ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE Y CONTENIDO FENÓLICO DE LOS EXTRACTOS PROVENIENTES DE LAS BAYAS DE DOS ESPECIES DEL GÉNERO VISMIA (GUTTIFERAE)

ANTIOXIDANT ACTIVITY AND PHENOLIC CONTENT OF EXTRACTS FROM BERRIES OF TWO SPECIES OF VISMIA GENUS (GUTTIFERAE)

Edwin ÁLVAREZ R.¹; Orfa J. JÍMENEZ G.¹; Cristian M. POSADA A.¹; Benjamín A. ROJANO.¹; Jesús H. GIL G.²; Carlos M. GARCÍA P.¹; Diego L. DURANGO R.¹*
¹ Grupo de Química de los Productos Naturales y los Alimentos, Facultad de Ciencias, Escuela de Química, Universidad Nacional de Colombia, Calle 59ª 63-020 Autopista Norte, AA 3840, Medellín, Colombia.
² Departamento de Ingeniería Agrícola y de Alimentos, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín.

El material vegetal resultante del secado y molienda de las bayas de Vismia baccifera ssp. ferruginea y V. guianensis colectado en el Parque Regional Arví (Antioquia, Col.), se extrajo mediante percolación sucesiva con éter de petróleo, acetato de etilo y metanol. A los extractos se les determinó el rendimiento, contenido de fenoles totales y la capacidad captadora de radicales mediante los métodos de decoloración del DPPH y ABTS+. La mayor actividad captadora de radicales y el más alto contenido de compuestos fenólicos correspondieron al extracto en acetato de etilo, seguido por el de éter de petróleo. Mediante sucesivos fraccionamientos cromatográficos de los extractos activos se aislaron, los antranoides prenilados ferruginina A (1) y γ-hidroxiferruginina (2), y la antraquinona vismiaquinona A (3), cuya elucidación estructural fue llevada a cabo por métodos espectroscópicos y por comparación con los datos reportados en la literatura. Los datos obtenidos en los modelos in vitro establecen claramente el potencial antioxidante de los extractos de Vismia baccifera ssp. ferruginea y V. guianensis; esta actividad posiblemente está asociada con las características químicas de los metabolitos aislados.

Palabras clave: Guttiferae, fenoles totales, antranoides prenilados, vismiaquinona A, actividad antioxidante, radicales libres

Plant material resulting from dried and pulverized berries of Vismia baccifera ssp. ferruginea and V. guianensis collected in the Parque Regional Arví (Antioquia, Col.), was extracted by successive percolation with ether of petroleum, ethyl acetate and methanol. Yield, total phenolic content and free radical scavenging activity employing the methods of decoloration of the DPPH and ABTS+ free radicals of these extracts were determined. Ethyl acetate fraction, which was followed by petroleum ether extract, exhibited the highest ABTS and DPPH radical-scavenging activity and total phenolic content. Therefore, ethyl acetate and petroleum ether fractions were subjected to further separation by chromatographic methods. Thus, two prenylated anthranoid (ferruginin A, 1 and γ-hydroxyferruginin A, 2) and one anthraquinone (vismiaquinone A, 3), had been isolated and their structures determined by spectroscopic methods and by comparison with the values reported in literature. The data obtained in the in vitro models clearly establish the antioxidant potency of Vismia baccifera ssp. ferruginea and V. guianensis extracts; this activity may possibly be due to the chemical characteristics of compounds isolated.

Keywords: Guttiferae, total phenolics, prenylated anthranoids, vismiaquinone A, antioxidant activity, free radicals

INTRODUCCIÓN

Diversas reacciones bioquímicas en nuestro cuerpo generan especies reactivas de oxígeno, las cuales son capaces de dañar biomoléculas cruciales. Si estas especies no son captadas eficientemente por constituyentes celulares, pueden ocasionar enfermedades (1,2). Sin embargo, la acción deletérea de los radicales libres puede ser bloqueada por sustancias antioxidantes, las cuales captan los radicales libres destoxificando el organismo. Algunas investigaciones recientes sobre los radicales libres han confirmado que los alimentos ricos en antioxidantes juegan un papel esencial en la prevención de enfermedades neurodegenerativas, cardiovasculares y cancerígenas (3,4,5), males como el de Parkinson y Alzheimer (6), así como también inflamaciones y problemas ocasionados por el envejecimiento celular (7). En los últimos años, una de las áreas que más ha atraído la atención es la búsqueda de nuevos antioxidantes naturales para el control de enfermedades neurodegenerativas, en las cuales está implicado el daño oxidativo. En este sentido, los extractos de plantas y diferentes clases de fitoquímicos han demostrado ser una fuente importante de compuestos con marcada actividad antioxidante, permitiendo el crecimiento acelerado de investigaciones en esta área (8 - 13).

Las especies del género Vismia son árboles y arbustos de amplia distribución; se encuentran principalmente en las regiones tropicales y subtropicales de América del Sur y Central, aunque algunas pocas especies también se hallan en África y Asia (14). Estas especies han sido empleadas abundantemente alrededor del mundo en la medicina tradicional para el tratamiento de algunas enfermedades, particularmente el látex producido por diferentes especies, tales como V. augusta, V. confertiflora, V. dealbata, V. baccifera ssp. ferruginea y V. guianensis entre otras, se han usado para el tratamiento de heridas y ulceraciones infectadas, enfermedades fúngicas de la piel, herpes en los labios, como purgante y febrífugo, entre otras (15,16,17,18).

En este estudio se evaluó la actividad antioxidante de los extractos provenientes de las bayas de las especies Vismia guianensis y V. baccifera ssp. ferruginea, mediante el empleo de dos modelos in vitro basados en la capacidad captadora del radical libre 1,1-difenil-2-picrilhidrazilo y del catión radical del ácido 2,2´-azino-bis-(3-etilbenzotiazolina-6-sulfónico) . Adicionalmente se determinó el contenido de fenoles totales y el rendimiento de la extracción con cada uno de los solventes. Debido a que los extractos en acetato de etilo y éter de petróleo presentaron el mayor contenido de fenoles totales y la mejor actividad captadora de radicales, se sometieron a separación mediante métodos cromatográficos que condujeron al aislamiento de tres compuestos mayoritarios, para los cuales se llevó a cabo la elucidación estructural mediante métodos espectroscópicos convencionales.

MATERIALES Y MÉTODOS

Material vegetal

Las bayas frescas de Vismia baccifera ssp. ferruginea (VB) y Vismia guianensis (VG) se colectaron en el mes de Junio del año 2005 en el Parque Regional Arví (Antioquia, Colombia); un espécimen de comprobación de las plantas (2581 para V. guianensis y 2582 para V. baccifera ssp. ferruginea) se depositó en el Herbario de la Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín (MEDEL).

Métodos y materiales analíticos

Los puntos de fusión se determinaron en un fusiómetro Buchi B-540. Los espectros de resonancia magnética nuclear (RMN) se obtuvieron en un espectrómetro Bruker AMX 300, operando a 300.12 y 75.42 MHz para los núcleos de 1H y 13C respectivamente, y usando como solvente cloroformo deuterado (CDCl3). Los desplazamientos químicos están expresados en δ (ppm) y las constantes de acoplamiento están reportadas en Hz.. La cromatografía de columna (CC) se llevó a cabo usando sílica gel 60 (0.040-0.063 mm; Merck) y Sephadex LH-20 (Amersham Bioscience, Sweden) y la cromatografía de capa fina (CCF) y preparativa (CCP) en cromatoplacas de silica gel 60, F-254 (Merck). El revelado de las cromatoplacas se llevó a cabo por visualización bajo luz UV (254 nm, 310 nm) y por aspersión con FeCl3 al 5% seguido de calentamiento. El contenido de fenoles y la capacidad captadora de radicales libres se realizó en un espectrofotómetro JENWAY 6405.

Obtención de los extractos

Las bayas frescas (2 Kg) se lavaron con agua (3 x 500 mL) y posteriormente se secaron a 40°C en una estufa durante 24 h. Las bayas secas se trituraron y el material obtenido se extrajo exhaustiva y sucesivamente por percolación (a temperatura ambiente) con éter de petróleo, acetato de etilo y metanol durante 24 h. Después de la filtración, la fase orgánica se evaporó a sequedad a presión reducida en un rotaevaporador a 40° C, obteniéndose los extractos crudos que fueron posteriormente pesados.

Aislamiento

El extracto etéreo (34 g) proveniente de V. guianensis se fraccionó mediante CC en sílica gel usando mezclas de polaridad creciente de éter de petróleo y acetato de etilo, obteniéndose cinco fracciones (F1-F5). La fracción F2 (1.2 g) se analizó mediante cromatografía de exclusión molecular, de donde se obtuvieron cuatro subfracciones (F2A-F2D). La subfracción F2B se recristalizó empleando EtOH de donde se obtuvo el compuesto 3, como cristales de color rojo (15.0 mg).

Fenoles totales

Los compuestos antioxidantes generalmente contienen grupos fenólicos. Debido a esto, se comparó el contenido de compuestos fenólicos en cada uno de los extractos para obtener más información acerca de la posible capacidad antioxidante de cada uno de ellos.

La determinación del contenido de fenoles totales se realizó de acuerdo con el método de Folin-Ciocalteu (19). A los tres extractos de cada una de las dos especies vegetales en estudio se aplicó el siguiente procedimiento: a 50 μL de muestra se le adicionó un volumen de 250 μL de reactivo de Folin-Ciocalteu sin diluir. Después de 1 min., se añadieron 750 μL de solución acuosa de Na2CO3 al 20% (p/v), y se llevó a un aforo de 5.0 mL con agua. Los controles, por su parte, contenían todos los reactivos con excepción del extracto. Luego de 2 h de incubación a 25°C, se midieron las absorbancias a 760 nm y se compararon con una curva de calibración (r2 = 0.992) usando estándares de ácido gálico (100-600 mg/L). El contenido de fenoles totales se determinó como los equivalentes de ácido gálico (GAE, mg de ácido gálico/g de extracto), y los valores se presentan como la media de los datos del análisis llevado a cabo por triplicado. La ecuación obtenida con la regresión fue:

Y = 0,0019X - 0,0271; donde: Y = Absorbancia, y X = Concentración de fenoles.

Actividad inhibidora del radical 1,1-Difenil-2-picrilhidrazilo

Se midió y comparó la actividad captadora del radical de los diferentes extractos orgánicos provenientes de las dos especies en estudio. Para la medición de la actividad inhibidora del radical libre DPPH se empleó una solución en metanol de 1,1-difenil-2-picrilhidrazilo con una absorbancia de 0.3 a la longitud de onda de máxima absorción. Por su parte las muestras a evaluar se prepararon a diferentes concentraciones (50, 25, 12.5, 6.25, 3.12, 1.56 y 0.78 μg/mL) por adición de la solución de DPPH previamente preparada. Adicionalmente, la solución de referencia se obtuvo a partir de DMSO disuelto con la solución de DPPH, con el primero a las mismas concentraciones empleadas para las muestras. Igualmente se prepararon soluciones blanco de las muestras disueltas con metanol a las mismas concentraciones consideradas previamente, una solución de referencia con DMSO y metanol y un control positivo con butilhidroxitolueno (BHT). Todas las soluciones resultantes fueron incubadas en la oscuridad durante 30 minutos a temperatura ambiente. Pasado este tiempo se midieron en el espectrofotómetro las absorbancias para todas las soluciones a 517nm. A partir de las absorbancias obtenidas se determinó el porcentaje de inhibición medio para cada concentración de acuerdo con la siguiente expresión matemática:

donde Am es la absorbancia de las muestras, Abm es la absorbancia del blanco de muestra, Ar es la absorbancia de las soluciones de referencias y Abr la absorbancia del blanco de referencia.

Actividad inhibidora del catión radical del ácido 2,2'azinobis-(3-etilbenzotiazolina)-6-sulfónico

Para cada uno de los extractos se prepararon soluciones de diferente concentración en DMSO, a las cuales se adicionó la solución de ABTS (2,2'- etilbenzotiazolina-6- sulfonato de amonio), disuelta en una solución buffer acuosa citrato-fosfato de pH 7.4 y con una absorbancia de 0.700 a la longitud de onda de máxima absorción (700 nm). Cada concentración se evaluó por triplicado. Como blancos de muestra se utilizaron las mismas concentraciones preparadas en la solución buffer de pH 7.4. Para la referencia se prepararon tres repeticiones, que contenían la solución buffer con la solución ABTS, y por último, para el blanco de referencia se hizo una repetición que contenía DMSO con la solución buffer pH 7.4. Una vez obtenidas las mezclas se dejaron incubar durante media hora y se midió la absorbancia a 700 nm en el espectrofotómetro. Seguidamente se calculó el porcentaje de inhibición medio, IC50, con la misma expresión matemática empleada para el análisis de la actividad inhibitoria del radical . De igual manera se usó el BHT como control positivo.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Rendimiento de los extractos y contenido de fenoles totales

El rendimiento de la extracción y contenido de fenoles totales de los extractos obtenidos a partir de las bayas de las especies del género Vismia, V. guianensis y V. baccifera ssp. ferruginea usando éter de petróleo, acetato de etilo y metanol se presentan en la tabla 1. Los porcentajes de material extractable con los diferentes solventes mostraron similitudes para las dos especies analizadas; los rendimientos máximos en la extracción se obtuvieron para los extractos de metanol en ambas especies, siendo el porcentaje en peso con respecto al material vegetal seco de 30.40% para VG y 31.60% para VB. Por su parte, el porcentaje en peso extraído con éter de petróleo y acetato de etilo correspondió respectivamente a 3.99% y 4.46% para VG y 4.56% y 5.89% para VB. El porcentaje en peso total de material extractable a partir de las bayas secas fue de 38.95% para VG y 39.82 % para VB. Ninguna asociación significativa se encontró entre los rendimientos de la extracción y el contenido de fenoles totales o la actividad inhibidora del radical y .

Tabla 1. Porcentaje extraído y contenido de fenoles totales de los extractos provenientes de las especies del género Vismia (V. guianensis y V. baccifera ssp. ferruginea).

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Las sustancias fenólicas se han reconocido por su aporte a la actividad antioxidante de los materiales vegetales (22). Debido a lo anterior, se investigó el contenido de fenoles totales en los extractos empleando el método de Folin-Ciocalteu. El contenido de fenoles totales para los extractos provenientes de las dos especies estuvo en el rango de 78.33 ± 6.11 a 356.67 ± 27.77 mg/g extracto como equivalentes de ácido gálico (véase tabla 1). Aunque la fracción soluble en acetato de etilo del material vegetal seco fue menor comparado con la fracción soluble en metanol, el contenido fenólico total (356.67 ± 27.77 mg GAE /g extracto) fue casi dos veces mayor que en el extracto de metanol (186.67 mg GAE/g extracto). El contenido de fenoles totales para las dos especies, tanto en los extractos en éter de petróleo como en los de metanol, fue muy similar. Por otro lado, el contenido fenólico de los extractos en éter de petróleo mostró marcadas diferencias entre las especies analizadas, siendo para VG (205.00 ± 1.67 mg GAE/g extracto) de casi tres veces el encontrado en VB (78.33 ± 6.11 mg GAE/g extracto).

Actividad captadora del radical libre de los extractos

El DPPH es usualmente empleado como sustrato para evaluar la actividad antioxidante de compuestos que, se presume, pueden tener capacidad captadora de radicales libres (23). El método está basado en la reducción de la absorbancia de la solución en metanol de en la presencia de un antioxidante donante de hidrógeno, debido a la generación de la forma no radicalaria DPPH-H. El valor IC50 para cada extracto y el BHT se calculó y definió como la concentración de muestra causante del 50% de inhibición de la absorbancia (véase tabla 2). Un valor inferior del IC50 indica una mayor actividad antioxidante. En este estudio, todos los extractos mostraron una excelente actividad inhibidora del radical dependiente de la concentración, con valores de IC50 que estuvieron en el rango de 3.72 ± 0.13 a 7.04 ± 0.07 para VG y 4.46 ± 0.19 a 17.51 ± 0.63 µg/ml para VB. Los extractos provenientes de VG presentaron valores de IC50 comparables al obtenido para el control positivo BHT e inferiores a los reportados para VB, lo que demuestra una actividad superior en esta primera especie. Además, los extractos en acetato de etilo de las dos especies, que presentaron el mayor contenido fenólico, resultaron ser los de mayor actividad inhibidora del radical , incluso superior a la obtenida para el BHT. La actividad captadora del radical, encontrada en los extractos de éter de petróleo y metanol para cada una de las especies fue similar, a pesar de que el rendimiento obtenido para este último fue considerablemente superior al encontrado en el extracto etéreo. Lo anterior puede estar asociado a que durante el tratamiento con metanol se extrajeron algunos compuestos fenólicos de alta polaridad junto con azúcares, sales inorgánicas y otros compuestos no activos para captar radicales. Adicionalmente, la actividad del extracto etéreo de VG es aproximadamente el doble de la encontrada en el mismo extracto en VB, lo cual puede estar asociado con el mayor contenido de fenoles totales determinado en VG.

Tabla 2. Valores de IC50 (μg/ml) de la actividad de los diferentes extractos de las bayas de las dos especies de Vismia (V. guianensis y V. baccifera ssp. ferruginea).

Actividad captadora del catión radical de los extractos

Otro de los métodos utilizados para determinar la capacidad de un antioxidante para captar radicales libres, y aplicable tanto a antioxidantes lipofílicos como hidrofílicos, es el protocolo de decoloración del catión radical . Este método es uno de los más aplicados porque se considera un protocolo de elevada sensibilidad, práctico, rápido y muy estable (24). Debe señalarse que, a pesar de las diferencias metodológicas, los resultados obtenidos con los métodos y permiten alcanzar conclusiones prácticamente similares (véase tabla 2). Todos los extractos procedentes de las dos especies revelaron una buena capacidad inhibitoria del catión radical, con valores de IC50 en el rango de 4.16 ± 0.07 a 11.23 ± 0.41 μg/ml. Los extractos en acetato de etilo, que presentaron el mas alto contenido fenólico, también fueron los de mayor actividad con valores de IC50 de 4.16 ± 0.07 y 5.86 ± 0.72 para VB y VG, respectivamente. Por su parte, los extractos en éter de petróleo mostraron valores de IC50 inferiores a los obtenidos para los extractos en metanol, lo que demuestra una capacidad antioxidante superior en los primeros.
No se observó una correlación lineal entre los valores de la actividad captadora de radicales ( y ) y el contenido en fenoles totales (método de Folin-Ciocalteau). Esto indica claramente que otros compuestos diferentes a los fenólicos pueden tener un papel importante en la actividad captadora del radical catión en los extractos.

Aislamiento de los metabolitos mayoritarios presentes en el extracto en acetato de etilo

Basados en los promisorios resultados de la actividad antioxidante y el contenido de fenoles se procedió a la obtención de compuestos puros a partir del extracto en acetato de etilo de VB y en éter de petróleo de VG. Del extracto en acetato de etilo de VB, sometido a sucesivas cromatografías de columna sobre sílica gel y Sephadex LH-20, se aislaron como metabolitos mayoritarios los antranoides prenilados ferruginina A (1) y la γ-hidroxiferruginina A (2) (véase figura 1). Un análisis comparativo cualitativo (CCF) permitió establecer que ambos compuestos estaban presentes en el extracto en AcOEt de la especie VG. Los componentes aislados presentaron las siguientes propiedades físicas:

Figura 1. Estructura de los componentes mayoritarios aislados del extracto en acetato de etilo (1, 2) y éter de petróleo (3) de las bayas de las especies de Vismia.

Ferruginina A (1) se obtuvo como un sólido en agujas de color amarillo (n-hexano); punto de fusión 168-170 °C (no corregido). RMN ¹H (300 MHz; CDCl₃): δ 16.49 (1H, s, 9-OH), 10.05 (1H, s, 8-OH), 7.27 (1H, s, H-10), 7.06 (1H, s, H-5, J 7Hz, acoplamiento a larga distancia con C6-CH₃), 5.90 (1H, s, H-2), 5.15 (1H, t, H-17), 4.72 (1H, t, H-12 y H-12', J 7Hz), 4.66 (1H, t, H-12 y H-12', J 7Hz), 3.50 (2H, d, H-16, J 7Hz), 2.90-2.50 (4H, m, H-11 y H-11'), 2.46 (3H, s, C6-CH3, acoplamiento a larga distancia con H-5), 1.84 (3H, s, Me), 1.71 (3H, s, Me), 1.55 (3H, s, Me), 1.51 (3H, s, Me), 1.48 (3H, s, Me). RMN 13C (75.5 MHz; CDCl₃): 198.2 (C-1), 192.2 (C-3), 166.2 (C-9), 163.3 (C-8), 154.6 (C-4a), 144.5 (C-6), 142.1 (C-10a), 136.9 (C-13 y 13'), 135.9 (C-18), 124.3 (C-5), 108.9 (C-9a), 105.7 (C-8a), 122.8 (C-7), 119.1 (C-12 y 12'), 118.7 (C-17), 117.6 (C-10), 105.7 (C-2), 50.2 (C-4), 40.9 (C-11 y 11'), 25.4 (C-16), 26.3 (3xMe), 21.2 (Ar-CH₃), 18.5 (3xMe). Estos datos poseen una buena concordancia con aquellos reportados previamente en la literatura (25).

γ-Hidroxiferruginina A (2) se obtuvo como cristales de color rojo-naranja (n-hexano); punto de fusión 97-99 °C (no corregido). RMN ¹H (300 MHz; CDCl₃): δ 16.52 (1H, s, 9-OH), 10.15 (1H, s, 8-OH), 7.13 (1H, s, H-10), 7.09 (1H, s, H-5, J 7Hz, acoplamiento a larga distancia con C6-CH₃), 5.83 (1H, s, H-2), 5.15 (1H, t, H-17), 4.72 (1H, t, H-12 y 12', J 7Hz), 4.66 (1H, t, H-12 y 12', J 7Hz), 3.48 (2H, d, H-16, J 7Hz), 3.14 y 2.50 (4H, m, H-11 y H-11'), 2.45 (3H, s, C6-CH₃, acoplamiento a larga distancia con H-5), 2.04 (3H, s, Me), 1.83 (3H, s, Me), 1.70 (3H, s, Me), 1.57 (3H, s, Me), 1.49 (3H, s, Me). NMR ¹³C (75.5 MHz; CDCl3): 198.2 (C-1), 192.2 (C-3), 166.2 (C-9), 163.3 (C-8), 154.6 (C-4a), 144.5 (C-6), 142.1 (C-10a), 136.9 (C-13 y 13'), 135.9 (C-18), 124.3 (C-5), 108. 9 (C-9a), 105.7 (C-8a), 122.8 (C-7), 119.1 (C-12 y 12'), 118.7 (C-17), 117.6 (C-10), 105.7 (C-2), 50.2 (C-4), 40.9 (C-11 y 11'), 25.4 (C-16), 26.3 (3xMe), 21.2 (Ar-CH3), 18.5 (3xMe). Estos datos concuerdan perfectamente con aquellos reportados en la literatura (26).

Del extracto en éter de petróleo de VG sometido a sucesivas cromatografías de columna sobre sílica gel y Sephadex LH-20, se aisló como metabolito mayoritario la vismiaquinona A (3) (véase figura 1). Un análisis comparativo cualitativo (CCF) permitió establecer que este compuesto está presente en el extracto de éter de petróleo de la especie VG. El compuesto aislado presentó las siguientes propiedades físicas:

Vismiaquinona A (3).Se obtuvo como cristales de color amarillo-naranja con punto de fusión de 202-204 °C (no corregido). RMN ¹H (300 MHz; CDCl3): δ 12.89 (1H, s, 8-OH), 12.06 (1H, s, 1-OH), 7.55 (1H, s, H-4), 7.46 (1H, s, H-5), 7.00 (1H, s, H-7), 6.81 (1H, dd, H-2', J 7.2; 16.3 Hz), 6.59 (1H, d, H-1', J 16.3 Hz), 3.98 (3H, s, OMe), 2.40 (1H, m, H-3'), 2.38 (3H, s, C6-CH3), 1.07 (6H, d, 2xCH3, H-4' y H-5', J 6.7 Hz). RMN 13C (75.5 MHz; CDCl3): 191.1 (C-9), 182.6 (C-10), 163.1 (C-8), 162.9 (C-1), 162.5 (C-3), 148.9 (C-6), 147.2 (C-2'), 133.0 (C-4a), 132.3 (C-1'), 131.9 (C-4b), 124.8 (C-7), 121.5 (C-4), 116.2 (C-8a), 110.4 (C-4), 110.3 (C-8b), 56.7 (OMe), 33.8 (C-3'), 22. 8 (2xMe, C-4' y C-5'), 22.6 (Ar-CH₃). Los datos espectroscópicos se correlacionan perfectamente con los reportados en la literatura (27).

CONCLUSIONES

Los resultados obtenidos en este estudio muestran claramente que las bayas de V. baccifera ssp. ferruginea y V. guianensis pueden ser una fuente natural de antioxidantes con potencial aplicación en alimentos o la industria farmacéutica, dada la alta actividad encontrada en los diferentes extractos bajo los dos modelos in vitro (DPPH, ABTS) evaluados. En particular, el extracto de acetato de etilo presentó el mayor contenido de fenoles y la más alta actividad captadora de radicales, superando inclusive al BHT, lo que constituye a esta fracción en una fuente potencial de sustancias antioxidantes de polaridad media. Los metabolitos identificados poseen características químicas que pueden estar asociadas con la capacidad captadora de radicales encontrada en los diferentes extractos. Sin embargo, son necesarias futuras investigaciones respecto al mecanismo y la evaluación de la capacidad antioxidante de los compuestos individuales presentes en los extractos.

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AGRADECIMIENTO

Este trabajo fue financiado por la Dirección de Investigaciones de la Universidad Nacional de Colombia-Sede Medellín (DIME) - Código DIME No. 30802946.

* Autor a quien se debe dirigir la correspondencia: dldurango@unalmed.edu.co