Adherencia de levaduras de Paracoccidioides brasiliensis a proteínas de matriz extracelular: resultados preliminares

 

 

Ángel González¹*;, Blanca Ortiz²**; Andrew Hamilton³***; Ángela Restrepo¹⁺; Luz Elena Cano^1,4++.

 

1 Grupo de Micología Médica y Experimental, Corporación para Investigaciones Biológicas, CIB, Medellín, Colombia.

2 Grupo de Inmunología Celular e Inmunogenética, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia (U de A), Medellín, Colombia.

3 Guy's King's and St Thomas' School of Medicine. Universidad de Londres, UK.

4 Escuela de Bacteriología y Laboratorio Clínico, U de A, Medellín, Colombia.

* Estudiante de Doctorado, Posgrado en Ciencias Básicas Biomédicas, U de A.

** Profesora, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia.

*** Profesor, Guy's King's and St Thomas' School of Medicine. Universidad de Londres, UK.

+ Asesora Científica, CIB.

++ Profesora, Escuela de Bacteriología, U de A.

 

 

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INTRODUCCIÓN

La adhesión de los microorganismos a células del hospedero o a proteínas de matriz extracelular (PMEC), representa el primer paso para establecer un proceso infeccioso (1). Así, se ha determinado que propágulas de hongos de importancia clínica se unen a diferentes PMEC. Recientemente se ha demostrado que conidias y micelios de Paracoccidioides brasiliensis se unen a PMEC tales como laminina, fibrinógeno y fibronectina (2). Hasta el momento no se conoce cuál es la interacción entre levaduras de P. brasiliensis y PMEC.

OBJETIVO

Determinar la adherencia de levaduras de P. brasiliensis a PMEC (laminina, fibrinógeno y fibronectina).

METODOLOGÍA

Se utilizaron dos cepas colombianas de P. brasiliensis, una aislada de un paciente (ATCC-60855) fase levadura y micelio, y otra de un armadillo de nueve bandas (Dassypus novemcintus) (ATCC-204479) fase levadura. Su interacción con las diferentes PMEC fue determinada por ensayos de inmunofluorescencia indirecta (IFI), utilizando microscopía de fluorescencia y citometría de flujo. Adicionalmente, se realizaron electroforesis de proteínas (SDS-PAGE) y ensayos de ligandos de afinidad, para determinar la unión de estas proteínas a extractos citoplasmáticos y de pared celular de levaduras y micelios (3).

RESULTADOS

Ambos ensayos de IFI mostraron que las levaduras de P. brasiliensis se unen a laminina y fibrinógeno, pero no a fibronectina. Adicionalmente, se observó que dicha interacción era independiente de la cepa utilizada. Por otro lado, se encontró que las levaduras unían anticuerpos antifibrinógeno. Ensayos de afinidad a la fibronectina mostraron que únicamente se unía a esta proteína una fracción de aproximadamente 28KDa provenientes de extractos de micelio.

DISCUSIÓN

Estos resultados muestran que las levaduras del hongo P. brasiliensis se unen a ciertas PMEC (laminina y fibrinógeno). Adicionalmente, la unión del anticuerpo anti-fibrinógeno indica la presencia de una proteína semejante al fibrinógeno. Además, los ensayos de IFI y ligando de afinidad indican la presencia de una proteína de unión a la fibronectina en el micelio pero no en la levadura, lo que sugiere que la expresión de esta molécula podría ser regulada durante el proceso de transformación micelio-levadura y estar relacionada con la capacidad patogénica de cada fase del hongo. Estos hallazgos sugieren que las interacciones anteriores serían de gran importancia en el establecimiento y diseminación de la enfermedad.

PALABRAS CALVE

PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS, LAMININA, FIBRINÓGENO, FIBRONECTINA, ADHERENCIA

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BIBLIOGRAFÍA

1. ISBERG R, TRAN VAN NHIEU G. Binding and internalization of microorganism by integrin receptor. Trends Microbiol 1994; 2:10- 14.         [ Links ]

2. CARO E, HAMILTON A, RESTREPO A, CANO LE. Adherence of Paracoccidioides brasiliensis conidia to extracellular matrix proteins. VIII International Meeting on Paracoccidioidomycosis. 25-28 June, 2002. Abst. 01-60.         [ Links ]

3. PEÑALVER MC, O'CONNOR JE, MARTINEZ JP, GIL ML. Binding of human fibronectin to Aspergillus fumigatus conidia. Infect Immune 1996; 64: 1.146-1.153.         [ Links ]