Rafael Tizol Correa

Subdirección de Maricultivo, Centro de Investigaciones Pesqueras, Barlovento, Santa Fe, Playa, La Habana, CUBA.

ABSTRACT

Laboratory experiments were carried out to determine the possibility of using the microalgae Nannochloropsis oculata as a food source for brine shirmp. Among the range concentrations studied (3 x 10⁵ to 14 x 10⁵ cells/ml), 12 x 10⁵ cells/ml offered the best results of survival and growth rate and it is recommended as the most effective. From correlation matrix, high values (r > 0.90; a = 0.05) were obtained for the relation of microalgae concentration and survival, growth rate and the variation of average lenght. The minimum cellular concentration of microalgae which is necessary for brine shrimp culture is 5.6 x 10⁵ cells/ml.

Un grupo numeroso de alimentos inertes y vivos, han sido utilizados con éxito para el cultivo de Artemia hasta etapas adultas, entre los que se encuentran el salvado de arroz y soya, harina de pescado, yema de huevo, etc., además de un amplio grupo de microalgas y levaduras (Dobbeleir, et al, 1980).

Un elevado número de especies de algas han sido empleadas para la alimentación de Artemia, sin embargo es recomendable determinar las posibilidades de las cepas de algas que se utilizan, ya que las especies de algas difieren altamente entre sí. Varios procedimientos pueden emplearse para estas observaciones como análisis de composición química, ensayos de crecimiento y supervivencia. Además es importante conocer la densidad mínima celular a la cual se de tiene la ingestión de algas, para así garantizar el alimento necesario en todas las etapas de crecimiento. El presente estudio está orientado a esclarecer estos aspectos con respecto al alga Nannochloropsis oculata con el objetivo de su uso posterior en el cultivo de Artemia, considerando la alta disponibilidad de la misma en la Estación de Cultivo del Centro de Investigaciones Pesqueras.

Para evaluar las densidades adecuadas de la microalga Nannochloropsis oculata como alimento, se realizaron dos experimentos con diferentes densidades. El primero con rangos entre 3 x 10⁵ cel/ml hasta 9 x 10⁵ cel/ml, con diferencia entre las mismas de 1 x 10⁵ (Experimento I). Esta variante no arrojó los resultados esperados de crecimiento y supervivencia, por lo que realizó una segunda corrida con densidades entre 8 x 10⁵ y 14 x 10⁵ cel/ml (Experimento II).

Las experiencias se llevaron a cabo con tres réplicas en un laboratorio con temperatura controlada de 25 °C y una salinidad de 35 o/oo. El local estaba iluminado con lámparas fluorescentes de 20 watts con un fotoperíodo de 12 x 12 horas de luz-oscuridad. Placas petri con 25 ml de suspensión de algas a las densidades estudiadas incluyendo un control sin algas fueron inoculadas con 10 nauplios recién eclosionados, los cuales fueron mantenidos por las mismas por un período de 7 días, según la metodología descrita por Sorgeloos, et al (1986).

Una vez transcurridos los 7 días se controlaron los organismos restantes, fijados previamente con solución lugol. Se le midió el largo total, calculando posteriormente el largo medio para cada una de las concentraciones estudiadas, la desviación standar, el porcentaje de supervivencia y la tasa de crecimiento diario (mm/día). Se aplicó una matriz de correlación para un 95 % de confiabilidad a los datos finales de concentración, largo medio, supervivencia y tasa de crecimiento para conocer la relación entre los mismos.

A fin de determinar la concentración mínima celular a la cual se detiene la ingestión de algas en cultivos de Artemia, se realizó un experimento en probetas de 2 l, con 3 réplicas. En las misma se colocaron 3000 nauplios en estadio II con aireación suave, en una suspensión de algas con una densidad inicial de 1.6 x 10⁶ cel/ml.

Se llevaron a cabo mediciones de la densidad celular cada 10 minutos, hasta que no se registraron caídas significativas en la misma. Este valor al cual los niveles de ingestión se detienen es específico para cada especie de microalga y se considera como la concentración mínima celular necesaria para un adecuado desarrollo de Artemia (Sorgeloos, et al, 1986).

Las muestras para la determinación de las densidades de células se tomaron con una pipeta Pasteur, llevándose a cabo dos conteos por muestra en una cámara Neubauer utilizando un microscopio con objetivo de 40 aumentos.

En el experimento I, los mayores valores de supervivencia correspondieron a las densidades de 8 x 10⁵ cel/ml y 9 x 10⁵ cel/ml (50 y 66 % respectivamente) (Tabla 1). A partir del tercer día se empezaron a observar altas mortalidades, al quinto día en el control y al sexto en las de 3 x 10⁵ cel/ml todos los organismos habían muerto. Para las densidades de 4 x 10⁵ y 7 x 10⁵ cel/ml, aunque no ocurrió una mortalidad total, se reportó un bajo número de organismos vivos al final del experimento.

Los mayores valores de la tasa de crecimiento y el largo medio se obtuvieron en las densidades más altas, con un máximo en 9 x 10⁵ cel/ml. Se realizó una segunda corrida aumentando las densidades, con un rango entre 8 x 10⁵ y 14 x 10⁵ cel/ml (Experimento II).

Como en el experimento inicial, a partir del tercer día se registraron altas mortalidades en el control, que al final del estudio incluyó la totalidad de los organismos. Los mayores porcentajes de supervivencia se reportaron en las densidades de 11 x 10⁵ y 12 x 10⁵ cel/ml (96 %) aunque se obtuvieron índices superiores al 90 % a partir de 10 x 10⁵ cel/ml. Con referencia al largo medio final los mejores valores se presentaron en las densidades entre 11 x 10⁵ y 14 x 10⁵ cel/ml con un máximo entre las de 12 x 10⁵ y 13 x 10⁵ cel/ml. Igual comportamiento se encontró con respecto a la tasa de crecimiento.

Teniendo en cuenta que se obtuvieron altos índices de supervivencia y crecimiento de los nauplios en densidades mayores a los 10 x 10⁵ cel/ml, se puede concluir que el alga Nannochloropsis oculata es un alimento adecuado para este organismo a los niveles de densidad de algas estudiados.

Considerando que los mejores valores de supervivencia, tasa de crecimiento y largo medio final se alcanzaron con densidades entre 12 x 10⁵ cel/ml y 13 x 10⁵ cel/ml, es posible recomendar las mismas como las más efectivas para este cultivo.

Altos valores de coeficiente de correlación se obtuvieron entre la densidad y el largo medio, la tasa de crecimiento y la supervivencia (Tabla 2). El menor valor de coeficiente de correlación se obtuvo en la comparación entre la densidad y la supervivencia, debido fundamentalmente a que los valores de supervivencia son máximos en las densidades de 11 x 10⁵ y 12 x 10⁵ cel/ml y una disminución de la misma se observa a niveles superiores.

Se debe señalar, que en la densidad de 12 x 10⁵ cel/ml, convergen los mayores valores de la supervivencia, el largo medio y la tasa de crecimiento, lo que permite recomendar la misma como la más adecuada para el cultivo de Artemia cuando se usa esta microalga como alimento. Experiencias de cultivo con Chlorella sp. una microalga de características muy similares a la estudiada por su tamaño para alimentar Artemia utilizaron densidades de 1.14 x 10⁶ cel/ml con buenos resultados (Sotolongo, 1988), mientras que para lograr rendimientos satisfactorios con Dunaliella tertiolecta, se emplearon densidades entre 7 y 10 x 10⁴ cel/ml (Coutteau et al, 1990), cosechas de hasta 25 kg de peso humedo/m³ , se han logrado con densidades celulares de 4.5 x 10⁴ del alga Chaetoceros curvicetus (Sorgeloos, 1985) aunque ambas microalgas presentan un tamaño superior a la utilizada por nosotros.

En la tabla 3, se ofrecen los valores de las lecturas de la densidad de algas en el experimento de concentración mínima celular. En los mismos se observa una estabilización de las lecturas en una concentración al rededor de las 5.6 x 10⁵ cel/ml, donde los niveles de ingestión se detienen, por lo que podemos señalar este valor como la densidad mínima celular de Nannochloropsis oculata para el cultivo de esta especie. Este valor reviste un carácter específico para cada especie de alga y está dado básicamente por las dimensiones celulares. Para Nannochloropsis oculata, este valor se encuentra al rededor de 5000 cel/ml (Sorgeloos, et al, 1986) debido a que el tamaño de la célula es mayor que la estudiada en el presente trabajo.

Experiencias de cultivo con Chlorella sp. una microalga de características muy similares a la estudiada por su tamaño para alimentar Artemia utilizaron densidades de 1.14 x 10⁶ cel/ml con buenos resultados (Sotolongo, 1988), mientras que para lograr rendimientos satisfactorios con Dunaliella tertiolecta, se emplearon densidades entre 7 y 10 x 10⁴ cel/ml (Coutteau et al, 1990). Cosechas de hasta 25 kg de peso húmedo/m³, se ha logrado con densidades celulares de 4.5 x 10⁴ cel/ml del alga Chaetoceros curvicetus (Sorgeloos, 1985) aunque ambas microalgas presentan un tamaño superior a la utilizada por nosotros.

BIBLIOGRAFÍA

1 Coutteau, P., P. Lavens y P. Sorgeloos. 1990. Baker's yeast as a potential substitute for live algae in aquaculture diets: Artemia a case study. Jour. World Aquacul. Soc, 21(1). pag. 1-9.         [ Links ]

2 Dobbeleir, J., N. Adam, E. Bossuyt, E. Bruggeman y P. Sorgeloos. 1980. New aspects of the use of inert diets for high density culturing of brine shrimp. The brine shrimp Artemia. Vol. 3. Universa Press, Wettern, Belgium. Pag. 165-174.         [ Links ]

3 Sotolongo, M.E. 1988. The evaluation of various diets for optimal growwth and survival of different life stages of Artemia. General Aquaculture Course. Study Report. Kanagawa International Fisheries Training Centre. JICA. Kanagawa, Japón. Pag. 73-78.         [ Links ]

4 Sorgeloos, P. 1985. Potential of converting microalgae into brine shrimp Artemia. Arch. Hydrobiol. Beih. 20. Pag. 25-32.         [ Links ]

5 Sorgeloos, P., P. Lavens, P. Leger, W. Tackaert y D. Versichele. 1986. Manual para el cultivo y uso de Artemia en la acuacultura. FAO, Documento de Campo, 10. Pag. 170-174.        [ Links ]