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Revista de la Universidad Industrial de Santander. Salud

Print version ISSN 0121-0807

Rev. Univ. Ind. Santander. Salud vol.48 no.2 Bucaramanga Apr./June 2016

http://dx.doi.org/10.18273/revsal.v48n2-2016009 

DOI: http://dx.doi.org/10.18273/revsal.v48n2-2016009

Etiología viral de infección respiratoria
aguda en niños menores de 5 años
en las provincias Comunera y
García Rovira de Santander

Jorge R. García Corzo1, Jurg Niederbacher Velasquez1, Clara I. González Rugéles1, Laura A. Rodríguez Villamizar1,
Mayra Machuca Pérez1, Alexander Torres Prieto2, Gloria C. Ortiz Rodríguez2, Mónica Romero Salazar2

1. Universidad Industrial de Santander. Bucaramanga, Colombia.
2. Secretaría de Salud Departamental, Gobernación de Santander. Bucaramanga, Colombia
Correspondencia: Jorge Raúl García Corzo. Dirección: Clínica Chicamocha. Carrera 46 64-07 La Floresta, Bucaramanga.
Correo electrónico: jrgarciacor@gmail.com.. Teléfono: 300 222 2923

Recibido: agosto 7 de 2015 Aprobado: noviembre 30 de 2015


Forma de citar: García Corzo JR, Niederbacher Velasquez J, González Rugéles CI, Rodríguez Villamizar LA, Machuca Pérez M, Torres Prieto A, et al. Etiología viral de infección respiratoria aguda en niños menores de 5 años en las provincias Comunera y García Rovira de Santander. Rev Univ Ind Santander Salud. 2016; 48(2): 240-245.


RESUMEN

Introducción: La infección respiratoria aguda es una causa importante de morbimortalidad en menores de cinco años en los municipios de las provincias de Santander. La etiología viral en esos municipios no es bien conocida. Objetivo: El objetivo del estudio fue determinar la etiología viral de la infección respiratoria aguda en menores de cinco años en las provincias Comunera y García Rovira del departamento de Santander entre diciembre de 2012 y diciembre de 2013. Materiales y métodos: Estudio descriptivo en población usuaria de servicios de urgencias. Se obtuvieron muestras por hisopado nasofaríngeo y se realizó amplificación por reacción en cadena de polimerasa con el test Seeplex® RV15 OneStep ACE Detection, multiplex para 15 virus. Resultados: Participaron 64 niños, 57,8% niños de sexo masculino. El 26,6%, de los niños eran menores de un año. La positividad para virus fue del 37,5% de las muestras. El 75% de las muestras positivas fueron de la provincia Comunera y 25% de la provincia de García Rovira. Hubo co-infección por dos virus en 8,3% de las muestras positivas. Los virus más identificados fueron Rhinovirus (29%), Parainfluenza 4 (20,8%) e Influenza (12,5%). También se identificó Coronavirus, Adenovirus, Virus Sincitial Respiratorio, Metapneumovirus y otros virus Parainfluenza. Conclusiones: En las dos provincias de Santander evaluadas circula una amplia cantidad de virus respiratorios en menores de cinco años. El Rhinovirus fue identificado como el más frecuente. Se encontró presencia de Metapneumovirus y Coronavirus humano.

Palabras clave: Virus, infecciones del sistema respiratorio, niño, prevalencia, reacción en cadena de la polimerasa multiplex.

Etiology of acute respiratory infection in children under 5 years
in the provinces Comunera and García Rovira of Santander

ABSTRACT

Introduction: Acute respiratory infection is a major cause of morbidity and mortality in children under 5 years in Santander (Colombia). Viral etiology in municipalities from this department is not well known. Objective: To determine the viral etiology of acute respiratory infection in children under five years in the provinces Comunera and García Rovira (Santander) from December 2012 to December 2013. Methodology: Descriptive study in pediatric population who attended the emergency services studied. Nasopharyngeal swab samples were obtained and a polymerase chain reaction was performed with Seeplex® OneStep RV15 ACE Detection, which is a multiplex test for 15 virus. Results: 64 children were enrolled, 57,8% being boys. 26.6% of participants were under one year. Virus positivity was present in 37.5% of the samples and 75% of the positive samples were from the province Comunera. Besides, 8.3% from positive samples were co-infected with two viruses. The most common virus were Rhinovirus (29%), Parainfluenza 4 (20.8%) and influenza (12.5%). Coronavirus, Adenovirus, respiratory syncytial virus, Metapneumovirus and other Parainfluenza virus were also identified. Conclusions: There is a wide circulation of respiratory virus in children under five in these two provinces of Santander (Colombia). Rhinovirus was the most frequent. Human Metapneumovirus and Coronavirus were also found.

Keywords: Viruses, respiratory tract infections, child, prevalence, multiplex polymerase chain reaction.


INTRODUCCIÓN

La infección respiratoria aguda (IRA) sigue siendo una de las mayores causas de morbimortalidad infantil, de hecho, las infecciones respiratorias bajas son la primera causa de muerte entre 1 y 59 meses de edad a nivel mundial1. Según el Observatorio de Salud Pública de Santander, en el año 2011 a nivel departamental, los distintos tipos de IRA juntos, fueron la primera causa de consulta externa en menores de un año (19,8%) y de uno a cuatro años (9,8%). En cuanto a consulta de urgencias, fueron la primera causa en menores de un año (20,8%) y la segunda de uno a cuatro años (10,5%). Las provincias distintas a la capital aportaron el 41,8% del total de registros de IRA. Las provincias Comunera y García- Rovira aportaron el 3,3% y 7,3% del total de casos reportados, respectivamente2.

En las provincias Comunera y García-Rovira, no existe información acerca de los virus causantes de IRA en menores de cinco años. Esta información es importante para mejorar el conocimiento sobre los virus causantes que circulan fuera de la capital Santandereana y planear actividades de prevención relacionadas con el programa ampliado de inmunización.

El objetivo de este estudio fue determinar la presencia de 15 virus respiratorios en menores de cinco años con diagnóstico clínico de IRA en la provincia Comunera y en la provincia de García Rovira durante el periodo entre diciembre 2012 y diciembre de 2013.

MATERIALES Y MÉTODOS

Diseño del estudio

Se realizó un estudio descriptivo prospectivo en niños menores de cinco años de edad con diagnóstico de infección respiratoria aguda (IRA) dado por un médico en el servicio de urgencias. Se obtuvo financiación para 64 muestras y procesamientos que se distribuyeron de manera proporcional a la población de cada provincia. Los sitios donde se realizó el muestreo fueron la provincia Comunera (Hospital Regional Manuela Beltrán del Socorro) y la provincia de García Rovira (Hospital Regional de Málaga, Hospital Santa Ana de Guaca y Hospital San Antonio del Cerrito). Estas instituciones fueron seleccionadas porque atienden población rural y urbana, además brindan atención tanto a pacientes externos como a pacientes que requieren hospitalización. Socorro y Málaga son los principales municipios de estas provincias y dado el importante porcentaje de IRA aportado por García Rovira, se asignaron otros tres municipios a esta provincia. La Secretaría de Salud Departamental convocó a las instituciones seleccionadas para participar en el proyecto. Para evitar que los virus aislados solo representaran un pico de infección respiratoria, las muestras se tomaron de forma uniforme a lo largo de un año.

Características geográficas y climáticas

La provincia Comunera está conformada por 17 municipios siendo El Socorro su capital, con una altitud promedio de 1300 msm con temperaturas que varían entre 11°C y 33°C, con un promedio de 24°C.

La provincia de García Rovira está conformada por 13 municipios siendo Málaga su capital, con temperaturas promedio que varían entre 14°C (Guaca y Cerrito) y 18°C (Málaga) y sus municipios tienen altitudes de 2220 msm (Cerrito), 2235msm (Málaga) y 2401 msm (Guaca).

Participantes

Se incluyeron como participantes menores de cinco años que fueron llevados a consulta de urgencias por una enfermedad respiratoria definida por la presencia de uno de los siguientes síntomas: congestión nasal, rinorrea, tos, dificultad para respirar o para deglutir. Los criterios de inclusión fueron: máximo cinco días de inicio de los síntomas, residencia en Santander sin haber salido del departamento los 14 días anteriores al inicio de los síntomas y edad menor de cinco años. Los niños fueron excluidos si recibieron antivirales para influenza o si tuvieron una enfermedad previa en los siete días anteriores al inicio de los síntomas. Para determinar el tipo de IRA se usó la clasificación del Programa de Atención Integrada de las Enfermedades Prevalentes de la Infancia (AIEPI-2012). Los criterios empleados para definir taquipnea también fueron tomados del AIEPI 2012.

Ruta del estudio y recolección de muestras

Una vez los cuidadores del niño dieron su consentimiento informado, se recolectaron los datos clínicos, epidemiológicos y del examen físico en un formulario elaborado para el estudio.

Las muestras fueron tomadas por personal previamente entrenado, usando hisopado nasofaríngeo con escobillón de rayón estéril, conservadas en medio de transporte viral (Vircell TM001) a 4 °C, fueron trasladadas en menos de 72 horas al Laboratorio Central de Investigaciones de la Facultad de Salud de la Universidad Industrial de Santander donde se extrajeron los ácidos nucleicos con el kit comercial Gene-spin™ que fueron almacenados a - 20 °C hasta ser empleados.

Reacción en Cadena de Polimerasa con transcripción inversa (RT-PCR) multiplex para la identificación viral Se empleó amplificación por RT-PCR multiplex para detectar los virus con el test cualitativo Seeplex® RV15 OneStep ACE Detection (Seegene, Seoul, South Korea) que amplifica simultáneamente secuencias de ADN/ ARN específicas para 15 virus distintos. Mediante una prueba piloto el test fue validado a nivel local de acuerdo a las instrucciones dadas por el productor. La prueba tiene una especificidad que en promedio es mayor del 98%, con sensibilidad mayor del 60% para la mayoría de virus (la sensibilidad reportada Coronavirus y Bocavirus es 24% y 25%, respectivamente). Fueron efectuadas tres reacciones de amplificación, con su respectivo control interno y los iniciadores para la amplificación de 5 virus. Este programa de amplificación contó con 45 ciclos de 94 °C por 0,5 minuto, 60 °C por 1,5 minutos y 72 °C por 1 minuto. La amplificación se terminó con una extensión a 72°C durante 10 minutos y se visualizaron los amplificados en gel de agarosa al 2% coloreado con bromuro de etidio.

Análisis estadístico

Se realizó estadística descriptiva, calculando distribución de frecuencias por las variables edad, grupos de edad, sexo, procedencia, seguridad social y virus aislado.

RESULTADOS

La población de estudio correspondió a 64 menores de cinco años, de estos 57,8% niños y 26,6% menores de un año. La TABLA 1 presenta las características sociodemográficas de la población de estudio.

La PCR-RT fue positiva en 24 casos (37,5%). En el 8,3% (n=2) de las muestras positivas se presentó co-infección por dos virus: Influenza B y Parainfluenza 4 en un caso y en el otro, Rhinovirus y Parainfluenza 1. De los casos positivos, 75% procedían de la provincia Comunera y 25% de la provincia de García Rovira. La positividad de las muestras fue distinta en las dos provincias: 43,9% en la Comunera y 26,1% en García Rovira.

Se identificaron 12 de los 15 virus buscados. Los virus identificados con mayor frecuencia fueron Rhinovirus (29%), Parainfluenza 4 (20,8%) e Influenza (12,5%). La descripción de los virus aislados se encuentra en la TABLA 2. Dado el número pequeño de la muestra, no fue posible realizar inferencias sobre la estacionalidad de cada virus.

DISCUSIÓN

Este es el primer estudio que busca e identifica la presencia de un amplio número de virus respiratorios en provincias santandereanas. Los resultados muestran que hay una importante variedad de virus circulando en las provincias Comunera y García Rovira de Santander. Al comparar con información no publicada de la Secretaría de Salud Departamental sobre aislamientos virales en niños en el 2013, solo hay un caso identificado de un niño de 5 años del Socorro con virus Influenza A. La Secretaría de Salud Departamental no tiene la posibilidad de identificar rutinariamente otros virus respiratorios diferentes a Influenza ni cuenta con PCR. En nuestro estudio, el virus de la influenza ocupó el tercer lugar en frecuencia. Al comparar con la cobertura de vacunación para influenza estacional en 2013 (datos de la Secretaría de Salud aún no publicados), se verifica que ésta fue relativamente baja en estas provincias (García Rovira: 39,8% para menor de 1 año y 68,8% para 12 a 23 meses y en Comunera: 37,6% y 57,8% respectivamente). Esto indica que mejorar estas coberturas puede prevenir un importante número de infecciones respiratorias.

En el Departamento de Antioquia, la positividad reportada de las muestras en 2012 fue de 51%. Esto incluye muestras procesadas por inmunofluorescencia (panel viral para Influenza A y B, Adenovirus, VSR y Parainfluenza 1,2 y 3) y otras por PCR-RT para estos mismos virus. Es de resaltar que el virus que predominó fue el VSR, seguido de Influenza A (no H1N1) y Parainfluenza 3. Sin embargo no se desglosa la información por edades ni municipios para excluir los datos correspondientes a la ciudad capital, Medellín, y poder establecer comparaciones con nuestro estudio3.

Una revisión de las muestras procesadas mediante PCRRT en las bases de datos del grupo de virología del Instituto Nacional de Salud, mostró que en el 2013 las muestras positivas fueron de 27,3% y entre el 2013 y el 2015 los virus más frecuentes fueron el VSR (53%), el Influenza A (24%), el virus de la enfermedad aleutiana (12%) y el Metapneumovirus (7%), pero estos datos no están discriminados por edades, ni zonas rurales y urbanas4.

En un estudio realizado en el estado Zulia de Venezuela entre febrero de 2005 y julio de 2006 para identificar etiología de IRA usando aislamiento viral e inmunofluorescencia directa para cuatro virus, se obtuvieron 102 muestras con identificación de virus en 46 de ellas (45%). En 27 niños hasta los seis años de edad se identificaron Adenovirus, Influenza, Parainfluenza y VSR5. Los resultados de nuestro estudio muestran que estos cuatro virus circulan a los dos lados de la frontera colombo venezolana.

Se identificaron dos casos de infección simultánea por dos virus (8,3%). Esta prevalencia es notoriamente inferior a la reportada en Chile donde la co-infección reportada varía entre el 16% y 37%6,7,8 y en España en donde se ha reportado hasta 62% de co-infección en niños hospitalizados9. En Colombia, un estudio que evaluó infecciones por VSR y adenovirus en menores de tres años hospitalizados, encontró infección simultánea en 4,5% de los pacientes10. No se halló alguna característica sociodemográfica o clínica particular ni mayor severidad de la IRA en los niños con co-infección; sin embargo, esto puede explicarse dado que el número limitado de aislamientos simultáneos no permite hacer comparaciones precisas entre niños con mono-infección y co-infección. A este respecto una reciente revisión sistemática y meta-análisis no encontró diferencias en severidad clínica entre las mono-infecciones y co-infecciones respiratorias virales, por lo cual el mayor riesgo de mortalidad observado en niños con co-infección viral aún requiere mayor investigación11.

Este estudio tiene algunas limitaciones. En primer lugar, el tamaño de la muestra dificulta hacer análisis de estacionalidad o relacionarlas con temporadas de infección respiratoria a nivel de las zonas evaluadas. De manera similar, los datos tampoco permiten hacer comparaciones con otras provincias Santandereanas ni establecer patrones de circulación con respecto a años anteriores. En este estudio no se realizó identificación de bacterias, las cuales pueden agregarse a infecciones virales previas o ser la causa de la infección respiratoria en los casos donde no pudo aislarse un virus.

Es de notar, la necesidad de contar con un monitoreo permanente de los virus circulantes en el departamento de Santander con técnicas de PCR-RT que permitan una mejor vigilancia epidemiológica de la IRA en menores de cinco años.

CONSIDERACIONES ÉTICAS

El Comité de Ética del Instituto del Corazón de Bucaramanga aprobó el protocolo de la investigación y el consentimiento informado de acuerdo a los estándares éticos de la Declaración de Helsinki (Acta No. 048 del 14 de abril de 2012). El consentimiento informado fue firmado por los cuidadores del paciente y todos los datos recolectados fueron confidenciales.

DECLARACIÓN DE CONFLICTO DE INTERESES

Los autores manifiestan que no existe ningún conflicto de intereses.

AGRADECIMIENTOS

A Oscar Téllez Santos, pediatra, por su colaboración para la realización del protocolo inicial de este estudio y a la Universidad Industrial de Santander y la Gobernación de Santander por la financiación de este proyecto.


REFERENCIAS

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