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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[ANÁLISIS FITOQUÍMICO PRELIMINAR DE HOJAS, TALLOS Y SEMILLAS DE CUPATÁ (Strychnos schultesiana Krukoff)]]></article-title>
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<article-title xml:lang="pt"><![CDATA[Análises fitoquímica preliminar das folhas, caules e semente de cupatá (Strychnos schultesiana Krukoff)]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[In order to improve the knowledge of Colombian flora, particularly that belonging to the llanos orientales region, Strychnos schultesiana Krukoff was chosen for a chemical composition in-depth study to establish a potential utility in medicinal or industrial fields. For this analysis, a preliminary phytochemical study of three organs of the plant -steams, seeds and leafs- was made; the purpose was to find the main secondary metabolites associated with biological activities: alkaloids, flavonoids, tannins, saponins, antracenic derivates, steroids, coumarins, cardiotonic glycosides and terpenic lactones. The main compounds were alkaloids. This fact was expected, as this species belongs to the genus Strhychnos, widely known because of its high alkaloid content. In addition, the existence of flavonoids in the studied organs of the plant is very remarkable. These compounds are well known as scavengers, useful in prevention of diseases related with oxidative processes. Finally, the results of this work are very useful as a first approach to the knowledge and utility of the vegetal species found in this location. Furthermore, this plant has big agronomical advantages related with the culture establishment, which improves the rational use of natural resources in our country, as a means of regional and national development.]]></p></abstract>
<abstract abstract-type="short" xml:lang="pt"><p><![CDATA[Com a finalidade de aumentar os conhecimento da flora colombiana, particularmente aquela presente na região dos "llanos orientales", se elegeu a espécie Strychnos schultesiana Krukoff para aprofundar sua composição química e assim estabelecer uma utilidade médica ou industrial potencial. Para isso realizou-se uma análise fitoquímica preliminar de três dos seus órgãos - caule, folha e semente -, nos quais se avaliou a presença dos principais grupos metabólicos secundários associados com a atividade biológica, a saber: alcalóides, flavonóides, taninos, saponinas, derivados antracênicos, esteróides e/ou triterpenóides, cumarinas, glicósidos cardiotônicos e lactonas terpênicas. Detectou-se a presença de alcalóides em grande concentração, o qual era de esperar-se ao tratar uma espécie do gênero Strychnos, amplamente conhecida por seu conteúdo de alcalóides. É notável também a presença de flavonóides nos três órgãos. Estes compostos são amplamente conhecidos por suas propiedades antioxidantes, úteis na prevenção de múltiplas doenças associadas aos processos oxidativos. Os resultados deste trabalho são realmente úteis como primeira aproximação da ampliação do conhecimento químico e a possível utilidade das espécies presentes nesta zona de Colômbia -com características agronômicas ótimas para o estabelecimento de cultivos-, que permitam uma utilização racional dos recursos naturais do nosso país, como fonte do desenvolvimento regional e nacional.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[  <FONT SIZE="2" FACE="VERDANA"> </FONT>     <p align="center"><font size="4" face="VERDANA"><B>AN&Aacute;LISIS FITOQU&Iacute;MICO PRELIMINAR  DE HOJAS, TALLOS Y SEMILLAS DE CUPAT&Aacute; (<i>Strychnos schultesiana</i> Krukoff)</B></font></p>     <p align="center"><font size="3" face="VERDANA"><B>Preliminary phytochemical analysis of  Cupat&aacute; (<i>Strychnos schultesiana</i> krukoff) stems and seeds</B></font></p>     <p align="center"><font size="3" face="VERDANA"><B>An&aacute;lises fitoqu&iacute;mica preliminar das folhas, caules e semente de cupat&aacute; (<i>Strychnos schultesiana</i> Krukoff)</B></font></p> <FONT SIZE="2" FACE="VERDANA">     <p>Lyndon Carvajal Rojas<SUP>1</SUP>, Yoshie Hata Uribe<SUP>2</SUP>, Noralba Sierra Mart&iacute;nez<SUP>3</SUP> &amp; Diana Rueda Ni&ntilde;o<SUP>4</SUP></p>     <p><SUP>1</SUP>Ingenier&iacute;a Forestal, Facultad del Medio Ambiente y Recursos Naturales,  Universidad Distrital Francisco Jos&eacute; de Caldas. Correspondencia:  <A HREF="mailto:lcarvajal@udistrital.edu.co">lcarvajal@udistrital.edu.co</A>      <BR><SUP>2</SUP>Departamento de Farmacia, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia,  Sede Bogot&aacute;. <A HREF="mailto:yahatau@unal.edu.co">yahatau@unal.edu.co</A>       <BR><SUP>3</SUP>Departamento de Farmacia, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia,  Sede Bogot&aacute;. <A HREF="mailto:nsierram@unal.edu.co">nsierram@unal.edu.co</A>      <BR><SUP>4</SUP>Grupo B&uacute;squeda de Principios Bioactivos, Departamento de Farmacia,  Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogot&aacute;.  <A HREF="mailto:dcruedan@unal.edu.co">dcruedan@unal.edu.co</A></p>      <p>Recepci&oacute;n: Julio 4 de 2009/Aprobaci&oacute;n: Septiembre 1 de 2009</p>  <hr>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><B>RESUMEN </B></p>     <p>Con el fin de ahondar en el conocimiento de la flora colombiana, particularmente aquella  presente en la regi&oacute;n de los llanos orientales, se eligi&oacute; la especie  <i>Strychnos schultesiana </i>Krukoff para profundizar en su composici&oacute;n qu&iacute;mica  y as&iacute; establecer una potencial utilidad medicinal o industrial. Para ello se  realiz&oacute; un an&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico preliminar de tres de sus &oacute;rganos  -tallos, hojas y semillas-, en el que se evalu&oacute; la presencia de los  principales grupos de metabolitos secundarios asociados con actividad biol&oacute;gica,  a saber: alcaloides, flavonoides, taninos, saponinas, derivados antrac&eacute;nicos,  esteroides y/o triterpenoides, cumarinas, glic&oacute;sidos cardiot&oacute;nicos y lactonas  terp&eacute;nicas. Se detect&oacute; la presencia de alcaloides en gran concentraci&oacute;n,  lo cual era de esperarse al tratarse de una especie del g&eacute;nero <i>Strychnos</i>,  ampliamente conocida por su contenido de alcaloides. Es notable tambi&eacute;n la presencia  de flavonoides en los tres &oacute;rganos. Estos compuestos son ampliamente conocidos por  sus propiedades antioxidantes, &uacute;tiles en la prevenci&oacute;n de m&uacute;ltiples  enfermedades asociadas a los procesos oxidativos. Los resultados de este trabajo son realmente  &uacute;tiles como primera aproximaci&oacute;n a la ampliaci&oacute;n del conocimiento  qu&iacute;mico y a la posible utilidad de las especies presentes en esta zona de Colombia  -con caracter&iacute;sticas agron&oacute;micas &oacute;ptimas para el establecimiento  de cultivos-, que permitan una utilizaci&oacute;n racional de los recursos naturales  de nuestro pa&iacute;s, como fuente de desarrollo regional y nacional.</p>      <p><B><i>Palabras clave</i></B>: <i>Strychnos</i>, an&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico preliminar, alcaloides.</p> <hr>     <p><B>ABSTRACT</B></p>     <p>In order to improve the knowledge of Colombian flora, particularly that belonging  to the llanos orientales region, <i>Strychnos schultesiana </i>Krukoff was chosen for a  chemical composition in-depth study to establish a potential utility in medicinal or  industrial fields. For this analysis, a preliminary phytochemical study of three organs of the  plant -steams, seeds and leafs- was made; the purpose was to find the main  secondary metabolites associated with biological activities: alkaloids, flavonoids, tannins,  saponins, antracenic derivates, steroids, coumarins, cardiotonic glycosides and terpenic  lactones. The main compounds were alkaloids. This fact was expected, as this species belongs  to the genus <i>Strhychnos, </i>widely known because of its high alkaloid content. In addition,  the existence of flavonoids in the studied organs of the plant is very remarkable. These  compounds are well known as scavengers, useful in prevention of diseases related with  oxidative processes. Finally, the results of this work are very useful as a first approach to  the knowledge and utility of the vegetal species found in this location. Furthermore, this  plant has big agronomical advantages related with the culture establishment, which improves  the rational use of natural resources in our country, as a means of regional and national  development.      <p><B><i>Keywords</i></B>: <i>Strychnos</i>, preliminary phytochemical study, alkaloids.</p> <hr>     <p><B>RESUMO</B></p>     <p>Com a finalidade de aumentar os conhecimento da flora colombiana, particularmente aquela presente na regi&atilde;o dos &ldquo;llanos orientales&rdquo;, se elegeu a esp&eacute;cie <i>Strychnos schultesiana</i> Krukoff para aprofundar  sua composi&ccedil;&atilde;o qu&iacute;mica e assim estabelecer uma utilidade m&eacute;dica ou industrial potencial. Para isso realizou-se uma an&aacute;lise fitoqu&iacute;mica preliminar de tr&ecirc;s dos seus &oacute;rg&atilde;os - caule, folha e semente -, nos quais se avaliou a presen&ccedil;a dos principais grupos metab&oacute;licos secund&aacute;rios associados com a atividade biol&oacute;gica, a saber: alcal&oacute;ides, flavon&oacute;ides, taninos, saponinas, derivados antrac&ecirc;nicos, ester&oacute;ides e/ou triterpen&oacute;ides, cumarinas, glic&oacute;sidos cardiot&ocirc;nicos e lactonas terp&ecirc;nicas. Detectou-se a presen&ccedil;a de alcal&oacute;ides em grande concentra&ccedil;&atilde;o, o qual era de esperar-se ao tratar uma esp&eacute;cie do g&ecirc;nero Strychnos, amplamente conhecida por seu conte&uacute;do de alcal&oacute;ides. &Eacute; not&aacute;vel tamb&eacute;m a presen&ccedil;a de flavon&oacute;ides nos tr&ecirc;s &oacute;rg&atilde;os. Estes compostos s&atilde;o amplamente conhecidos por suas propiedades antioxidantes, &uacute;teis na preven&ccedil;&atilde;o de m&uacute;ltiplas doen&ccedil;as associadas aos processos oxidativos. Os resultados deste trabalho s&atilde;o realmente &uacute;teis como primeira aproxima&ccedil;&atilde;o da amplia&ccedil;&atilde;o do conhecimento qu&iacute;mico e a poss&iacute;vel utilidade das esp&eacute;cies presentes nesta zona de Col&ocirc;mbia -com caracter&iacute;sticas agron&ocirc;micas &oacute;timas para o estabelecimento de cultivos-, que permitam uma utiliza&ccedil;&atilde;o racional dos recursos naturais do nosso pa&iacute;s, como fonte do desenvolvimento regional e nacional.</p>     <p><B><i>Palavras chave:</i></B> <i>Strychnos</i>, an&aacute;lises fitoqu&iacute;mica preliminar, alcal&oacute;ides.</p> <hr>     <p><B>INTRODUCCI&Oacute;N </B></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>El hombre utiliza las plantas con prop&oacute;sitos medicinales desde tiempos  prehist&oacute;ricos y a&uacute;n hoy tienen un papel clave en el mantenimiento de la salud de  la mayor parte de la poblaci&oacute;n mundial, pese a los avances de la medicina moderna. Esto  si se tienen en cuenta las diversas formas en que se utilizan, que van desde la  preparaci&oacute;n de decocciones e infusiones en zonas rurales y pa&iacute;ses pobres,  pasando por los productos fitoterap&eacute;uticos, hasta la obtenci&oacute;n de principios activos  en pa&iacute;ses desarrollados para la elaboraci&oacute;n de medicamentos. Se estima que en el  mundo se utilizan cerca de 10000 especies vegetales con fines medicinales, la mayor parte en  sistemas de medicina tradicional (WHO 1993, Calixto 2000, Ca&ntilde;igueral 2002, Newman  <i>et al. </i>2003).</p>     <p>En los pa&iacute;ses en v&iacute;as de desarrollo, donde vive el 75% de la poblaci&oacute;n  mundial, se consume menos del 15% del mercado total de medicamentos. Las plantas medicinales  representan, por tanto, el &uacute;nico recurso terap&eacute;utico disponible para los sectores  m&aacute;s desfavorecidos de esta poblaci&oacute;n. Por lo anterior, las autoridades de salud a nivel  mundial han aumentado considerablemente su atenci&oacute;n a dichos medicamentos, ya que por un lado  constituyen la &uacute;nica medicina disponible en los pa&iacute;ses en v&iacute;as de desarrollo y,  por otro, se han convertido en una popular alternativa en los pa&iacute;ses desarrollados (Sharapin  2002).</p>      <p>Para determinar la composici&oacute;n qu&iacute;mica de las plantas medicinales y conocer sus  constituyentes biol&oacute;gicamente activos pueden seguirse metodolog&iacute;as que van desde un  an&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico preliminar hasta estudios qu&iacute;micos sistem&aacute;ticos  bioguiados. Puesto que este &uacute;ltimo tipo de estudio requiere una inversi&oacute;n considerable  de tiempo y recursos, lo ideal es iniciar con estudios fitoqu&iacute;micos preliminares que permitan  hacer una discriminaci&oacute;n de las plantas a estudiar en t&eacute;rminos de su composici&oacute;n  qu&iacute;mica, con el fin de seleccionar &uacute;nicamente aquellas m&aacute;s interesantes para  posteriores estudios sistem&aacute;ticos. El objetivo de un estudio fitoqu&iacute;mico preliminar  es determinar la presencia o ausencia de los principales grupos de metabolitos en una especie  vegetal, a saber: alcaloides, antraquinonas y naftoquinonas, esteroides y triterpenos, flavonoides,  taninos, saponinas, cumarinas, lactonas terp&eacute;nicas y cardiot&oacute;nicos. Dado que cada uno  de estos grupos de compuestos est&aacute; relacionado con actividades biol&oacute;gicas  espec&iacute;ficas, partiendo de los resultados obtenidos en el estudio fitoqu&iacute;mico  preliminar es posible orientar investigaciones posteriores para determinar la actividad  biol&oacute;gica de las especies en cuesti&oacute;n y los principios activos involucrados.</p>      <p>En el caso del presente an&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico preliminar se parti&oacute; del  extracto etan&oacute;lico de tres &oacute;rganos -hojas, semillas y tallos- de  <i>Strychnos schultesiana </i>(Loganiaceae) (Missouri Botanical Garden 2008), en los cuales  se evalu&oacute; la presencia de los principales grupos de metabolitos secundarios previamente  mencionados, mediante pruebas de tubo y/o cromatograf&iacute;a en capa delgada que se describen de  manera detallada en el siguiente apartado.</p>      <p>Las especies del g&eacute;nero <i>Strychnos </i>han sido utilizadas tradicionalmente por muchas  comunidades ind&iacute;genas para la preparaci&oacute;n de venenos conocidos como  &ldquo;curares&rdquo;. <i>Strychnos schultesiana </i>es una especie trepadora que presenta un  comportamiento muy favorable para su manejo y propagaci&oacute;n en vivero, de igual manera comienza  entre los 3 y 4 a&ntilde;os de edad la producci&oacute;n de frutos, muy abundantes en el sitio de  recolecci&oacute;n y conocidos en la poblaci&oacute;n con los nombres de cupat&aacute;,  casta&ntilde;a espinosa o solita. Al no conocerse mucho de su composici&oacute;n qu&iacute;mica,  se plante&oacute; la necesidad de realizaci&oacute;n de un an&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico  preliminar para ahondar en su conocimiento qu&iacute;mico.</p>       <p>El cupat&aacute; es una planta trepadora de hojas simples, opuestas, sin estipula ni exudado.  La corteza externa es de color caf&eacute; y la viva, amarilla. Las ramas tienen espinas opuestas  con las cuales asciende. Flores de color amarillo est&aacute;n dispuestas en cimas axilares. Los  frutos son bayas grandes de color amarillo y con numerosas semillas de color curuba que presentan  una fragancia muy agradable. En la <A HREF="#FIG1">figura 1</A> se pueden observar fotograf&iacute;as de los diferentes  &oacute;rganos de la especie.</p>     <p>    <CENTER><A NAME="FIG1"></A><IMG SRC="img/revistas/cofo/v12n1/v12n1a11fig1.jpg"></CENTER></p>      <p>La especie se distribuye en Per&uacute;, Ecuador y Venezuela. En Colombia la encontramos en el  Choc&oacute; biogeogr&aacute;fico, Orinoqu&iacute;a, regi&oacute;n Andina y piedemonte llanero y es  usada por los ind&iacute;genas de las regiones donde se encuentra para la preparaci&oacute;n de  curares &uacute;tiles para capturar las presas f&aacute;cilmente; para ello untan la punta del dardo  o de la flecha con la cual van a herir al animal. Aunque los frutos poseen una pulpa carnosa de  un sabor muy agradable, las semillas no se deben consumir ya que contienen estricnina.  Con respecto a la propagaci&oacute;n, se puede utilizar la semilla de manera exitosa y la planta  es de lento crecimiento en sus primeros estados de desarrollo, en los que requiere sombra. Por su  car&aacute;cter ascendente tiende a trepar sobre &aacute;rboles hasta alcanzar las copas. Se han  realizado ensayos de propagaci&oacute;n vegetativa que presentan buenos resultados en vivero. La  especie presenta rebrotes.</p>      <p><B>METODOLOG&Iacute;A </B></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>El material vegetal de cupat&aacute; fue recolectado en el mes de junio del a&ntilde;o 2008, en la  finca El Alcarav&aacute;n, vereda Los Maracos, km 1 v&iacute;a al Ri&oacute; Ariari, Granada, Meta.  Para realizar el an&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico preliminar se utiliz&oacute; la metodolog&iacute;a  corrientemente utilizada en el Departamento de Farmacia para tal prop&oacute;sito (Sanabria 1983), la  cual se divide en tres etapas: procesamiento del material vegetal, obtenci&oacute;n del extracto  etan&oacute;lico y realizaci&oacute;n de la prueba de identificaci&oacute;n de cada uno de los  metabolitos.</p>       <p><B>Procesamiento del material vegetal</B>: Hojas, tallos y semillas de <i>S. schultesiana </i> fueron sometidos a un proceso de secado en una estufa de aire circulante a 50&ordm; C por 48 horas,  trabajando cada uno de los &oacute;rganos de la planta por separado. Posteriormente, el tama&ntilde;o  de part&iacute;cula se disminuy&oacute; pasando el material seco por un molino de discos (hojas y  tallos) o un molino de cuchillas (semillas), seg&uacute;n el caso.</p>      <p><B>Obtenci&oacute;n del extracto etan&oacute;lico</B>: 100 g del material vegetal seco y  molido de cada uno de lo &oacute;rganos a estudiar fueron sometidos separadamente a  maceraci&oacute;n, en un bal&oacute;n de fondo plano por un tiempo de 24 horas, utilizando como  solvente de extracci&oacute;n etanol del 96% en cantidad suficiente para cubrir el material vegetal.  Posteriormente se llev&oacute; a reflujo por una hora, se dej&oacute; enfriar a temperatura ambiente  y se filtr&oacute; y concentr&oacute; para eliminar el solvente y proceder a realizar las pruebas  para cada uno de los metabolitos.</p>       <p><B>Alcaloides</B>: La mayor&iacute;a de los alcaloides, con excepci&oacute;n de los alcaloides  de amonio cuaternario y N-&oacute;xidos de amina, son solubles en solventes org&aacute;nicos poco  polares, como cloroformo y mezclas de &eacute;ste, pero pueden formar sales solubles en agua en  presencia de &aacute;cidos minerales diluidos, como el &aacute;cido clorh&iacute;drico al 5% en agua.  Esta propiedad &aacute;cido-base se aprovech&oacute; para su purificaci&oacute;n a partir de  extractos totales. Luego de este paso inicial se realizaron pruebas de precipitaci&oacute;n en  medio &aacute;cido, utilizando para ello sales de metales pesados como el ioduro de potasio  (reactivo de Dragendorff), el ioduro de potasio y mercurio (reactivo de Mayer) y la sal de Reineckato  de amonio, entre otros. En la <A HREF="#FIG2">figura 2</A> se describe detalladamente el procedimiento de  purificaci&oacute;n de alcaloides en las muestras evaluadas.</p>     <p>    <CENTER><A NAME="FIG2"></A><IMG SRC="img/revistas/cofo/v12n1/v12n1a11fig2.jpg"></CENTER></p>      <p><B>Nafto y antraquinonas</B>: Para la detecci&oacute;n de este tipo de metabolitos secundarios  se emple&oacute; la reacci&oacute;n de Borntr&auml;ger-Kraus. Para ello, el extracto etan&oacute;lico  seco fue extra&iacute;do con una soluci&oacute;n etan&oacute;lica en agua (1:7), a la cual se  adicion&oacute; per&oacute;xido de hidr&oacute;geno y &aacute;cido sulf&uacute;rico y se  procedi&oacute; a calentar; bajo estas dr&aacute;sticas condiciones, se hidrolizan los enlaces  glicos&iacute;dicos y se oxidan las antronas y los antranoles hasta antraquinonas, las cuales  fueron extra&iacute;das con tolueno y agitadas en presencia de una soluci&oacute;n de  hidr&oacute;xido de sodio al 5% que contiene hidr&oacute;xido de amonio al 2%. En caso de presencia  de nafto o antraquinonas, al dejar separar las fases la capa alcalina (inferior) toma una  coloraci&oacute;n que va del rosado al rojo intenso, dependiendo de la concentraci&oacute;n de  estos compuestos en la muestra.</p>      <p><B>Esteroides y triterpenoides libres</B>: Para su an&aacute;lisis preliminar en plantas la  prueba m&aacute;s com&uacute;nmente usada es la de Liebermann-Burchard. Para realizar esta prueba,  fue necesario hacer un procedimiento de separaci&oacute;n previo en el cual se obtuvo un extracto en  &eacute;ter de petr&oacute;leo a partir del extracto etan&oacute;lico seco. Este extracto  et&eacute;reo se extrajo de nuevo con una mezcla de metanol -agua 9:1, se recuper&oacute; la capa  superior y se someti&oacute; a cromatograf&iacute;a en capa delgada, empleando gel de s&iacute;lice  F<SUB>254 </SUB>como fase estacionaria y una fase m&oacute;vil compuesta por una mezcla  hexano-acetato de etilo (95:5). La cromatograf&iacute;a desarrollada se dej&oacute; secar antes de  revelarla, se asperj&oacute; con el reactivo de Liebermann-Burchard (soluci&oacute;n etan&oacute;lica  de anh&iacute;drido ac&eacute;tico en presencia de &aacute;cido sulf&uacute;rico) y se someti&oacute;  a calentamiento (110&ordm; C) durante 5 a 10 min. Se considera resultado positivo si bajo estas  condiciones aparecen manchas en cualquier tonalidad del rojo, azules o verdes.</p>      <p><B>Flavonoides</B>: Para su detecci&oacute;n se emplea principalmente la reacci&oacute;n de  la cianidina, conocida tambi&eacute;n como reacci&oacute;n de Shinoda. Para ello el extracto  etan&oacute;lico seco se extrajo con una soluci&oacute;n etan&oacute;lica en agua (1:7) y se  filtr&oacute;. Este filtrado, denominado &ldquo;A&rdquo;, se puso en un tubo de ensayo con 0.5 g de  magnesio en polvo. Seguidamente se adicion&oacute; HCL concentrado, gota a gota, hasta el  desprendimiento de hidr&oacute;geno. Si en estas condiciones se observa la aparici&oacute;n de  coloraci&oacute;n rojiza, violeta o naranja, se considera positivo para compuestos con el  n&uacute;cleo de la &gamma;-benzopirona (flavonas, flavonoles, flavanonas, flavanonoles,  isoflavonoides y xantonas).</p>       <p>Tambi&eacute;n existe otro tipo de flavonoides denominados leucoantocianidinas, las cuales por  cambio en el pH se tornan de incoloras a intensamente coloreadas de rojo. Para detectar la presencia  de este tipo de compuestos en la muestra, el filtrado A fue transferido a un tubo de ensayo, se  adicion&oacute; &aacute;cido clorh&iacute;drico concentrado y se someti&oacute; a calentamiento  en un ba&ntilde;o mar&iacute;a hirviendo durante 10-15 min. La aparici&oacute;n de coloraci&oacute;n  rojiza bajo estas condiciones indica la presencia de leucoantocianidinas.</p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p><B>Taninos</B>: Estos polifenoles tienen la propiedad de unirse a las prote&iacute;nas y  precipitarlas. Por esta raz&oacute;n, la prueba m&aacute;s empleada para la detecci&oacute;n de  este grupo de metabolitos secundarios emplea el reactivo de gelatina-sal, el cual produce un  precipitado blanco en presencia de taninos, luego de haber extra&iacute;do el extracto  etan&oacute;lico total con una soluci&oacute;n acuosa de etanol (7:1). Estos precipitados formados  como consecuencia de la presencia de taninos deben ser solubles en urea 10 M y producir coloraciones  verdes, azules o negras tras la adici&oacute;n de cloruro f&eacute;rrico al 10% en agua.</p>      <p><B>Saponinas</B>: Son glic&oacute;sidos cuya aglicona consiste en un n&uacute;cleo esteroidal  o triterp&eacute;nico; esta caracter&iacute;stica estructural les confiere un car&aacute;cter  anf&oacute;tero que les permite actuar como tensioactivos. Aprovechando esta propiedad, las dos  pruebas m&aacute;s empleadas en la detecci&oacute;n de saponinas son la de hem&oacute;lisis y la  de formaci&oacute;n de espuma, puesto que al ser tensioactivas las saponinas inestabilizan la  membrana celular de los eritrocitos, induciendo su ruptura.</p>      <p>Para realizar la prueba de hem&oacute;lisis el extracto etan&oacute;lico fue extra&iacute;do  con la soluci&oacute;n acuosa (7:1). En caso de ausencia de taninos, se procedi&oacute; a realizar  las pruebas; de lo contrario, con el fin de eliminarlos, se adicionaron aproximadamente 2 g de  &oacute;xido de magnesio, evaporando a sequedad y extrayendo luego con etanol al 96%. Una vez  eliminados los taninos, 1 ml de esta soluci&oacute;n se puso en un tubo de ensayo en presencia de  5 ml de suspensi&oacute;n normalizada de gl&oacute;bulos rojos. Como patr&oacute;n de  hem&oacute;lisis positiva se emplearon 0.5 ml de una soluci&oacute;n de digitonina (10 mg en  100 ml de etanol del 80%) en presencia de 5 ml de suspensi&oacute;n normalizada de gl&oacute;bulos  rojos y como blanco se emplearon 5ml de la misma suspensi&oacute;n con 1 ml de agua. La prueba de  hem&oacute;lisis es considerada positiva cuando en 10 min se presenta hem&oacute;lisis en el  patr&oacute;n y en la muestra, mientras que el blanco permanece sin hemolizar.</p>      <p>La prueba de formaci&oacute;n de espuma consiste en agitar vigorosamente la soluci&oacute;n  acuosa (7:1), obtenida del extracto etan&oacute;lico total, en un tubo de ensayo y observar la  espuma formada. &Eacute;sta debe ser estable por lo menos 30 minutos para poder establecer la  presencia de saponinas.</p>      <p><B>Glic&oacute;sidos cardiot&oacute;nicos</B>: Estos compuestos poseen caracter&iacute;sticas  estructurales similares a las de las saponinas, con una estructura compuesta por un n&uacute;cleo  esteroidal glicosilado (2 desoxiaz&uacute;cares) y una lactona insaturada de 5 o 6 miembros. Para la  detecci&oacute;n de &eacute;stos pueden emplearse pruebas en tubo de ensayo espec&iacute;ficas para  cada una de las partes que componen la mol&eacute;cula, o t&eacute;cnicas cromatog&aacute;ficas. El  presente an&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico preliminar emple&oacute; cromatograf&iacute;a en capa  delgada (CCD), sirvi&eacute;ndose de dos placas cromatogr&aacute;ficas elu&iacute;das en la misma  fase m&oacute;vil (cloroformo: metanol: agua 82:17:1) con el fin de comparar los valores de Rf de los  compuestos revelados. Una de ellas se revel&oacute; con el reactivo de vainillina - &aacute;cido  ortofosf&oacute;rico (1% vainillina y 10% de &aacute;cido en etanol), espec&iacute;fico para  esteroides y triterpenos, con el fin de detectar el n&uacute;cleo esteroidal de los  cardiot&oacute;nicos. La otra placa se revel&oacute; con la reacci&oacute;n de Raymond, la cual  utiliza m-dinitrobenceno (2% en etanol) y NAOH al 20%; en estas condiciones, las &gamma;-lactonas  &alpha;-&beta; insaturadas producen coloraciones violeta que desaparecen  r&aacute;pidamente. De esta manera, s&oacute;lo aquellas manchas que revelan en las dos placas  pueden considerarse cardiot&oacute;nicos pues poseen el n&uacute;cleo esteroidal adem&aacute;s de la  lactona insaturada. Esto se evidencia claramente con un patr&oacute;n de digitoxina.</p>      <p>Previo a la realizaci&oacute;n de la cromatograf&iacute;a es necesario eliminar las clorofilas  del extracto, ya que intervienen con el ensayo. Es necesario hacer lo mismo en el caso del  an&aacute;lisis de cumarinas y lactonas sesquiterp&eacute;nicas. Para ello el extracto  etan&oacute;lico seco fue tratado con un volumen aproximadamente igual de una soluci&oacute;n de  acetato de plomo al 4% que conten&iacute;a 0.5% de &aacute;cido ac&eacute;tico, con el fin de  precipitar las clorofilas presentes. Esta mezcla se dej&oacute; en reposo durante aproximadamente  15 min y se filtr&oacute; a presi&oacute;n atmosf&eacute;rica. El filtrado as&iacute; obtenido fue  concentrado a 3/4 de su volumen en evaporador rotatorio, se dej&oacute; enfriar y se extrajo en un  embudo de decantaci&oacute;n con 2 vol&uacute;menes de 30 ml de cloroformo. Se combinaron las capas  clorof&oacute;rmicas, se adicion&oacute; sulfato de sodio anhidro, se filtr&oacute; y se  concentr&oacute; a 3 ml aproximadamente, obteniendo as&iacute; la soluci&oacute;n a ser utilizada  en las pruebas cromatogr&aacute;ficas.</p>      <p><B>Cumarinas</B>: Son compuestos derivados de la &alpha;benzopirona. Dado que en su  estructura presentan un gran n&uacute;mero de instauraciones, estos compuestos exhiben una fuerte  fluorescencia azul o verde al ser irradiados con luz ultravioleta, propiedad que se aprovecha para  su detecci&oacute;n. Adicionalmente, puesto que todas las cumarinas poseen en su estructura una  &gamma;-lactona, pueden identificarse mediante las reacciones propias para lactonas. Por este motivo,  con el fin de determinar la presencia de cumarinas en la muestra, se desarroll&oacute; una  cromatograf&iacute;a en capa delgada empleando gel de s&iacute;lice F<SUB>254 </SUB>como fase  estacionaria y una mezcla cloroformo-cetona 9:1 como fase m&oacute;vil. Una vez elu&iacute;da la  placa, se observ&oacute; a la luz UV(365 y 254 nm) antes de revelarse con la reacci&oacute;n del  hidroxamato f&eacute;rrico, espec&iacute;fica para lactonas. Esta reacci&oacute;n consiste en  asperjar la placa con una mezcla de vol&uacute;menes iguales de clorhidrato de hidroxilamina al 2%  en etanol y NAOH 2N, calentar por 5-10 min a 100&ordm; C y, al cabo de este tiempo, dejar enfriar  y asperjar con vol&uacute;menes iguales de HCL 2N y FeCl<SUB>3 </SUB>al 1% en etanol. Aquellos  compuestos con fluorescencia al ultravioleta que luego de la aplicaci&oacute;n del reactivo revelador  exhiben coloraci&oacute;n anaranjada al visible son considerados cumarinas. Una placa  cromatogr&aacute;fica adicional puede asperjarse con KOH al 5%, el cual acent&uacute;a fuertemente  la fluorescencia de estos compuestos al ser expuestos a la luz UV.</p>     <p><B>Lactonas sesquiterp&eacute;nicas</B>: Estos compuestos, como su nombre lo indica, son  terpenos con un esqueleto de 15 &aacute;tomos de carbono, que tienen adem&aacute;s en su estructura  una lactona. Para identificar estos compuestos se hicieron dos cromatograf&iacute;as en capa delgada  (fase estacionaria: gel de s&iacute;lice F<SUB>254</SUB>) elu&iacute;das con una fase m&oacute;vil  compuesta por cloroformo y acetona (9:1). Una de las cromatograf&iacute;as fue revelada para  terpenos, como se indic&oacute; en el caso de los glic&oacute;sidos cardiot&oacute;nicos, y la  otra se derivatiz&oacute; para lactonas con el reactivo de hidroxamato f&eacute;rrico, como se  indic&oacute; en el caso de las cumarinas. Ambas pruebas deben ser positivas para poder concluir  que la muestra presenta este tipo de metabolitos secundarios.</p>      <p><B>RESULTADOS</B></p>     <p>En la <A HREF="#TAB1">tabla 1</A> se presentan los resultados obtenidos luego de hacer el an&aacute;lisis  fitoqu&iacute;mico preliminar de los tres &oacute;rganos seleccionados de <i>S. schultesiana. </i>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>    <CENTER><A NAME="TAB1"></A><IMG SRC="img/revistas/cofo/v12n1/v12n1a11tab1.jpg"></CENTER></p>     <p><B>DISCUSI&Oacute;N </B></p>     <p>En el presente an&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico preliminar de hojas, tallos y semillas de la  especie <i>S. schultesiana </i>se parti&oacute; de extractos etan&oacute;licos puesto que este  solvente tiene la capacidad de extraer compuestos de una amplia gama de polaridades, adem&aacute;s  de ser menos costoso y t&oacute;xico que otros solventes org&aacute;nicos. La metodolog&iacute;a  seguida para este an&aacute;lisis fue la previamente estandarizada por Sanabria (1983), y contempla  la detecci&oacute;n de los metabolitos secundarios generalmente relacionados con actividades  biol&oacute;gicas.</p>      <p>A continuaci&oacute;n se presenta la discusi&oacute;n de los resultados consignados en la  <A HREF="#TAB1">tabla 1</A>, en relaci&oacute;n a los &oacute;rganos de la especie <i>S. schultesiana </i>evaluados.</p>      <p>Con respecto a los alcaloides, fue el grupo de metabolitos secundarios m&aacute;s abundante  encontrado en los tres &oacute;rganos. Sin embargo, dado que la cantidad de precipitado obtenido  es proporcional a la concentraci&oacute;n de alcaloides en la muestra, puede inferirse que las hojas  son el &oacute;rgano de la planta donde tiene lugar la mayor acumulaci&oacute;n de alcaloides, aunque  cabe aclarar que en tallos y semillas tambi&eacute;n se encuentran en concentraci&oacute;n apreciable.</p>      <p>Es conocido que las especies del g&eacute;nero <i>Strychnos </i>presentan una alta  concentraci&oacute;n de alcaloides de tipo ind&oacute;lico (estricnina, Yang &amp; Yang 1993,  Santos <i>et al</i>. 2006), los cuales son solubles principalmente en solventes de baja polaridad.  Por este motivo, los extractos obtenidos con este tipo de solventes durante el proceso de  purificaci&oacute;n (filtrados A y B) presentaron una mayor concentraci&oacute;n de alcaloides,  tal como se muestra en la <A HREF="#TAB1">tabla 1</A>. Adem&aacute;s de alcaloides de tipo ind&oacute;lico, puede  inferirse la presencia de alcaloides de amonio cuaternario o N-&oacute;xidos de amina en las semillas  y las hojas de esta planta, puesto que se obtuvo resultado positivo con el Reineckato de amonio,  tanto en el extracto inicial como en la fase m&aacute;s polar del proceso de purificaci&oacute;n,  donde se encuentra concentrado este tipo de alcaloides. Sin embargo, se deduce que la  concentraci&oacute;n de &eacute;stos es muy baja, lo que se evidencia en la reducida cantidad de  precipitado obtenido.</p>      <p>La cromatograf&iacute;a realizada para la detecci&oacute;n de esteroides y/o triterpenos permite  determinar la presencia de estos compuestos en las tres muestras evaluadas, lo que se evidencia en la  aparici&oacute;n de diversas manchas de tonalidades azulosas y rojizas. Las hojas presentan un mayor  n&uacute;mero de estos compuestos en comparaci&oacute;n con semillas y tallos. Seg&uacute;n lo  observado, el lupeol no se encuentra presente en esta planta puesto que en ninguno de los  &oacute;rganos evaluados se observan manchas con un valor de Rf similar al obtenido para este  patr&oacute;n.</p>     <p>El an&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico preliminar de hojas, tallos y semillas de <i>S.  schultesiana </i>permiti&oacute; comprobar tambi&eacute;n la presencia de flavonoides en la  especie, ya que en los tres &oacute;rganos evaluados se obtuvieron resultados positivos con la  reacci&oacute;n de Shinoda y con la del &aacute;cido clorh&iacute;drico. Lo anterior indica la  presencia de flavonoides tipo flavona, flavonol, flavanona, flavanonol, isoflavonoide y  leucoantocianidinas.</p>       <p>Por otra parte, puesto que s&oacute;lo las hojas de <i>S. schultesiana </i>ocasionaron  precipitaci&oacute;n del reactivo gelatina - sal, puede concluirse que en este &oacute;rgano  se concentran los taninos producidos por la planta, y dado que el precipitado obtenido es soluble  en urea y produce coloraci&oacute;n verde tras la adici&oacute;n de cloruro f&eacute;rrico, se  infiere que estos taninos son del tipo cat&eacute;quico o condensados. Sin embargo, la reducida  cantidad de precipitado obtenido indica una baja concentraci&oacute;n de taninos en la muestra.</p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Respecto al an&aacute;lisis de saponinas, s&oacute;lo el extracto etan&oacute;lico de las hojas  de la especie evaluada produjo hem&oacute;lisis comparable a la observada con el patr&oacute;n,  mientras que con los extractos de tallos y semillas los eritrocitos permanecieron intactos, lo  que se evidenci&oacute; por la turbidez de la suspensi&oacute;n de gl&oacute;bulos rojos. De  lo anterior se infiere que de los tres &oacute;rganos analizados, s&oacute;lo las hojas contienen  saponinas. Por otro lado, los resultados de la prueba de espuma para semillas y tallos concuerdan  con esta conclusi&oacute;n, puesto que al agitar la muestra no se observ&oacute; la formaci&oacute;n  de espuma abundante ni estable; sin embargo, a pesar de los resultados obtenidos en la prueba de  hem&oacute;lisis para el extracto de hojas, el ensayo de espuma arroj&oacute; resultados negativos,  lo cual puede deberse a que, como se expuso anteriormente, no todas las saponinas tienen la capacidad  de producir espuma. Aun con estos resultados a simple vista contradictorios para el extracto de  hojas, puede inferirse la presencia de saponinas en &eacute;l, pues la prueba m&aacute;s concluyente  para la determinaci&oacute;n de saponinas es la de hem&oacute;lisis.</p>      <p>En cuanto a la detecci&oacute;n de glic&oacute;sidos cardiot&oacute;nicos, ninguno de los  esteroides observados tras re-velar una de las placas con vainillina present&oacute;  coloraci&oacute;n violeta similar a la del patr&oacute;n en la placa revelada con la  reacci&oacute;n de Raymond, por lo cual puede deducirse que la especie <i>S. schultesiana </i>no  contiene glic&oacute;sidos cardiot&oacute;nicos en hojas, tallos ni semillas. Por su parte, el  patr&oacute;n de digitoxina produjo coloraciones violetas, al ser revelado tanto con el reactivo de  vainillina en &aacute;cido o-fosf&oacute;rico como con el de Raymond, tal como se esperaba.</p>      <p>Para la detecci&oacute;n de cumarinas se emplearon tres fases m&oacute;viles, de las cuales  aquella constituida por tolueno-&eacute;ter et&iacute;lico (1:1), saturada con &aacute;cido  ac&eacute;tico al 10%, permiti&oacute; una mejor separaci&oacute;n de los componentes de cada  extracto, encontr&aacute;ndose as&iacute; una mancha fluorescente bien definida en el extracto  de tallos, otra en el extracto de semillas y cuatro en el de hojas; sin embargo, al revelar con  la reacci&oacute;n del hidroxamato f&eacute;rrico, ninguna de ellas present&oacute; coloraci&oacute;n  caf&eacute; similar a la del patr&oacute;n, descartando as&iacute; la presencia de cumarinas en los  extractos.</p>      <p>Para confirmar lo anterior, se asperj&oacute; una de las placas desarrolladas en acetato de etilo,  con KOH al 5%, con lo cual no se intensific&oacute; la fluorescencia de las manchas observadas, que  incluso desapareci&oacute;, confirmando que no se trata de cumarinas sino de otros compuestos  poliinsaturados que pueden fluorescer tambi&eacute;n al UV.</p>      <p>Por otro lado, si bien los compuestos fluorescentes presentes en semillas y hojas de  <i>S. schultesiana </i>no se colorearon tras revelar la placa con la reacci&oacute;n del hidroxamato  f&eacute;rrico, los extractos de tallos y semillas presentaron manchas de color caf&eacute; que no  fluoresc&iacute;an al UV, lo que indica la presencia de lactonas. Sin embargo, al revelar con el  reactivo de vainillina, s&oacute;lo las lactonas presentes en el extracto de semillas poseen una  parte terp&eacute;nica que se observa de color violeta, mientras que la mancha observada en el  extracto de tallos no revel&oacute;, por lo que puede concluirse que aunque los tallos poseen  lactonas, no son de tipo terp&eacute;nico.</p>      <p>Para esta especie no se encuentran reportes sobre composici&oacute;n qu&iacute;mica.  Sin embargo, los resultados obtenidos del presente an&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico preliminar  de hojas, tallos y semillas de esta planta coinciden con los reportados para otras especies del  g&eacute;nero <i>Strychnos</i>. Ejemplo de lo anterior son los reportes de la presencia de alcaloides  en las hojas de <i>S. pseudoquina </i>y en semillas de <i>S. nux-vomica </i>(Nicoletti &amp; Colus  1984, Yang &amp; Yang 1993, Santos <i>et al</i>. 2006), flavonoides en hojas de <i>S. pseudoquina  </i>y <i>S. spinosa </i>(Nicoletti <i>et al. </i>1984, Hoet <i>et al. </i>2004, Santos <i>et al.  </i>2006) y esteroides y &aacute;cidos grasos en ra&iacute;ces y tallos de <i>S. nitida </i>(Gu <i>et  al. </i>1997). Adicionalmente, se reporta la presencia de otros grupos de metabolitos no analizados  en esta oportunidad, como lignanos en tallos de <i>S. vanprukii </i>(Thongphasuk <i>et al. </i>2004),  glic&oacute;sidos fen&oacute;licos, iridoides en madera y corteza de <i>S. axillaris </i>(Itoh y  Colus 2008) y &aacute;cidos org&aacute;nicos como el qu&iacute;nico y el log&aacute;nico y  &eacute;steres de los mismos en corteza y madera de <i>S. lucida</i> (Itoh <i>et al. </i>2008).</p>      <p>A pesar de no haber detectado cumarinas en el presente an&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico  preliminar de <i>S. schultesiana</i>, se ha reportado la presencia de este tipo de metabolitos  secundarios en las ra&iacute;ces de <i>S. cathayensis </i>(Luo 2006). Sin embargo, este es un  grupo de compuestos cuya presencia no se haya ampliamente descrita en la literatura de otras  plantas del g&eacute;nero <i>Strychnos</i>, por lo que puede tratarse de un grupo poco difundido  en estas especies y presente en estos &oacute;rganos (ra&iacute;ces). Adem&aacute;s, cabe aclarar  que la presencia de un tipo de metabolito en una planta no condiciona su presencia en otras  especies del mismo g&eacute;nero.</p></p>Grupos de metabolitos secundarios como los glic&oacute;sidos antrac&eacute;nicos, los  cardiot&oacute;nicos, saponinas y taninos, los cuales no fueron detectados en el presente estudio  o s&oacute;lo fueron detectados en uno de los &oacute;rganos evaluados, no se encuentran reportados  en la literatura consultada para otras especies del g&eacute;nero <i>Strychnos</i>.</p>     <p><B>CONCLUSIONES </B></p>     <p>Los resultados del an&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico preliminar efectuado sobre la muestra de  hojas de <i>S. schultesiana </i>Krukoff evidencian la presencia de alcaloides, taninos, flavonoides,  saponinas, esteroides y/o triterpenoides. Los tallos y las semillas de la misma especie presentan  alcaloides, flavonoides, lactonas y esteroides. En estos &oacute;rganos no se detect&oacute; la  presencia de saponinas ni taninos. Las semillas contienen lactonas terp&eacute;nicas, mientras que  en los tallos se encuentran lactonas pero no de tipo esteroidal. En ninguno de los &oacute;rganos  evaluados se encontr&oacute; la presencia de cumarinas ni glic&oacute;sidos cardiot&oacute;nicos o  antraquin&oacute;nicos.</p>     <p><B>AGRADECIMIENTOS </B></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>A la Corporaci&oacute;n para el Desarrollo del &Aacute;rea del Manejo Especializado la Macarena  &ldquo;CORMACARENA&rdquo;, por la financiaci&oacute;n de este proyecto el cual se desarroll&oacute;  en el marco del convenio 05 de 2001 suscrito con la Universidad Distrital Francisco Jos&eacute; de  Caldas.</p>     <p><B>REFERENCIAS BIBLIOGR&Aacute;FICAS</B></p>      <!-- ref --><p>Calixto, J. B. 2000. Efficacy, safety, quality control, marketing and regulatory guidelines for  herbal medicines (phytotherapeutic agents). Brazilian Journal of Medical and Biological Research 33:  179-189.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000075&pid=S0120-0739200900010001100001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>Ca&ntilde;igueral, S. 2002. La fitoterapia: &iquest;una terap&eacute;utica para el tercer milenio?  Revista de Fitoterapia (2): 101-121.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000076&pid=S0120-0739200900010001100002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>Gu, Z., T. Li, P. Xiao, J. Chen &amp; W. Lian. 1997. Chemical constituents of <i>Strychnos nitida  </i>G. Don. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 22 (1): 40-41.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000077&pid=S0120-0739200900010001100003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>Hoet, S., F. Opperdoes, R. Brun, V. Adjakidj&eacute; &amp; J. Quetin-Leclercq. 2004. In vitro  antitrypanosomal activity of ethnopharmacologically selected Beninese plants. Journal of  Ethnopharmacology 91 (1): 37-42.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000078&pid=S0120-0739200900010001100004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>Itoh, A., Y. Tanaka, N. Nagakura, T. Nishi &amp; T. Tanahashi. 2006. A quinic acid ester from  Strychnos lucida. J. Nat. Med 60: 146-148.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000079&pid=S0120-0739200900010001100005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>Luo, T. 2006.  Studies on the chemical constituents and biological activities from the stem of Pourthiaea lucida and the root of Strychnos cathayensis.   Master's Thesis.  Graduate Institute of Pharmaceutical Technology, Tajen University.  Taiwan.  Disponible en: <a href="http://192.192.215.195/ETD-db/ETD-search/view_etd?URN=etd-0717107-162042" target="_blank">http://192.192.215.232/ETD-db/ETD-search/ view_etd?URN=etd-0717107-162042</a>.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000080&pid=S0120-0739200900010001100006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>Missouri Botanical Garden. 2008. Disponible en: <a href="http://www.tropicos.org/" target="_blank">http://www.tropicos.org/</a>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000081&pid=S0120-0739200900010001100007&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>Nicoletti, M., M. Goulart., R. de Lima, A. Goulart, F. Delle Monache &amp; G. Marini Bettolo.  1984. Flavonoids and alkaloids from <i>Strychnos pseudoquina</i>. J. Nat. Prod. 47 (6): 953-957.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000082&pid=S0120-0739200900010001100008&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>Newman, D. J., G. M. Cragg &amp; K. M. Snader. 2003. Natural products as sources of new drugs over  the period 1981 - 2002. Journal of Natural Products 66: 1022-1037.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000083&pid=S0120-0739200900010001100009&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>Sanabria, A. 1983. An&aacute;lisis fitoqu&iacute;mico preliminar. Metodolog&iacute;a y su  aplicaci&oacute;n en la evaluaci&oacute;n de 40 plantas de la familia Compositeae. Facultad de  Ciencias, Departamento de Farmacia, Universidad Nacional de Colombia. Bogot&aacute;.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000084&pid=S0120-0739200900010001100010&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>Santos, F., I. Colus, M. Silva-Villegas &amp; E.  Varanda. 2006.  Assessment of DNA damage by extracts and fractions of Strychnos pseudoquina, a Brazilian medicinal plant with antiulcerogenic activity.   Food and Chemical Toxicology 4(9): 1585-1589.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000085&pid=S0120-0739200900010001100011&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>Sharapin, N. 2002.  Materias primas vegetales para la industria de productos fitofarmac&eacute;uticos.   Revista de Fitoterapia  1 (3):  23-28.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000086&pid=S0120-0739200900010001100012&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>Thongphasuk, P., R. Suttisri, R. Bavovada &amp; R.  Verpoorte. 2004.  Antioxidant lignan glucosides from Strychnos vanprukii.   Fitoterapia 75(7-8): 623-628.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000087&pid=S0120-0739200900010001100013&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>World Health Organization (WHO). 1993. Research guidelines for evaluating the safety and efficacy  of herbal medicines. Geneva. 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