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Iatreia
versão impressa ISSN 0121-0793
Iatreia vol.16 supl.1 Medellín mar. 2003
Adherencia de levaduras de Paracoccidioides brasiliensis a proteínas de matriz extracelular: resultados preliminares
Ángel González1*;, Blanca Ortiz2**; Andrew Hamilton3***; Ángela Restrepo1+; Luz Elena Cano1,4++.
1 Grupo de Micología Médica y Experimental, Corporación para Investigaciones Biológicas, CIB, Medellín, Colombia.
2 Grupo de Inmunología Celular e Inmunogenética, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia (U de A), Medellín, Colombia.
3 Guy's King's and St Thomas' School of Medicine. Universidad de Londres, UK.
4 Escuela de Bacteriología y Laboratorio Clínico, U de A, Medellín, Colombia.
* Estudiante de Doctorado, Posgrado en Ciencias Básicas Biomédicas, U de A.
** Profesora, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia.
*** Profesor, Guy's King's and St Thomas' School of Medicine. Universidad de Londres, UK.
+ Asesora Científica, CIB.
++ Profesora, Escuela de Bacteriología, U de A.
INTRODUCCIÓN
La adhesión de los microorganismos a células del hospedero o a proteínas de matriz extracelular (PMEC), representa el primer paso para establecer un proceso infeccioso (1). Así, se ha determinado que propágulas de hongos de importancia clínica se unen a diferentes PMEC. Recientemente se ha demostrado que conidias y micelios de Paracoccidioides brasiliensis se unen a PMEC tales como laminina, fibrinógeno y fibronectina (2). Hasta el momento no se conoce cuál es la interacción entre levaduras de P. brasiliensis y PMEC.
OBJETIVO
Determinar la adherencia de levaduras de P. brasiliensis a PMEC (laminina, fibrinógeno y fibronectina).
METODOLOGÍA
Se utilizaron dos cepas colombianas de P. brasiliensis, una aislada de un paciente (ATCC-60855) fase levadura y micelio, y otra de un armadillo de nueve bandas (Dassypus novemcintus) (ATCC-204479) fase levadura. Su interacción con las diferentes PMEC fue determinada por ensayos de inmunofluorescencia indirecta (IFI), utilizando microscopía de fluorescencia y citometría de flujo. Adicionalmente, se realizaron electroforesis de proteínas (SDS-PAGE) y ensayos de ligandos de afinidad, para determinar la unión de estas proteínas a extractos citoplasmáticos y de pared celular de levaduras y micelios (3).
RESULTADOS
Ambos ensayos de IFI mostraron que las levaduras de P. brasiliensis se unen a laminina y fibrinógeno, pero no a fibronectina. Adicionalmente, se observó que dicha interacción era independiente de la cepa utilizada. Por otro lado, se encontró que las levaduras unían anticuerpos antifibrinógeno. Ensayos de afinidad a la fibronectina mostraron que únicamente se unía a esta proteína una fracción de aproximadamente 28KDa provenientes de extractos de micelio.
DISCUSIÓN
Estos resultados muestran que las levaduras del hongo P. brasiliensis se unen a ciertas PMEC (laminina y fibrinógeno). Adicionalmente, la unión del anticuerpo anti-fibrinógeno indica la presencia de una proteína semejante al fibrinógeno. Además, los ensayos de IFI y ligando de afinidad indican la presencia de una proteína de unión a la fibronectina en el micelio pero no en la levadura, lo que sugiere que la expresión de esta molécula podría ser regulada durante el proceso de transformación micelio-levadura y estar relacionada con la capacidad patogénica de cada fase del hongo. Estos hallazgos sugieren que las interacciones anteriores serían de gran importancia en el establecimiento y diseminación de la enfermedad.
PALABRAS CALVE
PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS, LAMININA, FIBRINÓGENO, FIBRONECTINA, ADHERENCIA
BIBLIOGRAFÍA
1. ISBERG R, TRAN VAN NHIEU G. Binding and internalization of microorganism by integrin receptor. Trends Microbiol 1994; 2:10- 14. [ Links ]
2. CARO E, HAMILTON A, RESTREPO A, CANO LE. Adherence of Paracoccidioides brasiliensis conidia to extracellular matrix proteins. VIII International Meeting on Paracoccidioidomycosis. 25-28 June, 2002. Abst. 01-60. [ Links ]
3. PEÑALVER MC, O'CONNOR JE, MARTINEZ JP, GIL ML. Binding of human fibronectin to Aspergillus fumigatus conidia. Infect Immune 1996; 64: 1.146-1.153. [ Links ]