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<article-id pub-id-type="doi">10.7705/biomedica.v35i1.2367</article-id>
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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[Evaluación de la sensibilidad a insecticidas en poblaciones de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) del departamento de Caldas, Colombia, en 2007 y 2011]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[Introduction: Continuous use of insecticides for the control of dengue transmission may lead to decreased susceptibility levels in mosquito vector populations. Timely monitoring is necessary to ensure detection of any potential resistance problems. Objective: To determine the susceptibility status of Aedes aegypti to insecticides used in public health in Caldas, Colombia, during 2007 and 2011. Materials and methods: Susceptibility tests to the organophosphates temephos, malathion, fenitrothion and pirimiphos methyl, as well as to the pyrethroid deltamethrin, were carried out using standard World Health Organization and Centers for Disease Control and Prevention protocols. Results: In 2007, resistance to temephos was detected in Ae. aegypti populations from La Dorada with resistance ratios of 11.5 and 13.3, prompting the Caldas Health Department to suspend the use of this larvicide. A reduction in resistance ratios to temephos was observed in 2011, as well as an apparent resistance to pirimiphos methyl. All Ae. aegypti populations tested were susceptible to deltamethrin, malathion and fenitrothion in both years. Conclusion: Evaluating the resistance ratios during two distinct periods allowed a decrease in resistance to be detected after suspension of the use of temephos. Surveillance of mosquito populations for changes in susceptibility levels to the insecticides used in dengue control programs is therefore recommended.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[   <font face="verdana" size="2">     <p>doi: <a href="http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v35i1.2367" target="_blank">http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v35i1.2367</a> </p>     <p>ART&Iacute;CULO ORIGINAL</p>     <p><font size="4">    <center><b>Evaluaci&oacute;n de la sensibilidad a insecticidas en poblaciones de <i>Aedes aegypti </i> (Diptera: Culicidae) del departamento de Caldas, Colombia, en 2007 y 2011 </b></center></font></p>     <p>    <center>Marcela Conde <sup>1</sup> , Lorena I. Orjuela <sup>1</sup> , C&eacute;sar Augusto Castellanos <sup>2</sup> , Manuela Herrera-Varela <sup>1</sup> , Susana Licastro <sup>3</sup> , Martha L. Qui&ntilde;ones <sup>1</sup> </center></p>     <p><sup>1</sup> Grupo de Entomolog&iacute;a, Departamento de Salud P&uacute;blica, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Colombia, Bogot&aacute;, D.C., Colombia </p>     <p><sup>2</sup> Direcci&oacute;n Territorial de Salud de Caldas, Manizales, Colombia </p>     <p><sup>3</sup> Centro de Investigaciones de Plagas e Insecticidas, CIPEIN, Buenos Aires, Argentina </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><b>Instituci&oacute;n donde se llev&oacute; a cabo el trabajo: </b></p>     <p>Universidad Nacional de Colombia, Bogot&aacute;, D.C., Colombia </p>     <p><b>Contribuci&oacute;n de los autores: </b></p>     <p>Martha L. Qui&ntilde;ones y C&eacute;sar Augusto Castellanos: estructuraci&oacute;n del proyecto </p>     <p>Martha L. Qui&ntilde;ones, Marcela Conde y Lorena I. Orjuela: trabajo de campo y laboratorio, an&aacute;lisis de datos y elaboraci&oacute;n del manuscrito </p>     <p>Susana Licastro y Manuela Herrera-Varela: trabajo de laboratorio y an&aacute;lisis de datos </p>     <p>C&eacute;sar Augusto Castellanos: trabajo de campo </p>     <p>Recibido: 16/04/14; aceptado: 20/09/14</p> <hr size="1">     <p><b>Introducci&oacute;n. </b> El uso continuo de insecticidas para el control de la transmisi&oacute;n del dengue puede generar una reducci&oacute;n en los niveles de sensibilidad de las poblaciones de los mosquitos vectores. La vigilancia oportuna es necesaria para detectar cualquier problema potencial de resistencia. </p>     <p><b>Objetivo. </b> Determinar el estado de la sensibilidad a insecticidas de uso en salud p&uacute;blica en poblaciones de <i>Aedes aegypti </i>del departamento de Caldas, Colombia, en el 2007 y el 2011. </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><b>Materiales y m&eacute;todos. </b> Se realizaron pruebas de sensibilidad a los organofosforados temef&oacute;s, malati&oacute;n, fenitroti&oacute;n y metil-pirimif&oacute;s y al piretroide deltametrina, siguiendo las metodolog&iacute;as estandarizadas de la Organizaci&oacute;n Mundial de la Salud y de los <i>Centers for Disease Control and Prevention </i> de los Estados Unidos. </p>     <p><b>Resultados. </b> En el 2007 se encontr&oacute; resistencia al temef&oacute;s en dos barrios del municipio de La Dorada, con grados de resistencia de 11,5 y 13,3. Por ello, la Direcci&oacute;n Territorial de Salud de Caldas suspendi&oacute; el uso de este larvicida en dichos barrios. Cuatro a&ntilde;os despu&eacute;s, en el 2011, se observ&oacute; una reducci&oacute;n en los grados de resistencia al temef&oacute;s, as&iacute; como resistencia al metil-pirimif&oacute;s. Todas las poblaciones evaluadas fueron sensibles a los insecticidas deltametrina, malati&oacute;n y fenitroti&oacute;n en los dos per&iacute;odos. </p>     <p><b>Conclusi&oacute;n. </b> La cuantificaci&oacute;n de los grados de resistencia en dos per&iacute;odos permiti&oacute; evidenciar la reducci&oacute;n de la resistencia al temef&oacute;s despu&eacute;s de suspender su uso. Se recomienda mantener la vigilancia de los niveles de sensibilidad de los insecticidas usados en los programas de control de dengue. </p>     <p><b>Palabras clave: </b><i>Aedes </i>, dengue, resistencia a los insecticidas, insecticidas organofosforados, temef&oacute;s, control de vectores, Colombia. </p>     <p>doi: <a href="http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v35i1.2367" target="_blank">http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v35i1.2367</a> </p> <hr size="1">     <p><font size="3"><b>Insecticide susceptibility evaluation in <i>Aedes aegypti </i> populations of Caldas, Colombia, in 2007 and 2011 </b></font></p>     <p><b>Introduction: </b> Continuous use of insecticides for the control of dengue transmission may lead to decreased susceptibility levels in mosquito vector populations. Timely monitoring is necessary to ensure detection of any potential resistance problems. </p>     <p><b>Objective: </b> To determine the susceptibility status of <i>Aedes aegypti </i> to insecticides used in public health in Caldas, Colombia, during 2007 and 2011. </p>     <p><b>Materials and methods: </b> Susceptibility tests to the organophosphates temephos, malathion, fenitrothion and pirimiphos methyl, as well as to the pyrethroid deltamethrin, were carried out using standard World Health Organization and Centers for Disease Control and Prevention protocols. </p>     <p><b>Results: </b> In 2007, resistance to temephos was detected in <i>Ae. aegypti </i> populations from La Dorada with resistance ratios of 11.5 and 13.3, prompting the Caldas Health Department to suspend the use of this larvicide. A reduction in resistance ratios to temephos was observed in 2011, as well as an apparent resistance to pirimiphos methyl. All <i>Ae. aegypti </i> populations tested were susceptible to deltamethrin, malathion and fenitrothion in both years. </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><b>Conclusion: </b> Evaluating the resistance ratios during two distinct periods allowed a decrease in resistance to be detected after suspension of the use of temephos. Surveillance of mosquito populations for changes in susceptibility levels to the insecticides used in dengue control programs is therefore recommended. </p>     <p><b>Key words: </b><i>Aedes </i>, dengue, insecticide resistance; insecticides, organophosphate; temephos, vector control, Colombia. </p>     <p>doi: <a href="http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v35i1.2367" target="_blank">http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v35i1.2367</a> </p> <hr size="1">     <p>El mosquito <i>Aedes (Stegomyia) aegypti </i>, Linnaeus 1762, es reconocido como el artr&oacute;podo m&aacute;s importante en la transmisi&oacute;n de los virus del g&eacute;nero <i>Flavivirus </i> responsables del dengue y la fiebre amarilla urbana en humanos (1). Esta especie es tambi&eacute;n el principal vector del virus Chikungunya ( <i>Alphavirus </i>), en torno al cual se ha generado recientemente una alerta debido a su ingreso en los pa&iacute;ses de las Am&eacute;ricas, al incremento en el n&uacute;mero de casos importados en la regi&oacute;n (2) y a la presencia de casos aut&oacute;ctonos en pa&iacute;ses del Caribe y en algunos pa&iacute;ses de Centroam&eacute;rica y Suram&eacute;rica como El Salvador, Guyana y Surinam (3). </p>     <p>El dengue en Colombia representa un grave pro blema de salud p&uacute;blica debido a la interacci&oacute;n de diversas causas, entre las que se destacan el clima propicio, la urbanizaci&oacute;n no planificada, las condiciones y la calidad de vida de la poblaci&oacute;n, algunos aspectos conductuales y culturales de la poblaci&oacute;n, el bajo desarrollo y la respuesta institucional, la vulnerabilidad de la poblaci&oacute;n expuesta, la amplia distribuci&oacute;n del vector <i>Ae. aegypti </i>, y la circulaci&oacute;n simult&aacute;nea de diferentes serotipos (4). En Colombia se reportaron entre 30.000 y 50.000 casos anuales entre el 2008 y el 2013, con excepci&oacute;n de la epidemia que se present&oacute; en el 2010, cuando se registraron 147.257 casos (5). La tasa de incidencia de casos de dengue en Caldas fue de 42,8 casos por 100.000 habitantes en el 2007, y de 18,2 en el 2011, en tanto que en el a&ntilde;o epid&eacute;mico de 2010 la tasa de incidencia fue de 143,3. Los municipios de La Dorada, Victoria, Viterbo, Marquetalia y Chinchin&aacute; aportan anualmente alrededor del 70 % de los casos de dengue del departamento, con incidencias en el 2011 de 164,4, 45,7, 39,5, 20,1 y 15,3, respectivamente (6). </p>     <p>Debido a su amplia distribuci&oacute;n, altas densidades, h&aacute;bitos hematof&aacute;gicos , cr&iacute;a en fuentes artificiales generadas por el hombre, y su capacidad para transmitir arbovirosis humanas, <i>Ae. aegypti </i> se considera una amenaza para la salud p&uacute;blica. A pesar de los esfuerzos globales para obtener una vacuna o un tratamiento efectivo para los pacientes con dengue u otras arbovirosis transmitidas por <i>Ae. aegypti </i>, el control vectorial sigue siendo la &uacute;nica opci&oacute;n para la prevenci&oacute;n y el control de estas enfermedades (1 ). Este control se lleva a cabo mediante la aplicaci&oacute;n de insecticidas qu&iacute;micos larvicidas, como el organofosforado temef&oacute;s , y adulticidas, como los organofosforados malati&oacute;n, fenitroti&oacute;n, metil-pirimif&oacute;s y el piretroide deltametrina, que en Colombia son aplicados por funcionarios de los programas de prevenci&oacute;n y control de enfermedades transmitidas por vectores de las secretar&iacute;as de salud para reducir r&aacute;pidamente las poblaciones de mosquitos y as&iacute; disminuir el riesgo de transmisi&oacute;n del virus del dengue en situaciones epid&eacute;micas (7). Adem&aacute;s, se ha implementado el control f&iacute;sico mediante la eliminaci&oacute;n de sitios de cr&iacute;a, como los recipientes artificiales, o el lavado y cepillado de albercas, actividades que se desarrollan con la participaci&oacute;n de la comunidad (7). </p>     <p>El organofosforado temef&oacute;s ha sido el larvicida de mayor uso en los programas de control de dengue en Colombia por su efecto residual (de 8 a 12 semanas) (7), su eficacia y su costo. Como resultado de su uso frecuente, se ha reportado resistencia a este organofosforado en poblaciones de <i>Ae. aegypti </i> en Cali (Su&aacute;rez MF, Gonz&aacute;lez R, Morales CA. Temephos resistance to <i>Aedes aegypti </i> in Cali, Colombia. Am J Trop Med Hyg. 1996;55(Suppl.):257), en Medell&iacute;n (8) y en C&uacute;cuta (9). Entre el 2005 y el 2007, se evalu&oacute; en un estudio multic&eacute;ntrico el estado de la resistencia a insecticidas en los principales vectores de dengue y malaria en 12 departamentos del pa&iacute;s y se report&oacute; que, aproximadamente, el 70 % de las poblaciones de <i>Ae. aegypti </i> evaluadas fueron resistentes al temef&oacute;s (10,11). En otros pa&iacute;ses de Am&eacute;rica Latina, como Argentina (12,13), Brasil (14-17), Cuba (18,19) y El Salvador (20), tambi&eacute;n se ha reportado la resistencia al temef&oacute;s en poblaciones de <i>Ae. aegypti </i>. </p>     <p>El malati&oacute;n ha sido el principal insecticida organo-fosforado empleado en Colombia como adulticida en casos de epidemia desde 1980 (10). En varias evaluaciones hechas en el pa&iacute;s, se ha informado que la mayor&iacute;a de las poblaciones de <i>Ae. aegypti </i>son sensibles al malati&oacute;n (10,11,21). Sin embargo, en pa&iacute;ses como Cuba, Panam&aacute; y Venezuela (19,22,23), se ha encontrado una resistencia incipiente a este insecticida. </p>     <p>Pese a que en Colombia la deltametrina y los organofosforados fenitroti&oacute;n y metil-pirimif&oacute;s no se han usado de manera intensiva para el control de vectores del dengue, hay reportes de resistencia de <i>Ae. aegypti </i> a la deltametrina (10,21,24) y al fenitroti&oacute;n (10,11,21). En otros pa&iacute;ses de la regi&oacute;n, como la Guyana Francesa (25), M&eacute;xico (26) y Per&uacute; (27), as&iacute; como en el occidente venezolano (23), tambi&eacute;n se ha reportado resistencia a la deltametrina, y solo en Cuba y Panam&aacute; (19,22,28), se ha encontrado resistencia entre moderada y alta al metil-pirimif&oacute;s. </p>     <p>Teniendo en cuenta estos antecedentes, el objetivo del presente estudio fue determinar el estado de la sensibilidad de las poblaciones de <i>Ae. aegypti </i>a insecticidas piretroides y organofosforados en los municipios prioritarios para la transmisi&oacute;n del dengue, inicialmente durante el 2007. Posteriormente, en el 2011, la Direcci&oacute;n Territorial de Salud de Caldas seleccion&oacute; otros municipios con el fin de continuar la evaluaci&oacute;n y sugiri&oacute; incluir otro organofosforado. </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>En este trabajo se presentan los resultados de las evaluaciones del 2007 y del 2011, as&iacute; como de las comparaciones que estas permitieron. </p>     <p><b>Materiales y m&eacute;todos </b></p>     <p><b><i>&Aacute;rea de estudio y recolecci&oacute;n del material biol&oacute;gico </i></b></p>     <p>Las &aacute;reas de estudio fueron seleccionadas por la Direcci&oacute;n Territorial de Salud de Caldas en dos periodos, el 2007 y el 2011, con base en el riesgo de transmisi&oacute;n del dengue y el uso de insecticidas para el control del <i>Ae. aegypti. </i>Las localidades donde se recolectaron los espec&iacute;menes de <i>Ae. aegypti </i>en el 2007 <i></i>fueron los cascos urbanos de los municipios de Chinchin&aacute; (04&deg;58&quot; latitud norte, 75&deg;36&quot; longitud oeste), en los barrios Sector 1 y 2, cuya altitud es de 1.378 msnm, y del municipio de La Dorada (05&deg;27&quot; latitud norte, 74&deg;40&quot; longitud oeste), en los barrios Las Margaritas y Las Ferias, con una altitud de 176 msnm. </p>     <p>Dados los resultados de este primer estudio en los dos municipios, en el 2011 la Direcci&oacute;n Territorial de Salud de Caldas decidi&oacute; cambiar el municipio de Chinchin&aacute; por otros municipios prioritarios para el control del dengue en el departamento y continuar con las evaluaciones en los mismos barrios de La Dorada. As&iacute;, en el 2011 se incluyeron los municipios de Marquetalia (05&deg;20&quot; latitud norte, 75&deg;03&quot; longitud oeste), con una altitud de 1.600 msnm, Victoria (05&deg;19&quot; latitud norte, 74&deg;54&quot; longitud oeste), con una altitud de 750 msnm, y Viterbo (05&deg;04&quot; latitud norte, 75&deg;52&quot; longitud oeste), con una altitud de 998 msnm (<a href="#figura1">figura 1</a>). </p>     <p>    <center> <a name="figura1"><img src="img/revistas/bio/v35n1/v35n1a07m1.jpg"></a></center></p>      <p>Tanto en el 2007 como en el 2011 el personal de la Universidad Nacional de Colombia y los auxiliares del Programa de Enfermedades Transmitidas por Vectores de la Direcci&oacute;n Territorial de Salud de Caldas recolectaron larvas de <i>Ae. aegypti </i>en cada uno de los municipios, revisando albercas y dep&oacute;sitos de agua dom&eacute;sticos en viviendas donde los habitantes permitieran el ingreso. </p>     <p>Las larvas recolectadas se llevaron al Laboratorio de Entomolog&iacute;a M&eacute;dica de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional en Bogot&aacute; y se mantuvieron hasta la segunda generaci&oacute;n filial (F2) para los bioensayos. Las larvas se criaron en bandejas pl&aacute;sticas y se les suministr&oacute; concentrado para conejos como alimento. Los mosquitos adultos se alimentaron con soluci&oacute;n de agua azucarada al 10 % y con sangre humana procedente de bancos de sangre cada tercer d&iacute;a para la obtenci&oacute;n de sus huevos. El insectario se mantuvo a una temperatura de 27 &deg;C en promedio y una humedad relativa de 60 %, con un fotoperiodo de 12 horas, de acuerdo con la metodolog&iacute;a de Gerberg (29). </p>     <p>Como referencia se utiliz&oacute; la cepa sensible Rockefeller (ROCK), procedente del Laboratorio de Entomolog&iacute;a del Instituto Nacional de Salud, la que a su vez se obtuvo en 1979 del Laboratorio de los <i>Centers for Disease Control and Prevention </i>(CDC) de Puerto Rico. </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><b><i>Pruebas biol&oacute;gicas en larvas </i></b></p>     <p>Los bioensayos con la dosis diagn&oacute;stica para temef&oacute;s se ajustaron a la metodolog&iacute;a de la Organizaci&oacute;n Mundial de la Salud (OMS) (30). Se evalu&oacute; la dosis diagn&oacute;stica de 0,02 ppm con 24 horas de exposici&oacute;n de las larvas. Se hicieron cuatro r&eacute;plicas por bioensayo, utilizando larvas de t ercer estadio tard&iacute;o o cuarto temprano, para un total de 100 larvas por concentraci&oacute;n. Se utilizaron dos grupos de control: uno expuesto a la acetona (control negativo), la cual no deber&iacute;a causar mortalidad en las larvas, y el otro con la concentraci&oacute;n de insecticida por evaluar en la cepa sensible ROCK (control positivo). Las larvas que pasaron a estadio de pupa durante la prueba se excluyeron del an&aacute;lisis, al igual que los bioensayos con mortalidades superiores al 20 % en el control. La lectura de las mortalidades se hizo a las 24 horas. </p>     <p>Para estimar los grados de resistencia se evalua ron de 5 a 7 concentraciones que ocasionaron entre 3 y 100 % de mortalidad en las larvas, tanto en las cepas de campo como en la cepa sensible de referencia ROCK. Todas las concentraciones se ajustaron con agua a un volumen final de 100 ml. </p>     <p><b><i>Pruebas biol&oacute;gicas en adultos </i></b></p>     <p>Para esto se utiliz&oacute; la metodolog&iacute;a de la botella del CDC descrita por Brogdon y McAllister (31). Esta metodolog&iacute;a permite evaluar el tiempo requerido por un insecticida para alcanzar y actuar sobre el sitio de acci&oacute;n o sitio blanco. Este tiempo de acci&oacute;n se incrementa en presencia de mecanismos de resistencia. </p>     <p>Los insecticidas, las dosis y los tiempos diagn&oacute;sticos evaluados en <i>Ae. aegypti </i>fueron: para deltametrina, 6,25 &micro;g/botella/30 minutos; malati&oacute;n, 100 &micro;g/botella/30 minutos; fenitroti&oacute;n, 75 &micro;g/botella/45 minutos (establecidos por el proyecto multic&eacute;ntrico 2005-2007) (10,11), y para el metil-pirimif&oacute;s, 100 &micro;g/botella/45 minutos, establecido por el Laboratorio de Entomolog&iacute;a M&eacute;dica de la Universidad Nacional. Las dosis diagn&oacute;stico de los insecticidas bajo evaluaci&oacute;n se prepararon a partir de las soluciones madre, las cuales permanecieron protegidas de la luz y refrigeradas a 4 &deg;C. Se utilizaron soluciones de insecticida de grado anal&iacute;tico diluidos en acetona. </p>     <p>Los bioensayos se hicieron en botellas de vidrio Wheaton de 250 ml previamente lavadas y secadas. La totalidad del interior de cada botella y de la respectiva tapa, se impregn&oacute; con una dosis diagn&oacute;stico de 1 ml de la soluci&oacute;n del insecticida. Esto se logr&oacute; realizando movimientos de rotaci&oacute;n hasta cerciorarse de que el producto estuviera distribuido uniformemente dentro de la botella. Las botellas se dejaron secar durante 3 a 5 horas antes de iniciar las pruebas, teniendo la precauci&oacute;n de mantenerlas en un sitio oscuro para proteger el insecticida de la degradaci&oacute;n por el efecto de la luz (32). </p>     <p>En cada bioensayo se utilizaron cuatro botellas impregnadas con el insecticida y una botella impregnada con acetona (control negativo), en las cuales se expusieron los mosquitos de la poblaci&oacute;n bajo evaluaci&oacute;n, y en otra botella impregnada con el insecticida se expusieron mosquitos de la cepa sensible (ROCK), a manera de control positivo. En cada botella se expusieron entre 15 y 25 hembras adultas, vac&iacute;as, de menos de 5 d&iacute;as de emergidas. Cada 15 minutos se registr&oacute; el n&uacute;mero de mosquitos vivos y muertos en cada botella. El desarrollo de la prueba tomaba de una hora y media a dos horas, o hasta que todos los mosquitos estuvieran muertos. El criterio de intoxicaci&oacute;n en los mosquitos se defini&oacute; como la dificultad para volar y la incapacidad de mantenerse parados sobre la superficie de la botella (32). </p>     <p><b><i>An&aacute;lisis de bioensayos </i></b></p>     <p>Se us&oacute; la f&oacute;rmula de Abbot (33) para corregir los bioensayos de larvas y adultos cuando la mortalidad en el control negativo se situaba entre 5 y 20 %. La interpretaci&oacute;n de los resultados se hizo de acuerdo con los criterios de la OMS (34), los cuales establecen que mortalidades iguales o superiores a 98 % indican sensibilidad, y aquellas inferiores a 98 % indican posible resistencia. </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Para los bioensayos con larvas, se estimaron las concentraciones letales al 50 y 90 % (CL 50 y CL 90 ) con el insecticida temef&oacute;s mediante la regresi&oacute;n dosis-mortalidad en el an&aacute;lisis de regresi&oacute;n Probit (SPSS &reg; , 7,5) . A partir de las concentraciones letales calculadas para cada cepa de <i>Ae. aegypti </i>, <i></i>y por comparaci&oacute;n con la l&iacute;nea de regresi&oacute;n de la cepa sensible de referencia ROCK, se calcularon los grados de resistencia para el insecticida (CL 50 de la cepa de <i>Ae. </i><i>aegypt i </i>de campo/CL 50 de la cepa ROCK). Para la interpretaci&oacute;n de dichos grados se utiliz&oacute; el criterio de Mazzarri y Georghiou (35), quienes sugieren que estos pueden clasificarse en altos (&gt;10), medios (entre 5 y 10), y bajos (&lt;5). </p>     <p><b>Resultados </b></p>     <p><b><i>Pruebas biol&oacute;gicas de la OMS con el insecticida temef&oacute;s en larvas </i></b></p>     <p>Las poblaciones de <i>Ae. aegypti </i>de Chinchin&aacute;, Marquetalia y Viterbo mostraron porcentajes de mortalidad compatibles con sensibilidad a la dosis diagn&oacute;stica (<a href="#cuadro1">cuadro 1</a>). Las poblaciones de los barrios de Las Ferias y Las Margaritas del municipio de La Dorada y la poblaci&oacute;n de <i>Ae. aegypti </i> procedente del municipio de Victoria, mostraron porcentajes de mortalidad compatibles con resistencia. </p>     <p>    <center> <a name="cuadro1"><img src="img/revistas/bio/v35n1/v35n1a07t1.gif"></a></center></p>      <p>En el <a href="#cuadro2">cuadro 2</a> se presentan los grados de resistencia obtenidos para las poblaciones de <i>Ae. aegypti </i>de La Dorada (Las Ferias y Las Margaritas) en el 2007 y el 2011, los de Victoria, Marquetalia y Viterbo en el 2011 y los de la cepa sensible ROCK. No se incluy&oacute; la poblaci&oacute;n de Chinchin&aacute; porque no se logr&oacute; obtener el n&uacute;mero m&iacute;nimo de individuos requerido para esta estimaci&oacute;n; adem&aacute;s, los resultados con la evaluaci&oacute;n de la dosis diagn&oacute;stica mostraron que los sectores 1 y 2 fueron compatibles con sensibilidad. Los resultados de las concentraciones letales al 50 y 90 % para la cepa ROCK se estimaron en el 2007. De acuerdo con los criterios de Mazzarri y Georghiou (35), en el 2007 las poblaciones de <i>Ae. </i><i>aegypti </i> de los barrios Las Ferias y Las Margaritas del municipio de La Dorada presentaron grados de resistencia altos, con valores de 13,27 y 11,48, respectivamente. </p>     <p>    <center> <a name="cuadro2"><img src="img/revistas/bio/v35n1/v35n1a07t2.gif"></a></center></p>      <p>Durante el 2011 las poblaciones de Las Margaritas y Viterbo presentaron un grado de resistencia mayor de 5, con valores de 5,525 y 5,61, correspondientes a una resistencia moderada, y las poblaciones de Viterbo, Marquetalia y Las Ferias presentaron un grado de resistencia menor de 5, con valores que oscilaron entre 0,75 y 4,75, los cuales se consideran indicativos de sensibilidad. Las pendientes (B en el <a href="#cuadro2">cuadro 2</a>) de las regresiones Probit de las poblaciones de Las Margaritas en el 2007 y de Victoria en el 2011 fueron las m&aacute;s bajas, lo que significa que fueron m&aacute;s heterog&eacute;neas. </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><b><i>Pruebas biol&oacute;gicas del CDC para los insecticidas deltametrina, malati&oacute;n, fenitroti&oacute;n y metil-pirimif&oacute;s en adultos </i></b></p>     <p>Los resultados de las pruebas biol&oacute;gicas con la metodolog&iacute;a del CDC en mosquitos adultos se presentan en el <a href="#cuadro3">cuadro 3</a>. Las poblaciones evaluadas mostraron resultados compatibles con sensibilidad a todos los insecticidas evaluados tanto en el 2007 como en el 2011, a excepci&oacute;n de las poblaciones de Las Ferias y Las Margaritas del municipio de La Dorada, las cuales mostraron resistencia al metil-pirimif&oacute;s durante el 2011 . </p>     <p>    <center> <a name="cuadro3"><img src="img/revistas/bio/v35n1/v35n1a07t3.gif"></a></center></p>      <p><b>Discusi&oacute;n </b></p>     <p>Los resultados obtenidos con el insecticida temef&oacute;s evidenciaron una reversi&oacute;n de la resistencia de <i>Ae. aegypti </i> en las poblaciones evaluadas en el departamento de Caldas. En las poblaciones de los barrios Las Ferias y Las Margaritas del municipio de La Dorada se observ&oacute; una reducci&oacute;n en los grados de resistencia, los cuale s pasaron de 13,27 y 11,48 en el 2007 a 4,75 y 5,61 durante el 2011. Esta disminuci&oacute;n se podr&iacute;a explicar por la decisi&oacute;n de la Direcci&oacute;n Territorial de Salud de Caldas de suspender en estos barrios el uso del larvicida temef&oacute;s a ra&iacute;z de los grados de resistencia observados en el 2007. El uso de temef&oacute;s se restringi&oacute; solo a focos epid&eacute;micos en el departamento. Al disminuir su uso, se establecieron otras medidas de control como la educaci&oacute;n de la comunidad, la promoci&oacute;n del lavado y cepillado de albercas, adem&aacute;s de la organizaci&oacute;n de jornadas de recolecci&oacute;n de objetos inservibles y la aplicaci&oacute;n del tratamiento espacial con el organofosforado malati&oacute;n solo en caso de epidemia, lo cual ocurri&oacute; en el 2010 (4). Esta estrategia gener&oacute; una disminuci&oacute;n en la presi&oacute;n de selecci&oacute;n ejercida por el organofosforado temef&oacute;s sobre las poblaciones de <i>Ae. aegypti </i>. L os resultados obtenidos con las poblaciones de Las Ferias y Las Margaritas en Caldas muestran que despu&eacute;s de cuatro a&ntilde;os de disminuci&oacute;n de la presi&oacute;n con el temef&oacute;s en poblaciones de <i>Ae. aegypti </i>fue posible reducir los grados de resistencia. </p>     <p>En los lineamientos para el manejo de la resistencia a insecticidas en vectores de enfermedades, la Organizaci&oacute;n Mundial de la Salud recomienda la rotaci&oacute;n o aplicaci&oacute;n en mosaico de insecticidas de diferente modo de acci&oacute;n, con el prop&oacute;sito de disminuir la presi&oacute;n de selecci&oacute;n causada por un insecticida, y, eventualmente, revertir la resistencia (36). En el sector agr&iacute;cola se han reportado varios casos de esta reversi&oacute;n, por ejemplo en el gusano del tabaco ( <i>Spodoptera litura </i>) en Asia, en donde la sensibilidad a varios insecticidas se increment&oacute; entre 5 y 9 veces despu&eacute;s de 11 generaciones y en ausencia de la presi&oacute;n de selecci&oacute;n (37). En el gusano cogollero ( <i>Helicoverpa arm&iacute;gera </i>), plaga de varios cultivos como el algod&oacute;n, se ha evidenciado la reversi&oacute;n de la resistencia a insecticidas con la introducci&oacute;n de algod&oacute;n transg&eacute;nico (modificado con <i>Bacillus thurigiensis </i>) y despu&eacute;s de 15 a&ntilde;os de suspensi&oacute;n del uso de insecticidas (38). </p>     <p>En el &aacute;mbito de la salud p&uacute;blica, en India se ha reportado una reversi&oacute;n de la resistencia al pire troide deltametrina en poblaciones de mosquitos de <i>Anopheles culicifacies </i> despu&eacute;s de 2 a 3 a&ntilde;os de haber suspendido su rociamiento dentro de los domicilios, aunque la misma poblaci&oacute;n mostr&oacute; estabilidad en la resistencia al DDT y al malati&oacute;n despu&eacute;s de haber suspendido su uso durante 30 y 9 a&ntilde;os, respectivamente (39). </p>     <p>Con relaci&oacute;n a la especie <i>Ae. aegypti </i> y el insecti cida temef&oacute;s, Melo-Santos, <i>et al., </i>(40) obtuvieron en Brasil una reversi&oacute;n de la resistencia a este organofosforado en experimentos llevados a cabo en el laboratorio con una cepa de campo resistente para evaluar tres escenarios diferentes en cuanto a la intensidad de la presi&oacute;n con temef&oacute;s y al ingreso de individuos sensibles, y en todos ellos encontraron reversi&oacute;n de la resistencia, lo que demuestra que es posible recuperar la sensibilidad al temef&oacute;s. En una poblaci&oacute;n de Brasil (Juazeiro do Norte) se observ&oacute; una disminuci&oacute;n de los grados de resistencia, que pasaron de 10,2 a 7,2 despu&eacute;s de la suspensi&oacute;n del uso de este organofosforado y su sustituci&oacute;n por <i>Bacillus thuringiensis israelensis </i> (41). Tales observaciones, as&iacute; como los resultados de este trabajo, indican que es posible recuperar la sensibilidad al temef&oacute;s, por lo cual es muy importante continuar la vigilancia del estado de la sensibilidad de las poblaciones de mosquitos a lo largo del tiempo, no solo con la dosis diagn&oacute;stica, sino estimando los grados de resistencia, lo cual permite cuantificar los niveles de resistencia y vigilar los cambios generados ya sea por el incremento o la disminuci&oacute;n de la presi&oacute;n ejercida por el uso de los insecticidas (35). </p>     <p>Con base en los resultados de la investigaci&oacute;n llevada a cabo en Brasil, Montella, <i>et al. </i>, (15 ) mencionan la necesidad de sustituir el temef&oacute;s por otro larvicida cuando las poblaciones de <i>Ae. aegypti </i>presenten grados de resistencia superiores a 3, ya que con grados de resistencia superiores a 10, como los que encontraron, la eficacia en campo del temef&oacute;s se disminuye a 4 semanas. Los autores concluyeron que la adopci&oacute;n de estas decisiones operativas requiere de una modificaci&oacute;n enorme en la vigilancia de la resistencia que se lleva a cabo en Brasil. En este sentido, y teniendo en cuenta la ventaja de Colombia al tener programas de enfermedades transmitidas por vectores en las secretar&iacute;as departamentales de salud y una Red Nacional de Laboratorios en Entomolog&iacute;a, es importante mantener la vigilancia de la resistencia al temef&oacute;s de una forma peri&oacute;dica y rutinaria y, en lo posible, estimar los grados de resistencia mediante los bioensayos pr&aacute;cticos que ha sugerido la OMS (30), y complementar esto con las pruebas bioqu&iacute;micas o el uso de mol&eacute;culas con sinergia, las cuales permiten detectar los mecanismos que pueden estar expres&aacute;ndose en las poblaciones resistentes . Adem&aacute;s, es importante disminuir la presi&oacute;n ejercida por el uso del temef&oacute;s, principalmente en las poblaciones de <i>Ae. aegypti </i>que han mostrado resultados compatibles con resistencia. </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Con relaci&oacute;n a los otros insecticidas evaluados, los resultados obtenidos en este estudio demos traron que las poblaciones de <i>Ae. aegypti </i>del departamento de Caldas incluidas en este estudio, fueron sensibles a la deltametrina y al fenitroti&oacute;n en los dos per&iacute;odos de muestreo, lo que puede deberse a que el Programa de Enfermedades Transmitidas por Vectores de Caldas no ha utilizado estos insecticidas para el control del <i>Ae. aegypti </i> en ninguna de las localidades evaluadas <i>. </i>Sin embargo, es importante mantener la vigilancia de la sensibilidad a la deltametrina dado lo registra do en otros pa&iacute;ses de Latinoam&eacute;rica con relaci&oacute;n a una posible resistencia cruzada por presi&oacute;n de selecci&oacute;n con el malati&oacute;n (42), el temef&oacute;s (27) y otros piretroides (24), as&iacute; como con el organofosforado fenitroti&oacute;n, del cual existen reportes de resistencia cruzada con el temef&oacute;s (18). </p>     <p>Las poblaciones de <i>Ae. aegypti </i> de los barrios de Las Ferias y Las Margaritas del municipio de La Dorada mostraron resultados compatibles con resistencia al organofosforado metil-pirimif&oacute;s, por lo que se recomienda verificarla y calcular los grados de resistencia, dado el porcentaje de mortalidad (93 %) y el hecho de que en ninguna localidad de Caldas se ha empleado el metil-pirimif&oacute;s. Es necesario estudiar, igualmente, una probable resistencia cruzada entre el metil-pirimif&oacute;s y el temef&oacute;s, ya que ha habido algunos reportes de dicha resistencia entre estos dos organofosforados en pa&iacute;ses como Cuba (19,28,43) y Panam&aacute; (19,22). </p>     <p>Con relaci&oacute;n al malati&oacute;n, las poblaciones de <i>Ae. </i><i>aegypti </i>evaluadas fueron sensibles a este organo-fosforado en los dos per&iacute;odos de muestreo, pese al hallazgo de poblaciones con grados de resistencia altos y moderados al temef&oacute;s . Puesto que estos dos insecticidas son organofosforados, se podr&iacute;a pensar en el riesgo de resistencia cruzada. Sin embargo, generalmente la resistencia al malati&oacute;n est&aacute; relacionada con la presencia de mecanismos de resistencia diferentes a la resistencia frente a otros organofosforados, dado que las enzimas desintoxicadoras del malati&oacute;n son principalmente las malati&oacute;n carboxil-esterasas, las cuales act&uacute;an secuestrando el insecticida antes de que llegue a su sitio de acci&oacute;n (44). Es muy importante mantener la vigilancia del malati&oacute;n debido a los reportes sobre resistencia cruzada entre piretroides y este organofosforado (42). Se sugiere alternar o rotar su uso con otros insecticidas en situaciones de epidemias y probar otros tipos de control en situaciones no epid&eacute;micas, como el control biol&oacute; gico o el f&iacute;sico, con el fin de disminuir la presi&oacute;n de selecci&oacute;n que se ha venido generando con el uso del malati&oacute;n desde hace m&aacute;s de tres d&eacute;cadas para el control del dengue en Colombia (7). </p>     <p>La vigilancia de los niveles de sensibilidad de las poblaciones de mosquitos vectores requiere de un seguimiento a lo largo del tiempo para clasificar las localidades que est&aacute;n en riesgo de resistencia incipiente, moderada o alta. Esto deber&iacute;a llevarse a cabo conjuntamente con pruebas de eficacia de los productos en campo, a fin de tomar mejores decisiones en cuanto al uso adecuado de los insecticidas y el manejo de la resistencia. </p>     <p>En conclusi&oacute;n, la determinaci&oacute;n de los grados de resistencia en poblaciones de <i>Ae. aegypti </i> en Caldas permiti&oacute; cuantificar la disminuci&oacute;n de la resistencia al temef&oacute;s despu&eacute;s de la suspensi&oacute;n de su uso. Estos resultados resaltan la importancia de mantener la vigilancia de los grados de resistencia de <i>Ae. aegypti </i> al temef&oacute;s dada la presi&oacute;n que su uso ha ejercido, y evidencian, asimismo, la posibilidad de revertir la resistencia a dicho insecticida suspendiendo su aplicaci&oacute;n y cambiando las estrategias de control, como lo hizo la Direcci&oacute;n Territorial de Salud de Caldas. El conocimiento sobre la estabilidad de la resistencia y su posible reversi&oacute;n al disminuir la presi&oacute;n de selecci&oacute;n es fundamental para el dise&ntilde;o de estrategias de manejo de la resistencia a los insecticidas. </p>     <p>    <center><b>Agradecimientos</b></center></p>     <p>A los funcionarios de la Secretar&iacute;a de Salud de Caldas, por su colaboraci&oacute;n y acompa&ntilde;amiento en la recolecci&oacute;n del material. A la comunidad de Chinchin&aacute;, La Dorada, Marquetalia, Victoria y Viterbo, por abrirnos las puertas de sus casas y permitir la recolecci&oacute;n del material. A Rub&eacute;n Albarrac&iacute;n, por la elaboraci&oacute;n del mapa. </p>     <p>    <center><b>Conflicto de intereses </b></center></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Los autores manifestamos no tener conflictos de intereses en esta publicaci&oacute;n. </p>     <p>    <center><b>Financiaci&oacute;n </b></center></p>     <p>Este proyecto cont&oacute; con la financiaci&oacute;n de la Direcci&oacute;n Territorial de Salud de Caldas y la Universidad Nacional de Colombia a trav&eacute;s de los convenios interadministrativos 00175 de 2007 y 00704 de 2009, y de Colciencias por medio del Programa de Intercambio Internacional de Investigadores e Innovadores en el marco de proyectos de investigaci&oacute;n conjunta, 2011, c&oacute;digo CO/04/11. </p>     <p>Correspondencia: Martha L. Qui&ntilde;ones, Departamento de Salud P&uacute;blica, Facultad de Medicina, Avenida Carrera 30 N° 45-03, Bogot&aacute;, D.C., Colombia Tel&eacute;fono: (571) 316 5000, extensi&oacute;n 15078 <a href="mailto:mlquinonesp@unal.edu.co">mlquinonesp@unal.edu.co</a></p>     <p>    <center><b>Referencias </b></center></p>     <!-- ref --><p>1. <b>Gubler DJ. </b>Dengue and dengue hemorrhagic fever. Semin Pediatr Infect Dis. 1997;8:3-9.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000100&pid=S0120-4157201500010000700001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>2. <b>Vega-R&uacute;a A, Zouache K, Girod R, Failloux AB, Louren&ccedil;o- de-Oliveira R. </b> High vector competence of <i>Aedes aegypti </i> and <i>Aedes albopictus </i> from ten American countries as a crucial factor of the spread of Chikungunya. J Virol. 2014;88:6294-306. <a href="http://dx.doi.org/10.1128/JVI.00370-14JVI.00370-14" target="_blank">http://dx.doi.org/10.1128/JVI.00370-14JVI.00370-14</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000102&pid=S0120-4157201500010000700002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>3. <b>Pan American Health Organization. </b> Number of reported cases of Chikungunya fever in the Americas, by country or territory 2013-2014 (to week noted). Chikungunya fever in the Americas. Cumulative cases epidemiological week/EW 30. Fecha de consulta: 25 de julio de 2014. Disponible en: <a href="file:///C:/Users/biomedica/Downloads/2014-jul-25-cha-CHIKV-casos-autoc-import-se-30%20(1).pdf" target="_blank">file:///C:/Users/biomedica/Downloads/2014-jul-25-cha-CHIKV-casos-autoc-import-se-30%20(1).pdf</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000103&pid=S0120-4157201500010000700003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>4. <b>Padilla JC, Rojas DP, S&aacute;enz-G&oacute;mez R. </b> Dengue en Colombia: epidemiologia de la reemergencia a la hiper- endemia. Bogot&aacute;: Gu&iacute;as de Impresi&oacute;n Ltda.; 2012. 250 p.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000105&pid=S0120-4157201500010000700004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>5. <b>Ministerio de Salud. </b> Informe situaci&oacute;n del dengue . Fecha de consulta: 3 de junio de 2014. Disponible en: <a href="http://www.minsalud.gov.co/Documentos%20y%20Publicaciones/INFORME%20SITUACION%20DE%20DENGUE.pdf" target="_blank">http://www.minsalud.gov.co/Documentos%20y%20Publicaciones/INFORME%20SITUACION%20DE%20DENGUE.pdf</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000107&pid=S0120-4157201500010000700005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>6. <b>D irecci&oacute;n Territorial de Salud de Caldas. </b> Informe comportamiento del dengue en el departamento de Caldas 2007-2012. Fecha de consulta: 11 de marzo de 2014. Disponible en: <a href="http://190.26.195.115/saludpublica/An%C3%A1lisis%20por%20evento%20de%20inter%C3%A9s%20en%20salud%20p%C3%BAblica%202007-%202012/DENGUE.pdf" target="_blank">http://190.26.195.115/saludpublica/An%C3%A1lisis%20por%20evento%20de%20inter%C3%A9s%20en%20salud%20p%C3%BAblica%202007-%202012/DENGUE.pdf</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000109&pid=S0120-4157201500010000700006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>7. <b>Ministerio de la Protecci&oacute;n Social, Instituto Nacional de Salud, Organizaci&oacute;n Panamericana de la Salud. </b> Gesti&oacute;n para la vigilancia entomol&oacute;gica y control de la transmisi&oacute;n del dengue. Fecha de consulta: 26 de julio de 2014. Disponible en: <a href="http://www.ins.gov.co/temas-de-interes/Dengue/03%20Vigilancia%20entomo%20dengue.pdf" target="_blank">http://www.ins.gov.co/temas-de-interes/Dengue/03%20Vigilancia%20entomo%20dengue.pdf</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000111&pid=S0120-4157201500010000700007&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p>8. <b>Mazzari MB. </b> Revisi&oacute;n del estado actual de la resistencia en <i>Aedes aegypti </i> a insecticidas utilizados en salud p&uacute;blica. Bol Dir Malariol Saneam Ambient 1995;35:91-5.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000113&pid=S0120-4157201500010000700008&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>9. <b>Grisales N, Poupardin R, G&oacute;mez S, Fonseca-Gonz&aacute;lez I, Ranson H, Lenhart A. </b> Temephos resistance in <i>Aedes </i><i>aegypti </i>in Colombia compromises dengue vector control. PLoS Negl Trop Dis. 2013;7:e2438. <a href="http://dx.doi.org/10.1371/journal.pntd.0002438" target="_blank">http://dx.doi.org/10.1371/journal.pntd.0002438</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000115&pid=S0120-4157201500010000700009&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>10. <b>Ocampo C, Salazar M, Mina N, Mcallister J, Brogdon </b><b>W. </b> Insecticide resistance status of <i>Aedes aegypti </i> in 10 localities in Colombia. Acta Trop. 2011;118:37-44. <a href="http://dx.doi.org/10.1016/j.actatropica.2011.01.007" target="_blank">http://dx.doi.org/10.1016/j.actatropica.2011.01.007</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000116&pid=S0120-4157201500010000700010&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>11. <b> Santacoloma L, Chaves B, Brochero HL. </b> Estado de la susceptibilidad de poblaciones naturales del vector del dengue a insecticidas en trece localidades de Colombia. Biom&eacute;dica. 2012;32:333-43. <a href="http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v32i3.680" target="_blank">http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v32i3.680</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000117&pid=S0120-4157201500010000700011&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>12. <b>Seccacini E, Lucia A, Zerba E, Licastro S, Masuh H. </b><i>Aedes aegypti </i>resistance to temephos in Argentina. J Am Mosq Control Assoc. 2008;24:608-9.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000118&pid=S0120-4157201500010000700012&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>13. <b>Llin&aacute;s GA, Seccacini E, Gardenal CN, Licastro S. </b>Current resistance status to temephos in <i>Aedes aegypti </i>from different regions of Argentina. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2010; 105:113-6. <a href="http://dx.doi.org/10.1590/S0074-02762010000100019" target="_blank">http://dx.doi.org/10.1590/S0074-02762010000100019</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000120&pid=S0120-4157201500010000700013&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>14. <b>Lima JB, Da-Cunha MP, Da Silva RC, Galardo AK, Soares Sda S, Braga IM, <i>et al. </i></b>Resistance of <i>Aedes aegypti </i> to organophosphates in several municipalities in the State of Rio de Janeiro and Esp&iacute;rito Santo, Brazil. Am J Trop Med Hyg. 2003;68:329-33.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000121&pid=S0120-4157201500010000700014&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p>15. <b>Montella I, Martins A, Viana P, Lima J, Braga I, Valle D. </b> Insecticide resistance mechanisms of Brazilian <i>Aedes aegypti </i>populations from 2001 to 2004. Am J Trop Med Hyg <i>. </i>2007;77:467-77.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000123&pid=S0120-4157201500010000700015&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>16. <b> Araujo AP, Araujo-Diniz DF, Helvecio E, de Barros RA, de Oliveira CM, Ayres CF, <i>et al. </i></b>The susceptibility of <i>Aedes aegypti </i> populations displaying temephos resistance to <i>Bacillus thuringiensis israelensis </i>: A basis for management. Parasit Vectors. 2013; 6 :297-305. <a href="http://dx.doi.org/10.1186/1756-3305-6-297" target="_blank">http://dx.doi.org/10.1186/1756-3305-6-297</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000125&pid=S0120-4157201500010000700016&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>17. <b>Gambarra WP, Martins WF, de Lucena Filho ML, de Albuquerque IM, Apolin&aacute;rio OK, Beserra EB. </b>Spatial distribution and esterase activity in populations of Aedes ( Stegomyia ) aegypti (Linnaeus) (Diptera: Culicidae) resistant to temephos. Rev Soc Bras Med Trop. 2013;46:178-84. <a href="http://dx.doi.org/10.1590/0037-8682-1727-2013" target="_blank">http://dx.doi.org/10.1590/0037-8682-1727-2013</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000126&pid=S0120-4157201500010000700017&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>18. <b> Rodr&iacute;guez MM, Bisset JA, Fern&aacute;ndez D, P&eacute;rez O. </b> Resistencia a insecticidas en larvas y adultos de <i>Aedes aegypti: </i>prevalencia de la esterasa A4 asociada con la resistencia a temephos. Rev Cubana Med Trop. 2004;56:54-60.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000127&pid=S0120-4157201500010000700018&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>19. <b> Rodr&iacute;guez MM, Bisset JA, Fern&aacute;ndez D. </b> Levels of insec ticide resistance and resistance mechanisms in <i>Aedes </i><i>aegypti </i>from some Latin American Countries. J Am Mosq Control Assoc. <i></i>2007;23:420-9.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000129&pid=S0120-4157201500010000700019&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>20. <b>Bisset JA, Rodr&iacute;guez MM, San Mart&iacute;n JL, Romero JE, Montoya R. </b> Evaluaci&oacute;n de la resistencia a insecticidas de una cepa de <i>Aedes aegypti </i> de El Salvador. Rev Panam Salud P&uacute;blica. 2009;26:229-34. <a href="http://dx.doi.org/10.1590/S1020-49892009000900007" target="_blank">http://dx.doi.org/10.1590/S1020-49892009000900007</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000131&pid=S0120-4157201500010000700020&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>21. <b> Fonseca-Gonz&aacute;lez I, Qui&ntilde;ones ML, Lenhart A, Brogdon WG. </b>Insecticide resistance status of <i>Aedes aegypti </i>(L.) from Colombia. Pest Manag Sci. <i></i>2010;67:430-7. <a href="http://dx.doi.org/10.1002/ps.2081" target="_blank">http://dx.doi.org/10.1002/ps.2081</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000132&pid=S0120-4157201500010000700021&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>22. <b>Bisset JA, Rodr&iacute;guez MM, C&aacute;ceres L. </b> Niveles de resistencia a insecticidas y sus mecanismos en dos cepas de <i>Aedes aegypti </i>de Panam&aacute;. Rev Cubana Med Trop. <i></i>2003;55:191-5.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000133&pid=S0120-4157201500010000700022&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>23. <b>&Aacute;lvarez LC, Ponce G, Oviedo M, L&oacute;pez B, Flores AE. </b>Resistance to malathion and deltamethrin in <i>Aedes aegypti </i>(Diptera: Culicidae) from western Venezuela. J Med Entomol. <i></i>2013;50:1031-9. <a href="http://dx.doi.org/10.1603/ME12254" target="">http://dx.doi.org/10.1603/ME12254</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000135&pid=S0120-4157201500010000700023&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>24. <b>Santacoloma L, Chaves B, Brochero HL. </b>Susceptibilidad de <i>Aedes aegypti </i>a DDT, deltametrina y lambdacialotrina en Colombia. Rev Panam Salud P&uacute;blica. 2010; 27:66-73. <a href="http://dx.doi.org/10.1590/S1020-49892010000100010" target="_blank">http://dx.doi.org/10.1590/S1020-49892010000100010</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000136&pid=S0120-4157201500010000700024&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>25. <b>Dusfour I, Thalmensy V, Gaborit P, Issaly J, Carinci R, Girod R. </b>Multiple insecticide resistance in <i>Aedes </i><i>aegypti </i>(Diptera: Culicidae) populations compromises the effectiveness of dengue vector control in French Guiana. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2011;106:346-52. <a href="http://dx.doi.org/10.1590/S0074-02762011000300015" target="_blank">http://dx.doi.org/10.1590/S0074-02762011000300015</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000137&pid=S0120-4157201500010000700025&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>26. <b>Flores AE, Ponce G, Silva BG, Guti&eacute;rrez SM, Bobadilla C, L&oacute;pez B, <i>et al </i>. </b>Wide spread cross resistance to pyrethroids in <i>Aedes aegypti </i>(Diptera: Culicidae) from Veracruz State, M&eacute;xico. J Econ Entomol. 2013;106:959-69. <a href="http://dx.doi.org/10.1603/EC12284" target="_blank">http://dx.doi.org/10.1603/EC12284</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000138&pid=S0120-4157201500010000700026&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>27. <b>Vargas F, C&oacute;rdova O, Alvarado A. </b>Determinaci&oacute;n de la resistencia a insecticidas en <i>Aedes aegypti, Anopheles albimanus </i>y <i>Lutzomyia peruensis </i>procedentes del norte Peruano. Rev Peru Med Exp Salud P&uacute;blica. 2006;23:259-64.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000139&pid=S0120-4157201500010000700027&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>28. <b>Bisset JA, Rodr&iacute;guez MM, Molina D, D&iacute;az C, Soca LA. </b>Esterasas elevadas como mecanismo de resistencia a insecticidas organofosforados en cepas de <i>Aedes aegypti </i>. Rev Cubana Med Trop. 2001;53:37-43.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000141&pid=S0120-4157201500010000700028&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p>29. <b>Gerberg EJ. </b> Manual for mosquito rearing and experimental techniques. Am Mosq Control Assoc. 1970;5:1-9 &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000143&pid=S0120-4157201500010000700029&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>30. <b>World Health Organization. </b> Instructions for determining the susceptibility or resistance of mosquito larvae to insecticides. WHO/VBC/ 81.807. Geneva: WHO; 1981. p. 6.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000144&pid=S0120-4157201500010000700030&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>31. <b>Brogdon WG, McAllister JC. </b>Simplification of adult mosquito bioassays through use of time -mortality determinations in glass bottles. 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J Am Mosq Control Assoc <i>. </i>1987;3:302-3.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000150&pid=S0120-4157201500010000700033&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p>34. <b> World Health Organization. </b> Test procedures for insecticide resistance monitoring in malaria vector mosquitoes. Geneva: WHO; 2013. p.30.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000152&pid=S0120-4157201500010000700034&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p>35. <b>Mazarri MB, Georghiou GP. </b> Characterization of resistance to organophosphate, carbamate, and pyrethroid insecticides in field populations of <i>Aedes aegypti </i>from Venezuela. J Am Mosq Control Assoc <i>. </i>1995;11:315-22.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000154&pid=S0120-4157201500010000700035&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p>36. <b>World Health Organization. </b> Global plan for insecticide resistance management in malaria vectors (GPIRM). <i></i>Geneva: WHO; 2012. Fecha de consulta: 19 de junio de 2014. Disponible en: <a href="http://www.who.int/malaria/vector_control/ivm/gpirm/en/index.html" target="_blank">http://www.who.int/malaria/vector_control/ivm/gpirm/en/index.html</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000156&pid=S0120-4157201500010000700036&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>37. <b>Rehan A, Saleem MA, Freed S. </b> Baseline susceptibility and stability of insecticide resistance of <i>Spodoptera lityra (F.) (Lepidoptera:Noctuidae </i>) in the absence of selection pressure. Pakistan J. Zool. 2011;43:973-8.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000158&pid=S0120-4157201500010000700037&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p>38. <b> Yang Y, Li Y, Wu Y. </b> Current status of insecticide resistance in <i>Helicoverpa armigera </i> after 15 years of Bt cotton planting in China. J Econ Entomol. 2013;106:375-81.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000160&pid=S0120-4157201500010000700038&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>39. <b>Raghavendra K, Vema V, Srivastava HC, Gunasekaran K, Sreehari U, Dash AP. </b>Persistance of DDT, malathion &amp; deltamethrin resistance in <i>Anopheles culicifascies </i> after their sequential withdrawal from indoor residual spraying in Surat district, India. Indian J Med Res. 2010;132:260-4 &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000162&pid=S0120-4157201500010000700039&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>40. <b>Melo-Santos MA, Varjal-Melo JJ, Ara&uacute;jo AP, Gomes TC, Paiva MH, Regis LN, <i>et al </i>. <i></i></b>Resistance to the organophosphate temephos: Mechanisms, evolution and reversion in an <i>Aedes aegypti </i> laboratory strain from Brazil. 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Parasit Vectors. 2011;4:5. <a href="http://dx.doi.org/10.1186/1756-3305-4-5" target="_blank">http://dx.doi.org/10.1186/1756-3305-4-5</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000164&pid=S0120-4157201500010000700041&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>42. <b> Rodr&iacute;guez MM, Bisset JA, D&iacute;az C, Soca LA. </b>Cross resistance to pyrethroids in <i>Aedes aegypti </i>from Cuba induced by the selection with organophosphate malathion . Rev Cubana Med Trop. 2003;55:105-11.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000165&pid=S0120-4157201500010000700042&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>     <!-- ref --><p>43. <b>Rodr&iacute;guez MM, Bisset JA, Mil&aacute; LH, Calvo E, D&iacute;az C, Soca LA. </b> Niveles de resistencia a insecticidas y sus mecanismos en una cepa de <i>Aedes aegypti </i>de Santiago de Cuba. 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