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<publisher-name><![CDATA[Facultad de Química Farmacéutica, Universidad de Antioquia]]></publisher-name>
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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[INFLUENCIA DE BACTERIOCINAS PRODUCIDAS POR Lactobacillus plantarum LPBM10 SOBRE LA VIDA ÚTIL DE FILETES DEL HÍBRIDO DE CACHAMA Piaractus brachypomus x Colossoma macropomum EMPACADO AL VACÍO: INFLUENCE OF BACTERIOCINS PRODUCED BY Lactobacillus plantarum LPBM10 ON SHELF LIFE OF CACHAMA HYBRID FILLETS Piaractus rachypomus x Colossoma macropomum VACUUM PACKAGED]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[Some lactic acid bacteria genera (BAL) as Lactobacillus, Leuconostoc, Lactococcus or their antimicrobial products as bacteriocins are used as alternatives biopreservation of minimally processed foods kept under refrigeration. Potential Biopreservatives from a bacteriocin producer native strain, Lactobacillus plantarum LPBM10, was evaluated on fillets of cachama hybrid Piaractus brachypomus x Colossoma macropomum, vacuum-packed and stored at 30&plusmn;0,5&deg;C during 30 days. The evaluation was undertaken using three treatments, bacteriocins raw extract, lactic acid and control. There were not differences among treatments on Mesophylls count. Meanwhile, psychotrophylls count reached values for fillets treated with raw extract of bacteriocins, lactic acid and control, 5.2 cycles log, 6.7 cycles log and 6.4 cycles log (P<0.05), respectively. Regarding total coliforms, 2.6 cycles log of initial count was obtained, maintaining the same value until the end of storage. Faecal coliforms count, at the end of storage period diminished 1.3, 1.5 and 2.1 cycles log for fillets control treated with raw extract of bacateriocins and lactic acid, respectively. BVT-N analysis showed the best results on treatment with raw extract of bacteriocins and end with 19.3 mg BVT-N/100g. Sensorial analysis results showed the greater acceptability range for bacteriocins raw extract treatment.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[ <p align="right"><strong><font size="2" face="VERDANA">BIOTECNOLOG&Iacute;A</font></strong></p>     <p align="right">&nbsp;</p>     <p><font size="4" face="Verdana">INFLUENCIA DE BACTERIOCINAS PRODUCIDAS POR <i>Lactobacillus plantarum</i> LPBM10 SOBRE LA VIDA &Uacute;TIL DE FILETES DEL H&Iacute;BRIDO DE CACHAMA <i>Piaractus brachypomus x Colossoma macropomum</i> EMPACADO AL VAC&Iacute;O </font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><strong><font size="3" face="Verdana">INFLUENCE OF BACTERIOCINS PRODUCED BY <i>Lactobacillus plantarum</i>    LPBM10 ON SHELF LIFE OF CACHAMA HYBRID FILLETS Piaractus rachypomus x    Colossoma macropomum VACUUM PACKAGED </font></strong></p>     <p>&nbsp;</p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font size="2" face="Verdana">H&eacute;ctor SU&Aacute;REZ M.<sup>1</sup><a href="#ab">*</a><a name="a"></a>, Alicia de FRANCISCO.<sup>2</sup>, Luiz H. BEIR&Atilde;O.<sup>2</sup> </font>    <br> <font size="2" face="Verdana"><sup>1</sup> Departamento de Ingenier&iacute;a Agr&iacute;cola y de Alimentos, Bloque 14 oficina 400, Universidad Nacional de Colombia, Calle 59A #63-20 Medell&iacute;n-Colombia. </font>    <br> <font size="2" face="Verdana"><sup>2</sup> Departamento de Ci&ecirc;ncia e Tecnolog&iacute;a de Alimentos, Centro de Ci&ecirc;ncias Agr&aacute;rias, Universidade federal de Santa Catarina. Florian&oacute;polis, Brasil. </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>&nbsp;</p>     <p>&nbsp;</p> <hr size="1" noshade> <font size="2" face="Verdana"><strong>RESUMEN</strong> </font>     <p><font size="2" face="Verdana">El uso de algunos de los g&eacute;neros de las bacterias &aacute;cidol&aacute;cticas (BAL) como <em>Lactobacillus, Leuconostoc, Lactococcus</em>, o sus productos antimicrobianos como las bacteriocinas, son alternativas en la biopreservaci&oacute;n de productos m&iacute;nimamente procesados que son mantenidos bajo refrigeraci&oacute;n. El potencial de biopreservaci&oacute;n de un extracto crudo de bacteriocinas producidas por una cepa nativa de <i>Lactobacillus plantarum</i> LPBM10, se eval&uacute;a sobre filetes de h&iacute;brido de cachama <i>Piaractus brachypomus x Colossoma macropomum</i> empacados al vac&iacute;o durante 30 d&iacute;as de almacenamiento a 3&plusmn;0,5 0C. La evaluaci&oacute;n se realiza por medio del recuento: mes&oacute;filos (heter&oacute;trofos), psicr&oacute;filos, esporas sulfitoreductoras, coliformes totales y fecales y presencia de Salmonella, teniendo en cuenta tres tratamientos: extracto crudo de bacteriocinas, &aacute;cido l&aacute;ctico y el control. El recuento de heter&oacute;trofos no presenta diferencia entre los tratamientos, mientras el recuento de psicrotr&oacute;filos alcanza valores de 5.2 ciclos log, 6.7 ciclos log y 6.4 ciclos log (P&lt;0.05) para los filetes tratados con extracto crudo de bacteriocinas, &aacute;cido l&aacute;ctico y control, respectivamente. Con respecto a los coliformes totales se obtiene un recuento inicial de 2.6 ciclos log, el cual no cambi&oacute; durante todo el estudio. En cuanto al recuento de coliformes fecales, al finalizar el periodo de almacenamiento, disminuy&oacute; 1.3, 1.5 y 2.1 ciclos log para los filetes control, tratados con extracto crudo de bacteriocinas y &aacute;cido l&aacute;ctico, respectivamente. El an&aacute;lisis de BVT-N muestra los mejores resultados para el tratamiento con extracto crudo de bacteriocinas y finaliza con 19.3 mg BVT-N/100g. Los resultados del an&aacute;lisis sensorial muestran el mayor rango de aceptabilidad para el tratamiento con extracto crudo de bacteriocinas. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana"><strong>Palabras clave:</strong> bacteriocinas, peces, <i>Lactobacillus plantarum</i> LPBM10, acuicultura, vida &uacute;til. </font></p> <hr size="1" noshade> <font size="2" face="Verdana"><strong>ABSTRACT </strong></font>     <p><font size="2" face="Verdana">Some lactic acid bacteria genera (BAL) as <em>Lactobacillus, Leuconostoc, Lactococcus</em> or their antimicrobial products as bacteriocins are used as alternatives biopreservation of minimally processed foods kept under refrigeration. Potential Biopreservatives from a bacteriocin producer native strain, <i>Lactobacillus plantarum</i> LPBM10, was evaluated on fillets of cachama hybrid <i>Piaractus brachypomus x Colossoma macropomum</i>, vacuum-packed and stored at 30&plusmn;0,5&deg;C during 30 days. The evaluation was undertaken using three treatments, bacteriocins raw extract, lactic acid and control. There were not differences among treatments on Mesophylls count. Meanwhile, psychotrophylls count reached values for fillets treated with raw extract of bacteriocins, lactic acid and control, 5.2 cycles log, 6.7 cycles log and 6.4 cycles log (P&lt;0.05), respectively. Regarding total coliforms, 2.6 cycles log of initial count was obtained, maintaining the same value until the end of storage. Faecal coliforms count, at the end of storage period diminished 1.3, 1.5 and 2.1 cycles log for fillets control treated with raw extract of bacateriocins and lactic acid, respectively. BVT-N analysis showed the best results on treatment with raw extract of bacteriocins and end with 19.3 mg BVT-N/100g. Sensorial analysis results showed the greater acceptability range for bacteriocins raw extract treatment. </font></p>     <p><strong><font size="2" face="Verdana">Key words:</font></strong><font size="2" face="Verdana"> bacteriocins, fish, <i>Lactobacillus plantarum</i> LPBM10, aquaculture, shelf life. </font></p> <hr size="1" noshade>     <p>&nbsp;</p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font size="3" face="Verdana"><strong>INTRODUCCI&Oacute;N</strong> </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">La carne de pescado, y en especial la de los filetes, es muy perecedera, su vida &uacute;til se ve limitada debido al deteriorio microbiano, lo que genera un alto riesgo para la salud de los consumidores cuando existen pat&oacute;genos involucrados (2). </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font size="2" face="Verdana">Los filetes de la cachama son altamente apetecibles en la nutrici&oacute;n. En algunos pa&iacute;ses de Suram&eacute;rica se ha obtenido un h&iacute;brido entre la cachama blanca, <em>Piaractus brachypomus</em>, y la cachama negra, <em>Colossoma macropomum</em>, que alcanza notables ventajas en la producci&oacute;n acu&iacute;cola. En el a&ntilde;o 2003, en Colombia, la producci&oacute;n de la cachama se ha incrementado en 12.023 toneladas; resulta ser as&iacute; la segunda especie (despu&eacute;s de la tilapia, la m&aacute;s utilizada por la acuicultura) mientras que se reporta una producci&oacute;n total de 18.4333 toneladas en los pa&iacute;ses productores como Argentina, Brasil, Bolivia, Per&uacute; y Venezuela (1). </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Es conocido que en la conservaci&oacute;n del pescado por refrigeraci&oacute;n y empaque al vac&iacute;o para almacenamiento, algunos microorganismos pueden sobrevivir y crecer, incluyendo <em>Salmonellas</em>, coliformes y bacterias esporuladas. En este sentido, el uso de algunos de los g&eacute;neros de las bacterias &aacute;cidol&aacute;cticas (BAL), como <em>Lactobacillus, Leuconostoc, Lactococcus</em>, o sus productos antimicrobianos como las bacteriocinas, son alternativas en la biopreservaci&oacute;n de productos m&iacute;nimamente procesados que son mantenidos bajo refrigeraci&oacute;n (3). Las bacteriocinas producidas por LAB son p&eacute;ptidos, generalmente degradados por proteasas intestinales, con espec&iacute;fica actividad antimicrobiana y con diferentes aplicaciones en el campo de la protecci&oacute;n de alimentos (4). </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Diferentes autores destacan las especies del g&eacute;nero Lactobacillus como los principales antagonistas de microorganismos pat&oacute;genos y deterioradores en productos de pescado (5-8). Se ha observado que algunas especies de <em>Lactobacillus</em> producen una variedad de compuestos antimicrobianos que difieren en su espectro inhibitorio, modo de acci&oacute;n, estructura y propiedades bioqu&iacute;micas. Se ha determinado que diferentes bacteriocinas producidas por <i>Lactobacillus plantarum</i> poseen efecto antag&oacute;nico ante organismos gram positivos y, en algunos casos, en gram negativos. En este sentido, la plantaricina F, producida por <em>Lactobacillus plantarum</em> BF001, microorganismo aislado del catfish (<em>Ictalurus puntactus</em>), es efectiva frente a <em>Lactobacillus, Lactococus, Listeria, Micrococcus, Leuconostocs, Pediococus, Staphylococcus, Streptococcus, Salmonella</em> y <em>Pseudomonas</em> (9); sin embargo, varios estudios muestran diferentes bacteriocinas producidas por bacterias &aacute;cidol&aacute;cticas (BAL) aisladas de carnes, pescados y productos l&aacute;cteos, de las que s&oacute;lo unas pocas han sido probadas y aplicadas en biopreservaci&oacute;n de filetes de pescado (10-12). </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de las sustancias antimicrobianas tipo bacteriocinas producidas por <i>Lactobacillus plantarum</i> LPBM10, sobre la vida &uacute;til de filetes de pescado empacados al vac&iacute;o y almacenados a 3&ordm;C, usando par&aacute;metros indicadores de calidad, microbiol&oacute;gicos, fisicoqu&iacute;micos y sensoriales. </font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font size="3" face="Verdana"><strong>MATERIALES Y M&Eacute;TODOS </strong></font></p>     <p><font size="2" face="Verdana"><strong>Muestras de peces </strong></font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Los peces h&iacute;bridos de cachama, <em>Piaractus braquipomus x Colossoma macropomum</em>, fueron obtenidos del Centro de Investigaci&oacute;n Pisc&iacute;cola de la Universidad de C&oacute;rdoba - CINPIC, Monter&iacute;a, Colombia, en septiembre de 2006. Los peces, capturados del estanque, fueron inmediatamente sacrificados por medio de punci&oacute;n en el cerebro y transportados al laboratorio. El peso y la longitud promedio de los peces fueron de 590 g y 32 cm respectivamente. Los filetes con piel se obtuvieron manualmente usando un cuchillo as&eacute;ptico, su peso medio fue 32.4% del peso inicial de los peces. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Cada filete por separado fue empacado al vac&iacute;o y almacenado bajo refrigeraci&oacute;n (3 &plusmn; 0.5&ordm;C) por un periodo de 30 d&iacute;as. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Los an&aacute;lisis fueron realizados durante los siguientes d&iacute;as de almacenamiento: 0, 5, 10, 15, 20, 25 y 30. Los filetes por triplicado fueron sometidos a an&aacute;lisis microbiol&oacute;gico, f&iacute;sico, qu&iacute;mico y sensorial. </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font size="2" face="Verdana"><strong>Producci&oacute;n y concentraci&oacute;n de bacteriocinas a partir de <em>L. Plantarum</em> LPBM10 </strong></font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">La cepa nativa de <em>L. plantarum</em> LPBM10 fue suministrada por el Laboratorio de Biotecnolog&iacute;a Microbiana de la Universidad Nacional de Colombia, sede Medell&iacute;n. Un in&oacute;culo inicial de    106 UFC/mL del <em>L. plantarum</em> LPBM10, fue cultivado en caldo MRS a 30 &ordm;C por 72 horas en c&aacute;mara de anaerobiosis, posteriormente centrifugado a 3000 rpm durante 20 minutos (13). Los sobrenadantes fueron esterilizados por filtraci&oacute;n en membranas (Milipore, poro 0,45 mm/di&aacute;metro 47mm), y tratados con &aacute;cido tricloroac&eacute;tico para obtener la bacteriocina concentrada. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana"><strong>Determinaci&oacute;n de la actividad del extracto crudo de bacteriocinas </strong></font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">El extracto crudo de bacteriocinas fue evaluado sobre <em>Listeria monocytogenes</em> mediante el    m&eacute;todo de difusi&oacute;n en pozos (14). Fue utilizado     <br> 104 – 105 UFC/mL de <em>Listeria monocytogenes</em> y se inocul&oacute; en caldo BHI mas 1% p/v de agar; posteriormente, formados los pozos e inoculados con 40mg del extracto crudo de bacteriocinas neutralizado y filtrado e incubado a 30oC durante 24 horas. Despu&eacute;s del periodo de incubaci&oacute;n con la presencia de halo inhibitorio se comprob&oacute; la actividad de la bacteriocina. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana"><strong>Tratamientos </strong></font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">El extracto concentrado de bacteriocina fue adicionado a la superficie de cada filete en cantidad de 1 mL utilizando una pipeta. Los tratamientos fueron los siguientes: </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">T1: Extracto concentrado de bacteriocina:     <br>   1 mL que contiene 40 mg de extracto concentrado de bacteriocina producido por <em>L. plantarum</em> LPBM10. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">T2: &Aacute;cido l&aacute;ctico: 1 mL de &aacute;cido l&aacute;ctico ajustado a pH 6.32, estimado previamente durante el empaque al vac&iacute;o del filete. </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font size="2" face="Verdana">T3: Control: 1 mL agua destilada </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana"><strong>Almacenamiento </strong></font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Los filetes de cada tratamiento, incluyendo el control, fueron empacados en bolsas de polietileno de baja densidad con barrera de transmisi&oacute;n de ox&iacute;geno de 29-45 mL/O<sub>2</sub>/m<sup>2</sup>/ 24h/atm, medido    a 23&ordm;C, y barrera de permeabilidad a gases de 10–15 g/m2 / 24h /medido a 38&ordm;C marca     <br>   CRYOVAC<sup>&reg;</sup>, utilizando una empacadora de vac&iacute;o WEBOMATIC<sup>&reg;</sup> 82246 (West Germany). </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana"><strong>An&aacute;lisis microbiol&oacute;gicos </strong></font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Se realizaron los siguientes an&aacute;lisis microbiol&oacute;gicos: recuento de mes&oacute;filos (heter&oacute;trofos) en placa, psicrotr&oacute;filos, coliformes totales, coliformes fecales, esporas sulfitoreductoras y presencia de <em>Salmonella</em>, seg&uacute;n las Normas del Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos (INVIMA) destinados para el consumo humano (15). </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana"><strong>Recuento de mes&oacute;filos en placa y psicrotr&oacute;filos</strong>: 10 g de la muestra fueron adicionados a 90 mL de agua peptonada 0.1% p/v, homogeneizados y realizadas las diluciones 10<sup>1</sup>, 10<sup>2</sup> y 10<sup>3</sup> y se inocul&oacute; 1 mL de cada diluci&oacute;n en cajas de petri con 15 mL de agar Plate Count por el m&eacute;todo vertido en profundidad, e incubadas a 35 &plusmn; 2&deg;C durante 48 horas. Para psicrotr&oacute;filos fueron incubados a    4 &plusmn; 0.5&deg;C durante 5-7 d&iacute;as. Los resultados fueron expresados en Unidades Formadoras de Colonia/mL, “UFC/mL”. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana"><strong>Determinaci&oacute;n de</strong><em><strong> Salmonella</strong></em>: Se adicionaron 25 g de la muestra homogeneizada a 225 mL de peptona buferada, se incub&oacute; a 35 &plusmn; 2&deg;C por 16 a 24 horas. Se tom&oacute; un mL del cultivo, se adicion&oacute; a un tubo de ensayo con 10 mL de caldo tetrationato medio de enriquecimiento selectivo, agregando 2 gotas de Lugol y 2 gotas de verde brillante al 0.1% p/v, incubados a 35 &plusmn; 2&deg;C por 18 a 24 horas. Luego se tom&oacute; una asada y se inocul&oacute; sobre el medio    de cultivo selectivo agar XLD y agar SS por el m&eacute;todo de agotamiento de superficie y se incub&oacute; a 35 &plusmn; 2&deg;C por 24 horas. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana"><strong>Determinaci&oacute;n de esporas sulfito reductoras</strong>: Se adicionaron 10 g de muestra homogeneizada a 90 mL de peptona universal 0.1 p/v y realizadas las diluciones 10<sup>1</sup>, 10<sup>2</sup>, 10<sup>3</sup>. Luego se adicion&oacute; 1 mL de cada diluci&oacute;n en cajas de petri con agar SPS por el m&eacute;todo de profundidad, incubado a 35 &plusmn; 2&deg;C por 72 horas en anaerobiosis. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana"><strong>Determinaci&oacute;n de coliformes totales y fecales</strong>: Se inocularon 10 g de muestra homogeneizada en nueve tubos de ensayo con 10 mL de caldo Fluorocult LMX, distribuidos as&iacute;: a tres tubos se les adicionaron 10 mL de la muestra; a otros,    3 mL de la muestra, y a los 3 restantes se les adicion&oacute;    0.1 mL de la muestra. Se homogenizaron utilizando el vortex y se incubaron a 35 &plusmn; 2&ordm;C por 24 a 48 horas. La lectura fue determinada por fluorescencia y presencia de indol, y los datos reportados como N&uacute;mero M&aacute;s Probable (NMP). </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font size="2" face="Verdana"><strong>An&aacute;lisis qu&iacute;mico </strong></font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Para la determinaci&oacute;n de bases vol&aacute;tiles totales de nitr&oacute;geno fue utilizado el m&eacute;todo propuesto por Goulas &amp; Kontominas (2005), en donde se molieron 10 g de muestra de carne de pescado con 50 mL de agua destilada usando un picador Moulinex<sup>&reg;</sup>. El material fue transferido con 200 mL de agua destilada a un baker de 500 mL y destilado despu&eacute;s de la adici&oacute;n de 2 g de MgO y una gota de silicona para prevenir la formaci&oacute;n de espuma. Luego se llev&oacute; a un erlenmeyer de 250 mL, que contiene 25 mL de soluci&oacute;n de &aacute;cido b&oacute;rico 3% p/v, 0.04 mL de rojo metilo y azul de metileno como indicadores para el tratamiento del amonio. La destilaci&oacute;n se continu&oacute; llevando a un volumen final de 125 mL del destilado obtenido. La soluci&oacute;n de &aacute;cido b&oacute;rico vira a verde cuando es alcalina por el destilado de BVT-N. La soluci&oacute;n fue tratada posteriormente con soluci&oacute;n    0.1 N de &aacute;cido hidrocl&oacute;rico. La destilaci&oacute;n se concluy&oacute; cuando el color del destilado cambi&oacute; a rosado por la adici&oacute;n gota a gota del &aacute;cido hidrocl&oacute;rico (16). La cantidad de BVTN en mg/100 g de carne de pescado fue calculada del volumen (V) de &aacute;cido hidrocl&oacute;rico adicionado y su concentraci&oacute;n (C) por la siguiente ecuaci&oacute;n: </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana"><img src="img/revistas/vitae/v15n1/v15n01a05eq01.gif"></font></p>     <p><font size="2" face="Verdana"><strong>Evaluaci&oacute;n sensorial </strong></font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">El an&aacute;lisis sensorial se llev&oacute; a cabo por el m&eacute;todo tradicional de juzgar la calidad de filetes de pescado. Fueron evaluadas las caracter&iacute;sticas sensoriales como apariencia, color y aroma por cinco panelistas entrenados. El puntaje se bas&oacute; en una escala hed&oacute;nica de nueve puntos (<a href="#tb01">Tabla 1</a>), donde 1 corresponde a “disgust&eacute; extremadamente” y 9 “gust&eacute; extremadamente”. El valor sensorial de 4 fue tomado como el rango m&iacute;nimo de aceptabilidad (17). </font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana"><strong>Tabla 1.</strong> An&aacute;lisis sensorial </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana"><img src="img/revistas/vitae/v15n1/v15n01a05tb01.gif"><a name="tb01"></a></font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font size="2" face="Verdana"><strong>An&aacute;lisis estad&iacute;stico </strong></font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font size="2" face="Verdana">Todos los ensayos fueron realizados por triplicado. El efecto de los diferentes tratamientos sobre los filetes empacados al vac&iacute;o y refrigerados a     <br>   3 &plusmn; 0.5&ordm;C, fue evaluado por an&aacute;lisis de variancia (ANOVA), aceptada como diferencia significativa P&lt; 0.05 y fue utilizado el sofware Statgraphics (Statistical Graphics Corp. Rockville, MD, USA).</font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><strong><font size="3" face="Verdana">RESULTADOS Y DISCUSI&Oacute;N </font></strong></p>     <p><strong><font size="2" face="Verdana">Cambios microbiol&oacute;gicos </font></strong></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Los cambios en la microbiolog&iacute;a de los filetes del h&iacute;brido de cachama durante el almacenamiento para los tres tratamientos se muestran en la <a href="#fig01">figura 1</a>. </font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana"> <strong>Figura 1.</strong> Comportamiento microbiol&oacute;gico del extracto crudo de bacteriocinas producidas por <em>L. plantarum</em> LPBM10 en filetes de h&iacute;brido de cachama empacado al vac&iacute;o durante 30 d&iacute;as de almacenamiento a 3&ordm;C para mes&oacute;filos (a), psicrotr&oacute;filos (b), coliformes totales (c) y coliformes fecales (d). </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana"><img src="img/revistas/vitae/v15n1/v15n01a05fig01.gif"><a name="fig01"></a></font></p>     <p>&nbsp;</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font size="2" face="Verdana">El recuento inicial para mes&oacute;filos (4.8 log UFC<sup>-1</sup>) indica un buen estado inicial de calidad para los filetes. Los filetes inoculados con el extracto crudo de bacteriocinas alcanzaron 5.7 ciclos log para mes&oacute;filos a los 30 d&iacute;as de almacenamiento, frente a los filetes tratados con &aacute;cido l&aacute;ctico, 6.3 ciclos log y los filetes control, 6.6 ciclos log. Aunque no se present&oacute; diferencia estad&iacute;stica (<em>P&gt;</em>0,05) entre los tratamientos, se observa que en los filetes tratados con el extracto crudo de bacteriocinas, se redujo en 0,9 ciclos log el conteo de mes&oacute;filos frente a la muestra control. Para el d&iacute;a 10 de almacenamiento, el extracto crudo de bacteriocinas consigui&oacute; disminuir la poblaci&oacute;n inicial de mes&oacute;filos, mostrando actividad bactericida. A partir del d&iacute;a 14 de almacenamiento se observ&oacute; un re-crecimiento para mes&oacute;filos; sin embargo, el comportamiento del extracto crudo de bacteriocinas podr&iacute;a considerarse bacteriost&aacute;tico al final del periodo estudiado. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">El conteo inicial para psicrotr&oacute;filos fue de    4.6 ciclos log, y alcanz&oacute; valores para los filetes tratados con extracto crudo de bacteriocinas, &aacute;cido l&aacute;ctico y control de 5.2 ciclos log, 6.7 ciclos log y 6.4 ciclos log (<em>P&lt;</em>0.05), respectivamente, para el d&iacute;a 30 de almacenamiento. Los filetes tratados con el extracto crudo de bacteriocinas disminuyeron en m&iacute;nimo 1.2 ciclos log, controlando la poblaci&oacute;n de psicrotr&oacute;filos, comparado con los filetes control y 1.5 ciclos log frente al tratamiento con &aacute;cido l&aacute;ctico, al final del periodo de almacenamiento, mostrando un efecto bacteriost&aacute;tico. En los primeros 10 d&iacute;as de almacenamiento no se observ&oacute; control de psicrotr&oacute;filos (incrementando de 1.3 ciclos log) por parte del extracto crudo tipo bacteriocinas; sin embargo, se observ&oacute; comportamiento bactericida (disminuci&oacute;n de 0.47 ciclos log) entre los d&iacute;as 10 y 25 de almacenamiento. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Para coliformes totales se obtuvo un conteo inicial de 2.6 ciclos log, valor que se mantuvo los 30 d&iacute;as de almacenamiento, logrando controlar la poblaci&oacute;n en los filetes tratados con extracto crudo de bacteriocinas. Para los filetes tratados con &aacute;cido l&aacute;ctico y control, el valor alcanzado al final del periodo de almacenamiento fue de 3 ciclos log. A partir del d&iacute;a 5 de almacenamiento, los tres tratamientos tienen un comportamiento bactericida frente a coliformes totales y un re-crecimiento a partir del d&iacute;a 15; sin embargo, en los filetes tratados con extracto crudo de bacteriocinas, disminuy&oacute; la poblaci&oacute;n incrementada de coliformes totales hasta valores similares a los del d&iacute;a 0, hacia el final del periodo de almacenamiento. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Los coliformes fecales iniciaron con recuento de 2.6 ciclos log; al finalizar el periodo de    almacenamiento, disminuyeron 1.3 ciclo log, 1.5 ciclos log y 2.1 ciclos log para los filetes control, tratados con extracto crudo de bacteriocinas y &aacute;cido l&aacute;ctico, respectivamente. Es evidente que la disminuci&oacute;n a lo largo del tiempo se debi&oacute; a las condiciones generadas por el empaque al vac&iacute;o, como es el efecto del CO<sup>2</sup> producido por los filetes debido a la respiraci&oacute;n anaer&oacute;bica y al desarrollo de bacterias &aacute;cidol&aacute;cticas que ser&iacute;an antagonistas de coliformes fecales. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">En las muestras de filete con los tratamientos utilizados no se detectaron <em>Salmonella</em> ni organismos sulfitoreductores. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Aunque el deterioro de los filetes de pescado en condiciones anaer&oacute;bicas es atribuido a las bacterias &aacute;cidol&aacute;cticas BAL (18), existe una considerable confusi&oacute;n sobre el rol de este grupo en filetes de pescado empacados al vac&iacute;o. Trabajos de inoculaci&oacute;n de especies de <em>Carnobacterium</em> y <em>Lactobacillus</em> (19, 7) sugieren que el potencial deteriorador de las BAL es variable y las enzimas autol&iacute;ticas pueden conducir a ello. Adem&aacute;s, la utilizaci&oacute;n de extractos crudos de sustancias bacteriocinas, bacteriocinas o la asociaci&oacute;n de BAL para preservar carne de pescado, muestra efectividad en la extensi&oacute;n de la vida &uacute;til, pero variabilidad en el efecto sobre algunos microrganismos. La utilizaci&oacute;n de salm&oacute;n ahumado empacado al vac&iacute;o (13), demostr&oacute; efecto bactericida o bacteriost&aacute;tico dependiendo del n&uacute;mero de c&eacute;lulas utilizadas: <em>Lactobacillus casei</em> fue bacteriost&aacute;tico cuando fue inoculado a 6 log UFC/g, pero bactericida a 8 log UFC/g; sin embargo, los mejores resultados se obtuvieron con la asociaci&oacute;n de <em>Lactobacillus casei</em> y Lactobacillus plantarum con  6 log UFC/g de in&oacute;culo (20). </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">El efecto bacteriost&aacute;tico o bactericida observado en filetes de cachama usando el extracto crudo de bacteriocinas, muestra una cin&eacute;tica que podr&iacute;a explicarse por la interferencia en la matriz alimentaria de compuestos tales como grasa o enzimas proteol&iacute;ticas, junto con la presencia de CO<sup>2</sup> generado en el empaque al vac&iacute;o. Varios autores consideran el empaque al vac&iacute;o despu&eacute;s de 48 horas para carnes y pescados frescos como un empaque de atm&oacute;sferas modificadas (21, 22). Los resultados obtenidos en el presente trabajo concuerdan con los de otros autores cuando utilizaron pedazos de carne de salm&oacute;n ahumado almacenados 20 d&iacute;as a 3&ordm;C, tratados con una sustancia tipo bacteriocina (STB) producida por <em>C. piscicola</em> y empacados al vac&iacute;o, donde en medio de crecimiento TSB no se observ&oacute; inhibici&oacute;n; presenta el pat&oacute;geno psicrotr&oacute;filo el mismo perfil de desarrollo que el control sin bacteriocina. Cuando se utiliz&oacute; en salm&oacute;n, experiment&oacute; una demora inicial en el crecimiento hasta los cinco d&iacute;as y mostr&oacute; un efecto bacteriost&aacute;tico hasta los 15 d&iacute;as de almacenamiento (23). El fen&oacute;meno de re-crecimiento de psicrotr&oacute;filos luego de las 48h, tambi&eacute;n fue observado cuando se ensay&oacute; la adici&oacute;n de nisina, lactocina 705 y enterocina CRL35 frente a diferentes microorganismos psicrotr&oacute;filos en medio TSB (24). </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">La cin&eacute;tica de inhibici&oacute;n con disminuci&oacute;n de viables al inicio o durante el periodo de almacenamiento, seguida de un re-crecimiento de los sobrevivientes, tambi&eacute;n ha sido reportada cuando se adicionan bacteriocinas o extractos crudos de bacteriocinas individualmente, mientras que en presencia de la combinaci&oacute;n de varias sustancias antimicrobianas se produce inmediata inhibici&oacute;n de las cepas indicadoras ensayadas. Estos resultados sugieren la aparici&oacute;n de c&eacute;lulas resistentes en la poblaci&oacute;n (25, 26). Por otra parte, la actividad del extracto crudo de bacteriocinas (40 mg/ml) podr&iacute;a haber sido insuficiente para la inhibici&oacute;n de mes&oacute;filos y coliformes fecales. Se considera que los factores intr&iacute;nsecos y extr&iacute;nsecos asociados con los alimentos pueden interferir con la efectividad de las bacteriocinas (27): ellas pueden ser inactivadas por componentes como proteasas, l&iacute;pidos y microorganismos, o su actividad puede ser afectada durante el procesamiento (temperatura, exudado) (12). Adem&aacute;s, la producci&oacute;n y persistencia de actividad de las bacteriocinas sobre los alimentos es muy dif&iacute;cil de medir, probablemente debido a la interacci&oacute;n con el producto y el empaque, donde la transferencia de la actividad podr&iacute;a ser observada de la carne de pescado al empaque por el almacenamiento (27, 28). </font></p>     <p><strong><font size="2" face="Verdana">Cambios en las bases vol&aacute;tiles totales de nitr&oacute;geno (BVT-N) </font></strong></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Los resultados de las BVT-N de filetes de h&iacute;brido de cachama durante el almacenamiento se muestran en la <a href="#fig02">Figura 2</a>. </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font size="2" face="Verdana">Las bases vol&aacute;tiles totales incrementaron su valor inicial de 15.7 mg BVT-N/100 mg para el tratamiento control y &aacute;cido l&aacute;ctico hasta el d&iacute;a 15, sobrepasando el l&iacute;mite aceptado (30 mg BVT-N/100g) (29). Sin embargo, se observa disminuci&oacute;n de los valores a partir del d&iacute;a 15, con un leve aumento hacia el final del periodo de almacenamiento. Por el contrario, en el tratamiento con extracto crudo de bacteriocinas, los valores se mantuvieron estables hasta el d&iacute;a 20 de almacenamiento, incrementando al d&iacute;a 25 y finalizando con 19.3 mg BVT-N/100 g (<em>P&lt;</em>0.05). </font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font size="2" face="Verdana"> <strong>Figura 2.</strong> Cambios en Bases Vol&aacute;tiles Totales (BVT) en filetes de h&iacute;brido de cachama empacados al vac&iacute;o durante 30 d&iacute;as de almacenamiento a 3&deg; C. </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana"><img src="img/revistas/vitae/v15n1/v15n01a05fig02.gif">3</font><a name="fig02"></a></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font size="2" face="Verdana">El incremento de los valores de BVT-N en los tratamientos con &aacute;cido l&aacute;ctico y control, frente al de extracto crudo con bacteriocinas, a lo largo del periodo de almacenamiento, podr&iacute;a estar influenciado por la interacci&oacute;n entre las bacterias &aacute;cidol&aacute;cticas, originadas por el empaque al vac&iacute;o, y la contaminaci&oacute;n bacterial inicial (30). Otros autores atribuyen bajos valores BVT-N obtenidos en salm&oacute;n ahumado por la interacci&oacute;n entre poblaciones de bacterias, cuando fue inoculado con L. sakei frente a psicrotr&oacute;filos productores de BVT-N (31). En el presente estudio, el tratamiento con extracto crudo de bacteriocinas muestra esta tendencia, al mantener controlada la poblaci&oacute;n de bacterias picrotr&oacute;ficas. De otra parte, nuestros resultados no concuerdan con los obtenidos por otros autores (32), donde se obtuvieron altos valores para aminas biog&eacute;nicas con sustancias bacteriocinas producidas por <em>L. sakei</em> en salm&oacute;n ahumado. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Para el desarrollo de t&eacute;cnicas de biopreservaci&oacute;n encaminadas a mejorar la vida &uacute;til y la seguridad en los alimentos, es esencial la comprensi&oacute;n de la ecolog&iacute;a microbiana. La identificaci&oacute;n del comportamiento de bacterias deterioradoras en pescado sometido a biopreservaci&oacute;n ha presentado dificultad, probablemente porque diferentes grupos de bacterias est&aacute;n envueltas bajo diferentes condiciones (33), donde el sustrato, la composici&oacute;n de nutrientes, los par&aacute;metros f&iacute;sicos y qu&iacute;micos son determinantes para la selecci&oacute;n, crecimiento y actividad deterioradora de microorganismos en carne de pescado biopreservada. Adem&aacute;s, la interacci&oacute;n entre microorganismos determina la selecci&oacute;n, metabolismo y subsiguiente ruta de actividad de los organismos deterioradores, dificultando la comprensi&oacute;n. </font></p>     <p><strong><font size="2" face="Verdana">An&aacute;lisis sensorial </font></strong></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Los resultados del an&aacute;lisis sensorial de filetes de h&iacute;brido de cachama durante el almacenamiento aparecen en la <a href="#fig03">Figura 3</a>.</font></p>     <p>&nbsp;</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><font size="2" face="Verdana"> <strong>Figura 3.</strong> Cambios sensoriales en filetes de h&iacute;brido de cachama empacados al vac&iacute;o durante 30 d&iacute;as de almacenamiento a 3&ordm;C. Apariencia (a), color (b), aroma (c). </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana"><img src="img/revistas/vitae/v15n1/v15n01a05fig03.gif"><a name="fig03"></a></font></p>     <p align="center">&nbsp;</p>     <p><font size="2" face="Verdana">Con el incremento del tiempo de almacenamiento disminuy&oacute; el valor de aceptaci&oacute;n en los atributos evaluados. Los menores puntajes fueron para los atributos de apariencia y color, superiores al l&iacute;mite de aceptabilidad estimado en 4. No obstante el tratamiento con extracto crudo de bacteriocinas consigui&oacute; el mejor puntaje al final del periodo de almacenamiento (<em>P&lt;</em>0.05). Para el atributo aroma, el tratamiento con &aacute;cido l&aacute;ctico y control qued&oacute; por fuera del rango de aceptabilidad; sin embargo, el tratamiento con extracto crudo de bacteriocinas registr&oacute; un alto grado de aceptabilidad por parte de los panelistas (<em>P&lt;</em>0.05) al final del periodo de almacenamiento. Para los atributos de apariencia y color, el puntaje obtenido fue superior al l&iacute;mite establecido para el final del periodo, y result&oacute; superior el tratamiento con extracto crudo de bacteriocinas (P&lt;0.05). </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">La opacidad, la decoloraci&oacute;n de la piel y la presencia de “off oduor” fueron las principales causas atribuidas a los bajos puntajes obtenidos en los tratamientos. Seg&uacute;n los resultados de la prueba microbiol&oacute;gica y sensorial, podr&iacute;a considerarse a las enzimas proteol&iacute;ticas como responsables del impacto sobre la p&eacute;rdida de calidad de los filetes de pescado, pero no siempre son responsables por los caracter&iacute;sticos “off flavor” y “off oduor”, t&iacute;picos de la actividad microbiana (34). Tambi&eacute;n es posible que las bacterias psicrotr&oacute;ficas, aunque presentes en bajo nivel, participen en el deterioro, porque estos microorganismos pueden producir fuerte “off oduor”, lo cual se demostr&oacute; cuando fueron inoculados en salm&oacute;n ahumado refrigerado (35, 36). Similares resultados han sido reportados por otros autores (30), cuando utilizaron extracto crudo de bacteriocinas producidas por <em>C. divergens</em> V41 en salm&oacute;n ahumado mantenido en refrigeraci&oacute;n, donde fuertes “off flavor” y “off oduor” fueron detectados por el panel sensorial. Sin embargo, no se reporta una clara relaci&oacute;n entre algunos microorganismos y cambios sensoriales en productos pisc&iacute;colas empacados al vac&iacute;o (37). En el presente estudio solamente se present&oacute; rechazo sensorial para el atributo aroma en el tratamiento con &aacute;cido l&aacute;ctico y control, el d&iacute;a 25 de almacenamiento, y se hall&oacute; diferencia estad&iacute;stica con respecto al tratamiento con extracto crudo de bacteriocinas. Este rechazo sensorial no coincide con el conteo de bacterias, porque no excedi&oacute; el l&iacute;mite considerado como deteriorado (&lt;10<sup>7</sup> ufc/g); sin embargo, el desarrollo de “off odour” es el resultado de la actividad microbiana (6). Es posible que la presencia de piel en los filetes incremente los conteos bacterianos iniciales e incida en el aroma con productos del metabolismo microbiano, donde se demuestra que el tratamiento con extracto crudo de bacteriocina fue efectivo. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">El presente estudio contribuy&oacute; a reconocer el comportamiento de bacterias deterioradoras en filetes de cachama biopreservados con un extracto crudo de bacteriocinas. Es importante observar que los efectos preservativos no influyeron negativamente sobre las caracter&iacute;sticas sensoriales. </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">La actividad antag&oacute;nica muestra ser un importante agente biopreservante, que podr&iacute;a ser utilizado en filetes de cachama empacados al vac&iacute;o y refrigerados; esta consideraci&oacute;n tendr&iacute;a validez en la medida que la matriz y la temperatura utilizadas facilitan la actividad de las sustancias bactericidas. </font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font size="3" face="Verdana"><strong>AGRADECIMIENTOS</strong> </font></p>     <p><font size="2" face="Verdana">Los autores agradecen a la profesora Olga In&eacute;s Montoya, directora del grupo de investigaci&oacute;n en Biotecnolog&iacute;a Microbiana de la Universidad Nacional de Colombia, por el aporte de la cepa de <i>Lactobacillus plantarum</i> LPMB10, y al profesor V&iacute;ctor Atencio Garc&iacute;a, director del Centro de Investigaci&oacute;n Pisc&iacute;cola de la Universidad de C&oacute;rdoba, CINPIC, por el aporte de los peces requeridos para el presente estudio. </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>&nbsp;</p>     <p><strong><font size="3" face="Verdana">REFERENCIAS BIBLIOGR&Aacute;FICAS </font></strong></p>     <!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">1. FAO. El estado mundial de la pesca y la acuicultura. Roma; 2004. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000105&pid=S0121-4004200800010000500001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">2. Zuckerman H, Avraham RB. Control of growth of L. monocytogenes in fresh salmon using microgardtand nisin. Lebens-Wiss-u-Technol 2002; 35:543–548. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000106&pid=S0121-4004200800010000500002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">3. Al-zoreky N, Ayres JW, Sandine WE. Characterization of propionibacterial growth metabolites inhibitory for gram negative bacterial. J Cultura and Dairy Prod 1993; 184: 4–13. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000107&pid=S0121-4004200800010000500003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">4. V&aacute;zquez JA, Gonz&aacute;lez MP, Murado MA. Preliminary tests on nisin and pediocin production using waste protein sources factorial and kinetic studies. Bioresource Techn 2006; 97:605–613. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000108&pid=S0121-4004200800010000500004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">5. Tom&eacute; E, Teixeira P, Gibbs PA. Anti-listerial inhibitory lactic acid bacteria isolated from commercial cold smoked salmon. Food Microbiol 2006; 23:399–405. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000109&pid=S0121-4004200800010000500005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">6. Dondero M, Cisternas F, Carvajal L, Simpson R. Changes in quality of vacuum-packed cold-smoked salmon (Salmo salar) as a function of storage temperature. Food Chem. 2004; 87: 543–550. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000110&pid=S0121-4004200800010000500006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">7. Gonz&aacute;lez-Rodr&iacute;guez MN, Sanz JJ, Santos JA, Otero A, Garc&iacute;a-L&oacute;pez ML. Numbers and types of microorganisms in vacuum-packed cold-smoked freshwater fish at the retail level. Int J Food Microbiol 2002; 77:161–168. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000111&pid=S0121-4004200800010000500007&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">8. Lyhs U, Lahtinen J, Fredriksson-Ahomaa M, Hyytia-Trees E, Elfing K, Korkeala H. Microbiological quality and shelf-life of vacuum-packaged ‘gravad' rainbow trout stored at 3 and 8&ordm;C. Int J Food Microbiol. 2001; 70:221–230. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000112&pid=S0121-4004200800010000500008&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">9. Fricourt BV, Barefoot SF, Testin RF, Hayasaka SS. Detection and activity of plantaricin F an antibacterial substance from <i>Lactobacillus plantarum</i> BF001 isolated of processed channel catfish. J Food Protection 1994; 57:698-702. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000113&pid=S0121-4004200800010000500009&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">10. Campos CA, Rodr&iacute;guez O, Calo-Mata P, Prado M, Barros-Vel&aacute;zquez J. Preliminary characterization of bacteriocins from Lactococcus lactis, Enterococcus faecium and Enterococcus mundtii strains isolated from turbot (Psetta maxima). Food Rese Int 2006; 39: 356–364. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000114&pid=S0121-4004200800010000500010&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">11. Yamazaki K, Suzuki M, Kawai Y, Inque N, Montville T. Inhibition of Listeria monocytogenes in cold-smoked salmon by Carnobacterium piscicola CS526 isolated from frozen surimi. J Food Protec 2003; 66:1420–1425. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000115&pid=S0121-4004200800010000500011&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">12. Duffes F, Leroi F, Boyaval P, Dousset X. Inhibition of Listeria monocytogenes by Carnobacterium spp strains in a simulated cold smoked fish system stored at 4 &ordm;C. Int J Food Microbiol 1999; 47:33–42. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000116&pid=S0121-4004200800010000500012&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">13. Ogunbanwo ST, Sanni AI, Onilude AA. African J Biotech. 2003; 2 (8), 219-227. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000117&pid=S0121-4004200800010000500013&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">14. Lewus CB, Kaiser A, Montville TJ. Inhibition of food-borne bacterial pathogens by bacteriocins from lactic acid bacteria isolated from meat. Appl Environ Microbiol 1991; 57:1683-1688. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000118&pid=S0121-4004200800010000500014&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">15. INVIMA. Manual de t&eacute;cnicas de an&aacute;lisis para control de calidad microbiol&oacute;gica de alimentos para consumo humano. Bogot&aacute;: INVIMA; 1998. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000119&pid=S0121-4004200800010000500015&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">16. Goulas AE, Kontominas MG. Effect of salting and smoking-method on the keeping quality of chub mackerel (Scomber japonicus): biochemical and sensory attributes. Food Chem 2005; 93:511–520. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000120&pid=S0121-4004200800010000500016&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">17. Amerine MA, Pongborn RH, Roescler EB. Principles of sensory evaluation of food. New York: Academic Press; 1965. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000121&pid=S0121-4004200800010000500017&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">18. ICMSF. Microorganisms in foods: 6. Microbial ecology of food commodities. Baltimore: Blackie Academic &amp; Professional; 1998. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000122&pid=S0121-4004200800010000500018&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">19. Hansen LT, Huss HH. Comparison of the microflora isolated from spoiled cold-smoked salmon from three smokehouses. Food Res Int 1998; 31: 703–711. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000123&pid=S0121-4004200800010000500019&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">20. Vescovo M, Scolari G, Zacconi C. Inhibition of Listeria innocua growth by antimicrobial-producing lactic acid cultures in vacuum-packed cold-smoked salmon. Food Microbiol 2006; 23:689–693. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000124&pid=S0121-4004200800010000500020&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">21. Garcia T, Mart&iacute;n R, Sanz B, Hern&aacute;ndez PE. Extensi&oacute;n de la vida &uacute;til de la carne fresca. I: Envasado en atm&oacute;sferas modificadas y utilizaci&oacute;n de bacterias l&aacute;cticas y bacteriocinas. Rev Esp Cienc Tecnol Aliment 1995; 35(1)1-18. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000125&pid=S0121-4004200800010000500021&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">22. Quintavalla S, Vicina L. Antimicrobial food packaging in meat industry. Meat Sci 2002; 62:373-380. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000126&pid=S0121-4004200800010000500022&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">23. Sch&ouml;bitz R, Gonz&aacute;lez J, Vignolo G, Molina LH. Control de Listeria monocytogenes en salm&oacute;n ahumado mediante la aplicaci&oacute;n de bacteriocinas producidas por bacterias l&aacute;cticas. La Alimentaci&oacute;n Latinoamericana 2006; 264:64-69. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000127&pid=S0121-4004200800010000500023&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">24. Vignolo G, Palacios J, Far&iacute;as ME, Sesma F, Schillinger U, Holzapfel W, et al. Combined effect of bacteriocins on the survival of various Listeria species in broth and meat system. Curr Microbiol 2000; 41:410-416. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000128&pid=S0121-4004200800010000500024&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">25. Crandall D, Montville T. Nisin resistance in Listeria monocytogenes ATCC 700302 is a complex phenotype. Appl Environ Microbiol 1998; 64: 231-237. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000129&pid=S0121-4004200800010000500025&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">26. Schillinger U, Chung H, Keppler K, Holzapfel W. Use of bacteriocinogenic lactic acid bacteria to inhibit spontaneous nisin-resitant mutants of Listeria monocytogenes Scott A. J Appl Microbiol 1998; 85:657-663. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000130&pid=S0121-4004200800010000500026&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">27. Duffes F, Corre C, Leroi F, Dousset X, Boyaval P. Inhibition of Listeria monocytogenes by in situ produced and semipuried bacteriocins of Carnobacterium spp. on vacuumpacked, refrigerated cold-smoked salmon. J Food Protection 2000; 62:(12)1394–1403. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000131&pid=S0121-4004200800010000500027&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">28. Vaz-velho M, Todorov S, Ribeiro J, Gibbs P. Growth control of Listeria innocua 2030C during processing and storage of cold-smoked salmon-trout by Carnobacterium divergens V41 culture and supernatant. Food Control 2005; 16:541–549. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000132&pid=S0121-4004200800010000500028&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">29. Leroi F, Joffraud JJ, Chevalier F, Cardinal M. Research of quality indices for cold-smoked salmon using a stepwise multiple regression of microbiological counts and physicochemical parameters. J Appl Microbiol 2001; 90: 578– 587. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000133&pid=S0121-4004200800010000500029&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">30. Brillet A, Pilet M, Prevost H, Cardinal M, Leroi F. Effect of inoculation of Carnobacterium divergens V41, a biopreservative strain against Listeria monocytogenes risk, on the microbiological, chemical and sensory quality of cold-smoked salmon. Int J Food Microbiol 2005; 104: 309– 324. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000134&pid=S0121-4004200800010000500030&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">31. Joffraud JJ, Cardinal M, Cornet J, Chasles JS, L&eacute;on S, Gigout F. Effect of bacterial interactions on the spoilage of cold-smoked salmon. Int J Food Microbiol 2006; 112: 51–61. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000135&pid=S0121-4004200800010000500031&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">32. Jorgensen LV, Huss HH, Dalgaard P. The effect of biogenic amine production by single bacterial cultures and metabiosis on cold-smoked salmon. J Appl Microbiol 2000; 89:920–934. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000136&pid=S0121-4004200800010000500032&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">33. Gram L, Huss H. Microbiological spoilage of fish and fish products. Int J Food Microbiol 1996, 33, 121–137. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000137&pid=S0121-4004200800010000500033&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">34. Truelstrup L, Gill T, Drewes S, Huss H. Importance of autolysis and microbiological activity on quality of cold-smoked salmon. Food Res Int 1996; 29:(2)181–188. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000138&pid=S0121-4004200800010000500034&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">35. Joffraud JJ, Leroi F, Roy C, Berdague JL. Characterization of volatile compounds produced by bacteria isolated from the spoilage flora of cold-smoked salmon. Int J Food Microbiol 2001; 66:175–184. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000139&pid=S0121-4004200800010000500035&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">36. Stohr V, Joffraud JJ, Cardinal M, Leroi F. Spoilage potential and sensory profile associated with bacteria isolated from cold-smoked salmon. Food Res Int 2001; 34:797– 806. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000140&pid=S0121-4004200800010000500036&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font size="2" face="Verdana">37. Lyhs U, Korkeala H, Bj&ouml;rkroth J. Identification of lactic acid bacteria from spoiled, vacuum-packaged ‘gravad' rainbow trout using ribotyping. Int J Food Microbiol 2002; 72:147– 153. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000141&pid=S0121-4004200800010000500037&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><p>&nbsp;</p>     ]]></body>
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