Diversos autores a nivel mundial han evaluado ampliamente el uso de los huevos de helmintos como indicadores de contaminación fecal. Estos se han detectado en diferentes matrices ambientales relacionadas con la reutilización del agua residual o con la disposición de biosólidos provenientes de las depuradoras, por lo que el contacto de los agricultores o los consumidores puede resultar en su infección con agentes patógenos. El riesgo se genera por el contacto directo con el agua residual contaminada, los biosólidos y los alimentos regados con dicha agua o cultivados en suelos donde se han utilizado biosólidos como enmienda orgánica 1-4.
Los huevos de helmintos se encuentran en el ambiente y son de gran importancia en salud pública, debido a su mínima dosis infectiva y a su alta resistencia a diversas condiciones ambientales, como la temperatura, el pH y la humedad, así como a la desinfección con cloro 4-6. Se los utiliza, asimismo, como indicadores de la presencia de parásitos por contaminación fecal en aguas residuales tratadas, y en lodos y biosólidos generados por sistemas de tratamiento 6,7. Los géneros más predominantes son Ascaris, Trichuris, Ancylostoma e Hymenolepis8,9.
Según la Organización Mundial de la Salud (OMS), 1.450 millones de infecciones en el mundo presentan infección por Ascaris lumbricoides, con efectos adversos en su salud (ascariasis), y síntomas como anemia, náuseas, oclusión de las vías biliares y obstrucción intestinal, lo que ocasiona alrededor de 3.000 muertes al año 8.
Según el Informe Quincenal Epidemiológico Nacional (IQEN) del Instituto Nacional de Salud, en Colombia el riesgo sanitario por este tipo de parásitos es alto, aunque únicamente se han reportado los casos de teniasis por Taenia solium entre 2008 y 2010 en trabajadores que tenían contacto directo con cerdos, debido a la disposición inadecuada de los excrementos. La mayoría de los casos de riesgo de infección por helmintos se presenta en la población de bajos recursos y con hábitos higiénicos deficientes, como se ha constatado en el país; por ejemplo, en el departamento de Bolívar, se observó que el 92 % de las personas estaban parasitadas: 56 % con A. lumbricoides, 53 % con Trichuris trichiura, 6 % con Anchylostoma spp., 4 % con Hymenolepis nana, 3 % con Strongyloides stercoralis, 0,9 % con Taenia spp. y 0,6 % con Enterobius vermicularis10. Estos casos podrían estar relacionados, no solo con el nivel de vida de la población, sino con el contacto o consumo de aguas o alimentos contaminados.
En el 2006, la OMS estableció como permisible una concentración de huevos de helmintos de máximo uno por litro en aguas residuales tratadas para cultivos que se consumen crudos 8. Por otra parte, la norma de la United States Environmental Protection Agency (EPA) también establece límites en el contenido de huevos de helmintos en biosólidos utilizados en agricultura, y considera admisible un límite máximo de un huevo por cada 4 g de sólidos totales 7. Sin embargo, estas concentraciones no siempre se pueden lograr en los países en desarrollo debido a la alta prevalencia de los huevos en la población y, por consiguiente, en el agua y los lodos provenientes de los sistemas de tratamiento de aguas residuales 2,5,11.
Dada la falta de datos a nivel nacional, es importante evaluar la presencia y la concentración de helmintos, así como su comportamiento en diferentes matrices ambientales y en su estadio de huevo, bajo las condiciones climáticas y los sistemas de tratamiento existentes. Además, aunque se cuenta con varios métodos de análisis, es necesario unificar una metodología para su identificación y conteo, así como para la de los huevos viables de helmintos, los cuales se consideran infectivos.
En este contexto, el objetivo del estudio fue presentar los datos obtenidos sobre la identificación y el conteo de huevos de helmintos en aguas residuales crudas y tratadas, en biosólidos, en suelos tratados con estos y en pastos provenientes de tales suelos, en los departamentos de Cundinamarca y Antioquia, ambos ubicados en la zona andina de Colombia.
Materiales y métodos
Se determinaron y cuantificaron el total de huevos de helmintos y el de huevos viables en aguas, suelo, biosólidos y pastos. Pese a que las normas de la OMS (2006) y de la USEPA (1999) solo estipulan que debe informarse el número total de huevos, es importante determinar su viabilidad o capacidad de desarrollarse hasta la etapa infectiva; los huevos que contenían una larva completamente desarrollada y móvil, se consideraron viables.
Evaluación de huevos de helmintos en aguas residuales
Distrito de riego y drenaje La Ramada. Se evaluó la calidad del agua utilizada para riego agrícola en el distrito La Ramada, en el cual se cultivan hortalizas que se distribuyen en Bogotá y otros municipios.
El agua proviene del río Bogotá y su punto de captación está localizado en la estación de bombeo Chicú, a la altura de la cuenca media, punto en el cual el río ya ha recibido vertidos domésticos e industriales. Como estaciones de muestreo se seleccionaron el punto de captación y varios de los canales que distribuyen el agua a lo largo del distrito. Dichas estaciones se denominan Chicú, La Isla, Entrada Ciénaga Gualí-Tres Esquinas, Salida Ciénaga Gualí-Tres Esquinas, La Herrera y El Tabaco. Se recogieron ocho muestras de cada estación, para un total de 48.
Sistema de tratamiento primario químicamente asistido
Para analizar el efecto del sistema de tratamiento primario químicamente asistido en la eliminación de los huevos de helmintos, se seleccionaron las aguas afluentes y efluentes de la planta de tratamiento de aguas residuales El Salitre. El agua que llega a esta planta proviene de la utilizada por cerca de 2’000.000 de habitantes de la zona norte de Bogotá y se caracteriza por incluir vertidos de tipo doméstico.
Como alternativa al uso del agua del río Bogotá, se ha considerado la posibilidad de regar con estos efluentes los cultivos del distrito de riego La Ramada.
Para determinar si existían diferencias a lo largo del día, se tomaron 12 muestras del afluente y 60 del efluente en horas de la mañana y de la tarde.
La toma de muestras, así como su conservación y transporte, se ajustaron a las normas de la EPA 12.
Todas las muestras se procesaron en el curso de las 24 horas después de su recolección, garantizando la correspondiente cadena de custodia.
El protocolo utilizado para el análisis de los huevos de helmintos en el agua de los canales de riego y la planta El Salitre fue el propuesto en la Norma Oficial Mexicana NMX-AA-113-SCFI de 1999 13.
Evaluación de los huevos de helmintos en biosólidos
Para determinar la concentración de huevos de helmintos en biosólidos provenientes de los sistemas de tratamiento de las aguas residuales domésticas, se analizaron muestras de biosólidos de la planta de tratamiento de aguas residuales El Salitre. Este material proviene de los lodos de sedimentación material proviene de los lodos de sedimentación primaria sometidos a un proceso de estabilización anaerobia mesofílica. Se recolectó una muestra por mes durante dos años y 11 meses, para un total de 35 muestras. El protocolo utilizado fue el propuesto en la Norma Oficial Mexicana NOM-004 ECOL de 2002 14.
Evaluación de huevos de helmintos en suelo
Biosólidos utilizados para el cultivo de pasto en Cogua, Cundinamarca. Para evaluar la concentración y la disminución de los huevos de helmintos a lo largo del tiempo, se construyeron parcelas de 0,15 m de profundidad y 56 m2 de área, y en cada una se mezcló el suelo nativo con biosólidos provenientes de la planta de tratamiento de aguas residuales El Salitre y se sembró pasto ballico (género Lolium) (ray grass) para la alimentación del ganado lechero. Las parcelas estaban localizadas en el Centro Experimental San Francisco Javier de la Universidad Javeriana, vereda El Mortiño, municipio de Cogua, Cundinamarca.
Se analizaron tres tratamientos con diferentes proporciones en la mezcla de suelo y biosólidos, así como dos controles (únicamente suelo y únicamente biosólidos).
Los tratamientos y controles seleccionados al azar se repitieron tres veces en un total de 15 parcelas. En las preparaciones se utilizaron porcentajes de peso sobre peso, de la siguiente forma: tratamiento 1 (T1 ), 75 % de suelo y 25 % de biosólidos; tratamiento 2 (T2), 67 % de suelo y 33 % de biosólidos, y tratamiento 3 (T3), 50 % de suelo y 50 % de biosólidos. Como controles se emplearon únicamente suelo o únicamente biosólidos.
El muestreo de las parcelas incluyó dos fases: la primera, desde el día 0, o día correspondiente a la siembra del pasto, hasta el día 120, y la segunda, de 24 a 28 meses después de sembrado el pasto.
La muestra de análisis estaba compuesta, a su vez, de cinco muestras tomadas de las mezclas y los controles en forma de X, cuatro de los extremos y una del centro de cada parcela 15. Se recolectaron 75 muestras para el análisis de huevos de helmintos en la primera fase y, 30 en la segunda fase, para un total de 105 muestras que se procesaron en el curso de las 24 horas después de su recolección, garantizando la correspondiente cadena de custodia.
Biosólidos utilizados para el cultivo de pasto en Entrerríos, Antioquia. La segunda evaluación de la concentración y la disminución de huevos de helmintos en suelos se hizo en el municipio de Entrerríos, Antioquia.
Se evaluó el riesgo sanitario generado por el uso de biosólidos en el cultivo de pastos en un agroeco-sistema de vocación lechera. Estos provenían de la sedimentación primaria y secundaria de la planta de tratamiento de aguas residuales San Fernando, en Medellín, y se habían estabilizado mediante un tratamiento anaerobio mesofílico.
Se trabajó en dos parcelas: la primera de control, donde solo se usaron fertilizantes tradicionales, y la segunda, o experimental, donde se aplicaron los biosólidos; esto, con el fin de comparar su efecto como enmienda orgánica con fertilizantes de origen químico. La parcela experimental y la de control se subdividieron en otras cuatro, en las que se utilizaron biosólidos diluidos provenientes de la la planta de tratamiento de aguas residuales San Fernando o el fertilizante tradicional, según el caso.
Se recolectaron muestras de los biosólidos sin diluir, diluidos antes de ser aplicados y a los 45 días (cuando el pasto ya había crecido y el ganado entraba a pastar); este ciclo se repitió tres veces, para un total de 18 muestras. En la parcela de control se recolectaron 12 muestras de suelo de las cuatro subdivisiones. La muestra analizada, a su vez, estaba compuesta de cinco muestras tomadas del suelo en forma de X, cuatro de los extremos y una en el centro de cada subdivisión 16.
Para el análisis de los biosólidos, del suelo y de las mezclas, se utilizó el protocolo propuesto en la Norma Oficial Mexicana NOM-004 ECOL de 2002 14.
Evaluación de los huevos de helmintos en el pasto
Pasto sembrado en Cogua, Cundinamarca. Para evaluar el riesgo de contaminación de los pastos sembrados con adición de biosólidos, se recolectaron muestras de las parcelas ya descritas: 30 en la primera fase y 15 en la segunda. Cada muestra estaba compuesta, a su vez, por otras cinco recolectadas al azar en cada parcela, las cuales se analizaron dentro de las 24 horas después de su recolección, garantizando la correspondiente cadena de custodia 17.
Pastos sembrados en Entrerríos, Medellín, Antioquia. Se recolectaron pastos de la parcela experimental y de la de control del estudio hecho en Antioquia, aplicando el protocolo de muestreo ya descrito. Las muestras de pastos se recolectaron cada dos meses, 12 en cada parcela, para un total de 24 muestras en la primera y la tercera fases de evaluación. En la segunda fase no se evaluaron los pastos.
El protocolo utilizado para el análisis de pastos fue el propuesto por Kozan, et al., en 2005 17.
Protocolos usados para el análisis de las diferentes matrices
Los protocolos usados para el análisis parasitológico de huevos de helmintos en las diferentes matrices mencionadas, se presentan en el cuadro 1.
Resultados
Evaluación de huevos de helmintos en aguas residuales
En las muestras evaluadas en las estaciones del distrito de riego y drenaje La Ramada, se encontraron de 0,1 a 3 huevos de helmintos por litro y de 0,1 a 1 huevos viables por litro (cuadro 2). En algunos casos se superaron los límites máximos establecidos por la OMS (un huevo o menos por litro) para las aguas de riego de hortalizas, que es el cultivo más común en ese distrito, así como los establecidos en la Resolución 1207 de 2014 del Ministerio de Ambiente y Desarrollo Sostenible, de 1,0 huevos o larvas de helminto por litro 18.
HHT/L: total de huevos de helminto por litro; HHV/L: total de huevos viables de helminto por litro
* Los resultados presentados en la tabla son la media de los muestreos realizados en cada estación.
En los análisis mensuales de las aguas afluentes y efluentes de la planta de tratamiento de aguas residuales El Salitre, los valores registraron una disminución después del tratamiento en las muestras tomadas tanto en la mañana como en la tarde, excepto en uno de los casos (cuadro 3). Sin embargo, su concentración fue cercana o inferior a 1 huevo por litro, es decir, cumplían el requisito para las aguas de riego de hortalizas. La concentración total de huevos en el afluente varió entre 0,6 y 0,9 por litro, en tanto que a la salida fue de 0,2 a 0,3 por litro. La concentración de huevos viables en la entrada fue de menos de 0,1 a 0,5 por litro y, en la salida, de menos de 0,1 por litro.
HHT/L: total de huevos de helminto por litro; HHV/L: huevos viables de helminto por litro; PTAR: planta de tratamiento de aguas residuales
* Los resultados son la media de los muestreos realizados en las aguas afluentes y efluentes.
Análisis de huevos de helmintos en biosólidos y suelos
En el análisis mensual de los biosólidos generados en la planta El Salitre, se registró una concentración total de 3 a 22 huevos de helmintos por 4 g de peso seco y una de huevos viables de 2 a 12 por 4 g de peso seco (cuadro 4), lo cual supera la exigencia de la norma de la EPA para uso agrícola (un huevo o menos por 4 g de peso seco) y la establecida en el Decreto 1287 del 2014 por el Ministerio de Vivienda, Ciudad y Territorio de Colombia (menos de un huevo viable por 4 g de biosólidos para la categoría A, o de uso agrícola) 19.
HHT/4g/PS: número total de huevos de helminto por 4 gramos de peso seco; HHV/4g/PS: huevos de helminto viables por 4 g de peso seco
* Los resultados son la media de todas las muestras analizadas.
En los tratamientos 1, 2 y 3 en el día 0, se observaron entre 0,8 y 2 huevos viables de helminto por 4 g de peso seco, valor inferior al límite de cuantificación en los controles (cuadro 5). Llama la atención el resultado del control de biosólidos, lo cual podría explicarse por el alto grado de agregación del material, lo que dificulta la recuperación de los parásitos.
HHV/4g/PS: huevos de helminto viables por 4 g de peso seco; HHT/4g/PS: número total de huevos de helminto por 4 g de peso seco; T1: 75 % de suelo + 25 % de biosólidos; T2 : 67 % de suelo + 33 % de biosólidos; T3 : 50 % de suelo + 50 % de biosólidos; CS: muestra de suelo de control; CB: muestra de biosólidos de control; * En la primera fase no se informó el total de huevos de helminto. ** Los resultados corresponden al promedio de las tres réplicas analizadas por tratamiento. <: menor que el límite de cuantificación del protocolo
Al comparar las concentraciones en el inicio con las registradas a los 30 y 60 días, se encontraron variaciones según los tratamientos, con un aumento en el tratamiento 3 (de una concentración inicial de 1 pasó a 3 huevos viables por 4 g de peso seco) y una disminución en el tratamiento 1 (de 2 pasó a 0,9 huevos viables por 4 g de peso seco). En las muestras de control no se detectaron huevos viables de helmintos.
Por otra parte, en los días 75 y 120 se observó un aumento en todos los tratamientos (entre 5 y 22 huevos viables por 4 g de peso seco), excepto en la muestra de control de los suelos. Este aumento podría deberse al cambio en las características físicas del suelo (menos agregados y mayor humedad a causa de las lluvias) y en la distribución de los huevos en dicha matriz. A los 24 meses, las concentraciones disminuyeron en todos los tratamientos y en el control de biosólidos, pero se siguieron registrando concentraciones de menos de 0,4 a 6 huevos viables por 4 g de peso seco en todas las parcelas, lo que evidencia su gran resistencia a las condiciones ambientales, incluso después de dos años de la aplicación.
Durante el período de evaluación, la humedad fluctuó entre 35 y 59 % y, la temperatura del suelo, entre 10 y 20 °C. En el mes 28, se observó un aumento en el conteo total de huevos y en el de huevos viables en las muestras del tratamiento 2 y en las de control de biosólidos. La concentración de huevos viables en la segunda fase también presentó una disminución entre el mes 24 y el 28, excepto en el caso de las muestras de control de biosólidos, en las cuales se observó un aumento.
En las parcelas en el norte de Antioquia (cuadro 6), se observaron concentraciones totales de huevos de helmintos de 9 a 12, y de 3 a 5 huevos viables por 4 g de peso seco, con el uso de biosólidos diluidos. A los 45 días de la aplicación, las concentraciones totales de huevos de helmintos en la parcela experimental fluctuaron entre 0,4 y 8, y las de huevos viables, entre 0,4 y 4 por 4 g de peso seco; y en la parcela de control, la concentración total fue de 0,8 a 4 y de menos de 0,4 a 2 huevos viables por 4 g de peso seco, sin haber aplicado biosólidos.
Bd: biosólidos diluidos; SCA, SCB, SCC y SCD: muestras de suelo de control A, B, C y D; SEA, SEB, SEC y SED: muestras experimentales de suelo A, B, C y D; <: menor que el límite de cuantificación del protocolo; HHT/4g/PS: número total de huevos de helminto por 4 g de peso seco; HHV/4g/PS: huevos de helminto viables por 4 g de peso seco
La presencia de huevos de helmintos en esta parcela se relacionó con el paso de animales y la presencia de materia fecal de animales en el momento de la toma de la muestra. Tanto en la parcela experimental como en la parcela de control, se observó una disminución de la concentración total de huevos y de la de huevos viables, aunque siguieron registrándose después de 45 días.
Análisis de huevos de helmintos en el pasto
Con relación al pasto sembrado en las parcelas con mezcla de suelo y biosólidos en Cogua, Cundinamarca (cuadro 7), durante la primera fase de evaluación que se extendió hasta el día 120, todos los resultados estuvieron por debajo del límite de cuantificación de la técnica. En la segunda fase no se observaron variaciones en los resultados.
HHT/g/PF: número total de huevos de helminto por g de peso fresco;
HHV/g/PF: huevos viables de helminto por g de peso fresco.
* Media de las tres repeticiones
En los pastos sembrados con biosólidos diluidos en Entrerríos, Antioquia, (cuadro 8), en la parcela experimental se observaron, valores de menos de 2 a 9 en la concentración total de huevos, y de menos de 1 a 3 en la de huevos viables por 4 g de peso fresco; y en la parcela de control, de 0,8 a 4 en la concentración total y de 0,4 a 1 en la de los huevos viables por 4 g de peso fresco.
HHT/4g/PF: número total de huevos de helminto por 4 g de peso fresco;
HHV/4g/PF: huevos viables de helminto por 4 g de peso fresco;
NA:no aplica; SC: A, B, C, y
D: subdivisiones de control;
SE: A, B, C y
D:subdivisiones experimentales
Como se observa en los resultados en todas las matrices, no es suficiente tener el conteo total de los huevos, pues los huevos viables que pueden ser infectivos siguen presentes; por ello, se requieren los 26 días de incubación para establecer dicha diferencia.
Discusión
La evaluación de la presencia de huevos de helmintos en aguas residuales utilizadas para riego agrícola es de gran importancia debido al riesgo que representa para la población el contacto directo o indirecto con el agua sin tratar o los alimentos contaminados 20.
En Colombia se han realizado dos encuestas nacionales de parasitismo intestinal, una en 1966 y otra en 1980, y en ellas se reportaron los siguientes porcentajes de prevalencia de huevos de helmintos: A. lumbricoides, 33,6 %; T. trichiura, 37,5 %, y Ancylostoma spp., 23 % 21,22. En la Amazonia colombiana, Ordóñez, et al., encontraron una alta prevalencia de geohelmintos en niños de 2 a 16 años. El parásito más frecuentemente encontrado fue S. stercoralis, con 49,3 %, y el menos frecuente fue A. lumbricoides, con 9,9 % 20.
En el 2008, en un estudio en Norte de Santander, se analizaron muestras de agua del río Pamplonita, el cual provee el agua para el consumo de zonas urbanas y rurales, así como para actividades de tipo agrícola, industrial y doméstico. En las muestras se encontraron Ascaris spp., Hymenolepis spp., Toxocara spp. y Trichuris spp. 23.
A pesar de las bajas concentraciones encontradas en los canales de riego del distrito La Ramada, es importante recordar que la mayor concentración se puede detectar en los sedimentos, ya que los parásitos llegan allí por gravedad y pueden volver a la columna de agua por procesos de resuspensión. Los agricultores manifestaron que bombean a diferentes profundidades dependiendo de la época del año, ya que el caudal que pasa por los canales varía. En el sedimento se pueden presentar procesos de agregación con las partículas sedimentadas, lo cual disminuye la movilidad de los parásitos 24. Lo mismo ocurre en algunos sectores de las redes de conducción del agua antes de llegar a la planta de tratamiento de aguas residuales El Salitre, los cuales presentan zonas de sedimentación donde pueden quedar parte de los huevos de helmintos eliminados en el alcantarillado. Sin embargo, es importante anotar que la zona de donde proviene el agua se caracteriza por estar habitada por personas con mejores condiciones de vida y de salud.
La mayoría de autores coinciden en que el género Ascaris es el indicador más adecuado para la inactivación y la eliminación de parásitos en el lodo y las aguas residuales, ya que sus huevos pueden permanecer en los suelos por períodos de hasta siete años bajo condiciones ambientales adversas y conservan su viabilidad durante meses 1,6,24. La OMS sugiere que en las aguas superficiales utilizadas sin restricción para riego, las concentraciones totales deberían ser de menos de 1 huevo por litro y, de menos de 0,1, en los sitios donde vivan menores de 15 años 8,23. Los resultados obtenidos en algunas de las muestras del distrito de riego La Ramada y del efluente de la planta El Salitre superan dicha concentración. Esto sugiere que deben hacerse tratamientos adicionales para disminuir dichas concentraciones 25,26.
Chávez, et al. 27, evaluaron la correlación existente entre la concentración de huevos de helmintos en aguas residuales tratadas de la ciudad de México, así como la concentración de sólidos suspendidos totales tanto en el agua de entrada como de salida en la planta de tratamiento, con el fin de establecer el rango de tamaño de las partículas con gran cantidad de huevos de helmintos. En ese estudio se determinó la estrecha correlación entre un volumen de partículas de 20 a 80 μm con la presencia de helmintos en las aguas de los efluentes. Para este tamaño de partículas, los valores totales de sólidos suspendidos estuvieron entre 115 y 170 mg/L.
La ventaja de los sistemas químicamente asistidos, como es el caso de la planta El Salitre, consiste en que los procesos que emplean menos dosis de coagulantes combinados con floculantes de alta carga dan lugar a efluentes con bajo contenido de sólidos suspendidos. Un efluente con menos de 20 a 40 mg/l de sólidos suspendidos puede tener una concentración total de 3 a 10 huevos por litro y, con menos de 20 mg/l de sólidos suspendidos, un contenido de un huevo o menos por litro.
Los tratamientos primarios avanzados ofrecen reducciones de 90 a 99 % de huevos de helmintos y, a partir de un contenido de 120 huevos por litro, pueden producir entre 0,5 y 3 huevos por litro de agua efluente, lo que ayudaría a reducir estos parásitos en el sistema aquí evaluado 26.
Otras condiciones que ayudan a disminuir el riesgo sanitario se relacionan con el tipo de riego aplicado (inundación, aspersión o goteo), con el tiempo que trascurre desde el último riego y el momento de la cosecha, y con el lavado o cocción de los alimentos antes de su consumo 28,29.
En cuanto a la norma colombiana, la Resolución 1207 de 2014 establece un límite máximo de 1,0 huevos y larvas de helmintos por litro en aguas residuales tratadas 18.
Con base en estudios microbiológicos y epidemiológicos, la OMS ha elaborado guías que determinan la calidad del agua según el tipo de cultivo que se vaya a regar. Para la categoría A, el contenido total de huevos de helminto debe ser de 0,1 o menos por litro en cultivos de alimentos que comúnmente se consumen crudos, en campos deportivos y en parques públicos. En la categoría B, el contenido debe ser de 1 huevo o menos por litro (si hay niños menores de 15 años expuestos en los campos, este valor debe ser de 0,1 o menos huevos por litro), para el riego de cultivos de cereales industriales, cultivos para forraje, árboles frutales y praderas. La categoría C corresponde al riego localizado de cultivos de la categoría B, cuando ni los trabajadores ni el público están expuestos; para esta, no se ha establecido un límite de huevos 8.
A pesar de estas guías, el conteo de los parásitos es difícil ya que los protocolos utilizados no contemplan la capacidad de recuperar todos los huevos de helmintos en el ambiente. Ayres, et al., encontraron una buena correlación entre los huevos presentes y el porcentaje de recuperación, y sugieren que este puede verse afectado más por la calidad y la cantidad de materia orgánica que por el número absoluto de huevos presentes en la muestra 30. Jiménez, et al., reportaron que el porcentaje de recuperación de huevos en muestras de lodos variaba considerablemente según las técnicas, en un rango de 20 a 80 % 26.
En cuanto a los parásitos encontrados en diferentes matrices ambientales, el más común ha sido A. lumbricoides, seguido de T. trichiura, Toxocara spp., Ancylostoma spp., H. nana, H. diminuta, Taenia spp. y E. vermicularis. Se han observado también huevos de origen animal con potencial zoonótico y un gran número de quistes, ooquistes de protozoos, y huevos y larvas de nematodos de vida libre 31-33.
La presencia y el número de huevos de helmintos en los biosólidos varían con la tasa de infección predominante en la comunidad y, dado que son resistentes a las condiciones ambientales, pueden seguir siendo infecciosos durante varios años 5. Johnson, et al., encontraron huevos de Ascaris suum en biosólidos después de 29 semanas de almacenamiento 34. La supervivencia varía considerablemente según factores como la humedad y la temperatura, pero, en general, los huevos son resistentes al ambiente durante largos períodos, tanto que se los considera los microorganismos patógenos más resistentes 5,6,34.
Estos parámetros también son determinantes para definir el tipo de aplicación de los biosólidos, la cantidad aplicada y la restricción según el tipo de cultivo 7,35,36. El análisis de dichos parámetros, y su influencia en la concentración y la supervivencia de los huevos de los helmintos considerados en este estudio, pueden encontrarse en Cárdenas, et al., y en Campos, et al. 37,38.
La concentración total de huevos de helmintos y la de huevos viables en biosólidos aplicados en el suelo, varía entre un muestreo y otro, lo cual se explicaría por el hecho de que estos organismos no se encuentran de manera homogénea en los controles y en las mezclas, y su tasa de recuperación depende del tamaño de partícula del suelo, de que las muestras tomadas sean homogéneas y de que el volumen sea el mismo. Al tratarse de parásitos, estos necesitan de un huésped en el cual puedan desarrollar su ciclo infectivo y de reproducción, y es poco probable que esto ocurra en el ambiente. También pueden aumentar debido al aporte de escorrentías o estiércol proveniente de animales que transitan por la zona 5,39.
La diferencia en la concentración y la reducción de los huevos de helmintos en el suelo depende en gran parte de la textura, la temperatura, la humedad y la exposición a la luz solar, ya que estos factores influyen bastante en su supervivencia. La humedad es el parámetro más importante, ya que se ha observado que la supervivencia puede ser del 60 al 70 % en suelos con humedades entre el 20 y el 50 % 40.
Los huevos de helminto sobreviven por meses e, incluso, por años. Storey, et al., encontraron que Taenia saginata y A. lumbricoides habían sobrevivido en suelos y pastos enriquecidos con biosólidos, y que el número de huevos había disminuido en el día 200, con una densidad de población de 0,3 huevos por gramo de suelo 41.
En el caso de la concentración total de huevos y de huevos viables en pastos, si bien se encuentran bajas concentraciones en algunos casos, se ha observado que el riesgo de contaminación del ganado por el consumo de pastura contaminada por huevos de origen humano y animal es muy bajo, a menos que el pasto se haya visto sometido a pastoreo o pisoteo intensivo, lo cual favorecería su contaminación con el suelo y, en consecuencia, la del ganado al consumirlo 4,33,40.