Introducción

La enfermedad de Chagas es una compleja zoonosis vectorial, causada por el parásito Trypanosoma cruzi, que es trasmitido a través de las heces de los triatominos (^{Guhl 2007}; ^{OMS 2016}). Se presenta en toda América del Sur, América Central y México y actualmente representa un serio problema de salud para los países de esta región (^{Guhl 2007}). Existen aproximadamente entre 6 y 7 millones de personas infectadas en el mundo (^{OMS 2016}). El riesgo de trasmisión vectorial se presenta en todo el continente americano y se produce principalmente en Latinoamérica, pero actualmente la infección se ha diseminado a países como Alemania, Australia, Canadá, España, Francia, Italia y Japón, esto debido al incremento de la movilidad de personas entre América Latina y el resto del mundo (^{Pinazo y Gascon 2015}).

Al parecer la transmisión de la enfermedad de Chagas en el Ecuador existe desde épocas preincaicas en la provincia de Manabí. La enfermedad habría afectado también a los militares españoles que iniciaron la conquista del valle del río Portoviejo, alrededor de 1530 (^{Aguilar et al. 1999}).

En el Ecuador, las zonas de riesgo abarcan a 22 provincias, de las aproximadamente 8,4 millones de personas que viven allí, entre 3 a 5 millones son muy vulnerables, debido a las características de sus viviendas y a sus condiciones de pobreza (^{Aguilar et al. 1999}; ^{Abad-Franch et al. 2001}; ^{Aguilar et al. 2006}; ^{SNEM 2013}). Durante muchos años la prevalencia de la enfermedad fue subestimada (^{Abad-Franch y Aguilar 2003}). Dichas tasas oscilan entre 0,12 a 1,16 por cada 100.000 habitantes (^{MSP 2013}). Estimaciones realizadas por este organismo de salud muestran que la prevalencia general es probablemente del 1,38 %; la Sierra muestra una prevalencia de 0,65 %, mientras que en la Costa y la Amazonía alcanza porcentajes de 1,99 % y 1,75 %, respectivamente. Entre 165.000 y 170.000 personas son seropositivas en el país y, aproximadamente, el 50 % de ellas serían portadoras de cardiopatía (^{Aguilar et al. 1999}). La mayor tasa de prevalencia corresponde a Loja y El Oro (= 5 %), y Guayas es la provincia con mayor número de personas infectadas (> 65.000) (^{Aguilar et al. 2006}).

Las provincias que históricamente han sido más afectadas por esta enfermedad son El Oro, Manabí, Santa Elena, Guayas y Loja (^{Garzón et al. 2002}). En los años 50 se definió que el área endémica del Ecuador abarcaba el litoral, los valles cálidos interandinos y las estribaciones occidentales de la Cordillera de los Andes (^{Aguilar et al. 2006}). Sin embargo, debido a la descripción reciente de focos autóctonos de transmisión de T. cruzi en las provincias amazónicas de Napo, Sucumbíos y Orellana, el área endémica, tradicionalmente conocida en el Ecuador, se amplió hacia la Amazonía (^{Amunárriz et al. 1991}, ²⁰¹⁰; ^{Chico et al. 1997}).

Existen alrededor de 137 especies de triatominos descritas en el mundo, se reparten en 5 tribus y 17 géneros, habitan en su mayoría el continente americano con excepción de Triatoma amicitae Lent, 1951, Triatoma bouvieri Larrouse, 1924, Triatoma cavernicola Else & Cheong, 1977, Triatoma leopoldi (Schoudeten, 1933), Triatoma migrans Breddin, 1903, Triatoma pugasi Lent, 1953, Triatoma rubrofasciata (De Geer, 1773) y Triatoma sinica Hsiao, 1965, registrados en Asia, África y Europa (^{Dujardin et al. 2000}; ^{Galvão et al. 2003}).

En el Ecuador se han registrado 17 especies de triatominos, de los cuales al menos nueve poseen importancia vectorial en la trasmisión de la enfermedad de Chagas (^{Aguilar et al. 1999}, ²⁰⁰⁶; ^{Abad-Franch et al. 2001}, ²⁰¹³; ^{Dujardin et al. 2000}; ^{Abad-Franch y Aguilar 2003}). Triatoma dimidiata (Latreille, 1811) es una especie introducida sinantrópica, es el vector más importante de T. cruzi en el país, mientras que Rhodnius ecuadorensis Lent & León es considerado el segundo, con hábitats domésticos y silvestres. Triatoma carrioni Larrouse, 1926, es un vector importante en zonas andinas de Cañar, Azuay y Loja, sus colonias han sido encontradas en ambientes domésticos y silvestres. Rhodnius pictipes Stål, 1872 y Rhodnius robustus Larrouse, 1927, son vectores silvestres en la Amazonía. Panstrongylus rufotuberculatus (Champion, 1899), P. chinai (Del Ponte, 1929) y P. geniculatus (Latreille, 1811) pueden colonizar viviendas y transmitir la enfermedad de Chagas. Pastrongylus herreri (Wygodzinsky, 1948) y Pastrongylus howardi (Neiva, 1911) representan un peligro potencial, pues son especies selváticas que se han encontrado también en viviendas (^{Abad-Franch et al. 2001}; ^{Abad-Franch y Aguilar 2003}).

Triatoma venosa (Stål, 1872), Triatoma dispar Lent, 1950, Eratyrus mucronatus Stål, 1859, Eratyrus cuspidatus Stål, 1859, Cavernicola pilosa Barber, 1937 y Pastrongylus lignarius (Walker, 1873) son consideradas especies de hábitos silvestres y aparentemente sin un riesgo potencial (^{Abad-Franch et al. 2001}; ^{Galvão et al. 2003}; ^{Abad Franch y Aguilar 2003}). Rhodnius barretti Abad-Franch, Palomeque & Monteiro, 2013, es una especie silvestre de las provincias de Orellana y Sucumbíos, considerado como un nuevo candidato a vector de la enfermedad de Chagas, debido a sus características biológicas y de comportamiento (^{Abad-Franch et al. 2013}).

En la provincia de Pichincha se han registrado T. carrioni, R. ecuadorensis, P. geniculatus, P. rufotuberculatus y T. dispar (^{Abad-Franch et al. 2001}; ^{Abad-Franch et al. 2003}), sin embargo, específicamente para el Cantón San Miguel sólo se ha registrado T. carrioni (^{Abad-Franch et al. 2003}).

Según ^{Abad- Franch et al. (2001)} en el Ecuador se registró a T. dispar en las provincias de Imbabura (Lita y La Carolina) y Cotopaxi (La Maná), con hábitos estrictamente silvestres en bosques húmedos tropicales (0 a 300 msnm) y bosques muy húmedos premontanos (300 a 1.800 msnm), con rangos de temperatura de 18 a 25 °C y precipitaciones entre 2.000 a 4.000 mm. Esta especie no mostró evidencia de infección natural, por lo que no se le dio importancia como vector potencial en la transmisión de T. cruzi. Posteriormente, ^{Abad- Franch y Aguilar (2003)} ampliaron los registros de esta especie para Pichincha (Puerto Quito), Los Ríos (Babahoyo) y Chimborazo (Chunchi), dentro de los mismos tipos de bosque, rangos de temperatura y precipitación. Además, según análisis biogeográficos consideraron que T. dispar estaría potencialmente presente en los cantones Pedro Vicente Maldonado y San Miguel de los Bancos de la provincia de Pichincha y en las provincias de Carchi, Esmeraldas y Santo Domingo, limitando su distribución para las zonas norte y centro de las estribaciones occidentales de la Cordillera de los Andes.

En ^{2014 Guevara et al}. registraron 27 ejemplares de T. dispar en hábitat doméstico y peridoméstico de las comunidades Balsareño (44 msnm) y Pambilar (144 msnm) de la provincia de Esmeraldas, once de ellos fueron positivos a la presencia de T. cruzi por PCR. Con lo cual esta especie cambió de “sin importancia epidemiológica” a posible vector de la enfermedad de Chagas en esta provincia, corroborado esto por su facilidad de moverse del medio selvático a las áreas domésticas.

Un adulto de T. dispar fue encontrado, asociado con murciélagos (Molossus molossus y Myotis sp.), en la grieta de la ventana de un granero usado para criar pollos, cercano a dos viviendas de la localidad rural de Chinguilamaca (1.358 msnm), provincia de Loja. Uno de los murciélagos Myotis sp. fue positivo a la presencia de T. cruzi marinkellei, pero el triatomino no fue analizado por PCR, debido a que no estuvo debidamente preservado (^{Pinto et al. 2015}). Esta es la primera vez que se reportó esta especie al sur de la sierra ecuatoriana, por lo cual se considera con una distribución más andina y segundo potencial vector de T. cruzi marinkellei en murciélagos (^{Pinto et al. 2015}).

^{Abad-Franch et al. en 2001} publicaron los primeros mapas de distribución geográfica de las especies de triatominos del Ecuador, con base en los registros geográficos de especímenes de colecciones de Ecuador, Brasil y Reino Unido, así como en registros de campo aún no publicados. En el mapa de T. dispar solo se señalaron las localidades en Imbabura y Cotopaxi. En 2003 ^{Abad-Franch y Aguilar}, presentaron un mapa con más puntos de registro para T. dispar, en donde se indicó que para la provincia de Pichincha solo existió un registro geográfico representado por la localidad de Puerto Quito, cuyas coordenadas y altitud no son señaladas por los autores; sin embargo, la altitud de esta localidad es 316 msnm aproximadamente, la temperatura promedio anual es 25 °C, la precipitación promedio anual es 2.743 mm, la humedad relativa es 88 % (^{Climate-data org. 2017}) y pertenece al Bosque siempreverde piemontano de la Cordillera Occidental de los Andes (BsPn01) (^{MAE 2013}).

En el presente reporte se señala por primera vez, la presencia de T. dispar en la Provincia de Pichincha, a una altitud de 1.200 msnm, en la localidad de Milpe km 90, perteneciente al Cantón San Miguel de los Bancos, a una distancia de 53 km aproximadamente de la primera colecta en Puerto Quito y se actualiza su distribución geográfica en el Ecuador.

Materiales y métodos

Captura de triatominos

Los triatominos se colectaron durante un estudio de diversidad, comportamiento antropofílico y actividad diaria nocturna de flebótomos (vectores de Leishmania), en peridomicilio, zona de vivienda y remanentes de bosque de Milpe km 90. Se puede decir, que la captura de los triatominos fue algo accidental dentro de este estudio, ya que no se diseñó una metodología específica para capturarlos.

El cebo humano protegido se realizó durante la noche del 23 febrero 2013, de 18:00 a 20:00 h, horario en el que existe mayor actividad de los flebótomos. En el área de peridomicilio, junto a un árbol del género Pourouma sp. (Urticales: Cecropiaceae), a 40 m de distancia de una vivienda construida con cemento, se sentó a una persona, con la cabeza cubierta por un mosquitero y usando ropa larga, de tal forma que solo sus manos estuvieron desprotegidas. Otras personas provistas de aspiradores bucales y alrededor del cebo humano, capturaron a los flebótomos en el momento que se posaban en su cuerpo (^{Parra-Henao y Suárez 2012}; ^{Arrivillaga et al. 2013}). Los investigadores actuaron como cebos humanos siendo conscientes del peligro al que se exponían. Dos hembras adultas de triatominos se colectaron de forma manual, entre las 19:30 a 20:00 h, mientras pretendían picar a los colectores.

Además, se realizó un biomonitoreo de las poblaciones de flebótomos asociados a un remanente de bosque de la localidad, durante tres meses, tres noches cada mes. Se colocaron cuatro trampas tipo CDC de luz blanca más hielo seco, dos al interior del bosque, una en el ecotono entre pastizal y bosque y otra en el pastizal, cuyo funcionamiento fue de 18:00 a 06:00 h. En la trampa del ecotono, una noche cada mes, se realizó un estudio de actividad nocturna de los flebótomos, por lo que cada dos horas a partir de las 18:00 h, se recogía la malla de la trampa con los flebótomos colectados y se cambiaba por otra. La noche del 23 marzo 2013 entre las 22.00 a 00.00 h, mientras se fue a examinar la trampa, se colectó un tercer ejemplar ♀, que estuvo posado sobre el tronco de un árbol a 2 m de la trampa y a 500 m de distancia lineal de la vivienda principal de la localidad.

Solo se capturaron tres ejemplares adultos, no se evidenció la presencia de ninfas o de otros adultos en otros puntos de muestreo que incluyeron colectas en extradomicilio y peridomicilio con tres trampas tipo CDC de luz blanca más hielo seco, como atrayente.

Los ejemplares se recolectaron de forma manual utilizando envases de plástico y pinzas, luego se almacenaron en cajas de espumaflex con hielo seco, junto con las muestras de flebótomos, que se conservaron de esta forma para detección de Leishmania spp. por PCR y se transportaron así hasta el laboratorio.

Los ejemplares se clasificaron como individuos adultos ♀♀, con base en la forma del extremo posterior del abdomen, el cual termina en punta (Figs. 1A, B , 2G). Mediante el uso de claves especializadas de ^{Lent y Wygodzinsky (1979}), las hembras se identificaron como pertenecientes a la especie T. dispar, por presentar cuerpo de color café rojizo (Figs. 1A, B ); cabeza (Fig. 2A) y porción anterior del pronoto con manchas negras (Fig. 2D); porción posterior del pronoto y escutelo con manchas rojizas (Fig. 2D); presencia de pilosidad dorada conspicua en el integumento del cuerpo (Fig. 1B); membrana de los hemiélitros con dibujos jaspeados (Fig. 2F); fémures oscuros, con nódulos ferruginosos (Fig. 2B); conexivo negro, con dos manchas de color rojizo en cada segmento, una de ellas situada en la parte posterior del segmento, incluyendo la sutura intersegmental y ocupando todo el ancho del segmento, la otra, incompleta, situada en el centro del segmento adyacente al margen (Figs. 1A, 2F). Las hembras tuvieron una longitud de 24,5 a 26,0 mm, el ancho del pronoto fue de 5,0 a 6,0 mm y el ancho del abdomen fue de 6,0 a 8,0 mm, valores acordes con la descripción de la especie en ^{Lent y Wygodzinsky (1979)}.

Figura 1 Triatoma dispar Lent, 1950. Hembra. A. Hábito vista dorsal. B. Hábito vista ventral. 

Figura 2 Caracteres Triatoma dispar Lent, 1950. Hembra. A. Cabeza vista dorsal. B. Cabeza vista ventral. C. Cabeza vista lateral. D. Tórax vista dorsal. E. Tórax vista ventral. F. Abdomen vista dorsal. G. Abdomen vista ventral. 

Los especímenes colectados se depositaron en la Colección Nacional de Referencia de Artrópodos de importancia en Zoonosis (CONRAZ) del Instituto de Investigación en Salud Pública y Zoonosis, bajo los siguientes números de colección: EC-SMB-M-T22, EC-SMB-M-T23 y EC-SMB-M-T24.

Las fotografías de T. dispar se tomaron con una cámara Nikon Coolpix de 8 megapixeles y un estereomicroscopio Olympus SZ51, se editaron y organizaron en láminas con los programas Adobe PhotoShop CS versión 8.0.1 y CorelDRAW versión 12. El mapa de distribución del triatomino fue elaborado en el programa ArcGis versión 10.3.

Resultados y discusión

El presente trabajo, representa el primer registro de poblaciones silvestres de T. dispar en zonas de peridomicilio y pastizal asociado a un bosque intervenido en la localidad de Milpe km 90, provincia de Pichincha. Constituye el segundo registro para la provincia, pero el primero para el cantón San Miguel de los Bancos (Fig. 3), confirmando así la presencia de este triatomino, que hasta ahora solo había sido estimada por análisis biogeográficos para este cantón (^{Abad-Franch y Aguilar 2003}). El registro de esta especie en esta localidad tiene coherencia, ya que pertenece al Bosque siempreverde piemontano, formación vegetal donde anteriormente había sido reportado el triatomino en la provincia de Imbabura, que limita al norte de Pichincha con altitud, temperatura y precipitación dentro de los rangos que describieron ^{Abad-Franch et al. (2001)} y ^{Abad-Franch y Aguilar (2003)}, como las propicias para el desarrollo de las poblaciones de este insecto.

Figura 3 Mapa político del Ecuador señalando las localidades donde ha sido registrado Triatoma dispar. Los puntos en color gris indican los registros anteriores y el punto en color negro indica la nueva localidad. Mapa político del Ecuador señalando las localidades donde ha sido registrado Triatoma dispar. Los puntos en color gris indican los registros anteriores y el punto en color negro indica la nueva localidad. 

Triatoma dispar ocurre principalmente en las estribaciones occidentales de la Cordillera de los Andes (300 a 1.800 msnm) y se extiende a las tierras bajas de la Costa Norte (0 a 300 msnm), asociado a ecosistemas selváticos y ambientes domésticos y peridomésticos (^{Abad-Franch et al. 2001}; ^{Abad-Franch y Aguilar 2003}; ^{Guevara et al. 2014}; ^{Pinto et al. 2015}). Aún no está incriminado en la transmisión de T. cruzi, pero por sus características ecológicas podría tener importancia en el enlace entre el ciclo de transmisión selvático y doméstico, al menos en las localidades de Esmeraldas y Loja.

En un contexto eco-epidemiológico, la localidad de estudio no es considerada foco endémico de la enfermedad de Chagas, con base en la ausencia de registros clínicos. Según la estratificación del riesgo para esta enfermedadla enfermedad, basada en criterios entomológicos y epidemiológicos, el cantón San Miguel de los Bancos, donde se ubica Milpe km 90, es considerado de riesgo alto a medio-alto (^{Abad-Franch y Aguilar 2003}). La presencia de T. dispar en bosque y peridomicilio, así como la fuerte presión que sufre la zona por el incremento de la población humana y las actividades agropecuarias que se desarrollan en el lugar, urgen la implementación de planes para ejecutar la vigilancia entomológica en la zona.

Con base en el uso de indicadores entomológicos de triatominos ajustados a una escala espacial (^{Aché 1993}), el índice de infestación a lugares por T. dispar (número de lugares positivos a T. dispar / número de lugares revisados-puntos de muestreo x 100) indica un riesgo epidemiológico del 22 %, con un intervalo horizontal de dispersión espacial amplio dentro del área muestreada de bosques con alta intervención sinantrópica (500 m). Estudios de dinámica poblacional y búsqueda de infección natural en esta especie de triatomino, serán necesarios para evidenciar la presencia de T. cruzi en la localidad de Milpe km 90 y en la zona del nor-occidente de Pichincha y evaluar su importancia.

Es necesario recalcar que la especie reportada pertenece al complejo dispar compuesto por T. carrioni, T. dispar, T. nigromaculata Stål 1859, T. venosa y, probablemente, Triatoma boliviana Martínez et al. 2007. Este complejo se extiende desde el Perú a Costa Rica, por el noroeste de Sudamérica, excepto T. boliviana que está restringida a los valles subandinos de Bolivia (2.100 msnm) (^{Martínez et al. 2007}; ^{Galvão et al. 2003}; ^{Dujardin et al. 2000}). T. dispar es la especie con mayor distribución, reportada en Costa Rica, Panamá, Colombia y Ecuador (^{Dujardin et al. 2000}); T. nigromaculata ocurre en Venezuela, Colombia y Perú (Martínez et al. 2007; ^{Guhl et al. 2007}; ^{Chávez, 2006}; ^{Dujardin et al. 2000}); T. carrioni solo se encuentra en Ecuador y Perú entre los 1.000 y 2.600 m de altitud y T. venosa se encuentra en Colombia y Ecuador entre los 1.600 y 2.200 m de altitud (^{Dujardin et al. 2000}).

En el Ecuador T. dispar, T. carrioni y T. venosa son especies similares morfológicamente, que podrían solaparse en el ecosistema bosque muy húmedo premontano (^{Abad-Franch et al. 2001}; ^{Abad-Franch y Aguilar 2003)}, al que pertenece la localidad de estudio en la Provincia de Pichincha, lo que podría generar problemas en la identificación taxonómica de estos triatominos. Es importante enfatizar los caracteres que permiten distinguir estas especies, para facilitar su acertada identificación y aplicar adecuados planes de control y vigilancia epidemiológica (Tabla 1).

El presente trabajo contribuye al inventario de la entomofauna del Ecuador y a la actualización de la distribución de T. dispar, una especie silvestre con potencial rol vectorial, que ya ha colonizado ambientes domésticos y peridomésticos en Esmeraldas y Loja.