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</front><body><![CDATA[  <font face="verdana" size="2"> <font size="4"></font>    <center><font size="4"><b>Respuesta a: Comentarios sobre el art&iacute;culo &ldquo;Evaluaci&oacute;n de las t&eacute;cnicas de capacitaci&oacute;n esperm&aacute;tica y su efecto en la fragmentaci&oacute;n del ADN&rdquo; </b></font> </center>    <p></p> <font size="4">    <center><b>Answering to Comments on &ldquo;Assesment of sperm capacitation techniques and their effect on DNA fragmentation&rdquo; </b></center></font>    <p></p>     <p><b><i>Ibagu&eacute;, diciembre 21 de 2012 </i></b></p>     <p><b><i>Se&ntilde;or editor </i></b></p>     <p><b><i>Doctor Hernando Gait&aacute;n, MD, MSc </i></b></p>     <p><b><i>Respetado doctor Gait&aacute;n </i></b></p>     <p>Ante todo quisiera agradecerle al PhD Walter Cardona por el inter&eacute;s dado a la investigaci&oacute;n y al art&iacute;culo publicado, ya que con este tipo de ejercicios podemos aclarar conceptos, ofrecer mayor informaci&oacute;n y avanzar en el conocimiento de este campo de la ciencia. </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Teniendo en cuenta la opini&oacute;n del PhD Cardona, quisiera aclarar que la capacitaci&oacute;n esperm&aacute;tica es un proceso en donde los espermatozoides sufren cambios moleculares que les permiten alcanzar el ovocito y posteriormente fertilizarlo (1), y que los mecanismos involucrados han sido estudiados bas&aacute;ndose en ensayos <i>in vitro</i> espec&iacute;ficamente (2), por tanto, es un proceso que puede ser simulado <i>in vitro </i>(3) utilizando t&eacute;cnicas como <i>swim up </i>y gradientes de densidad, as&iacute; como tambi&eacute;n, medios de cultivo espec&iacute;ficos que promuevan este proceso (4). </p>     <p>Las dos t&eacute;cnicas utilizadas en la investigaci&oacute;n tienen como funci&oacute;n la separaci&oacute;n de espermatozoides m&oacute;viles as&iacute; como su capacitaci&oacute;n. Asimismo, se ha comprobado que el lavado y la posterior recuperaci&oacute;n de espermatozoides est&aacute;n relacionados con la capacitaci&oacute;n de los gametos masculinos (5), lo que puede significar que de manera <i>in vitro</i> se da la capacitaci&oacute;n de los espermatozoides por <i>swim up</i> y gradientes de densidad. Es as&iacute; como estas dos t&eacute;cnicas se aplican en laboratorios de Androlog&iacute;a y Embriolog&iacute;a para tratamientos como inseminaci&oacute;n intrauterina, FIV e ICSI (6). </p>     <p>Adem&aacute;s de su principio f&iacute;sico, en las t&eacute;cnicas de capacitaci&oacute;n esperm&aacute;tica se debe tener en cuenta la composici&oacute;n de los medios de cultivo para conseguir las dos funciones anteriormente nombradas. Recientemente se suplementaron los medios de cultivo con alb&uacute;mina s&eacute;rica (humana y bovina), no solo porque reduce el riesgo de transmitir infecciones sino porque se ha encontrado que es adecuada para la preparaci&oacute;n del semen en los tratamientos de reproducci&oacute;n asistida (4), al facilitar la capacitaci&oacute;n, la reacci&oacute;n acrosomal y la fertilizaci&oacute;n <i>in vitro</i> (2). Esta prote&iacute;na favorece la remoci&oacute;n de colesterol de la membrana plasm&aacute;tica, es decir, facilita el flujo de colesterol requerido para la capacitaci&oacute;n (7). </p>     <p>Reconozco que es de gran importancia dar a conocer los medios de cultivo utilizados. Para la capacitaci&oacute;n por <i>swim up</i> se us&oacute; medio HTF modificado (Irvine Scientific, Santa Ana, CA) que contiene sales, prote&iacute;nas y amino&aacute;cidos utilizados para la manipulaci&oacute;n de gametos y cultivo de embriones (insertos disponibles en la p&aacute;gina web de Irvine) suplementados al 10% de sustituto de suero sint&eacute;tico (SSS) (Irvine Scientific, Santa Ana, CA) que contiene aproximadamente 84% de alb&uacute;mina s&eacute;rica humana, entre otros componentes. </p>     <p>Para la capacitaci&oacute;n por gradientes se us&oacute; Isolate (Irvine Scientific, Santa Ana, CA), una suspensi&oacute;n coloidal de part&iacute;culas de s&iacute;lice (8). Posteriormente, para el segundo lavado se us&oacute; medio HTF modificado suplementado al 10% de SSS. </p>     <p>Finalmente, en lo que respecta a la movilidad, Gilbert (3) afirma que hay una gran controversia en este aspecto, ya que existen teor&iacute;as sobre el desplazamiento del espermatozoide hacia el ovocito en la trompa de Falopio, probablemente el gameto femenino atraiga al masculino por quimiotaxis, o tal vez el espermatozoide es transportado por actividad muscular del &uacute;tero. Sin embargo, en el art&iacute;culo solo se menciona que despu&eacute;s de la capacitaci&oacute;n esperm&aacute;tica la calidad seminal mejora en cuanto a movilidad, morfolog&iacute;a y disminuci&oacute;n de la fragmentaci&oacute;n del ADN de los espermatozoides. </p>     <p>Agradezco la atenci&oacute;n prestada </p>     <p><b>Luisa Fernanda Calder&oacute;n-Mendoza </b></p>     <p>Bi&oacute;loga </p>     <p><a href="mailto:luisa.fernanda.cm@hotmail.com">luisa.fernanda.cm@hotmail.com</a></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><b>REFERENCIAS</b>     <!-- ref --><p>1. Coopet T, Yeung C. Physiology of Sperm Maturation and Fertilization. En: Nieschlag E, Behre H, Nieschlag S, editors. Andrology Male Reproductive Health and Dysfunction. 3<Sup>rd</Sup> edition. London: Springer; 2010. p. 7478.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000024&pid=S0034-7434201200040001400001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>2. De Jonge C. Human Fertilization. En: Keel B, May J, De Jonge C, editors. Handbook of the Assisted Reproduction Laboratory. Florida: CRC Press; 2000. p. 28.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000026&pid=S0034-7434201200040001400002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>3. Gilbert S. Biolog&iacute;a del desarrollo. 7 ed. Buenos Aires: Editorial M&eacute;dica Panamericana; 2005.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000028&pid=S0034-7434201200040001400003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>4. Bourne H, Archer J, Edgar D, Baker HW. Sperm Preparation Techniques. En: Gardner D, Weissman A, Howles C, Shoham Z, editors. Textbook of Assisted Reproductive Technologies Laboratory and Clinical perspectives. 3 edition. United Kingdom: Informa Healthcare; 2004. p. 5357.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000030&pid=S0034-7434201200040001400004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>5. Selles E, P&eacute;rez I, Pellicer J, L&oacute;pez M. Capacitaci&oacute;n esperm&aacute;tica. En: Remoh&iacute; J, Romero J, De los Santos M, Pellicer A, editors. Manual pr&aacute;ctico de esterilidad y reproducci&oacute;n humana. Laboratorio de Reproducci&oacute;n Asistida. 3 ed. Espa&ntilde;a: McGraw Hill; 2008. p. 2529.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000032&pid=S0034-7434201200040001400005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>6. PennaVideau S. Selecci&oacute;n de espermatozoides para t&eacute;cnicas de reproducci&oacute;n asistida. En: Urbina M, Lerner J, editors. Fertilidad y Reproducci&oacute;n Asistida. Caracas: Editorial M&eacute;dica Panamericana; 2008. p. 48589.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000034&pid=S0034-7434201200040001400006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>7. Gadella B, Visconti P. Regulation of capacitation. En: De Jonge C, Barrat C, editors. The Sperm Cell. Cambridge: Cambridge University Press; 2006. p. 13446.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000036&pid=S0034-7434201200040001400007&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>8. Makkar G, Ng H, Yeung S, Ho P. Comparison of two colloidal silicabased sperm separation media with a nonsilicabased m&eacute;dium. Fertil Steril 1999;72:796802.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000038&pid=S0034-7434201200040001400008&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p> </font>      ]]></body><back>
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