¹ Universidad del Tolima. Grupo de Investigación de Productos Naturales. Ingeniera Agroindustrial. Ibagué, Colombia.

² Universidad del Tolima. Grupo de Investigación de Productos Naturales. Ingeniero Agroindustrial. Ibagué, Colombia.

³ Universidad del Tolima, Facultad de ciencias. Grupo de Investigación en Productos Naturales. Químico, MSc., Docente. Ibagué, Colombia

⁴ Universidad del Tolima, Facultad de ciencias. Grupo de Investigación en Productos Naturales. Licenciado, PhD, Docente. Ibagué, Colombia.

Correspondencia: danieldaza08@hotmail.com

RESUMEN

En este trabajo se evaluó el contenido de fenoles en los macerados etanólicos provenientes de la parte comestible (pulpa) y no comestible (semilla y cáscara) de Pitahaya (Cereus triangularis), Uchuva (Physalis peruviana) y Mangostino (Garcinia mangostana). Además se estudió comparativamente el potencial de los extractos para inhibir la peroxidación lipídica en una mantequilla elaborada artesanalmente. La concentración de compuestos fenólicos en la cáscara de Garcinia mangostana (590,9±3,9 mg EAG/g), resultó ser la más elevada entre los materiales analizados, contradictoriamente la pulpa de este fruto fue la porción con el contenido de fenoles (55,5±07 mg EAG/g). La actividad antioxidante mostró una relación directa con el contenido de compuesto fenólicos, con valores de coeficiente de correlación de 0,988, 0,961 y 0,998 para la Uchuva, Pitahaya y el Mangostino respectivamente. Todos los extractos mostraron actividad frente a la peroxidación lipídica y tres de ellos, cáscara de mangostino (CM), semilla de mangostino (SM) y pulpa de Uchuva (PU) mostraron mayor inhibición que el BHT, A.A y PC1 (producto comercial 1), mostrándose como materias primas promisorias para el uso en la industria alimentaria y cosmetica.

PALABRAS CLAVE: Peroxidación lipídica, Cereus triangularis, Physalis peruviana, Garcinia mangostana

ABSTRACT

This work evaluated the phenolic content in ethanolic macerated from edible portion (pulp) and non-edible portion (seeds and peel) of Pitahaya (Cereus triangularis), Physalis (Physalis peruviana) and Mangosteen (Garcinia mangostana). Besides the potential was studied comparatively extracts for inhibiting lipid peroxidation in a handcrafted butter. The concentration of phenolic compounds in the peel of Garcinia mangostana (590,9±3,9 mg EAG/g) was found to be the highest among the materials tested, contradictorily the pulp of this fruit showed lower content of phenols (55,5±07 mg EAG/g). The antioxidant activity showed a direct relationship with the content of phenolic compounds with correlation coefficient values ​​of 0,988, 0,961 and 0,998 for the Physalis, and Mangosteen Pitahaya respectively. All extracts showed activity against lipid peroxidation and three of them, mangosteen peel (CM), mangosteen seed (SM) and pulp Uchuva (PU) showed greater inhibition than BHT, AA and PC1 (commercial product 1). This fruits appearing as promising materials for use in the food and cosmetic industries.

KEYWORDS: Lipidic peroxidation, Cereus triangularis, Physalis peruviana, Garcinia mangostana

RESUMO

Neste trabalho foi avaliado o conteúdo fenólico dos extratos etanólicos da parte comestível (polpa) e não comestível (sementes e casca), de Pitaya (Cereus triangularis), Uchuva (Physalis peruviana) y Mangostino (Garcinia mangostana). Além disso, foi comparado o potencial dos extratos na inibição da peroxidação lipídica em manteiga elaborada artesanalmente. A concentração de compostos fenólicos na casca de Garcinia mangostana (590,9±3,9 mg EAG/g), foi a mais elevada entre os extratos analisados, contraditoriamente a polpa desse fruto apresentou o conteúdo mais baixo de fenólicos (55,5±07 mg EAG/g). A atividade antioxidante mostra uma relação direta com o conteúdo de compostos fenólicos, com valores de coeficiente de correlação de 0,988, 0,961 e 0,998 para a Uchuva, Pitahaya e o Mangostino, respectivamente. Todos os extratos mostraram capacidade de inibir a peroxidação lipídica e três deles, casca de Mangostino (CM), semente de Mangostino (SM) e polpa de Uchuva (PU) mostraram maior inibição que o BHT, AA e PC1 (produto comercial 1), mostrando-se matérias primas promissoras para ser utilizado em indústrias alimentícias e cosméticas.

INTRODUCCIÓN

El Departamento del Tolima, ubicado en la zona centro-occidental de Colombia, posee condiciones agroecológicas favorables tales como disponibilidad de tierras, diferentes pisos térmicos y una excelente localización geográfica respecto a los mercados nacionales, lo que lo convierte en potencialmente apto para el desarrollo de una amplia y variada gama de productos agrícolas, entre los que se destacan las frutas exóticas.

Por otra parte, diversas investigaciones han sugerido que el consumo de frutas y vegetales reduce el estrés oxidativo y modifica el perfil lipídico, con lo cual se reduce el riesgo de enfermedades causadas por radicales libres y el elevado colesterol sanguíneo [4]. El uso de antioxidantes de origen vegetal, tales como los ácidos fenólicos, flavonoides, tocoferoles en la industria alimentaria, cobra cada día mayor importancia debido al efecto anticarcinogénico, antidiabético y otros beneficios atribuidos para la salud humana [5, 6, 7, 8].

El objetivo de este trabajo fue determinar la capacidad antioxidante de la fracción comestible y residuos agroindustriales de Mangostino, Uchuva y Pitahaya utilizando una mantequilla preparada artesanalmente como modelo y relacionar dicha actividad con la presencia de compuestos fenólicos, buscando con ello fomentar el aprovechamiento de la fracción no comestible al utilizarlos como fuente alternativa para la obtención de antioxidantes naturales y a su vez reducir el impacto ambiental generado por el desaprovechamiento de estos materiales.

MÉTODO

Material vegetal

Se utilizaron semillas, cáscara y pulpa de Pitahaya amarilla (Cereus triangularis) y Uchuva (Physalis peruviana) obtenidos de mercados locales de la ciudad de Ibagué, la fruta de Mangostino (Garcinia mangostana) fue colectada en el Municipio de Mariquita

Adecuación del material y obtención de extractos

Los frutos fueron sometidos a un proceso de selección, lavado, segmentación (cáscara, pulpa y semilla) y secado en estufa (45-55°C/48 h). El material seco se trituró hasta conseguir un polvo fino. Una porción de las muestras se maceró con etanol (1:10 w/v materia seca/solvente), con remoción del solvente cada 24 h hasta el agotamiento de la muestra. Los extractos crudos se filtraron, se concentraron a presión reducida y se almacenaron (4°C) en frascos ámbar debidamente rotulados hasta su utilización.

Determinación cuantitativa de fenoles

Para la cuantificación de fenoles se hizo uso del reactivo de Folin-Ciocalteau (FC), siguiendo la metodología descrita por Dastmalchi et al. [9], con algunas modificaciones. A una alícuota del extracto (0,1 mL) se adicionó agua destilada (6 mL), reactivo FC (0,5 mL) y carbonato de sodio (1,5 mL, 20%), la mezcla se aforó con agua destilada a 10 mL y se incubó a temperatura ambiente en oscuridad (2 h). La absorbancia de las muestras se leyó a 760 nm en un espectrofotómetro Thermo Scientific Helios g, contra un blanco de reactivos disueltos en agua. El ácido gálico se utilizó para preparar una curva de calibración (0-700 mg/mL). La ecuación de la recta obtenida se estableció como: y = 0,001X-0,009, R2=0,997, la cual sirvió de base para calcular la concentración de las muestras. Los resultados se expresaron como miligramos equivalentes de ácido gálico por gramo de material seco (mg EAG/g).

Actividad antioxidante

Determinación de la capacidad antioxidante en un modelo de peroxidación lipídica en mantequilla. Para evidenciar la habilidad de los fitocompuestos contenidos en los extractos para inhibir la peroxidación lipídica se utilizó como sustrato una mantequilla preparada artesanalmente a base de crema de leche, a fin de garantizar la ausencia total de preservants antioxidantes.

La mantequilla elaborada fue clarificada sometiéndola a calentamiento (70°C/3 h) en vaso de precipitados y con agitación moderada, produciendo la separación de las fases. La fase lipídica se pasó a través de tela filtrante y por papel filtro [10]. La calidad del producto se estableció a través de la determinación de la humedad, densidad, cenizas, grasa, índice de refracción, acidez, índice de peróxido, índice de saponificación e índice de yodo, según metodología de la A.O.A.C. 1990 [11]. Dos mantequillas comerciales se utilizaron como controles.

Ecuación 1

Análisis estadístico

Todas las determinaciones químicas se efectuaron por triplicado. Cada réplica se analizó individualmente y los datos fueron reportados como la media de tres determinaciones (n=3±SD). Los análisis de varianza y diferencia entre las muestras fueron determinados por test de rangos múltiples de Duncan usando el programa estadístico Statgraphics. Versión estudiantil. Un nivel de p<0,05 fue usado como criterio para determinar las diferencias estadísticas.

RESULTADOS

Denominación de extractos vegetales

Para mayor comprensión del texto, los macerados etanólicos de los diferentes materiales vegetales se mencionarán a lo largo del trabajo de la siguiente manera: pulpa de Uchuva (PU), semilla de Uchuva (SU), cáscara de Uchuva (CU), pulpa de Pitahaya (PP), semilla de Pitahaya (SP), cáscara de Pitahaya (CP), pulpa de Mangostino (PM), semilla de Mangostino (SM) y cáscara de Mangostino (CM).

Contenido de fenoles totales

La identificación cuantitativa de compuestos fenólicos presentes en un material vegetal constituye uno de los primeros pasos para la determinación de la actividad antioxidante de estos [14], y adicionalmente puede proveer algún indicio de otras actividades biológicas. Los valores obtenidos en la cuantificación de fenoles en los diferentes extractos evaluados muestran contenidos que oscilan en un rango de 55,5 mg EAG/g a 590,9 mg EAG/g (cuadro 1). La mayor cantidad de compuestos fenólicos fue encontrado en CM seguido de SM, PU, SP, SU, CU, CP, PP y PM respectivamente.

Comparando estos resultados con la literatura, fueron reportados valores más bajos de fenoles totales para pulpa de Uchuva (40,45 y 39,15 mg EAG/100 g de muestra) cáscara de mangostino (195 mg EAG/g de extracto; 24,9 mg EAG/g) y para la pulpa y cáscara de pitahaya (42,4; 39,7 mgEAG/100) [19, 20, 21, 22, 23]. Adicionalmente, se hallaron reportes que difieren de nuestros resultados, para el contenido de fenoles de la pulpa de mangostino (263,3 mg EGA/g de fruta seca) [24]. La variación de los resultados puede deberse a diferencias en variedad de los frutos, factores medioambientales composición y naturaleza química de los constituyentes de cada matriz.

Cuadro 1

ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE

Determinación de calidad de la mantequilla

La caracterización físico química de la mantequilla usada como modelo y los productos comerciales utilizados como controles para la determinación del potencial antioxidante de los materiales analizados muestran diferencias estadísticas en la mayoría de los parámetros determinados, adicionalmente se observa claramente que la mantequilla elaborada artesanalmente no cumple con las especificaciones de la norma (Cuadro 2), sin embargo este material se constituye en un modelo optimo para la evaluación de la actividad de los extractos debido a que carece de aditivos que potencien o inhiban la actividad de los compuestos presentes en los extractos.

Cinética de inhibición de la peroxidación lipídica de los extractos

En la figura 1 se puede observar el potencial antioxidante de los extractos y controles utilizados, evaluado mediante el seguimiento de la inhibición de la peroxidación lipídica. En todo el ensayo se evidencio una buena relación tiempo-respuesta antioxidante, es decir con el aumento del tiempo de incubación hay un aumento en la respuesta inhibitoria, observándose la mayor potencialidad de todos los extractos al tiempo 15 días (360 horas de incubación).

Figura 1

Cuadro 2

El análisis de comparación de modelos alternativos realizó un ajuste de las curva de cinética de inhibición de la peroxidación lipídica, los valores de las pendientes (m), coeficientes de determinación (R2) y valor F de los modelos (cuadro 3), indican un buen ajuste al modelo exponencial en cada una de las cinéticas. La actividad antioxidante de los extractos, patrones y controles utilizados en el ensayo se evidencia desde el tiempo de incubación cero y va en aumento a medida que el tiempo de incubación se hace más prolongado, esto posiblemente se debe a que la matriz alimentaria utilizada como modelo no es una matriz purificada y por lo tanto contiene hidroperóxidos y compuestos pro-oxidantes que pueden dar inicio a la reacción de oxidación antes de iniciar el análisis.

Cuadro 3

Los resultados de actividad antioxidante al día 15 (360 h) mostraron que los extractos CM, PU y SM fueron los más activos de cada fruto con una inhibición de la peroxidación lipídica de 64,8%, 47,8% y 43,4 respectivamente, en contra posición las fracciones de cada fruto que mostraron menor actividad fueron CP (23%), PM (25,1%) y CU (33,3%), importa mencionar que son las fracciones no comestibles las que se mostraron mas activas, además de tener los mayores contenidos de compuestos fenólicos. Adicionalmente se observó que tres de los extractos evaluados CM, SM y PU tuvieron mayor efecto en la inhibición de la peroxidación lipídica al final del tiempo de incubación que PC1 un producto comercial sometido a procesos tecnológicos de refinamiento y enriquecido con compuestos que lo protegen de daños como la peroxidación lipídica, el BHT (antioxidante sintético) y el ácido ascórbico estos dos últimos son sustancias puras con una elevada actividad antioxidante utilizadas a nivel farmacológico e industrial [25, 26], la respuesta observada por parte de los extractos para inhibir la peroxidación lipídica en la mantequilla puede deberse a que en estos no solo están contenidos compuestos fenólicos, por el contrario son una mezcla de diversos metabolitos como ácido ascórbico, carotenos entre otros nutrientes que pueden interactuar antagónica o sinérgicamente, siendo esta ultima interacción una posible explicación para el elevado potencial antioxidante mostrado por los extractos [27].

Una comparación entre el contenido fenólico total y la respuesta final de inhibición de la peroxidación lipídica arrojó valores de correlación (r) de 0,988, 0,961 y 0,998 para la Uchuva, la Pitahaya y el Mangostino respectivamente (figura 2), lo anterior indica que la capacidad de los extractos para inhibir la peroxidación lipídica esta estrechamente relacionada con la presencia de compuestos de naturaleza fenólica.

Figura 2

Nuestros resultados sugieren que los materiales vegetales del interés de este trabajo, incluidos la parte comestible y la no comestible, se constituirían en fuente de antioxidantes aplicables en la industria, lo que mejoraría el futuro promisorio agroindustrial de estos frutos tropicales e incrementaría su valor agregado.

CONCLUSIONES

Todos los extractos analizados en este estudio mostraron capacidad para inhibir la peroxidación lipídica en un modelo alimenticio aunque con diferente eficiencia. La actividad antioxidante mostrada por la fracción no comestible (semilla y cáscara) del fruto de mangostino (Garcinia mangostana) la posicionan como un fruto promisorio no sólo por su contenido de metabolitos secundarios asociados a su capacidad antioxidante sino además por su potencialidad agroindustrial. Son necesarios estudios in vivo para establecer los beneficios reales de estas materias vegetales.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen el soporte económico de la Oficina de Investigaciones y Desarrollo Científico y el apoyo logístico del Departamento de Química de la Universidad del Tolima.

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