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<publisher-name><![CDATA[Universidad Nacional de Colombia, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología]]></publisher-name>
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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[MICROBIOTA RIZOSFÉRICA DE Espeletia spp. DE LOS PÁRAMOS DE SANTA INÉS Y DE FRONTINO-URRAO EN ANTIOQUIA, COLOMBIA]]></article-title>
<article-title xml:lang="en"><![CDATA[Rizospheric Microbiota of Espeletia spp. from Santa Inés and Frontino-Urrao Paramos in Antioquia, Colombia]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[The frailejón (Espeletia spp.) is the emblematic shrub of the paramo. This is an important ecosystem because they are sources of water and organic matter, and are inhabited by a high number of endemic biological species. Considering the importance of the microbiota in soil structure and nutrients availability to support plant growth, we assessed the cultivable microbial populations in Espeletia spp. rhizosphere in Santa Inés and Frontino-Urrao paramos, including functional groups with important role in cycling nutrients. The soil pH was strongly acid in both sites and the organic matter and nitrogen contents were highest in Frontino-Urrao soil. Nevertheless, the microbial abundance was similar in these sites except the content of endospore-forming bacteria, which was 3.8 fold large in Frontino-Urrao. Phosphate solubilizing and cellulolytic microorganisms were found in both sites. Those microorganisms would be used for soil restoration processes in paramos degraded by mining, livestock or agriculture.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[   <font size="2" face="Verdana">      <P>doi:<a href="http://dx.doi.org/10.15446/abc.v20n1.42827" target="_blank">10.15446/abc.v20n1.42827</a>.</P>      <P align="right">Art&iacute;culo de investigaci&oacute;n</P>      <P align="center"><font size="4" face="Verdana"><B>MICROBIOTA RIZOSF&Eacute;RICA DE <I>Espeletia </I>spp. DE LOS P&Aacute;RAMOS DE SANTA IN&Eacute;S Y DE FRONTINO-URRAO EN ANTIOQUIA, COLOMBIA </B></font></P>      <P align="center"><font size="3" face="Verdana"><B>Rizospheric Microbiota of <I>Espeletia</I> spp. from Santa In&eacute;s and Frontino-Urrao Paramos in Antioquia, Colombia </B></font></P>      <P><B>Pilar Ximena LIZARAZO-MEDINA<Sup>1</Sup>, Diana G&Oacute;MEZ-V&Aacute;SQUEZ<Sup>1</Sup>. </B></P>      <P><Sup>1</Sup> Instituto de Biolog&iacute;a, Universidad de Antioquia. Calle 67 # 53-108, oficina 7- 218. Medell&iacute;n, Colombia.    <BR> <B><I> For correspondence. </I></B><a href="mailto:pilarximenalizarazo.udea@gmail.com">pilarximenalizarazo.udea@gmail.com</a> </P>      <P>Received 27th April 2014, Returned for revision 13th June 2014, Accepted 12th October 2014.</P>      <P><B>Citation / Citar este art&iacute;culo como:</B> Lizarazo-Medina PX, G&oacute;mez-V&aacute;squez D. Microbiota rizosf&eacute;rica de <I>Espeletia </I>spp. de los p&aacute;ramos de Santa In&eacute;s y de Frontino-Urrao en Antioquia, Colombia. Acta biol. Colomb. 2015;20(1):175-182. doi: <a href="http://dx.doi.org/10.15446/abc.v20n1.42827" target="_blank">http://dx.doi.org/10.15446/abc.v20n1.42827</a>.</P>  <HR>      ]]></body>
<body><![CDATA[<P><B>RESUMEN </B></P>      <P>El frailej&oacute;n cuyo nombre cient&iacute;fico es <I>Espeletia </I>spp., es considerado el arbusto emblema de los p&aacute;ramos, un ecosistema de importancia debido a que son fuente de agua y de materia org&aacute;nica, donde se han registrado un alto n&uacute;mero de especies biol&oacute;gicas end&eacute;micas. Considerando la relevancia de la microbiota en la estructuraci&oacute;n del suelo y en la disponibilidad de los nutrientes como soporte para el crecimiento vegetal, se determinaron las poblaciones microbianas cultivables de importancia funcional como dinamizadora de nutrientes en el suelo rizosf&eacute;rico de <I>Espeletia</I> spp. en el p&aacute;ramo de Santa In&eacute;s y en el de Frontino-Urrao en Antioquia. Los suelos se caracterizaron por ser &aacute;cidos y en el p&aacute;ramo de Frontino-Urrao se reportaron los mayores contenidos de materia org&aacute;nica y nitr&oacute;geno. La abundancia de microorganismos fue similar en los dos p&aacute;ramos y se registr&oacute; &uacute;nicamente variaci&oacute;n en la abundancia de bacterias formadoras de endospora, que superaron en Frontino-Urrao 3,8 veces el contenido respecto al de Santa In&eacute;s. En ambos p&aacute;ramos se reportaron bacterias y hongos solubilizadores de fosfato y degradadores de celulosa que pueden ser empleados en procesos de restauraci&oacute;n de suelos paramunos degradados por la miner&iacute;a, la ganader&iacute;a o la agricultura.</P>      <P><B><I>Palabras clave: </I></B><I>Espeletia </I>spp., microbiota, p&aacute;ramos, riz&oacute;sfera, suelo.</P>      <P><B>ABSTRACT </B></P>      <P>The frailej&oacute;n (<I>Espeletia </I>spp.) is the emblematic shrub of the paramo. This is an important ecosystem because they are sources of water and organic matter, and are inhabited by a high number of endemic biological species. Considering the importance of the microbiota in soil structure and nutrients availability to support plant growth, we assessed the cultivable microbial populations in <I>Espeletia</I> spp. rhizosphere in Santa In&eacute;s and Frontino-Urrao paramos, including functional groups with important role in cycling nutrients. The soil pH was strongly acid in both sites and the organic matter and nitrogen contents were highest in Frontino-Urrao soil. Nevertheless, the microbial abundance was similar in these sites except the content of endospore-forming bacteria, which was 3.8 fold large in Frontino-Urrao. Phosphate solubilizing and cellulolytic microorganisms were found in both sites. Those microorganisms would be used for soil restoration processes in paramos degraded by mining, livestock or agriculture.</p>      <P><B><I>Keywords</I>: </B><I>Espeletia </I>spp., microbiota, paramos, rhizosphere, soil. </B></P>  <HR>      <P><B>INTRODUCCI&Oacute;N </B></P>      <P>Las comunidades microbianas del suelo se establecen de acuerdo con las caracter&iacute;sticas del h&aacute;bitat, y son determinadas por la ubicaci&oacute;n geogr&aacute;fica y los factores f&iacute;sico-qu&iacute;micos (Djukic <I>et al.</I>, 2010; Zhang <I>et al.</I>, 2013). La cobertura vegetal y espec&iacute;ficamente la naturaleza qu&iacute;mica de los exudados radiculares es considerada el elemento m&aacute;s determinante en el ensamble de las comunidades microbianas rizosf&eacute;ricas, lo cual se debe a que estas secreciones generan un ambiente selectivo altamente competitivo mediado por el potencial para ser metabolizados (Yergeau <I>et al.</I>, 2014).</P>      <P>El ecosistema paramuno est&aacute; ubicado a elevadas altitudes, por encima de los 3000 m s.n.m. en las cumbres de las monta&ntilde;as tropicales (Cuatrecasas, 1958). Debido a su localizaci&oacute;n altitudinal se consideran islas biogeogr&aacute;ficas con condiciones ambientales extremas para el desarrollo de la vida, caracteriz&aacute;ndose por una humedad relativa que var&iacute;a entre 70-85%, bajas temperaturas, valores de precipitaci&oacute;n alrededor de 3000 mm anuales, bajas tasas de evapotranspiraci&oacute;n y variaciones notorias de radiaci&oacute;n solar entre los periodos de lluvia y sequ&iacute;a (D&iacute;az-Granados <I>et al.</I>, 2005). Estos aspectos han condicionado el establecimiento de formas de vida con adaptaciones morfol&oacute;gicas, fisiol&oacute;gicas y de comportamiento espec&iacute;ficas que ha dado lugar a un alto grado de endemismo (Morales y Est&eacute;vez, 2006).</P>      <P>Los p&aacute;ramos colombianos han sido ampliamente descritos en cuanto a su fauna y flora (Rangel, 2000; Pedraza-Pe&ntilde;alosa <I>et al.</I>, 2004), sin embargo, el suelo, su microbiota y el papel que &eacute;sta desempe&ntilde;a en un ecosistema tan estrat&eacute;gico para la generaci&oacute;n de agua ha sido poco investigado. Los escasos estudios microbiol&oacute;gicos han estado restringidos a los p&aacute;ramos del departamento de Cundinamarca, en la cordillera oriental, y han empleado metodolog&iacute;as dependientes de cultivo. En estos trabajos se determinaron tanto poblaciones de hongos rizosf&eacute;ricos de <I>Espeletia killipii</I> y del suelo, como la comunidad bacteriana en los p&aacute;ramos de Guasca y Cruz Verde (Chitiva <I>et al.</I>, 2007; Arias y Pi&ntilde;eros 2008; Benavides y Hermida, 2008), y la presencia de bacterias diazotr&oacute;ficas y de hongos solubilizadores de f&oacute;sforo (Moratto <I>et al.</I>, 2005), as&iacute; como la microbiota cultivable asociada a la hojarasca (Bernal <I>et al.</I>, 2006), en el p&aacute;ramo de Guerrero. Recientemente, Monta&ntilde;a <I>et al.</I>, (2011) establecieron empleando una aproximaci&oacute;n metagen&oacute;mica la diversidad bacteriana del suelo de bosque alto andino en el Parque Nacional Natural de los Nevados a 3464 m s.n.m., determinando los<I> phyla</I> Proteobacteria y Actinobacteria como los grupos m&aacute;s abundantes.</P>      ]]></body>
<body><![CDATA[<P>En el suelo, la microbiota interviene en procesos dinamizadores de nutrientes como la fijaci&oacute;n del nitr&oacute;geno, la solubilizaci&oacute;n de fosfatos y la degradaci&oacute;n de compuestos carbonados, influyendo en el contenido de materia org&aacute;nica, la estabilidad y fertilidad del suelo, contribuyendo al establecimiento y desarrollo de las comunidades vegetales (Kim <I>et al.</I>, 2011; Waring <I>et al.</I>, 2014). Con el fin de conocer la abundancia de microorganismos cultivables y determinar grupos funcionales en el suelo rizosf&eacute;rico paramuno, en este trabajo se determin&oacute; la concentraci&oacute;n celular bacteriana y f&uacute;ngica cultivable asociada a la riz&oacute;sfera de <I>Espeletia </I>spp. en los p&aacute;ramos Santa In&eacute;s y Frontino-Urrao, en Antioquia, y se evalu&oacute; su potencial en la degradaci&oacute;n de celulosa y solubilizaci&oacute;n de fosfatos.</P>      <P><B>MATERIALES Y M&Eacute;TODOS    <BR> Sitios de estudio </B></P>      <P>Las &aacute;reas de estudio se encuentran localizadas en el departamento de Antioquia, el complejo paramuno de Santa In&eacute;s (6&deg;37.919&#39; N y 75&deg;38.669&#39; W a 3216 m s.n.m.) ubicado en el municipio de Belmira sobre la Cordillera Central, y el complejo Frontino-Urrao (6&deg;27.349&#39; N y 7&deg;5.313&#39; W a 3580 m.s.n.m.) ubicado en el municipio de Urrao sobre la Cordillera Occidental.</P>      <P>Se realizaron dos muestreos en cada sitio durante el a&ntilde;o 2012, en febrero y junio, en el p&aacute;ramo de Santa In&eacute;s y durante marzo y mayo en Frontino-Urrao. Se hicieron recolectas aditivas de suelo riz&oacute;sferico de <I>Espeletia</I> spp., mediante un muestreo aditivo a partir del suelo adherido a la ra&iacute;z de 30 plantas seleccionadas al azar en cada sitio. Las muestras fueron almacenadas en recipientes de pl&aacute;stico est&eacute;riles y trasportadas bajo refrigeraci&oacute;n al laboratorio y mantenidas en estas condiciones hasta el momento del an&aacute;lisis.</P>      <P><B>Caracterizaci&oacute;n del sitio de muestreo </B></P>      <P>En cada sitio se realizaron mediciones de temperatura, humedad relativa e intensidad lum&iacute;nica a nivel de las hojas de los frailejones y del suelo utilizando un termohigr&oacute;metro (HANNA HI 8564) y un lux&oacute;metro (Traceable&reg; Dual-Range Light Meter). Adem&aacute;s, se registr&oacute; la altura y envergadura de los frailejones con el fin de caracterizar los individuos del &aacute;rea muestreada. Los an&aacute;lisis fisicoqu&iacute;micos del suelo consistieron en determinar la capacidad de intercambio cati&oacute;nico efectiva (CICE), el pH, el porcentaje de materia org&aacute;nica, contenido de nitr&oacute;geno y f&oacute;sforo, elementos menores como aluminio, azufre, boro, calcio, magnesio, potasio, sodio, hierro, cobre, manganeso, zinc y la textura.</P>      <P><B>Determinaci&oacute;n de la abundancia microbiana </B></P>      <P>La abundancia de los grupos microbianos se estableci&oacute; mediante el recuento de unidades formadoras de colonias por gramo de suelo (UFC g<Sup>-1</Sup>) sembradas en superficie (Koch, 1994). Se sembraron al&iacute;cuotas de las diluciones para determinar el contenido de bacterias heter&oacute;trofas totales (BHT) en agar nutritivo (AN: peptona de carne 5 g, extracto de carne 3 g y agar-agar 12 g/L), bacilos Gram negativos (BGN) en agar eosina azul de metileno (EMB: peptona 10 g, K<Sub>2</Sub>HPO<Sub>4</Sub> 2 g, lactosa 5 g, sacarosa 5 g, eosina amarillenta 0,4 g, azul de metileno 0,07 g y agar-agar 13,5 g/L) y para selecci&oacute;n de <I>Pseudomonas</I> spp. (P) se realiz&oacute; el cultivo en agar B base seg&uacute;n KING (proteosa peptona 20 g, MgSO<sub>4</sub> 1,5 g, K<sub>3</sub>PO<sub>4</sub>.3H<sub>2</sub>O 1,8 g, glicerina 10 g y agar-agar 10 g/L). La abundancia de bacterias aerobias formadores de endospora (BAFE) se estableci&oacute; al someter las diluciones a 80 &deg;C durante 20 min y posterior siembra para el recuento de colonias en medio tripticasa de soya (TSA: peptona de case&iacute;na 15 g, peptona de harina de soya 5 g, NaCl 5 g y agar-agar 15 g/L). Los cultivos se incubaron a temperatura ambiente y se realiz&oacute; el recuento de UFC g<Sup>-1</Sup> a las 48 horas.</P>      <P>El contenido de Actinobacterias (AB) se determin&oacute; mediante siembra de las diluciones en agar almid&oacute;n case&iacute;na (almid&oacute;n soluble 10 g, K<Sub>2</Sub>HPO<Sub>4 </Sub>2 g, NaCl 2 g, case&iacute;na 1 g, MgSO<sub>4</sub> 0,05 g, CaCO<sub>3</sub> 0,02 g, FeSO<sub>4</sub>.7H<sub>2</sub>O 0,01 g y agar-agar 15 g/L) y el recuento se hizo despu&eacute;s de 12 d&iacute;as de incubaci&oacute;n a temperatura ambiente. Finalmente, para realizar el recuento de hongos filamentosos (HF) y levaduras (HL) se inocularon al&iacute;cuotas de las diluciones en agar papa dextrosa (PDA: infusi&oacute;n de papa 4 g (infusi&oacute;n de 200 g de papas), glucosa 20 g y agar-agar 15 g/L) suplementado con gentamicina (0,05mg/mL) para inhibir el crecimiento de bacterias, el n&uacute;mero de UFC g<Sup>-1</Sup> se determin&oacute; a los cinco d&iacute;as de incubaci&oacute;n a temperatura ambiente.</P>      ]]></body>
<body><![CDATA[<P><B>Determinaci&oacute;n de la abundancia de grupos funcionales </B></P>      <P>Se determin&oacute; la abundancia de bacterias solubilizadoras de fosfato y degradadoras de celulosa <I>in vitro</I>. La cuantificaci&oacute;n de bacterias solubilizadoras de fosfato inorg&aacute;nico (BSP) se hizo sembrando al&iacute;cuotas de las diluciones en agar Pikovskaya (PVK: glucosa 10 g, extracto de levadura 0,5 g, Ca<Sub>3</Sub>(PO<Sub>4</Sub>)<Sub>2 </Sub>5 g, (NH<sub>4</sub>)<sub>2</sub>SO<sub>4</sub> 0,5 g, KCl 0,2 g, MgSO<sub>4</sub> 0,1 g, MnSO<sub>4</sub> 0,0001 g, FeSO<Sub>4</Sub> 0,0001 g y agar-agar 15 g/L). Despu&eacute;s de cinco d&iacute;as de incubaci&oacute;n se contaron las colonias positivas que fueron confirmadas como solubilizadoras de fosfato sembr&aacute;ndolas de manera individual en el mismo medio. En estas condiciones los microorganismos con capacidad de solubilizar el fosfato desarrollan un halo transparente alrededor de la colonia producto de esa acci&oacute;n enzim&aacute;tica.</P>      <P>El recuento de las bacterias celulol&iacute;ticas (BC) se realiz&oacute; en agar carboximetilcelulosa (CMC: NaNO<Sub>3 </Sub>2 g, K<Sub>2</Sub>HPO<Sub>4 </Sub>1 g, MgSO<Sub>4 </Sub>0,5 g, KCl 0,5 g, sal de CMC 2 g, Peptona 0,2 g y agar-agar 15 g/L). A los cinco d&iacute;as de incubaci&oacute;n, los morfotipos obtenidos en los recuentos fueron repicados individualmente en agar nutritivo (AN) para su conservaci&oacute;n, posterior a esto a las cajas de los recuentos se les adicion&oacute; lugol (KI 1,33%, I 0,66%). El lugol se intercala entre los enlaces de la mol&eacute;cula de celulosa y cuando hay ruptura de estos por acci&oacute;n de las celulasas microbianas se observa un halo traslucido alrededor de la colonia. Las colonias que presentaron halo fueron contadas como UFC g<Sup>-1</Sup> de bacterias celulol&iacute;ticas. Los aislados repicados en agar nutritivo fueron reinoculados individualmente en agar CMC para verificar y cuantificar esta actividad enzim&aacute;tica.</P>      <P>Para determinar el grado de actividad metab&oacute;lica se emple&oacute; el &iacute;ndice de actividad indicado en la f&oacute;rmula (Kumar y Narula, 1999):</P>      <p align="center"><a name="ec1"><img src="img/revistas/abc/v20n1/v20n1a18ec1.jpg"></a></p>      <P>Las colonias de bacterias celulol&iacute;ticas, solubilizadoras y de los hongos aislados, fueron sembradas individualmente por duplicado en agar CMC y PVK seg&uacute;n correspondiera. Despu&eacute;s de 72 horas a temperatura ambiente, se registr&oacute; el tama&ntilde;o de la colonia y del halo, en el caso de los hongos el di&aacute;metro de la colonia se midi&oacute; cada 24 horas estandariz&aacute;ndose como la medici&oacute;n de la actividad cuando la colonia present&oacute; 3 cm, momento en que se adicion&oacute; lugol y se midi&oacute; el halo.</P>      <P><B>An&aacute;lisis de datos </B></P>      <P>La determinaci&oacute;n de las diferencias entre y dentro de cada sitio de acuerdo con las variables ambientales, medidas en campo, se realizaron mediante pruebas de comparaci&oacute;n de medias (U de Mann Whitney) en IBM SPSS 20 Software. La abundancia de los grupos microbianos y funcionales fue determinada haciendo tres an&aacute;lisis de cada muestra de suelo, con cinco r&eacute;plicas de siembra por diluci&oacute;n cada uno, los valores reportados corresponden al valor promedio de los recuentos obtenidos para los dos muestreos.</P>      <P><B>RESULTADOS    <BR> Caracterizaci&oacute;n de los sitios de muestreo </B></P>      ]]></body>
<body><![CDATA[<P>La vegetaci&oacute;n en los sitios muestreados est&aacute; dominada por <I>Espeletia </I>spp., la distribuci&oacute;n y caracter&iacute;sticas de estos arbustos var&iacute;an en cada p&aacute;ramo. La cobertura fue m&aacute;s densa en el de Frontino-Urrao que en Santa In&eacute;s donde la altura es menor, con una media de 100 cm (28-177 cm), mientras que en Frontino-Urrao presentaron un promedio de 133 cm (27-235 cm). Adem&aacute;s, se observaron diferencias en la vegetaci&oacute;n acompa&ntilde;ante, en Frontino-Urrao predominaron individuos del g&eacute;nero <I>Sphagnum</I>, mientras gran parte del suelo del p&aacute;ramo de Santa In&eacute;s est&aacute; cubierto por pastizales.</P>      <P>Respecto a las condiciones clim&aacute;ticas evaluadas, temperatura, intensidad lum&iacute;nica y humedad, el test de medias indic&oacute; diferencias entre p&aacute;ramos (<I>p</I>&lt;0,05). En ambos sitios el comportamiento de las mediciones de temperatura e intensidad lum&iacute;nica en el momento del muestreo indicaron valores superiores en Santa In&eacute;s. A nivel rizosf&eacute;rico no hubo variaci&oacute;n respecto a la temperatura a la altura de las hojas. En cuanto a la humedad se registraron valores menores en el p&aacute;ramo de Santa In&eacute;s (<a href="#fig1">Fig. 1</a>).</P>      <p align="center"><a name="fig1"><img src="img/revistas/abc/v20n1/v20n1a18fig1.jpg"></a></p>      <P><B>Caracter&iacute;sticas fisicoqu&iacute;mica del suelo </B></P>      <P>El suelo en las dos localidades se caracteriz&oacute; por ser h&uacute;medo con textura franca, presentando variaciones en la coloraci&oacute;n, siendo m&aacute;s oscura en el p&aacute;ramo de Frontino-Urrao. Los suelos de los dos p&aacute;ramos antioque&ntilde;os se caracterizaron por ser fuertemente &aacute;cidos, el contenido de materia org&aacute;nica, nitr&oacute;geno y f&oacute;sforo fue tres o cuatro veces mayor en el p&aacute;ramo de Frontino-Urrao. Los valores de microelementos fueron mayores en esta localidad, destac&aacute;ndose las concentraciones de hierro, azufre, potasio, magnesio y manganeso (<a href="#tab1">Tabla 1</a>).</P>      <p align="center"><a name="tab1"><img src="img/revistas/abc/v20n1/v20n1a18tab1.jpg"></a></p>      <P><B>Abundancia de grupos microbianos </B></P>      <P>La abundancia de los grupos microbianos cultivables evaluados present&oacute; el mismo patr&oacute;n en los dos p&aacute;ramos. El grupo de bacilos Gram negativos fue el m&aacute;s abundante, seguido por levaduras, hongos filamentosos, <I>Pseudomonas </I>spp., BAFE y Actinobacterias. El grupo que present&oacute; la mayor variaci&oacute;n fue el de BAFE cuya concentraci&oacute;n fue 3,8 veces superior en Frontino-Urrao (<a href="#fig2">Fig. 2</a>). La relaci&oacute;n hongo:bacteria fue 0,45 en Santa In&eacute;s y 0,30 en Frontino-Urrao.</P>      <p align="center"><a name="fig2"><img src="img/revistas/abc/v20n1/v20n1a18fig2.jpg"></a></p>      <P>La abundancia relativa de los grupos microbianos present&oacute; variaciones entre los p&aacute;ramos (<a href="#fig3">Fig. 3</a>). Los bacilos Gram negativos representaron 12 puntos porcentuales m&aacute;s en Santa In&eacute;s que en Frontino-Urrao. Los grupos <I>Pseudomonas </I>spp. y hongos filamentosos fueron menores entre tres y cuatro puntos porcentuales en Santa In&eacute;s, mientras que las Actinobacterias fueron 0,3% superiores en Frontino-Urrao. El grupo de las levaduras present&oacute; la misma proporci&oacute;n en ambos p&aacute;ramos. Finalmente, fue notoria la diferencia en la abundancia relativa de BAFE, cinco veces mayor en Frontino-Urrao.</P>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><a name="fig3"><img src="img/revistas/abc/v20n1/v20n1a18fig3.jpg"></a></p>      <P><B>Abundancia de los grupos funcionales </B></P>      <P>La abundancia de microorganismos con potencial para solubilizar fosfatos y degradar la celulosa fue similar en ambos p&aacute;ramos: 2,51x10<Sup>5</Sup> UFC g<Sup>-1</Sup> en Santa In&eacute;s y 2,24x10<Sup>5</Sup> UFC g<Sup>-1</Sup> en Frontino-Urrao, valores que corresponden al 19,5% y 14,4% del recuento de bacterias heter&oacute;trofas totales, respectivamente. Las bacterias celulol&iacute;ticas registraron recuentos de 1,59x10<Sup>5</Sup> UFC g<Sup>-1</Sup> y 1,52x10<Sup>5</Sup> UFC g<Sup>-1</Sup> en Santa In&eacute;s y Frontino-Urrao, respectivamente; el grupo de bacterias solubilizadoras de fosfatos con 9,23x10<Sup>4</Sup> UFC g<Sup>-1</Sup> en Santa In&eacute;s y 7,13x10<Sup>4</Sup> UFC g<Sup>-1</Sup> en Frontino-Urrao.</P>      <P>A partir del suelo del p&aacute;ramo de Santa In&eacute;s se obtuvieron 58 aislados celulol&iacute;ticos, 23 bacterianos (12 bacilos Gram positivos y 11 bacilos Gram negativos) y 35 f&uacute;ngicos (63,6% del total de aislados). En total, 48 aislados del p&aacute;ramo de Frontino-Urrao presentaron actividad celulol&iacute;tica, 20 bacterianos (11 bacilos Gram positivos y 9 bacilos Gram negativos) y 28 f&uacute;ngicos (68,3% del total de aislados). Los hongos presentaron &iacute;ndices de hidr&oacute;lisis bajos, entre 1,1 y 2,2; mientras esta capacidad metab&oacute;lica en los aislados bacterianos fue superior entre 1,3 y 14,5 (<a href="#fig4">Fig. 4a</a>).</P>      <p align="center"><a name="fig4"><img src="img/revistas/abc/v20n1/v20n1a18fig4.jpg"></a></p>      <P>En total fueron aislados 13 microorganismos solubilizadores de fosfato del p&aacute;ramo de Santa In&eacute;s, 12 bacterianos (11 Gram negativos y 1 Gram positivo) y un f&uacute;ngico. A partir de la muestra de Frontino-Urrao fueron aislados 12 microorganismos fosfato solubilizadores, 11 bacterianos (todos Gram negativos) y 1 f&uacute;ngico. El &iacute;ndice de solubilizaci&oacute;n de los hongos fue de 1,1 y 1,2 mientras la capacidad metab&oacute;lica de los aislados bacterianos fluct&uacute;a entre 1,1 y 2,2 (<a href="#fig4">Fig. 4b</a>).</P>      <P><B>DISCUSI&Oacute;N </B></P>      <P>Se caracteriz&oacute; a nivel de los ecosistemas paramunos, poco explorados microbiol&oacute;gicamente, las condiciones clim&aacute;ticas, propiedades f&iacute;sicoqu&iacute;micas del suelo y la abundancia de la comunidad microbiana de grupos espec&iacute;ficos y funcionales asociada a la riz&oacute;sfera de <I>Espeletia </I>sp., en dos p&aacute;ramos ubicados en cordilleras diferentes. Los sitios presentaron caracter&iacute;sticas particulares de acuerdo a las variables clim&aacute;ticas y las propiedades fisicoqu&iacute;micas del suelo. Los suelos de los p&aacute;ramos se caracterizaron por ser fuertemente &aacute;cidos, como ya hab&iacute;a sido reportado en los p&aacute;ramos alto andinos (D&iacute;az-Granados <I>et al.</I>, 2005). En los contenidos de materia org&aacute;nica y nitr&oacute;geno se presentaron caracter&iacute;sticas diferenciales, los registros de suelos de p&aacute;ramos han indicado que los valores altos de materia org&aacute;nica se deben a que la descomposici&oacute;n de la hojarasca se ralentiza como consecuencia de las bajas temperaturas (D&iacute;az-Granados <I>et al.</I>, 2005). En el p&aacute;ramo de Frontino-Urrao el contenido de materia org&aacute;nica fue mayor y fue donde tambi&eacute;n se reportaron los valores de temperatura m&aacute;s bajos. En este estudio la temperatura a nivel de la riz&oacute;sfera no present&oacute; diferencias respecto a la temperatura registrada a la altura de las hojas.</P>      <P>Los <I>phyla</I> Acidobacteria, Proteobacteria y Actinobacteria han sido reportados como los m&aacute;s abundantes en suelo de alta monta&ntilde;a seg&uacute;n las t&eacute;cnicas de secuenciaci&oacute;n masiva (Chu <I>et al.</I>, 2010; Monta&ntilde;a <I>et al.</I>, 2011). Las Acidobacterias son un <I>phylum</I> dif&iacute;cil de aislamiento en el laboratorio, por lo que en estudios empleando metodolog&iacute;as dependientes de cultivo es com&uacute;n &uacute;nicamente el reporte de individuos de los grupos Firmicutes, Proteobacteria y Actinobacteria, los cuales, por lo general son de f&aacute;cil aislamiento en las condiciones de cultivo convencionales. Estos tres <I>phyla</I> tambi&eacute;n fueron registrados en este estudio (Lyngwi <I>et al.</I>, 2013).</P>      <P>Los bacilos Gram negativos determinados aqu&iacute; se seleccionaron por su capacidad de crecer en agar EMB, en el cual se desarrollan representantes del <I>phylum</I> Proteobacteria. La abundancia de este <I>phylum</I> ha sido explicada por su diversidad metab&oacute;lica, fisiol&oacute;gica y su relevante intervenci&oacute;n en los ciclos del carbono, nitr&oacute;geno y azufre (Spain <I>et al.</I>, 2009). En la riz&oacute;sfera de <I>Espeletia </I>spp. de los dos p&aacute;ramos estudiados, los bacilos Gram negativos fueron el grupo m&aacute;s abundante, con una fracci&oacute;n significativa de representantes del g&eacute;nero <I>Pseudomonas, </I>del grupo gamma-Proteobacteria<I>. </I>Estas bacterias se han reportado tambi&eacute;n en suelos con cultivos agr&iacute;colas y se caracterizan por descomponer la materia org&aacute;nica, hacer disponible el f&oacute;sforo y por producir compuestos que promueven el crecimiento de las plantas. Sin embargo, algunas especies se han reportado como fitopat&oacute;genas (Kim <I>et al.</I>, 2011).</P>      ]]></body>
<body><![CDATA[<P>El grupo microbiano cuya contenido registr&oacute; diferencias en los p&aacute;ramos estudiados fue el de los BAFE, cuya caracter&iacute;stica de formar endospora ha sido restringida a miembros del <I>phylum </I>Firmicutes, entre los cuales se destaca el g&eacute;nero <I>Bacillus. </I>Este g&eacute;nero es el m&aacute;s abundante en suelo, sus especies presentan un crecimiento como saprofitas o como simbiontes, comensales o mutualistas, creciendo en interacci&oacute;n con las ra&iacute;ces. Las investigaciones han reportado que la baja concentraci&oacute;n de nutrientes es una de las condiciones que favorecen la esporulaci&oacute;n de estas bacterias (Brandes <I>et al.</I>, 2011). Sin embargo, los resultados obtenidos muestran que la mayor abundancia de bacterias esporulantes se encuentra en el p&aacute;ramo de Frontino-Urrao, donde se presentaron los mayores valores de materia org&aacute;nica. Al respecto, varios autores han indicado que esporas de <I>Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis, </I>al ser inoculadas en suelo germinan a su estado vegetativo y la poblaci&oacute;n crece hasta que se presenta una disminuci&oacute;n en los nutrientes, momento en que forman endosporas (Ellis, 2004; Earl <I>et al.</I>, 2008). De acuerdo con ese reporte es posible indicar que los altos valores de bacterias esporulantes reportadas en Frontino-Urrao se deben a que las c&eacute;lulas se encontraban creciendo en estado vegetativo y no estaban limitadas por el contenido de nutrientes. Es conocido que especies del g&eacute;nero <I>Bacillus</I> pueden promover el crecimiento vegetal disponibilizando nutrientes (f&oacute;sforo y nitr&oacute;geno) y adem&aacute;s, al competir por su establecimiento en la riz&oacute;sfera producen toxinas antibacterianas y antif&uacute;ngicas que probablemente disminuyen las poblaciones fitopat&oacute;genas favoreciendo el desarrollo de las plantas a las que est&aacute;n asociadas (Earl <I>et al.</I>, 2008).</P>      <P>El grupo Actinobacterias tambi&eacute;n es uno de los <I>phyla </I>m&aacute;s abundantes en suelo y de importancia en la mineralizaci&oacute;n de la materia org&aacute;nica y en la producci&oacute;n de sustancias antimicrobianas. No obstante, en este estudio representaron los menores conteos de los grupos evaluados, probablemente debido a que los miembros de esta comunidad adoptan la estrategia K, creciendo lentamente en especial en suelos muy h&uacute;medos como los presentados en los sitios de estudio (Cruz-Mart&iacute;nez <I>et al.</I>, 2009).</P>      <P>La relaci&oacute;n hongo-bacteria es una medida indirecta dependiente de la cantidad de nutrientes en el suelo, ya que los altos contenidos de C y N afectan negativamente la biomasa f&uacute;ngica. En este estudio la relaci&oacute;n H:B fue mayor en Santa In&eacute;s donde los valores de C y N son bastante menores, hallazgo que corresponde a lo observado por Bardgett y McAlister (1999), quienes determinaron que la relaci&oacute;n hongo/bacteria fue mayor en &aacute;reas cultivadas con pastos en las que los contenidos de C y N fueron bajos en comparaci&oacute;n con aquellos sitios que recib&iacute;an grandes cantidades de fertilizantes.</P>      <P>Dentro de los grupos dinamizadores de nutrientes las bacterias solubilizadoras de fosfatos hacen disponible el f&oacute;sforo para las plantas en forma de ortofosfatos mediante la producci&oacute;n de &aacute;cidos o la extrusi&oacute;n de protones (Sharma <I>et al.</I>, 2011). Los resultados obtenidos en este estudio mostraron que la abundancia de este grupo funcional fue 1,23 mayor veces en Santa In&eacute;s, hecho que puede relacionarse con los valores de f&oacute;sforo detectados en estos suelos. Al respecto Mander <I>et al.</I>, (2012) demostraron que la incidencia de estas poblaciones es mayor en suelos con bajos contenidos de f&oacute;sforo como sucedi&oacute; en Santa In&eacute;s, mientras que en el p&aacute;ramo de Frontino-Urrao el contenido de f&oacute;sforo fue mayor y se report&oacute; un menor contenido de bacterias solubilizadoras.</P>      <P>El suelo paramuno de las dos localidades present&oacute; un alto n&uacute;mero de microorganismos con potencial para degradar la celulosa, alrededor del 65% de los aislados f&uacute;ngicos y cerca del 15% de la abundancia bacteriana produjeron enzimas celulol&iacute;ticas en los ensayos <I>in vitro</I>. Sin embargo, en el suelo este proceso puede ser afectado negativamente por las bajas temperaturas que predominan en este ecosistema, ya que la temperatura &oacute;ptima de estas enzimas se encuentra por encima de los 20 #&#186;C (Otajevwo y Aluyi, 2011).</P>      <P>Este estudio es el primer reporte cuantificando la microbiota bacteriana y f&uacute;ngica asociada a las ra&iacute;ces de <I>Espeletia </I>spp., de p&aacute;ramos ubicados en la cordillera Central y Occidental de Colombia. Los recuentos bacterianos y f&uacute;ngicos registrados aqu&iacute; indican que existe un potencial microbiano con capacidad de dinamizar los contenidos de materia org&aacute;nica y f&oacute;sforo en estos suelos. Participando en esos procesos, la microbiota contribuye al mantenimiento de la estructura del suelo y de la diversidad vegetal de estos ecosistemas de importante conservaci&oacute;n debido al servicio ecosist&eacute;mico que prestan como reservorios de agua para las poblaciones humanas. Estudios m&aacute;s profundos a nivel de la funci&oacute;n de estos aislados microbianos son relevantes para la restauraci&oacute;n de estos suelos ya degradados por la ganader&iacute;a, la agricultura o la miner&iacute;a.</P>      <P>Los resultados obtenidos en esta investigaci&oacute;n son un gran aporte al conocimiento de la microbiota de los suelos de los p&aacute;ramos y hace referencia a la fracci&oacute;n cultivable de grupos microbianos espec&iacute;ficos, en un futuro es importante ampliar el estudio con metodolog&iacute;as independientes de cultivo que permitan establecer la diversidad microbiana total en estos ambientes poco explorados y de relevancia ecosist&eacute;mica.</P>      <P><B>CONCLUSIONES </B></P>      <P>Las comunidades microbianas presentaron abundancias relativas similares en los dos p&aacute;ramos estudiados, a pesar de las diferencias en las condiciones clim&aacute;ticas. La &uacute;nica variaci&oacute;n se present&oacute; en la proporci&oacute;n de BAFE cuyo contenido fue mayor en el p&aacute;ramo de Frontino-Urrao, lo que probablemente este explicado por el alto contenido de materia org&aacute;nica, nitr&oacute;geno y f&oacute;sforo, respecto a las concentraciones observadas en Santa In&eacute;s. En general se encontraron representantes de los <I>phyla </I>Proteobacteria, Firmicutes y Actinobacteria. Se estableci&oacute; la presencia de microbiota f&uacute;ngica y bacteriana con capacidad de degradar materia org&aacute;nica (celulosa) y hacer disponible el f&oacute;sforo a partir de fosfato inorg&aacute;nico, funciones que deben contribuir mediante el reciclaje de nutrientes a la fertilidad del suelo y mantenimiento de la cobertura vegetal.</P>      <P><B>AGRADECIMIENTOS </B></P>      ]]></body>
<body><![CDATA[<P>Los autores agradecen al Comit&eacute; para el Desarrollo de la Investigaci&oacute;n (CODI) de la Universidad de Antioquia (UDEA), en su Convocatoria Tem&aacute;tica 2010, por la financiaci&oacute;n del proyecto de investigaci&oacute;n: Inventario de la microbiota de suelo de dos zonas de p&aacute;ramos de Antioquia. A la Corporaci&oacute;n para el Estudio de las Patolog&iacute;as Tropicales (CAEPT) de la UDEA por la administraci&oacute;n de los recursos econ&oacute;micos y a los miembros del Grupo Ecolog&iacute;a Microbiana y Bioprospecci&oacute;n (EM&amp;B).</P>  <HR>      <P><B>REFERENCIAS </B></P>      <!-- ref --><P>Arias E, Pi&ntilde;eros P. Aislamiento e identificaci&oacute;n de hongos filamentosos demuestras de suelo de los P&aacute;ramos de Guasca y Cruz Verde (Tesis de pregrado). Bogot&aacute;: Pontificia Universidad Javeriana; 2008. 204 p. URL <a href="http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis226.pdf" target="_blank">http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis226.pdf</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000075&pid=S0120-548X201500010001800001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Bardgett RD, Mcalister E. The measurement of soil fungal:bacterial biomass ratios as an indicator of ecosystem self-regulation in temperate meadow grasslands. Biol Fertil Soils.1999;29(3):282&#150;290. Doi: <a href="http://dx.doi.org/10.1007/s003740050554" target="_blank">10.1007/s003740050554</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000077&pid=S0120-548X201500010001800002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Benavides GD, Hermida AM. Aislamiento e identificaci&oacute;n de flora bacteriana nativa de los p&aacute;ramos Cruz Verde y Guasca (Cundinamarca) (Tesis de pregrado). Bogot&aacute;: Pontificia Universidad Javeriana; 2008. 118 p. URL <a href="http://javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis145.pdf" target="_blank">http://javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis145.pdf</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000079&pid=S0120-548X201500010001800003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Bernal E, Celis S, Galindez X, Moratto CJ, Garcia D. Microflora cultivable y endomicorrizas obtenidas en hojarasca de bosque (P&aacute;ramo Guerrero&#150;Finca Puente de Tierra) Zipaquir&aacute;, Colombia. Acta biol Colomb. 2006;11(2):125-130.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000081&pid=S0120-548X201500010001800004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><P>Brandes-Ammann A, K&ouml;lle L, Brandl H. Detection of bacterial endospores in soil by terbium fluorescence. Int J Microbiol. 2011;2011:1-5. Doi:<a href="http://dx.doi.org/10.1155/2011/435281" target="_blank">10.1155/2011/435281</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000083&pid=S0120-548X201500010001800005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Chitiva A, Torrenegra R, Cabrera C, D&iacute;az N, Pineda V. Contribuci&oacute;n al estudio de microhongos filamentosos en los ecosistemas P&aacute;ramo de Guasca y El Tablazo. Estudio preliminar de mohos de p&aacute;ramos colombianos. Bogot&aacute;: Pontificia Universidad Javeriana; 2007. URL <a href="http://www.javeriana.edu.co/gifuj/hongos_%20ecosistemas_%20paramo.pdf" target="_blank">http://www.javeriana.edu.co/gifuj/hongos_%20ecosistemas_%20paramo.pdf</a> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000085&pid=S0120-548X201500010001800006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P>Chu H, Fierer N, Lauber C, Caporaso J, Knight R, Grogan P. Soil bacterial diversity in the Arctic is not fundamentally different from that found in other biomes. Environ Microbiol. 2010;12(11):2998&#150;3006. Doi:<a href="http://dx.doi.org/10.1111/j.1462-2920.2010.02277.x" target="_blank">10.1111/j.1462-2920.2010.02277.x</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000086&pid=S0120-548X201500010001800007&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Cruz-Mart&iacute;nez K, Suttle KB, Brodie EL, Power ME, Andersen GL, Banfield JF. Despite strong seasonal responses, soil microbial consortia are more resilient to long-term changes in rainfall than overlying grassland. ISME J. 2009;3:738-744. 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Ecology and genomics of <I>Bacillus subtilis</I>. Trends Microbiol. 2008;16(6):269. Doi:<a href="http://dx.doi.org/10.1016/j.tim.2008.03.004" target="_blank">10.1016/j.tim.2008.03.004</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000096&pid=S0120-548X201500010001800012&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Ellis RJ. Artificial soil microcosms: a tool for studying microbial autecology under controlled conditions. J Microbiol Methods. 2004;56(2):287-290. 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Doi: <a href="http://dx.doi.org/10.15517/rbt.v61i1.11141" target="_blank">10.15517/rbt.v61i1.11141</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000106&pid=S0120-548X201500010001800017&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Mander C, Wakelin S, Young S, Condron L, O&#39;Callaghan M. Incidence and diversity of phosphate-solubilizing bacteria are linked to phosphorus status in grassland soils. Soil Biol Biochem. 2012;44(1):93-101. 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Antonie van Leeuwenhoek. 2011;101:205-215.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000110&pid=S0120-548X201500010001800019&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Morales J, Est&eacute;vez J. El p&aacute;ramo &iquest;Ecosistema en v&iacute;a de extinci&oacute;n? Revista Luna Azul<I>. </I>2006;22:1-13.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000112&pid=S0120-548X201500010001800020&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Moratto C, Mart&iacute;nez LJ, Valencia H, S&aacute;nchez J. Efecto del uso del suelo sobre hongos solubilizadores de fosfato y bacterias diazotr&oacute;ficas en el p&aacute;ramo de Guerrero (Cundinamarca). Agronom&iacute;a Colombiana. 2005;23(2):299-309.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000114&pid=S0120-548X201500010001800021&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Otajevwo FD, Aluyi H. Cultural conditions necessary for optimal cellulase yield by cellulolytic bacterial organisms as they relate to residual sugars released in broth medium. Modern Applied Science. 2011;5(3):141-151. Doi:<a href="http://dx.doi.org/10.5539/mas.v5n3p141" target="_blank">10.5539/mas.v5n3p141</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000116&pid=S0120-548X201500010001800022&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Pedraza-Pe&ntilde;alosa P, Betancur J, Franco P. Chisac&aacute;, un recorrido por los p&aacute;ramos Andinos. Instituto de Ciencias Naturales e Instituto de Investigaci&oacute;n de Recursos Biol&oacute;gicos Alexander von Humboldt. Bogot&aacute;; 2004. p. 340.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000118&pid=S0120-548X201500010001800023&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Rangel JO. La regi&oacute;n de vida paramuna y franja aleda&ntilde;a en Colombia. In: Rangel JO, editor. Colombia Diversidad Bi&oacute;tica III. La regi&oacute;n de vida paramuna de Colombia. Universidad Nacional de Colombia. Bogot&aacute;. Colombia; 2000. p. 1-24.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000120&pid=S0120-548X201500010001800024&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Sharma S, Kumar V, Tripathi RB. Isolation of phosphate solubilizing microorganism (PSMs) from soil. J Microbiol Biotech Res. 2011;1(2):90-95.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000122&pid=S0120-548X201500010001800025&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Spain A, Krumholz L, Elshahed M. Abundance, composition, diversity and novelty of soil Proteobacteria. ISME J. 2009;3:992-1000. 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Doi: <a href="http://dx.doi.org/10.1007/s10533-013-9849-x" target="_blank">10.1007/s10533-013-9849-x</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000126&pid=S0120-548X201500010001800027&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></P>      <!-- ref --><P>Yergeau E, Sanschagrin S, Maynard C, St-Arnaud M, Greer C. Microbial expression profiles in the rhizosphere of willows depend on soil contamination. ISME J. 2014;8:344-358. 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