favorables para la broca tales como presencia de frutos en el arbol y en el suelo, ausencia de enemigos naturales, alta humedad y disposicion de frutos durante todo el año, esta desarrolla su potencial biotico sin ninguna restriccion (Le Pelley 1973; Urrelo et al. 1982). Por lo anterior, se considera que es la plaga de mayor importancia en el cafe, lo cual amerita su control debido a las grandes perdidas que ocasiona (Bustillo et al. 1993). Los frutos infestados y que caen al suelo juegan un papel importante en la dinamica poblacional al albergar el insecto durante la epoca de escasez de frutos y poseer mayor humedad, ofreciendole un buen refugio para su desarrollo (Bergamin 1944; Kraker 1988; Bernai et al. 1999). Salazar et al. (1993) afirman que la broca en estos frutos continua desarrollandose para salir posteriormente y causar nuevas infestaciones.

En Colombia, se ha implementado un programa de Manejo Integrado de la broca del cafe, que involucra los componentes quimico, cultural y biologico. El control quimico no es la solucion ya que su eficacia es reducida debido a que los productos aplicados no penetran en los frutos para matar los estados de la broca que permanecen en su interior (Bustillo 1991, 1995). El control cultural es una practica que debe estar enfocada a realizar labores en el cultivo como: cosechar oportunamente los frutos maduros del arbol, retirar del cultivo todos los frutos secos y en los focos cosechar semanalmente todos los frutos brocados y si es posibie los caidos alrededor de los arboles infestados, lo cual demanda una gran cantidad de mano de obra disponible (Bustillo 1991). El control biologico con parasitoides es una alternativa con alto potencial para el control de la broca; sin embargo, aiin no es una opcion facil porque sus procesos de produccion masiva son bastante costosos (Baker 1999).

Dentro del grupo de organismos considerados con potencial para el control de la broca en el suelo, estan los entomonematodos (EN) (Commonwealth Institute of Biological Control 1990; Bustillo 1991; Georgis y Horn 1992) destacandose las familias Steinernematidae, HeteroRhabditidae, Allantonematidae V Mermithidae. (Allard y Moore 1989; Hominick y Collins 1997; Smiths 1997) siendo consideradas las dos primeras como las mas apropiadas para controlar plagas del suelo debido a sus habitos cripticos(Georgis y Hom 1992).Estos organismos poseen una caracteristica particular al estar asociados con bacterias entomopatogenas. Avances en la produccion masiva, formulacion y metodos de aplicacion, han permitido considerarlos en programas de control contra insectos cuyo habitat es el suelo (Georgis y Hom 1992; Lopez 1999).

Los EN podrian sustituir a los insecticidas por el amplio numero de insectos que pueden atacar, su seguridad y facilidad de aplicacion y la ausencia de restricciones de registro en algunos paises (Capinera y Epsky 1992).

Investigaciones realizadas en Cenicafe (Lopez 1999; Molina y Lopez 2002) en condiciones de laboratorio e invernadero han comprobado el efecto patogenico de entomonematodos de las familias Steinernematidae y HeteroRhabditidae sobre diferentes estados de la broca del cafe. Bajo condiciones de campo no se conoce su comportamiento, por lo que la presente investigacion se dirigio a averiguar la accion de dos nematodos nativos encontrados previamente en ecosistemas cafeteros (Heterorhabditis sp. y Steinernema sp.) sobre poblaciones de la broca del cafe que se encuentra en frutos en el suelo.

Materiales y Metodos

El experimento se realizo en el laboratorio de Entomologia de Cenicafe y en la Estacion Central "Naranjal" en un lote de 696 m², correspondiente a una zoca de tres años con 432 plantas de cafe variedad Colombia sembradas a 1,5 x 1,0 m y con una pendiente aproximada del 20%.

Para la multiplicacion de los entomonematodos se utilizaron larvas de Galleria mellonella (Lepidoptera: Pyralidae), de ultimo instar, criadas en dieta artificial, la cual constaba de 150 ml de miel, 45 g de cera de abejas, 310 g de salvado de trigo y 150 ml de glicerina.

Se utilizaron frutos de cafe variedad Colombia de 190 dias de desarrollo fisiologico, los cuales se infestaron artificialmente en la Unidad de Cria de Parasitoides de Cenicafe en una proporcion de cuatro brocas por fruto; estos frutos se desinfectaron previamente con el fin de reducir contamination; para esto, los frutos se colocaron en una solucion de hipoclorito de sodio al 1% durante 15 minutos. Luego los frutos se marcaron en un extremo con pintura para su facil identificacion en las distintas evaluaciones. Despues de 30 dias de la infestacion, se tomo una muestra correspondiente al 10% de los frutos a utilizar en el experimento y se disecaron evaluando la proporcion de estados con el fin de estimar la poblacion inicial en los frutos colocados en el plato de cada arbol.

Los tratamientos (Tabla 1) fueron tres dosis de los dos entomonematodos (125.000, 250.000 y 500.000 Jl) en 300 ml de agua por arbol, aplicados por medio de un dispensador de agua, sobre frutos brocados colocados previamente en el plato del arbol (30 frutos brocados / arbol), coincidiendo con la presencia de frutos brocados en el plato del arbol despues de las cosechas. Como testigo se aplico en cada plato del arbol el mismo volumen de agua (300 ml) utilizado en la aplicacion de Jl, pero sin nematodos. Cada tratamiento consto de ocho unidades experimentales, en las cuales se evaluo la infestacion y en los platos de los mismos se evaluo la mortalidad de los estados de broca. Para esto ultimo, se retiraron cinco frutos al azar del plato de los arboles para ser disecados, cada 15 dias (seis evaluaciones) hasta el inicio de la primera cosecha del año y cada 30 dias hasta el inicio de la segunda cosecha.

La unidad experimental (U. E.) estuvo constituida por un arbol sobre el cual se coloco una jaula entomologica de 1,20 m. x 1,20 m. x 2,40 m., fabricada en PVC cubierta con muselina, la cual tenia en un extremo cinta velcro para facilitar el ingreso a la unidad experimental en la toma de datos. Al cubrir cada arbol con una jaula entomologica se permitia el paso de luz y aire, y por ser permeable se permitia el ingreso de agua cuando se presentaban las lluvias. El objeto de usar dicha jaula fue el de evitar el ingreso o el escape de broca de la U.E.

En cada U. E. se colectaron los frutos brocados del arbol, dejando unicamente los frutos verdes sin brocar. De la misma manera, se retiraron todos los frutos caidos en cada plato y luego se distribuyeron 30 frutos brocados. Este mismo procedimiento se repitio para la segunda parte del experimento.

Con los resultados parciales encontrados para la primera cosecha del año, se pudo determinar una variacion alta para las variables evaluadas, lo que llevo a realizar algunas modificaciones para la segunda cosecha como: descope de los arboles, con el fin de evitar el daño de las jaulas, desrrame de la parte inferior del arbol, puesto que estas ramas ya no eran productivas y dificultaban las evaluaciones, homogenizacion de la muestra dejando cada U. E. con un numero similar de frutos y modification del sistema de aplicacion utilizando un frasco atomizador, con el cual se podian simular mejor las condiciones de una aspersion, pues se disminuia el tamaño de la gota.

Adicionalmente se quiso evaluar la persistencia de los nematodos en el suelo, para lo cual se realizaron dos muestreos tan pronto como se terminaron las evaluaciones para las respectivas cosechas; es decir, a los 3 y 4 meses despues de las aplicaciones. Para esto se colectaron muestras de suelo de las unidades experimentales donde se tenian los diferentes tratamientos y se realizo una prueba con larvas de Galleria mellonella en las cuales se observaba o no la infeccion por nematodos. Para esto, en recipientes plasticos de 17,5 cm x 12,5 cm x 7,5 cm, se agregaron 800 g de suelo aproximadamente de cada tratamiento y con un 12% de humedad. En cada recipiente se colocaron cinco larvas de G. mellonella axenicas. Los recipientes se sellaron y 10 dias despues se examinaron las muestras. Las larvas con indicios de parasitismo se separaron y a cada muestra positiva se le realizo una diseccion, para confirmar que el parasitismo era producido por nematodos. Luego se llevaron a camaras secas y mas adelante a camaras modificadas tipo White (Fig.1) para extraer los Jl de los entomonematodos y comparar si coincidian con las dos especies evaluadas.

Analisis estadistico

Las variables evaluadas en el experimento en la parte aerea del arbol fueron: porcentaje promedio de infestacion por arbol y porcentaje de mortalidad de broca. Para evaluar el efecto de la aplicacion de los Jl en el plato del arbol se considero la variable porcentaje de mortalidad de estados de broca en frutos en el suelo. Adicional a esta variable, se evaluo el porcentaje de ausencia y porcentaje de abandono de adultos de broca en estos frutos.

Para las dos etapas del experimento se utilizo el mismo analisis estadistico como se muestra a continuacion: promedios y variacion para las variables descritas por tratamiento, analisis de varianza de acuerdo con el modelo de analisis del diseno completamente aleatorio en arreglo factorial 3x3 +1, prueba de comparacion de Tukey al 5% para comparar los promedios de los factores por separado en caso de que la interaccion fuera significativa y que el Anava mostrara efecto de ellos. Para el analisis de los resultados, los datos se transformaron con Log 10. Dicha transformacion se realizo en la primera parte del experimento en las variables porcentaje de infestacion con el total de frutos y porcentaje de infestacion con el total de frutos maduros brocados.

Resultados y Discusion

Evaluacion durante la cosecha de mitaca

Efecto de entomonematodos sobre el desarrollo de la broca en frutos en el suelo. Durante la primera cosecha de cafe del año, al aplicar nematodos entomopatogenos a frutos infestados con broca en el suelo, se observaron mortalidades con las tres dosis utilizadas y las dos especies evaluadas. Tratamientos como el de Heterorhabditis sp. (125.000 Jl / plato) y Steinernema sp. (250.000 Jl / plato) alcanzaron los valores mas altos de mortalidad, siendo estos respectivamente de 28,9 y 29,7%. Mientras que en ei testigo, los valores de mortalidad en broca por causas distintas estuvieron alrededor del 17,5% (Fig.2). Para esta variable no se encontro una relacion directa entre el aumento de la mortalidad y el aumento de la dosis de entomonematodos aplicada, pero si se pudo observar una tendencia de ambos entomonematodos a disminuir la mortalidad con la mayor dosis aplicada (500.000 Jl / plato). El incremento que se logra en el porcentaje de mortalidad de broca con la aplicacion de los dos entomonematodos con respecto al testigo, es importante dentro de un esquema de manejo integrado ya que se pueden reducir poblaciones de broca que van a ser fuentes importantes de reinfestacion de la plaga en el cultivo.

En cuanto al porcentaje de mortalidad corregido, el cual fue estimado por la formula de Schneider - Orelly, este no mostro diferencias estadisticas en esta primera parte entre concentraciones y especies de entomonematodos, pero es importante resaltar un aumento en los porcentajes de mortalidad del 14,6% para la primera evaluacion hasta el 83,6% hacia la cuarta evaluacion como se aprecia en la figura 3.

En relacion con el numero de entomonematodos por fruto se puede observar que los unicos tratamientos donde se encontraron Jl fue donde hubo aplicacion de los mismos, encontrandose desde 0,1 hasta 6,7 Jl en promedio por fruto, a partir de los 15 dias de la aplicacion. Este numero de Jl permanece a traves del tiempo notandose que a partir de los 60 dias hay un incremento en todos los tratamientos, lo que indica que hay reproduccion del entomonematodo dentro del fruto de cafe. Hacia los 15 dias el nematodo que se presenta en mayor cantidad dentro del fruto es Steinernema sp. en concentracion de 125.000 Jl, con 6,7 Jl en promedio por fruto. A los 30 dias el mayor promedio lo presenta Heterorhabditis en concentracion de 125.000 Jl con 33,9 Jl por fruto. Esto concuerda con Molina y Lopez (2002) quienes al analizar dos especies de entomonematodos comprobaron que estos nematodos en condiciones de laboratorio tenian la capacidad de alcanzar en poco tiempo el orificio de entrada de la broca al grano, penetrar e infectar estados de esta. Ademas, es importante resaltar que a los 15 y 30 dias despues de la aplicacion se observo un mayor numero de nematodos por fruto con las concentraciones menores de ambos entomonematodos (125.000 Jl/plato).

En cuanto a las variables porcentaje de ausencia de estados de broca y porcentaje de abandono de adultos de broca de estos frutos luego de la aplicacion de los entomonematodos, no se encontraron diferencias estadisticas. Sin embargo, es importante resaltar que al final de esta parte del experimento, los tratamientos donde se aplicaron nematodos, presentaron porcentajes de ausencia mayores que los del testigo. Estos tratamientos estuvieron entre un 80 y un 100%, mientras que en el testigo se alcanzaron porcentajes de ausencia del 65%, lo cual demuestra la tendencia de estos a disminuir las poblaciones de broca dentro de los frutos.

Efecto de los entomonematodos sobre ef desarrollo de la broca y la infestacion en el arbol. El analisis de varianza no mostro diferencias significativas entre tratamientos (p>0,05) para la variable porcentaje promedio de infestacion por arbol. Sin embargo, observando los valores promedio para la variable porcentaje de infestacion (Tabla 2), en los diferentes pases de recoleccion antes de la primera cosecha del año, se da una tendencia a ser inferiores a los encontrados en el testigo, deslacandose el tratamiento Heterorhabditis sp. (500.000 Jl / plato), que durante todos los pases de cosecha para esta variable de infestacion en el arbol siempre fue menor que el testigo. La tendencia anteriormente descrita se observa para los tratamientos Stemernema sp. en concentraciones de 125.000, 250.000 y 500.000 Jl. Como se puede observar en la tabla 2, es importante mencionar que a traves de las seis evaluaciones los tratamientos de mayor concentracion de Jl (500.000), para ambas especies de entomonematodos, presentaron valores menores de infestacion a traves del tiempo 7,9 y 9,77% con respecto al testigo 14,43%, lo cual desde el punto de vista de control de broca y daño al grano de cafe es bueno, pues asi el agricultor se puede estar viendo beneficiado en el producto final que va a llevar para la venta.

Adicionalmente, se evaluo el porcentaje de infestacion en frutos maduros, en el cual se observaron porcentajes menores de los tratamientos con respecto al testigo a traves de las seis evaluaciones, pero estos no presentaron diferencias estadisticas entre si, igualmente por la variabilidad de los resultados. Los tratamientos de Steinernema sp. (T4, T5 y T6) con sus tres dosis presentaron porcentajes de infestacion en frutos maduros menores a los de Heterorhabditis sp. en su respectiva concentracion a traves del tiempo de evaluacion y a su vez menores que el testigo, lo cual puede deberse a que con este nematodo se obtuvieron los mayores porcentajes de mortalidad de frutos en el suelo.

Evaluacion durante la cosecha principal

Los resultados obtenidos en la segunda parte del experimento mostraron diferencias en relacion con el porcentaje de mortalidad de estados de broca en frutos en el suelo. Todo esto puede deberse a los ajustes realizados para esta etapa, los cuales fueron explicados anteriormente en la metodologia.

Efecto de entomonematodos sobre el desarrollo de la broca en frutos en el suelo. Para la variable porcentaje de mortalidad en frutos en el suelo, se realizo un analisis de varianza y se encontraron diferencias estadisticas para la primera evaluacion (p<0,05) de los tratamientos con respecto al testigo. Para las evaluaciones posteriores los resultados obtenidos no mostraron diferencias entre si (Tabla 3). Lo anterior puede explicarse debido a que en la primera evaluacion se tuvieron los mayores promedios de nematodos dentro de fruto.

Posteriormente, los valores de mortalidad fueron corregidos por el testigo, por medio de la formula de Sneider - Orelly y no se observaron alli diferencias estadisticas entre las dos especies de entomonematodos y las tres concentraciones utilizadas. Lo importante aca es resaltar que cuando se aplican nematodos, las mortalidades promedio para la cosecha principal estuvieron entre un 13,64 y un 42,27% como se puede observar en la tabla 4. Ademas, que para las cuatro evaluaciones que se realizaron durante esta parte del experimento, los valores de mortalidad mas altos se lograron con la dosis de 250.000 Jl / plato para ambos entomonematodos, siendo estos de 57,06 y 59,82% para Heterorhabditis sp. y Steinernema sp., respectivamente (fig. 4), lo que coincide ademas con los valores mas altos de entomonematodos por fruto (Tabla 5). Los resultados encontrados muestran un efecto de ambas especies de nematodos hasta cuatro meses despues de su aplicacion, lo cual concuerda con Baur y Kaya (2001), quienes mencionan que dependiendo de las condiciones ambientales y del mismo tipo de suelo, Steinernema puede sobrevivir hasta cinco meses y lieterorhabditis hasta dos meses.

Adicionalmente, para esta parte se realizaron los analisis de dos variables como fueron el total de estados de broca por fruto en el suelo y el total de entomonematodos por fruto. no encontrandose diferencias estadisticas en el analisis de varianza que se realizo (p>0,05) para ninguna de las dos. Los promedios para ambas variables a traves de las tres primeras evaluaciones se aprecian en la tabla 5. Para la tercera evaluacion se puede observar claramente que el testigo supera a los tratamientos en cuanto al numero promedio de estados de broca por fruto, lo cual da muestras del efecto que tienen los entomonematodos sobre el insecto, al disminuir las pobiaciones del mismo en los frutos del suelo. En lo que se refiere al numero de nematodos por fruto, es importante resaltar que en las dos primeras evaluaciones el mayor promedio es para Steinernema sp. lo cual da una idea de la mayor capacidad que posee este para penetrar los frutos de cafe, pero hacia la tercera evaluacion, los mayores promedios corresponden a Heterorhabditis sp. lo cual da a entender la capacidad que posee este nematodo de multiplicarse mejor que Steinernema sp., ya que de Heterorhabditis sp. es suficiente que penetre un nematodo para multiplicarse, puesto que en su primera generacion este es hermafrodita, caso contrario con el segundo que necesita de un macho y una hembra para multiplicarse.

Efecto de entomonematodos sobre el desarrollo de la broca y la infestacion en el arbol. Para la variable porcentaje promedio de infestacion en el arbol se realizo un analisis de varianza, en el cual no se encontraron diferencias estadisticas (p>0,05). Dicho analisis se realizo con base en el total de frutos y el total de frutos maduros. Tales comportamientos a traves del tiempo, se pueden observar en las figuras 5 y 6.

Vale la pena mencionar que en esta parte del experimento tampoco se encontro parasitismo y mortalidad de brocas en frutos en el arbol. Ademas, las modificaciones que se hicieron al inicio de esta segunda parte, para tratar de disminuir la variacion para la variable porcentaje de infestacion en arbol, no fueron suficientes; no siendo asi para la variable porcentaje de mortalidad de estados de broca en fruto y numero de nematodos por fruto, donde el cambio del equipo de aspersion favorecio notablemente el comportamiento de los nematodos entomopatogenos.

Es importante mencionar que, a lo largo de las dos etapas de evaluacion (primera cosecha del año y cosecha principal), se llevaron registros de la informacion climatica de la Estacion Central Maranjal (Fig. 7), donde se puede apreciar que variables como la temperatura y la humedad relativa, presentan un comportamiento similar a traves de los diez meses de evaluacion, mientras que las variables brillo solar y precipitacion si tienen unos picos muy marcados a traves del tiempo, pudiendose observar para la primera valores entre 118,1 y 209,5 horas de luz al mes; en tanto que para la segunda se observan valores entre 18,6 y 445,6 mm de precipitacion por mes. Al analizar la informacion registrada para los meses de diciembre de 2000 y julio de 2001, que fueron los meses en los cuales se hicieron las aplicaciones de los entomonematodos para las dos partes del experimento, las condiciones iniciales en ambos casos son similares.

En el mes de marzo de 2001, se presentaron los mayores registros de precipitacion, alcanzando estos valores de 445,6 mm, lo cual concuerda con un aumento en el porcentaje de ausencia de broca en frutos del suelo, lo que se ve reflejado directamente en una reduccion del numero de estados del insecto dentro del fruto. Bustillo (2002) menciona tambien que la humedad afecta la mortalidad y el potencial reproductivo de la broca. A su vez, esta mayor precipitacion coincide con las epocas de mayor infestacion de broca en tratamientos como los de Heterorhabditis sp. en sus tres dosis con respecto al testigo y una disminucion generalizada en el porcentaje de infestacion de frutos maduros de los tratamientos.

En contraste con lo anterior, en el mes de agosto de 2001, se presentaron los valores menores de precipitacion, los cuales coinciden con los porcentajes mayores de mortalidad de estados de broca en el suelo para ambas especies (82,01% para Heterorhabditis en dosis de 250.000 Jl y 88,19% para Steinemema en dosis de 250.000 JI), un promedio mayor de entomonematodos dentro del fruto para ambas especies (Heterorhabditis con 16,9 JI / fruto en una dosis de 250.000 Jl, y Steinemema con 16,26 JI / fruto en una dosis de 125.000 Jl). Ademas, esta poca precipitacion coincidio con una disminucion en el porcentaje de infestacion en el arbol que fue de 3,55 hasta 8,08% en los tratamientos, mientras que en el testigo fue de 14,45%.

Conclusiones

- Las dos especies de entomonematodos evaluadas tienen la capacidad de penetrar los frutos de cafe brocados que se encuentran en los platos de los arboles, causar mortalidad y multiplicarse en los estados de broca que hay en dichos frutos.

- La reduccion en la cantidad de estados de broca en los frutos en el suelo, se reflejo en una menor infestacion en los arboles.

- Las dos especies de entomonema todos parasitan principalmente los estados inmaduros de la broca que se encuentran dentro de los frutos que estan el suelo.

- No se hallaron estados de broca parasitados por los entomonematodos en frutos localizados en el arbol de cafe.

Agradecimientos

AI Dr. Celso Arboleda, por sus valiosos aportes tecnicos, al auxiliar Uriel Eduardo Posada, por la colaboracion en el campo y en el laboratorio, a las Disciplinas de Entomologia de Cenicafe, por el suministro de la informacion climatica y al personal de la Estacion Central "Naranjal", por su ayuda en el montaje y adecuacion en campo de las parcelas experimentales.

Literatura citada

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Recibido: Abr. 22 / 2003 Aceptado: Oct. 27 / 2003