1 Departamento de Química, Universidad Nacional de Colombia, sede Bogotá, Bogotá, Colombia. lecucas@unal.edu.co ]]>
2 Laboratorio de Química, Universidad del Magda lena, Santa Marta, Colombia. quimica taborda@yahoo.es
RESUMEN
Una nue va cu ma ri na lla ma da 3 -metoxi-4-(3-me t i l b u t -2-enil)-2H-cromen-2-ona fue ais la da de la ma de ra de Z. rhoifolium, jun to con los com pues tos conocidos, dictamnina y N-metilflindersina. Sus estruc turas fueron elucidadas por RMN, incluyendo técnicas bidimensionales y por com pa ra ción con da tos re por tados en la literatura.
Palabras clave: Zanthoxylum rhoifolium, Ru ta ceae, cu ma rinas y al ca loi des.
ABSTRACT
A novel coumarin named 3-metoxi-4-(3-me til but-2-enil)-2H-cromen-2-one was iso la ted from the wood of Z. rhoifolium, to get her with the known compounds, dictamnine and N-methylflin der si ne. Their struc tu res were elu cida ted by RMN spec tra in clu ding 2D techniques and comparison with literature data.
Key words: Zanthoxylum rhoifolium, Ru ta ceae, cou ma rin and al ka loids.
RESUMO
]]> Da madeira de Zanthoxylum rhoifolium foi iso la da uma nova cu ma ri na, com o name, 3 metoxi-4- (3-metilbut-2-enil)-2H-cromen 2-ona junto con os compostos, conhecidos: dictamnina y N-methyl- flindersina. Suas estruturas foram elucidadas por RMN, incluindo técnicas bidiomensionais e pela comparação comdados da literatura.Palavras chave: Zanthoxylum rhoifolium, Ru ta ceae, cu ma ri na e al ca lói des.
INTRODUCCIÓN
El género Zanthoxylum per te ne ce a la familia Rutaceae, y según el Herbario Nacional Colombia no es uno de los géneros de mayor distribución en nuestro país. La familia Rutaceae se caracteriza porque en ella se ha en con tra do una gran va rie dad de metabolitos secundarios, como: alcaloides (1, 2), cumarinas (3, 4), flavonoides (5), lignanos (6, 7), terpenos (8), limonoides (9, 10), crómanos (11, 12). La especie Z. rhoifolium tie ne gran importancia por su uso tradicional como tónico, febrífugo, analgésico, antipirético y antimalárico. Al aceite esencial de hojas, frutos y flores, al extracto crudo y a algunos de los alcaloides aislados de la corteza se les ha evaluado actividad antibacterial, dando prueba positiva para el aceite esencial de hojas y fru tos, el extracto crudo de corteza y algunos de los compuestos aislados (13, 14). A la preparación tradicional utilizada como antimalárico se le demostró que presentaba actividad antimalárica in vivo (15). En orden de validar su uso tradicional y confirmar la previa actividad in vivo realizada, se aislaron e identificaron siete alcaloides benzofenantridínicos; la mayoría presenta actividad contra Plasmodium falciparum (16). Otros alcaloides también han sido incluidos para esta especie en diferentes trabajos (13, 17).
En este artículo se reporta el aislamiento y la caracterización de una nueva cumarina, 3-me to xi-4-(3me til bu til-2-enil)-2H-cromen-2-ona 1, jun to con los al ca loi des dictamina 2 y la N-metilflindersina 3. La presencia de estos metabolitos es de gran importancia quimio taxonómica en el género.
PARTE EXPERIMENTAL
General
Los puntos de fusión se tomaron en un fusiómetro MEL-TEMP. Los espectros infrarrojo (IR) fueron tomados en KBr, en un equipo Pelkin Elmer FTIR panagon 500 serie 1000. Los espectros de RMN de 1H y 13C, al igual que los experimentos DEPT y bidimensional (HMQC, HMBC y COSY), se realizaron en un equipo Bruker Avance 400, de la Universidad Nacional de Colombia. Los solventes utilizados en la toma de los espectros de RMN fueron CDCl3 y ((CD3)2 CO), em pleando TMS como patrón interno. Los materiales utilizados en las diferentes técnicas cromatográficas fueron los siguientes, CC: sílica gel 60 (Merck); CCF y CCFP (1 mm de espesor): sílica gel 60 HF254-366 (Merck). Las placas de CCF fueron reveladas con lámpara de luz UV, vapores de I2 y reveladores de alcaloides, como por ejemplo Dragendorff.
Material vegetal
La muestra utilizada corresponde a la madera de Zanthoxylum rhoifolium (Rutaceae), recolecta da en la finca La Victoria, de la Sierra Nevada de Santa Marta, departamento del Magdalena, a 940 m.s.n.m. La muestra fue recolectada y determinada por el doctor Eduino Carbono de la Hoz, ingeniero agrónomo y especialista en sistemática de la Universidad del Magdalena. Un ejemplar de la muestra reposa en el Herbario de la Universidad del Magdalena con el número de colección 4283 (UTMC-12002).
]]> Extracción y aislamientoLa madera de Z. rhoifolium seca y molida (940 g) fue sometida a extracción por percolación con etanol al 96%. Del extracto etanólico resultante (19,0 g), se sometieron 17 g a CC (sílica gel; C6H5CH3-AcOIp) en polaridad creciente. Se recolectaron 16 fracciones. De la fracción 6 (350 mg), mediante CC sucesivas (sílica gel; Edp-AcOIp 8:2) se obtuvo el compuesto 2 (98 mg). La fracción 16 (828,2 mg) se sometió a CC sucesivas (sílica gel; C6H6-AcOEt 8:2 a 6:4) obteniéndoselos compuestos 3 (4,0 mg) y 1 (7,8 mg).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Del extracto etanólico de la madera de Z. rhoifolium se aislaron e identificaron tres compuestos, de los cua les dos son alcaloides: dictamnina 2 y N-metilflindersina 3, que han sido aislados de otras especies de Zanthoxylum (18-21). Estos alcaloides fueron caracterizados por comparación con los datos de la literatura (20, 22, 23).
El nuevo compuesto 1 es un sólido de color amarillo, de punto de fusión 125-127 ºC (CHCl3). Su espectro IR muestra señales en 3.018 cm-1, 2.927 cm-1, 2.855 cm-1 características de tensión =CH de compuestos aromáticos, estira miento CH de metilos y metilenos; presenta una señal en 1.644 cm-1 característica de la tensión C=O del grupo carbonilo de una lactona en cumarinas y señales en 1.615 cm-1, 1.516 cm-1 y 1.486 cm-1, características de la tensión C=C en anillos aromáticos (24).
En el espectro RMN 1H se observan señales que integran para un total de 16 protones (ver Tabla 1), presenta dos señales en δ 1.69 (s, 3H) y δ 1.81 (s, 3H), las cuales son típicas de los protones de grupos metilo; en δ 3.40 (d, J = 6.8 Hz, 2H) y en δ 5.27 (dd, J = 1.2, y 6.6 Hz, 1H), se observan señales características de protones metilénicos y metílicos, que corresponden a un grupo isoprenol (25). La señal en δ 3.94 (s, 3H), por su desplazamiento químico, es característica de grupo metoxilo unido a un anillo aromático. También se encuentran señales en la región aromática, en: δ 7.35 (t, J = 8.4 Hz, 1H), δ 7.23 (t, J = 8,0 Hz, 1H), d 7,48 (dd, J = 1.2 y 8.4 Hz, 1H) y δ 7.78 (dd, J = 0.8 y 8.0 Hz, 1H), las cuales se encuentran acopladas entre sí y corresponden a protones sobre un anillo aromático con sistema ABCD (24).
El espectro de RMN 13C junto con los experimentos DEPT 135 y 90 muestran señales para un total de 15 carbonos, de los cua les seis son cuaternarios con desplazamiento químico en: δ 132.5, δ 137.1 δ 162.5 δ 166.1, y δ 179.3. De éstas, dos señales corresponden a carbonos aromáticos oxígenados en δ162.5 y δ166.1 (26, 27). La señal en δ 179.3 es característica de un carbono carbonílico de α pironas de cumarinas. Las señales en δ 116.0, δ 121.3, δ 122.6, δ 122.8 y δ 130.1 corresponden a cinco metinos. En δ 23.3 aparece una señal para metileno. La señal en δ 61.8 es característica para un carbono de un grupo metoxilo sobre anillo aromático (27, 28) y en δ 25.7 y δ 17.9 aparecen señales para carbonos de dos grupos metilos.
El análisis realizado indica que el compuesto 1 contiene 15 carbonos, 16 hidrógenos y 3 oxígenos, lo que permite proponer la fórmula condensada C15H16O3 que tiene un IDH de 8. La sustancia 1 es una cumarina que tiene como sustituyentes un grupo isoprenilo y un metoxilo. Con el experimento de HMBC, se ubicó la posición de los sustituyentes sobre el núcleo cumarinico, determinando los carbonos cuaterna rios sobre los cuales están, por ejem plo: la señal del protón δ 5.27 correlaciona a 3J con el carbono cuaternario a δ 117.3. La señal de los hidrógenos del grupo metoxilo en δ 3.94 también correlacionan a 3J con el carbono a δ 162.5, indicando así que los sustituyentes anteriores son vecinales y están ubicados sobre el núcleo básico en las posiciones 3 y 4, respectivamente. El anterior análisis permite proponer la estructura del compuesto 1 denominado 3-metoxi-4-(3-met i lbut -2-enil)-2H-cromen-2-ona, de la cual no se han encontrado reportes en la literatura.
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AGRADECIMIENTOS
Este trabajo fue financiado por el Grupo de Investigación de Productos Naturales Vegetales del Departamento de Química de la Universidad Nacional de Colombia, sede Bogotá, y el Laboratorio de Química de la Universidad del Magdalena. Agradecemos al doctor Eduino Carbono de la Hoz por la recolección y determinación de la muestra, y al laboratorio de RMN de la Universidad Nacional de Colombia por la toma de los espectros.
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