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INTRODUCCIÓN
La mastitis es la inflamación de la glándula mamaria, y su principal causa es la infección bacteriana. La patogenia es compleja; contribuyen interacciones de la inmunidad innata y adaptativa, daño físico del esfínter y factores asociados con el ordeño mecánico 1. Es considerada la enfermedad infectocontagiosa de mayor impacto en los rebaños lecheros. Puede ser provocada por numerosos agentes, dentro de los cuales el género Staphylococcus es el más frecuentemente aislado 2.
La incidencia de mastitis clínica oscila entre el 15 y el 25 %, aunque en algunos hatos puede ser superior al 45 %3 . A pesar de los métodos modernos establecidos para el control de la mastitis bovina, esta continúa siendo una de las mayores causas de pérdidas económicas en la producción lechera, sufrimiento animal, efectos negativos en la calidad de leche y reducción en la higiene del producto 4 . Es imposible cuantificar con precisión el costo total de la mastitis: varía con el tiempo y depende de las condiciones del hato. La disminución de la producción de leche representa aproximadamente el 70 % del costo total
de la mastitis 5; en Estados Unidos, el costo de la mastitis se ha estimado en 200 dólares/vaca/año 3.
En el campo, muchos animales afectados con mastitis pasan desapercibidos en la evaluación clínica, pero podrían ser diagnosticados mediante pruebas de laboratorio y de campo como el California Mastitis Test (CMT) 6,7. Dicha prueba es fácil y rápida para predecir el conteo de células somáticas en leche de vacas con cuartos mamarios afectados 8.
La ocurrencia y el tipo de sintomatología en la mastitis se relacionan con la patogenicidad de los microorganismos y su habilidad para invadir los tejidos, así como la resistencia de la glándula mamaria. Estos factores determinan la severidad de los síntomas, que pueden variar desde el incremento en el conteo de células somáticas sin cambios macroscópicos en leche hasta la fibrosis progresiva o la ocurrencia de severa toxemia 9. La histopatología tiene como importancia el evaluar los daños tisulares y la pérdida de integridad estructural, dependiendo de la severidad y la duración del cuadro. Aquí se puede ver una inflamación, fibrosis, aumento de células, edemas, atrofia del tejido mamario, y en casos graves abscesos y gangrena 5,10.
El objetivo del presente trabajo fue describir los hallazgos histopatológicos en glándula mamaria de vacas lecheras diagnosticadas con mastitis clínica mediante la prueba de CMT en la planta de sacrificio del municipio de Ipiales, Nariño, Colombia.
MATERIALES Y MÉTODOS
Localización
El estudio se realizó en la planta de beneficio del municipio de Ipiales, departamento de Nariño, Colombia, en el período comprendido entre mayo a junio de 2014.
Tamaño de la muestra
Con base en el promedio de sacrificio de bovinos hembras (n = 2443) en la planta de beneficio del municipio de Ipiales durante 2011 y 2012, se estimó el tamaño de la muestra (n) teniendo en cuenta que las vacas que llegan a la planta de sacrificio tienen la misma probabilidad de ser diagnosticadas con mastitis clínica o sin esta, según la fórmula 11,12:
El número de muestras (n) por obtener para el estudio se estimó en 332 cuartos mamarios positivos a mastitis clínica mediante CMT y que ingresan a la planta de beneficio de Ipiales.
Criterio de inclusión
Para el estudio se incluyeron hembras bovinas positivas a cualquier grado de mastitis clínica según la prueba de CMT.
Toma de muestras para prueba de California Mastitis Test
En la planta de beneficio, durante la inspección ante mortem, se realizó la prueba de CMT hasta completar el total de la muestra, teniendo en cuenta el criterio de inclusión. La prueba CMT se calificó como grado 0 (normal), trazas (mastitis subclínica), grado 1 (mastitis clínica con un rango aproximado de 400.000 a 1.200.000 células somáticas), grado 2 (mastitis clínica con un rango aproximado de 1.200.000 a 5.000.000 células somáticas) y grado 3 (mastitis clínica con un conteo de células somáticas mayor a 5.000.000) 13.
Toma de muestra para evaluación histopatológica
Inmediatamente después del sacrificio, se realizó la toma de muestras por corte profundo de tejido mamario, incluyendo piel y pezón de cada cuarto. Las muestras se fijaron en formol bufferado al 10 % para su transporte, y los tejidos se procesaron mediante la técnica de inclusión en parafina y coloración de hematoxilina y eosina, en el laboratorio de Patología de la Fundación Hospital San Pedro del Municipio San Juan de Pasto, Colombia.
El análisis y la interpretación histopatológica se realizaron en el área de cátedra y servicio de Patología Veterinaria de la Universidad de Nariño, teniendo en cuenta los criterios de evaluación de la tabla 1, para lo cual se consideraron los siguientes aspectos: reconocimiento histológico del órgano; evaluación en objetivos de 4X, 10X y 40X; evaluación de acinos glandulares, ductos, canalículos y conductos galactóforos, piel y pezón; observación de alteraciones microcirculatorias, degenerativas, inmunopatologías inflamatorias, proliferativas y disturbios generales. El grado de severidad se determinó según el porcentaje de tejido afectado, cantidad y distribución de alteraciones e infiltrado celular 5,14.
Variables objeto de estudio
Las variables consideradas fueron: grado de mastitis según CMT y cambios histopatológicos en glándula mamaria (grado de severidad, patrón de distribución de las lesiones, tipo de infiltrado celular, cronicidad, cambios en tejido funcional).
Análisis estadístico
Para determinar la distribución de los grados de mastitis clínica mediante CMT y establecer los cambios histopatológicos en glándula mamaria, se realizó estadística descriptiva mediante el uso de tablas de frecuencias, determinando la participación porcentual de cada variable en la población objeto de estudio.
RESULTADOS
Proporción de cuartos afectados con mastitis clínica según la prueba California Mastitis Test
Según la prueba de CMT, la mayor proporción de cuartos anteriores (46,2 %) y posteriores (44,2 %) se encontró afectada con mastitis grado 1. La presentación de mastitis grado 2 fue mayor en cuartos anteriores (26,9 %). Con respecto a mastitis grado 3, se presentó en mayor proporción en cuartos posteriores (36,5 %) que en anteriores (26,9 %).
En la figura 1 se puede observar en igual proporción mastitis clínica grado 1 (46,2 %), grado 2 (26,9 %) y grado 3 (26,9 %) en los cuartos anterior izquierdo, anterior derecho y posterior izquierdo. La variación entre cuartos anteriores y posteriores se presentó por un aumento de mastitis grado 3 (46,2 %) en el cuadrante posterior derecho.
Cambios histopatológicos en tejido mamario
Las lesiones fueron en mayor proporción severas, de distribución intraductal-periductal con infiltrado celular predominantemente mixto. En el 79,80 % de los casos las lesiones fueron crónicas, en las cuales en el 32,7 % se encontró presencia de tejido conectivo (no funcional) leve (tabla 2). La cronicidad de las lesiones, así como la naturaleza multifactorial de la enfermedad, se ve reflejada en que los infiltrados inflamatorios mononuclear y mixto (figura 2) fueron los predominantes en el estudio (tabla 2).
DISCUSIÓN
En el estudio se encontró mayor proporción de mastitis clínica grado 3 en cuartos posteriores. Este hallazgo concuerda con lo registrado por Wolter, Castañeda, Kloppert y Zschöck, en 2004, quienes afirman que normalmente los cuartos posteriores son más grandes que los delanteros y, en promedio, secretan alrededor del 60 % del rendimiento diario de leche, lo cual incrementa el riesgo de traumatismos y lesiones que facilitan el ingreso de microorganismos a la glándula mamaria 15.
Los hallazgos histopatológicos en la glándula mamaria revelan una mayor proporción de lesiones crónicas; aquí predominaron los infiltrados inflamatorios mononuclear y mixto, acompañados con proliferación de tejido conectivo, lo cual es indicativo del proceso de reparación en el tejido dañado; por otra parte, los hallazgos reflejan la naturaleza multifactorial de la enfermedad 9.
Los resultados en piel indican la presencia de dermatitis linfocítica perivascular que varía de moderada a severa en el 82,68 % de la población objeto de estudio. Este tipo de hipersensibilidad de tipo III es denominada también enfermedad por complejos inmunitarios 16. Debido a que la afección se presentó en una alta proporción de la población, se recomienda realizar un estudio enfocado hacia la búsqueda de agentes irritativos que afecten la piel, que varían desde sustancias químicas y medio ambiente hasta rutina de ordeño.
