Edison OSORIO D.^1,2*; Guillermo MONTOYA P.¹; Jaume BASTIDA^2
1 Grupo de Investigación en Sustancias Bioactivas. Facultad de Química Farmacéutica. Universidad de Antioquia. A.A. 1226. Medellín,Colombia. ]]> ²Departament de Productes Naturals. Facultat de Farmàcia. Universitat de Barcelona. Avda Diagonal 643, 08028. Barcelona, Spain.

A una fracción biflavonoide (FB) caracterizada fitoquímicamente de Garcinia madruno (Clusiaceae), se le evalúa su potencial inhibitorio de la oxidación de LDL y su capacidad estabilizadora de especies radicalarias, correlacionando dichas actividades con su contenido en biflavonoides. Los biflavonoides morelloflavona, volkensiflavona y amentoflavona se identifican a partir de la FB. El extracto que contiene la FB (extracto AcOEt) se determina como el principal factor involucrado en la actividad estabilizadora de radicales libres de esta especie vegetal, obteniendo la actividad estabilizadora del radical DPPH• a una concentración de 4,50 µg/mL. La peroxidación inducida con CuSO4 de las lipoproteínas de baja densidad, se reduce significativamente en presencia de FB (CE₅₀ = 11,85 µg/mL). El biflavonoide morelloflavona se determina como el principal responsable de la protección ejercida por la FB frente a la actividad estabilizadora de radicales libres y la peroxidación lipídica, aunque posiblemente existan procesos de sinergismo. Estas propiedades sugieren que la FB de G. madruno es un excelente candidato para ser utilizado como antioxidante.

Palabras clave: Garcinia madruno, Clusiaceae, biflavonoides, antioxidante, DPPH, peroxidación lipídica.

The inhibitory LDL oxidation potential and free radical stabilization capacity of a characterized biflavonoid fraction (FB) was evaluated and correlated by its biflavonoid content. Morelloflavone, volkensiflavone and amentoflavone were identified in the FB. The extract containing the FB (AcOEt extract) was found to be the major contributor to the free radical-scavenging activity of G. madruno. The DPPH activity for the FB was 4.50 µg/mL. Lipid peroxidation, induced with CuSO₄, was significantly reduced in the presence of the FB (CE₅₀ = 11.85 µg/mL). Morelloflavone was found to be the main biflavonoid in the fraction responsible for its protection against lipid peroxidation and free radical-scavenging activity, although processes of synergy are possible. These properties suggest that the FB of G. madruno is an excellent candidate for use as an antioxidant.

Keywords: Garcinia madruno, Clusiaceae, biflavonoids, antioxidant, DPPH, lipid peroxidation.

Los compuestos fenólicos constituyen un grupo numeroso de metabolitos secundarios considerados como antioxidantes naturales, además de presentar otras funciones biológicas importantes (7). En los últimos años ha cobrado especial interés el estudio de la actividad biológica de los polifenoles, y en especial la evaluación de su capacidad antioxidante. Estos compuestos actúan a menudo de forma sinérgica con las vitaminas C y E, aumentando y prolongando los beneficios de las mismas (8, 9). Se ha comprobado su capacidad para actuar como dadores de electrones o quelantes de iones metálicos como el hierro y el cobre, inhibiendo la oxidación de lipoproteínas de baja densidad (LDL) (8). Las LDL están implicadas en la patogénesis de las enfermedades coronarias y, además, está ampliamente aceptado que la oxidación de estas lipoproteínas es un punto de inicio de la lesión arterial (10, 11). Que el estrés oxidativo contribuye a la patogénesis de las enfermedades cardiovasculares se constató gracias a las observaciones realizadas en las modificaciones que sufrían las LDL al ser oxidadas y posteriormente convertidas a sus formas aterogénicas (oxLDL) y reconocidas por receptores "scavenger" de macrófagos, los cuales favorecen la formación de células espumosas (11).

Entre los compuestos fenólicos destacamos los flavonoides, cuyas propiedades antioxidantes se deben a la protección de los tejidos frente a las ROS y a la peroxidación lipídica (12). Por su parte, los biflavonoides, dímeros de flavonoides unidos por un enlace inter-flavonoide de tipo C-O-C o C-C, presentan menos evidencias desde el punto de vista biológico; sin embargo, entre sus propiedades se encuentran las actividades antinflamatoria, antiartrítica y antioxidante (13, 14), asociadas con la habilidad de suprimir especies reactivas de oxígeno y de inhibir enzimas como la fosfolipasa A₂ y la ciclooxigenasa (14, 15).

En nuestra continua investigación de metabolitos biológicamente activos a partir de la flora colombiana, en el presente trabajo reportamos el aislamiento de una fracción biflavonoide de Garcinia madruno (Kunth) Hammel (Clusiaceae), su caracterización fitoquímica y la evaluación de su efecto antioxidante por dos mecanismos diferentes, la inhibición de la peroxidación lipídica de las LDL, así como la captación del radical libre DPPH•, dos procesos que acarrean daño vascular.

Material vegetal

Las partes aéreas (hojas y ramas) de G. madruno se recolectaron en Julio de 2004, en predios de la Universidad de Antioquia (Medellín, Colombia). Las muestras fueron identificadas por el Dr. Fernando Alzate, y un espécimen (Alzate-3030) se depositó en el Herbario de la Universidad de Antioquia (HUA).

Extracción, fraccionamiento y purificación de la FB y de los biflavonoides puros

Se extrajeron ramas y hojas secas de G. madruno (1,8 Kg) a temperatura ambiente con hexano y posteriormente con AcOEt (720 g). Una porción del extracto de AcOEt (50 g) se fraccionó por diferentes técnicas cromatográficas como exclusión por tamaño, cromatografía líquida al vacío y cromatografía en columna para obtener la fracción purificada de biflavonoides (FB) (2,2 g). Una porción de FB (200 mg) se separó por cromatografía en capa fina preparativa para obtener morelloflavona [1] (127,9 mg), volkensiflavona [2] (32,8 mg) y amentoflavona [3] (15,9 mg). Los biflavonoides conocidos se identificaron por comparación de sus datos físicos y espectroscópicos (CD, IR, EM, RMN 1H y 13C y RMN 2D) con los datos previamente reportados en la literatura (16-21).

El efecto de cada uno de los biflavonoides y de la fracción biflavonoide (FB) sobre el radical DPPH• se determinó mediante el procedimiento descrito por Brand-Williams y col. (22). Así, una alícuota (500 µL) de las soluciones que contenía diferentes concentraciones de FB y de los biflavonoides se adicionó a 1000 µL de una solución metanólica de DPPH• (0,02 mg/mL). La absorbancia a 517 nm se midió cada dos minutos, en un espectrofotómetro Varian CaryBio 50, hasta que la reacción se estabilizó. La concentración de DPPH• a diferentes tiempos de reacción ([DPPH•]_T) se calculó de acuerdo con la siguiente ecuación de la recta:

Con un coeficiente de regresión linear de 0,99, y una desviación estándar de 0,004351. El porcentaje del radical DPPH• remanente (% [DPPH•]_REM) fue calculado por la siguiente expresión:

El modelo de la curva dosis-respuesta obtenido al correlacionar el porcentaje de DPPH• remanente frente a la concentración de antioxidante, permite calcular la cantidad de antioxidante necesaria para estabilizar un 50% del radical libre (CE₅₀) (23).

La cantidad de DPPH• estabilizado se estimó para los primeros cuatro minutos de reacción en una concentración de compuesto cercana al valor de CE50. Estos valores fueron convertidos a una relación dividiéndolos por el total de DPPH• reducido en el estado estable. Esta relación fue denominada Índice de Reducción (RIt5'), un parámetro cinético que mide la velocidad de reacción para la reducción del DPPH• (24). Todos los parámetros fueron calculados gráficamente utilizando el software GraphPad 4.0 (Prism, USA).

Inhibición de la oxidación de lipoproteínas de baja densidad (LDL)

Aislamiento de LDL

La fracción de LDL fue obtenida por ultracentrifugación, aplicando un gradiente discontinuo de densidad en un equipo Beckman XL-100, utilizando un rotor SW-55Ti y tubos ultraclear de 5 mL (Ted Wilsona). Se parte de 50 mL de plasma procedente de voluntarios sanos y no fumadores (20-25 años), centrifugando a 2.500 rpm y 4° con citrato de sodio como anticoagulante (10,6 µmol citrato de sodio/mL de sangre). La fracción quilomicrones VLDL fue obtenida adicionando 1,6 mL de NaCl (1,0 g/mL) a 3,2 mL de plasma y centrifugando a 5° por un periodo de 12 h a 49.500 rpm. La fracción superior (1,6 mL) se retiró y se adicionaron 1,6 mL de KBr (1,2 g/mL), centrifugando de nuevo a 5° durante 18 h a 49.500 rpm. Se utilizó la SDS-PAGE para confirmar la pureza de las fracciones colectadas.

La fracción LDL obtenida por ultracentrifugación se cuantificó utilizando el ensayo estándar mediante espectrofotometría (Protein Quantification Kit-Rapid de Fluka).

Oxidación de la LDL

400 µL de LDL a una concentración de 430 µg/mL, se preincubaron durante 15 minutos con 50 µL de los biflavonoides y de FB a diferentes concentraciones. La oxidación se inició con la adición de 50 µL de una solución de CuSO₄ (100 µM) y se mantuvo la reacción a 37°C durante 12 h. El proceso se detuvo con la adición de 25 µL de una solución al 1% de EDTA, enfriando en un baño de hielo durante 15 minutos.

Determinación TBARS

Los productos de la peroxidación lipídica, principalmente malonildialdehído (MDA), formados durante el proceso de oxidación, se midieron en un espectrofotómetro Varian CaryBio 50 aplicando el método TBARS (thiobarbituric acid reactive substances). Para ello se adicionó 1,0 mL de una solución que contiene: 0,67% de ácido tiobarbitúrico (TBA), 15% de ácido tricloroacético (TCA) y 0,1 N de HCl, a 0.5 mL de la solución de oxidación de la LDL. El cromóforo obtenido a partir del TBA y el MDA, se forma a 95°C al cabo de 60 min. La solución se filtró a través de ésteres de metilcelulosa (0,2 micrones). Las lecturas de tres experimentos independientes se realizaron a 532 nm, y la cantidad de equivalentes de malondialdehído (MDA) formados se calculó usando un coeficiente de extinción molar de 1,56 x 10⁵ M^-1cm^-1 (25).

Caracterización fitoquímica

A partir de una fracción biflavonoide (FB) obtenida a partir del extracto desengrasado de G. madruno se obtuvieron tres compuestos (Véase figura 1), dos biflavonoides de tipo flavanona-(3→8")flavona, morelloflavona [1] y volkensiflavona [2], y el biflavonoide flavona-(3'→8'')-flavona, amentoflavona [3], en una proporción aproximada de 8:2:1.

Figura 1. Biflavonoides aislados de la FB de G. madruno.

La determinación del compuesto [1] se basó en el análisis de los datos espectroscópicos de RMN ¹H (Véase tabla 1). El espectro de RMN ¹H realizado en DMSO-d6 y CD3OD a temperatura ambiente, muestra que las señales principales están acompañadas por otras de menor intensidad con similares desplazamientos químicos. El espectro de RMN ¹³C a temperatura ambiente fue igualmente complejo. La duplicación de señales en los compuestos [1] y [2] sugiere la existencia de dos confórmeros a temperatura ambiente debido a su comportamiento rotamérico (atropisomerismo) (16, 26). La principal razón de la existencia de tales confórmeros son las restricciones de rotación alrededor del enlace C3→C8''. El aumento de la temperatura revela cambios en el espectro de RMN ¹H (Véase figura 2). A 100 °C (temperatura máxima utilizada en este experimento), se observó un grupo simple de señales a partir de un único confórmero. Pasada una hora, y utilizando la misma muestra a 25°C, el espectro de RMN ¹H mostró el mismo radio de los dos confórmeros. Este experimento de RMN a temperatura variable confirmó la presencia de dos confórmeros distintos del compuesto, [1a] y [1b] en solución a temperatura ambiente.

Figura 2. Experimento de RMN ¹H (Bruker DMX500) a temperatura variable de morelloflavona [1].

Tabla 1. Datos de RMN ¹H a 25°C de morelloflavona [1] y volkensiflavona [2] en DMSO-d6, y de amentoflavona [3] en CD3OD, σ in ppm, J in Hz.

Para facilitar la asignación de las señales de RMN ¹H y ¹³C a temperatura ambiente de los dos confórmeros del compuesto [1a] y [1b] en solución, se utilizaron experimentos de RMN 2D incluyendo COSY, HMQC y HMBC. Para el confórmero minoritario [1b], se asignaron solamente las señales de RMN ¹H ya que las señales de RMN ¹³C fueron, generalmente, de baja intensidad (Véase tabla 1). El espectro 1H mostró la presencia de un protón aromático a σ = 6,16 asignado a H-6''. El singulete ancho para dos protones a σ = 5.95, se asignó a los protones H-6 y H-8. El protón H-3'' mostró un singulete a σ = 6,52. Basándonos en la correlación ¹H–¹H (COSY), en la correlación heteronuclear a larga distancia (HMBC) y en las constante de acoplamiento, los dos dobletes que integran para cuatro protones aromáticos a σ = 7,14 (d, J = 9,0) y 6,38 (d, J = 8,5) se asignaron al sistema A₂B₂ (H-2'/6' y H-3'/5', respectivamente). Los protones del anillo E muestran un patrón ABX consistente para un sistema de protones que acoplan en posición orto a σ = 6,89 (d, J = 8,5) asignado a H-5''', un doblete ancho a σ = 7,39 (brd, J = 8,5) correspondiente a H-6''' y un singulete ancho a σ = 7,40 correspondiente con H-2'''. Este sistema fue confirmado por HMBC. La estéreo-estructura relativa del compuesto [1] fue identificada por poseer una relación trans entre las posiciones 2 y 3 debido a la constante de acoplamiento de J_2,3 = 11,5 Hz. La correlación a larga distancia (HMBC) fue útil en la asignación de los carbonos cuaternarios. Entre las principales correlaciones a tres enlaces, están la del H-2 con los correspondientes C-4, C-2', C-6' y C-8'', las cuales fueron útiles para designar una unión inter-flavonoide de tipo C3→C8''. La configuración absoluta del compuesto [1] se confirmó por su curva de dicroísmo circular (CD) como 2R,3S (16). La inspección en la curva de CD indicó efectos Cotton positivos para las transiciones n→π* y π→π* alrededor de 345 y 285 nm, respectivamente. La alta amplitud del efecto Cotton positivo sobre 285 indica una orientación β del anillo B y, por lo tanto, una configuración absoluta 2R (16). Teniendo en cuenta los datos de CD y las constantes de acoplamiento del espectro de RMN ¹H del compuesto [1] ( J2, 3, ca. 11,5 Hz), se facilita la asignación de una configuración relativa de las posiciones 2,3 en trans y una configuración absoluta 3S. A partir de los datos espectroscópicos mostrados, el compuesto [1] se halló estructuralmente idéntico al biflavonoide morelloflavona (16,17).

El compuesto [2] mostró similar complejidad en el espectro de RMN ¹H que el compuesto [1], fenómeno característico de biflavonoides con enlace inter-flavonoide C3→C8''. Sin embargo, mientras que [1] presentó un simple sistema A₂B₂, los espectros de RMN ¹H y ¹³C del compuesto [2] mostraron dos sets de señales aromáticas debido al sistema A₂B₂ adicional del anillo E (Véase tabla 1). El compuesto [2] se identificó como volkensiflavona, por comparación de sus datos físicos y espectrales con los reportados para este compuesto en la literatura (21).

La determinación del compuesto [3] se basó en el análisis de los datos espectroscópicos de RMN ¹H y ¹³C. El espectro de RMN ¹H (400 MHz), tomado en CD3OD, mostró dos señales a σ = 6,15 (d, J = 2,0 Hz) y 6,36 (d, J = 2,0 Hz), las cuales se asignaron a H-6 y H-8, respectivamente, en concordancia con el experimento COSY. Al no presentarse un doblete similar para H-6'' y H-8'', el anclaje entre las unidades flavonoides podría involucrar a C-6'' o C-8''. Un patrón ABX consistente en un doblete a σ = 7,08 (d, J = 8,8 Hz), un doble doblete a σ = 7,85 (dd, J = 2,0; 8,8 Hz) y un doblete a σ = 7,95 (d, J = 2,0 Hz) se asignó a H-5', H-6' y H-2', respectivamente. Se observó también un sistema A₂B₂ asignado a los cuatro protones aromáticos, H-2'''/H-6'''–H-3'''/H-5''', como dos dobletes a σ = 7,50 (d, J = 8,8 Hz) y a σ = 6,69 (d, J = 8,8 Hz), respectivamente. Además, la presencia de tres singuletes a σ = 6,57; 6,56 y 6,34 asignables a H-3, H-3'' y H-6'' excluyó la posibilidad de cualquier unión entre las unidades flavonas en C-3'' o C-6'' con C-3'. La posición de unión de las dos unidades de flavonas se confirmó por el experimento HMBC como C3'→C8'' en base a la correlación a tres enlaces HMBC entre el H-2' y el C-8''. Acorde con los resultados, el compuesto [3] se determinó como amentoflavona, un biflavonoide con anclaje C3'→C8''-interflavonoide, en concordancia con investigaciones previas (19, 21).

La comparación de la capacidad de cada biflavonoide para atrapar el radical DPPH• se efectuó en términos de concentración µM, mientras que la importancia relativa de la FB se expresó en términos de µg/mL. La fracción FB y los biflavonoides morelloflavona [1] y volkensiflavona [2] promovieron la estabilización del radical DPPH•, con valores de CE₅₀ de 4,50; 4,34 y 4,94 µg/mL, respectivamente (Véase tabla 2). La menor actividad fue observada para la amentoflavona [3] (un biflavonoide flavonaflavona), con un valor de CE₅₀ superior a 100 µM, lo cual está en concordancia con publicaciones anteriores (27, 28). Es interesante destacar que compuestos como [1] presentaron la mayor actividad captadora de radicales libres mediante el ensayo del DPPH•, entre los biflavonoides aislados de G. xanthochymus; sin embargo, en reportes previos, su CE₅₀ estaba alrededor de los 60 µM (27). Diferencias en los procedimientos del ensayo y los medios de solubilización de los compuestos podrían explicar dicho fenómeno. La quercetina [Q] se utilizó como control positivo en este ensayo, mostrando una actividad de 23,36 µM. Cabe mencionar que [Q] es un flavonoide monomérico y que su actividad en términos de µg/mL presenta unos niveles de CE₅₀ equivalentes a los de los biflavonoides activos (7,06 µg/mL).

Generalmente es aceptado que la combinación de la sustitución 3',4'-dihidroxi (catecol) en el anillo B, con un doble enlace entre C-2 y C-3 y una función carbonilo en la posición C-4, son requerimientos estructurales esenciales para la estabilización del radical aroxil flavonoidal (29, 30). Nuestros resultados confirman dichas observaciones. De hecho, las reacciones más aceptadas para definir la capacidad de captación de radicales libres, las cuales son inicialmente atribuidas a la alta reactividad de los sustituyentes hidroxilo, son (31):

La reacción 2a representa el acoplamiento entre dos radicales flavonoides (dimerización), la reacción 2b el acople entre un radical flavonoide con un radical DPPH•, y la reacción 2c representa, probablemente, el mecanismo de terminación predominante, el cual se produce mediante la formación de una quinona, más estable, a partir de una semiquinona, por pérdida de 1 electrón (31, 32). Por lo tanto, el grupo catecol en el anillo B de los flavonoides (anillo E en biflavonoides), es el principal grupo funcional en lo concerniente a la actividad antioxidante (33, 34). Los biflavonoides con 2 grupos hidroxilos adyacentes en el anillo E, tales como el compuesto [1], son más efectivos que sus equivalentes monohidroxilos. El mecanismo predominante de la acción es probablemente vía donación de un electrón por parte del flavonoide, formándose una semiquinona, la cual dona un electrón adicional para formar una orto-quinona por deslocalización electrónica (Véase figura 3). Para compuestos como la amentof lavona, que contiene un grupo 4'-monohidroxilo en el anillo E, el mecanismo de acción implica probablemente la formación de radicales fenoxilo, los cuales son relativamente menos estables y captadores débiles de radicales libres (12, 34). El doble enlace entre C-2 y C-3 y la función carbonilo en la posición C-4, son importantes para la actividad antioxidante; sin embargo, no son suficientes por si solos para proveer actividad captadora de radicales libres.

Figura 3. Mecanismo de terminación de radicales biflavonoides por pérdida de electrones de los grupos fenol y formación de orto-quinonas.

La CE₅₀ es un parámetro ampliamente utilizado para describir la habilidad de un compuesto o extracto para atrapar el radical DPPH•. Sin embargo, los valores de CE₅₀ dan poca información, en términos de velocidad, en relación con la cinética de una reacción (24, 35). Es por ello que, para completar la información, utilizamos un parámetro adicional, el Índice de Reducción (Rit5') (Véase tabla 2). Este parámetro da una idea aproximada de la reactividad de cada compuesto o fracción en el proceso de la decoloración del radical libre DPPH•. Varios compuestos puros, así como la fracción FB, indujeron un marcado descenso en la concentración de DPPH• cuando fueron comparados con la reactividad de [Q]. Las especies mas reactivas fueron la fracción FB y el compuesto morelloflavona [1], los cuales presentaron valores de Rit5' similares (0,84–0,86). La amentoflavona mostró la menor reactividad, significativamente diferente a la de cualquier otro compuesto estudiado.

Inhibición de la peroxidación de lipoproteínas de baja densidad (LDL)

Se ha evaluado también la inhibición de la peroxidación lipídica, utilizando la formación de malondialdehído (MDA) como índice de la oxidación de LDL, después de la oxidación con CuSO4. La peroxidación lipídica se llevó a cabo en presencia de la fracción biflavonoide (FB) y de los biflavonoides aislados a partir de ella. En la tabla 2 aparece la protección conferida por las sustancias evaluadas y se observa que la fracción FB reduce la peroxidación en forma dependiente de la dosis, demostrando ser un antioxidante efectivo. El valor de CE₅₀ determinado para el efecto inhibitorio de FB en la peroxidación lipídica fue de 11,85 µg/mL, el más bajo observado entre las sustancias evaluadas. Los biflavonoides puros morelloflavona [1] y volkensiflavona [2], también presentaron actividad antioxidante con unos valores de CE₅₀ de 12,36 y 20,57 µg/mL respectivamente. La menor actividad se observó para el biflavonoide amentoflavona [3] (CE₅₀ de 91,34 µg/mL). En este ensayo, la quercetina [Q] se utilizó como control positivo, mostrando una actividad de 25,06 µg/mL. El biflavonoide [1] es el responsable de la mayor parte de la actividad captadora de DPPH• y de la protección contra la peroxidación lipídica de la FB, aunque es posible un proceso de sinergismo, ya que, a pesar de que la FB contenía biflavonoides de baja actividad relativa como [3], su CE₅₀ en algunos casos fue superior a la obtenida para el compuesto [1] puro. En este sentido, diversos estudios ponen de manifiesto que los polifenoles presentan mayor poder antioxidante en combinación que de forma aislada. Así, los polifenoles aislados, como el galato de epigalocatequina, la quercetina, el diosmetin y el pignogenol, ejercen una protección parcial ante la peroxidación lipídica; en cambio, la combinación de todos ellos aumenta muchísimo el efecto protector (36).

Se llevó a cabo un estudio fitoquímico con una fracción biflavonoide obtenida a partir de G. madruno, identificando el biflavonoide de tipo flavona(3'→8'')-flavona amentoflavona y los compuestos de tipo flavanona-(3→8'')-flavona: morelloflavona y volkensiflavona. Estos últimos presentan, como característica, un fenómeno de atropisomerismo, con la presencia de confórmeros que difieren en la rotación alrededor del enlace inter-flavonoide C3→C8''. Las observaciones sugieren que dicho fenómeno varía con la temperatura pero no con los solventes, de manera que estos últimos no tienen efecto significativo en el comportamiento rotamérico de los compuestos.

Igualmente, se estudió la actividad antioxidante de la fracción FB y de los compuestos aislados a partir de ella, por medio de los métodos del 2,2'-difenil-1-picrilhidracil (DPPH•) y de la inhibición de la peroxidación de las LDL. En general, los compuestos con enlace inter-flavonoide C3→C8'' demuestran una potente actividad captadora de radicales DPPH•. Los biflavonoides que presentan esta característica en combinación con una sustitución 3''',4'''-dihidroxi (catecol) en el anillo E, un doble enlace entre C-2'' y C-3'' y una función carbonilo en posición C-4'', son los captadores de radicales más activos. En relación con los inhibidores de la peroxidación de LDL, los mejores inhibidores fueron los compuestos con enlace inter-flavonoide C3→C8'': morelloflavona y volkensiflavona. Los datos sugieren que la FB es una excelente candidata para ser utilizada como antioxidante. Es probable que se produzcan procesos de sinergismo en la FB, toda vez que presenta una actividad captadora de radicales y una inhibición de la peroxidación de LDL superior, en algunos casos, a los compuestos más activos.

El autor principal agradece a la Universidad de Antioquia y a la Fundación Carolina, la concesión de una beca predoctoral.

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Recibido: Marzo 24 de 2009; Aceptado: Septiembre 22 de 2009

* Autor a quien debe dirigir la correspondencia: josorio@farmacia.udea.edu.co