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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[BOROJÓ (Borojoa patinoi): FUENTE DE POLIFENOLES CON ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[According to popular belief, borojó (Borojoa patinoi cuatrec.) fruit is recognized for its preservative properties, possibly related to the presence of phenolic compounds. The content of polyphenols and their antimicrobial activity against pathogens as Escherichia coli and Staphylococcus aureus were evaluated in this research. Borojó fruit has polyphenol content between 600 and 800 mg gallic acid/100gr, and antimicrobial activity against S. aureus and E. coli with inhibition halos between 12 and 9 mm respectively. These results showed the advantages that have this fruit from the Rubiaceae family as a potential antimicrobial agent in food and cosmetics industries.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[ <p align="right"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>PRODUCTOS NATURALES </b></font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p align="center"><b><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="4">BOROJ&Oacute; (<i>Borojoa patinoi</i>): FUENTE DE POLIFENOLES   CON ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA </font></b></p>     <p>&nbsp;</p>     <p align="center"><b><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"> BOROJ&Oacute; (<i>Borojoa patinoi</i>): SOURCE OF POLYPHENOLS WITH ANTIMICROBIAL ACTIVITY</font></b></p>     <p>&nbsp;</p>     <p>&nbsp;</p>     <p><b><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Indira SOTELO D.<sup>1</sup>, Nidia CASAS F.<sup>2</sup>, Gustavo CAMELO M.<sup>2</sup></font></b></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">1 Grupo Procesos Agroindustriales. Maestr&iacute;a en Dise&ntilde;o y Gesti&oacute;n de Procesos. Ingenier&iacute;a de Producci&oacute;n Agroindustrial. Universidad de La Sabana. Bogot&aacute;, Colombia. <a href="mailto:indira.sotelo@unisabana.edu.co">indira.sotelo@unisabana.edu.co</a>.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">2 Grupo Procesos Agroindustriales. Maestr&iacute;a en Dise&ntilde;o y Gesti&oacute;n de Procesos. Ingenier&iacute;a de Producci&oacute;n Agroindustrial. Universidad de La Sabana. Bogot&aacute;, Colombia.</font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>&nbsp;</p> <hr noshade size="1">     <p><b><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> RESUMEN</font></b><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> El fruto del boroj&oacute; (<i>Borojoa patinoi cuatrec</i>.) es reconocido en la tradici&oacute;n popular por sus propiedades   como conservante, posiblemente relacionadas con la presencia en &eacute;l de compuestos fen&oacute;licos. En esta   investigaci&oacute;n se evalu&oacute; el contenido de polifenoles y su actividad antimicrobiana frente a pat&oacute;genos como   <i>Escherichia coli</i> y <i>Staphylococcus aureus</i>. El fruto del boroj&oacute; tiene un contenido de polifenoles que oscila   entre 600 y 800 mg &aacute;cido g&aacute;lico/100gr, y actividad antimicrobiana frente a <i>S. aureus</i> y <i>E. coli</i>, determinada   por halos de inhibici&oacute;n entre 12 y 9 mm respec ivamente. Estos resultados muestran el potencial que   tiene este fruto de la familia de las Rubiaceae como posible agente antimicrobiano para ser utilizado en la industria agroalimentaria y cosm&eacute;tica.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>Palabras clave:</b> actividad antimicrobiana, boroj&oacute;, polifenoles, <i>E. coli, S. aureus</i>.</font></p> <hr noshade size="1">     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>ABSTRACT</b></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> According to popular belief, boroj&oacute; (<i>Borojoa patinoi cuatrec</i>.) fruit is recognized for its preservative   properties, possibly related to the presence of phenolic compounds. The content of polyphenols and their   antimicrobial activity against pathogens as <i>Escherichia coli</i> and <i>Staphylococcus aureus</i> were evaluated in this   research. Boroj&oacute; fruit has polyphenol content between 600 and 800 mg gallic acid/100gr, and antimicrobial   activity against <i>S. aureus</i> and <i>E. coli</i> with inhibition halos between 12 and 9 mm respectively. These results   showed the advantages that have this fruit from the Rubiaceae family as a potential antimicrobial agent in food and cosmetics industries.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>Key words:</b> antimicrobial activity, boroj&oacute;, polyphenols,<i> E. coli, S. aureus</i>.</font></p> <hr noshade size="1">     <p>&nbsp;</p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"> <b>INTRODUCCI&Oacute;N</b></font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> El boroj&oacute; (<i>Borojoa patinoi cuatrecasas</i>) es el nombre   dado a una especie arb&oacute;rea de entre 3 y 5 m de altura,   de tallo erecto, le&ntilde;oso, y hojas decusadas, propia   de los climas tropicales y subtropicales, perteneciente   a la familia Rubi&aacute;ceae, originaria del sotobosque   selv&aacute;tico del interior del Departamento del Choc&oacute;,   zona del Pac&iacute;fico colombiano, y de las selvas amaz&oacute;nicas.   Su fruto es una baya carnosa de entre 7 y   12 cm de y di&aacute;metro, que en sus primeros estadios   es verde clara y al madurar se torna parda rojiza;   tiene un mesocarpio carnoso con sabor arom&aacute;tico   y muy perfumado (1). Este fruto es com&uacute;nmente   utilizado en Am&eacute;rica del Sur, en productos como   jugos, pulpas y mermeladas, por su alto contenido   de s&oacute;lidos y bajo pH. Los nativos lo han empleado   tradicionalmente como cicatrizante y para embalsamar   cad&aacute;veres; adem&aacute;s, se le han atribuido propiedades   como energizante de la actividad sexual.   Sin embargo, sobre sus caracter&iacute;sticas fitoqu&iacute;micas   y funcionales es poca la literatura cient&iacute;fica que   se encuentra referenciada; por tanto, hay pocos   datos que permitan hoy dilucidar sus propiedades.   Investigadores como Giraldo <i>et al.</i>, 2004 (1) se han   aproximado al conocimiento de este fruto nativo   y han determinado su sexo mediante marcadores   moleculares. Mosquera<i> et al</i>., 2005, 2010 (2-3), estudiaron   algunas caracter&iacute;sticas de las propiedades   funcionales de la pulpa obtenida mediante el secado   por aspersi&oacute;n y evaluaron el efecto de la maltodextrina   en la estabilidad de la pulpa de boroj&oacute; seca   por liofilizaci&oacute;n.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Estudios fitoqu&iacute;micos realizados en plantas   pertenecientes a la familia de las Rubi&aacute;ceas, como   uncaria (4), caf&eacute; (5), Chassalia (6) y noni (7), han   hallado que estos frutos presentan contenidos de   compuestos fen&oacute;licos con propiedades antioxidantes   y actividad antimicrobiana y con un gran potencial   de aplicaci&oacute;n fitoterap&eacute;utica, lo cual podr&iacute;a tener   relaci&oacute;n con las propiedades que el saber popular   le atribuye al fruto del boroj&oacute;.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Los compuestos fen&oacute;licos son metabolitos secundarios   de las plantas, derivados de complejas rutas   metab&oacute;licas de origen mixto (shikimico&#8211;acetato   y acetato&#8211;mevalonato), y de reacciones enzim&aacute;ticas   como hidroxilaciones, metilaciones, acetilaciones   y glicosilaciones (8), y determinantes en la calidad   sensorial y nutricional de las frutas y vegetales (9).   Su contenido var&iacute;a de acuerdo con la especie, la   variedad, el tipo de cultivo, el estado de maduraci&oacute;n,   la estacionalidad y la regi&oacute;n geogr&aacute;fica, entre otros   factores (10). Est&aacute;n clasificados, de acuerdo con su   estructura, como &aacute;cidos fen&oacute;licos, flavonoides y   taninos (11). Dado que se les atribuye una variada   actividad farmacol&oacute;gica, en general asociada a la   capacidad de actuar como agentes antioxidantes,   secuestradores de radicales libres, antimicrobianos   y antivirales (12-13), actualmente se desarrollan   numerosas investigaciones sobre el tema.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> De acuerdo con Gonz&aacute;lez <i>et al</i>., 2001 (14), los   ensayos preliminares cualitativos permiten determinar   la presencia de metabolitos secundarios como:   flavonoides, triterpenos, cumarinas, esteroles, quinonas,   saponinas, glic&oacute;sidos y alcaloides, de manera   sencilla, espec&iacute;fica y r&aacute;pida, mediante reacciones de   coloraci&oacute;n, precipitaci&oacute;n, y el an&aacute;lisis de propiedades   f&iacute;sicas como la sublimaci&oacute;n o la fluorescencia.   En el proceso de extracci&oacute;n de los metabolitos se   pueden emplear diferentes solventes como: &eacute;ter   diet&iacute;lico, cloroformo, etanol y agua, que modifican   el pH del medio con el fin de obtener metabolitos   secundarios de acuerdo con su solubilidad (15).</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> El proceso de extracci&oacute;n de compuestos fen&oacute;licos   en diferentes plantas y frutas est&aacute; influenciado   por su naturaleza qu&iacute;mica, por el m&eacute;todo empleado   y la presencia de substancias interferentes. Contini   <i>et al</i>., 2008 (16), establecieron que el rendimiento   en la extracci&oacute;n de los compuestos fen&oacute;licos y su   actividad antioxidante no s&oacute;lo dependen de la naturaleza   del disolvente y del m&eacute;todo de extracci&oacute;n,   sino tambi&eacute;n de los compuestos bioactivos y de la   estructura de la matriz del producto, porque los   extractos de polifenoles presentes en las plantas   son una mezcla de diferentes clases de polifenoles,   solubles en el sistema de solvente empleado. Seg&uacute;n   Moure <i>et al</i>., 2001 (17), los solventes m&aacute;s empleados   est&aacute;n constituidos por mezclas acuosas de etanol,   metanol y acetona; asimismo indican que la selecci&oacute;n   &oacute;ptima del solvente para la extracci&oacute;n de los   compuestos fen&oacute;licos depende del tipo de matriz.   Sobre este asunto, Suhaj <i>et al</i>., 2006 (18) afirman   que mezclas de metanol en agua son eficaces para   la extracci&oacute;n de compuestos polifen&oacute;licos de matrices   fibrosas, como las frutas, debido a su grado   de polaridad, mientras que las mezclas de acetona   en agua son &uacute;tiles para la extracci&oacute;n de polifenoles   en matrices proteicas, como las nueces, ya que la   acetona degrada el complejo polifenol&#8211;prote&iacute;na.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Gracias a las propiedades de los polifenoles, y a su   fuerte actividad biol&oacute;gica como agentes antimicrobianos,   superior a la de los antioxidantes obtenidos   por s&iacute;ntesis qu&iacute;mica, que pueden llegar a promover   la carcinog&eacute;nesis (19), en los &uacute;ltimos a&ntilde;os ha crecido   el inter&eacute;s en la cuantificaci&oacute;n y uso de estos   antioxidantes, con el prop&oacute;sito de emplearlos en las   industrias alimentaria, farmac&eacute;utica y cosm&eacute;tica   (18), Varios autores han estudiado la relaci&oacute;n entre   el contenido de polifenoles y la actividad antimicrobiana,   encontrando asociaci&oacute;n entre ellos en   diferentes extractos de plantas y frutas (11, 20 - 28).</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Teniendo en cuenta las propiedades que se le   han atribuido al fruto del boroj&oacute;, los objetivos de   esta investigaci&oacute;n son: a) establecer la presencia   de metabolitos secundarios mediante ensayos de   identificaci&oacute;n cualitativos, y b) cuantificar el contenido   de polifenoles totales y evaluar su actividad   antimicrobiana sobre microorganismos pat&oacute;genos   como <i>Escherichia coli </i>y <i>Staphylococcus aureus</i>.</font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"> <b>MATERIALES Y M&Eacute;TODOS</b></font></p>     <p><b><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Materiales</font></b></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Acido g&aacute;lico (Sigma), reactivo de Folin Ciocalteu   (Merck), carbonato de sodio (Merck), etanol   (Merck), metanol (Merck), acetona (Merck) y agar   Muller Hilton (Scharlau).</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>Materia prima</b></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> El fruto del boroj&oacute; (<i>Borojoa patinoi cuatrec</i>.), en   completo estado de maduraci&oacute;n, fue adquirido en   el mercado local. Las semillas se apartaron de la   fruta de forma manual, para obtener la pulpa, que se   almacen&oacute; en bolsas de polietileno de baja densidad   con banda herm&eacute;tica abre-cierre (Ziploc&reg;) a una   temperatura de 4&deg;C hasta su uso.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>Caracterizaci&oacute;n fisicoqu&iacute;mica</b></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> El contenido de humedad de la pulpa de boroj&oacute;   se determin&oacute; por el m&eacute;todo de estufa a 70&deg;C   (AOAC 20.013 /80); prote&iacute;na, por el m&eacute;todo de   Kjeldahl (AOAC 924.09/90); grasa, por el m&eacute;todo   de Soxhlet (AOAC 963.15 /90); cenizas, por el m&eacute;todo   de incineraci&oacute;n (AOAC 940.26 /90); actividad   de agua (Aw), empleando el m&eacute;todo instrumental   Novasina a 20&deg;C, y el pH fue medido con potenci&oacute;metro   Metrohm.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>Pruebas preliminares para detecci&oacute;n de metabolitos   secundarios</b></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> La extracci&oacute;n de los metabolitos se efectu&oacute; empleando   etanol al 95% en una relaci&oacute;n 1:9 (pulpa   fresca: solvente) durante 2 horas, en agitaci&oacute;n constante,   a 60&deg;C. Los extractos se filtraron a vac&iacute;o y se   almacenaron en recipientes de vidrio color &aacute;mbar   a temperatura de refrigeraci&oacute;n hasta su uso. A los   extractos etan&oacute;licos se les practicaron diferentes   ensayos con reacciones qu&iacute;micas de identificaci&oacute;n,   mediante cambios de color o formaci&oacute;n de   precipitados, para determinar la presencia de los   metabolitos secundarios: flavonoides (Shinoda,   Pew's, reacci&oacute;n con vapores de amonio y prueba de   NaOH); triterpenos (Liebermann-Buchard); lactonas   insaturadas (m&eacute;todo Legal); glic&oacute;sidos (Kedde);   y polifenoles solubles (cloruro f&eacute;rrico) (29 - 32).</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>Extracci&oacute;n de polifenoles</b></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Para la extracci&oacute;n de polifenoles a partir de la   pulpa se emplearon tres solventes: etanol 30%,   metanol 30% y acetona 30%, en una relaci&oacute;n 1:9   (pulpa fresca:solvente). Se ensayaron dos m&eacute;todos   de extracci&oacute;n: (a) Centrifugaci&oacute;n: la mezcla de pulpa&#8211;   solvente se homogeneiz&oacute; en un Ultraturrax&reg;   durante dos minutos y se paso a una centr&iacute;fuga   Hettich Universal 32R a 9000 rpm, a 4&deg;C, durante   15 minutos; el sobrenadante se almacen&oacute; en ausencia   de luz para su posterior an&aacute;lisis. (b) Agitaci&oacute;n:   la mezcla de pulpa-solvente se homogeneiz&oacute; en   un Ultraturrax&reg; durante dos minutos y se llev&oacute; a   agitaci&oacute;n constante en un shaker a 60&deg;C durante 2   horas, luego se filtr&oacute; y el extracto se guard&oacute; en frascos  &aacute;mbar. Los extractos obtenidos se almacenaron   en refrigeraci&oacute;n hasta su cuantificaci&oacute;n.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>Cuantificaci&oacute;n de polifenoles</b></font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Se cuantific&oacute; el contenido de polifenoles presentes   en los extractos por el m&eacute;todo espectrofotom&eacute;trico   (33). A un bal&oacute;n aforado de 25 mL se   le adicionaron 1 mL del extracto de polifenoles, 5   mL de agua destilada y 1 mL de reactivo de Folin-Ciocalteu. Despu&eacute;s de cinco minutos de reacci&oacute;n,   se adicion&oacute; 1 mL de carbonato de sodio al 7% y se   afor&oacute; a 25 mL con agua destilada; se dej&oacute; reaccionar   durante 90 minutos protegido de la luz. Se determin&oacute;   la absorbancia a una longitud de onda de 750 nm   en un espectofot&oacute;metro Cary Varian 100 UV-Vis,   y el contenido de polifenoles se expres&oacute; en mg de  &aacute;cido g&aacute;lico (AG)/100 g de muestra.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>Actividad antimicrobiana</b></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Para evaluar la actividad antimicrobiana se   emplearon extractos de pulpa de boroj&oacute; fresca y   liofilizada (obtenida en un liofilizador Labconco   a -35&deg;C, y 6.66 KPa de presi&oacute;n). Los extractos se   332 Vitae i. sotelo d. et al.   obtuvieron del proceso de extracci&oacute;n con agua en   una relaci&oacute;n 1:3 (pulpa:agua), a 50&deg;C, en agitaci&oacute;n   constante durante 90 min, y se purificaron por   microfiltraci&oacute;n empleando una membrana de 0,22   micras de tama&ntilde;o de poro. A estos extractos se les   cuantific&oacute; el contenido de polifenoles por m&eacute;todo   espectrofotom&eacute;trico (33).</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> La prueba de inhibici&oacute;n se realiz&oacute; por el m&eacute;todo   de difusi&oacute;n en pozos, empleando cepas de <i>Staphylococcus   aureus </i>ATCC 460716 y <i>Escherichia coli</i> ATCC   25922, activadas en caldo Mueller Hinton durante   24 horas a 37&deg;C. De cada cultivo se tomaron 0.2 mL   de in&oacute;culo (108 UFC/mL) y se inocularon en 20 mL   de agar Mueller Hinton por la t&eacute;cnica de difusi&oacute;n   en profundidad. Con sacabocados est&eacute;riles de 6 mm   de di&aacute;metro se realizaron 6 pozos por placa, en los   cuales se colocaron 70 &mu;L de extracto acuoso de   boroj&oacute; de pulpa fresca y liofilizada, 70 &mu;L de agua,   70 &mu;L de fenol (10% p/v), &aacute;cido g&aacute;lico (0,1% p/v) y  &aacute;cido l&aacute;ctico (10% v/v), diluidos en agua est&eacute;ril. Se   incubaron en condiciones aerobias a 37&ordm;C durante   24 horas, y luego se hizo la medici&oacute;n del di&aacute;metro   promedio del halo de inhibici&oacute;n expresado en mm   (34).</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>An&aacute;lisis estad&iacute;stico</b></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Los ensayos se evaluaron por triplicado. Los resultados   obtenidos fueron expresados por promedio  &plusmn; desviaci&oacute;n est&aacute;ndar. El an&aacute;lisis estad&iacute;stico se llev&oacute;   a cabo mediante una comparaci&oacute;n por ANOVA, con   un nivel de confianza del 95% (P&lt;0,05), utilizando   el software Minitab&reg; versi&oacute;n 15.</font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"> <b>RESULTADOS Y DISCUSI&Oacute;N</b></font></p>     <p><b><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Caracterizaci&oacute;n fisicoqu&iacute;mica</font></b><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Los par&aacute;metros medidos para la caracterizaci&oacute;n   fisicoqu&iacute;mica de la pulpa de boroj&oacute; se observan en   la <a href="#t1">tabla 1</a>. En cuanto a las propiedades de humedad   y pH, se encuentran dentro del rango que definen   Mosquera <i>et al</i>., 2010 (3). El valor de actividad de   agua hallado es menor al que comunican los mismos   autores (0,98). La actividad de agua es una medida   del agua disponible para reaccionar qu&iacute;mica o f&iacute;sicamente   en un sistema y est&aacute; muy relacionada con la   composici&oacute;n de un alimento. Esto quiere decir que   las posibles variaciones en las condiciones agroecol&oacute;gicas   del cultivo influyen en las caracter&iacute;sticas   fisicoqu&iacute;micas del fruto.</font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>&nbsp;</p>     <p align="center"><a name="t1"></a><img src="img/revistas/vitae/v17n3/v17n3a11t1.jpg"></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">  En relaci&oacute;n con el pH, la pulpa de boroj&oacute; presenta   valores inferiores a los hallados en frutos   como el noni (7), perteneciente tambi&eacute;n a la familia   de las Rubi&aacute;ceas (3,72), factor favorable en lo que   concierne a su estabilidad a nivel microbiol&oacute;gico,   y propicia su posible uso como antimicrobiano,   porque los &aacute;cidos org&aacute;nicos ejercen una reducci&oacute;n   en el pH extracelular sobre los microorganismos,   aumentando la turgencia celular, que provoca un   aumento de la presi&oacute;n mec&aacute;nica sobre la pared de   los microorganismos, que eventualmente hace que   la pared colapse (34).</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> La pulpa de boroj&oacute; contiene cantidades muy bajas   de prote&iacute;na (0,70%), grasa (0,15%) y cenizas (0,8%),   expresadas en relaci&oacute;n peso a peso. Algunos valores   difieren en los estudios publicados, posiblemente   por el estado de maduraci&oacute;n o por las condiciones   de cultivo y postcosecha. Mosquera <i>et al</i>., 2010. (3),   mencionan contenidos de prote&iacute;na, grasa y cenizas   de: 0,69%, 0,15% y 0,76% (p/p); en el mismo orden,   Mosquera <i>et al</i>., 2005 (2) publican datos de 1,75%,   0,82%, 2,68% y Arango <i>et al</i>., 1986 (35) valores del   5,51%, 0,00%, 1,49% respectivamente.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>Ensayos preliminares para la detecci&oacute;n de   metabolitos secundarios</b></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Los resultados obtenidos de los ensayos cualitativos   de precipitaci&oacute;n y coloraci&oacute;n para la detecci&oacute;n   de metabolitos secundarios presentes en la pulpa de   boroj&oacute; aparecen en la <a href="#t2">tabla 2</a>.</font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p align="center"><a name="t2"></a><img src="img/revistas/vitae/v17n3/v17n3a11t2.jpg"></p>     <p>&nbsp;</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> El an&aacute;lisis preliminar para la identificaci&oacute;n cualitativa   de los metabolitos secundarios en la pulpa de   boroj&oacute; hizo evidente la presencia de fenoles, como   se aprecia en la <a href="#t2">tabla 2</a>. En cuanto a los triterpenos,   este estudio coincide con lo descrito por Mosquera   <i>et al</i>., 2005 (2), quienes se&ntilde;alan la prevalencia de   estos metabolitos secundarios en pulpa de boroj&oacute;   liofilizada y seca por atomizaci&oacute;n. En relaci&oacute;n con   los compuestos tipo flavonoides, la prueba con   NaOH result&oacute; positiva, lo que puede indicar presencia   de alg&uacute;n flavonoide en la pulpa fresca. En lo   referente a las lactonas insaturadas y los glic&oacute;sidos,   los resultados indicaron que estos metabolitos no   se encuentran en la pulpa fresca de boroj&oacute;.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los metabolitos secundarios, como triterpenos,   flavonoides, fenoles, taninos, saponinas y alcaloides,   han sido asociados con cualidades que incluyen la   actividad antimicrobiana, antiviral y algunas propiedades   curativas contra pat&oacute;genos (36-37). Como   la pulpa fresca de boroj&oacute; presenta tres de estos   metabolitos (triterpenos, flavonoides y fenoles), se   podr&iacute;a inferir que puede desarrollar alg&uacute;n tipo de actividad antimicrobiana.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>Extracci&oacute;n y cuantificaci&oacute;n de polifenoles</b></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Como se puede apreciar en la <a href="#f1">figura 1</a>, el contenido   total de polifenoles extra&iacute;dos de la pulpa de   boroj&oacute; var&iacute;a, dependiendo del tipo de solvente empleado   y del m&eacute;todo de extracci&oacute;n. Se observa que   para el m&eacute;todo de extracci&oacute;n por centrifugaci&oacute;n, el   metanol es el solvente que ofrece la mayor eficiencia   (870,56 &plusmn; 43,11 mg AG/ 100gr), seguido por la acetona   (651,12 &plusmn; 52, 4 mg AG/ 100gr). Sin embargo,   estad&iacute;sticamente no se observa diferencia significativa   (ANOVA p&lt; 0,05) entre los contenidos de   polifenoles extra&iacute;dos con estos dos solventes. En el   caso de la extracci&oacute;n que emplea como m&eacute;todo la   agitaci&oacute;n en shaker, el solvente que atrae una mayor   cantidad de polifenoles totales es la acetona (880,32  &plusmn; 44,94 mg AG/ 100gr), seguida por el etanol (725,3  &plusmn; 24,11 mg AG/ 100gr), y finalmente, el metanol   (464,74 &plusmn; 30,10 mg AG/ 100gr).</font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p align="center"><a name="f1"></a><img src="img/revistas/vitae/v17n3/v17n3a11f1.jpg"></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> De acuerdo con los resultados de este estudio,   la acetona es el solvente que permite una mayor   extracci&oacute;n de polifenoles totales, en lo cual coincide   con Contini <i>et al</i>., 2008 (16), quienes encontraron   que la acetona tiene el mayor rendimiento de extracci&oacute;n   de polifenoles con menor arrastre de sustancias   extra&ntilde;as para la c&aacute;scara y la semilla de nueces, en   comparaci&oacute;n con el etanol y el metanol. Asimismo   Alothman <i>et al</i>., 2009 (38) encontraron que la acetona   y el etanol son los solventes m&aacute;s eficientes en   el proceso de extracci&oacute;n de compuestos fen&oacute;licos en   pi&ntilde;a, banano y guayaba. Aunque la acetona exhibe   altos valores de eficiencia en el proceso de extracci&oacute;n   de compuestos polifen&oacute;licos, su aplicaci&oacute;n como   solvente se ve reducida para aplicaciones alimentarias   y cosm&eacute;ticas debido a sus niveles de toxicidad.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">  En los extractos obtenidos para la evaluaci&oacute;n de   la actividad antimicrobiana a partir de pulpa fresca y   liofilizada de boroj&oacute;, utilizando agua como solvente,   se encontr&oacute; que el contenido de polifenoles totales   fue de 253 &plusmn; 30 mg AG/100gr para pulpa fresca,   mientras que para pulpa liofilizada alcanz&oacute; valores   de 750 &plusmn; 15 mg AG/ 100gr.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Comparando el contenido de polifenoles obtenido   en el boroj&oacute; con el de otras especies de la familia   de las Rubi&aacute;ceas, se concluye que &eacute;ste tiene un contenido   mayor de polifenoles que el que comunican   Lizcano <i>et al</i>. (4) para <i>Uncaria guianensis</i> (466 mg   AG/100g), y menor al reportado por Soobrattee <i>et   al</i>., 2008 (6) para <i>Chassalia</i> (1000 mg AG/100g) y   para <i>Coffea macrocarpa</i> (2400mg AG/100g). En comparaci&oacute;n   con otros tipos de fruta, como la manzana   Granny Smith - 680 mg AG/100g (11), la manzana   royal - 349 mg AG/100g (11), el guaran&aacute; - 180 mg   AG/100 g (25), la pi&ntilde;a - 50.7 mg AG/100 g (38), el   banano - 72.2 mg AG/100 g (38) y la guayaba - 191   mg AG/100 g (38), el fruto del boroj&oacute; tiene un   contenido mayor de polifenoles.</font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">  Estos resultados hacen evidente que este fruto   es indiscutiblemente, una fuente de compuestos   polifen&oacute;licos con potenciales usos en la industria   agroalimentaria, como agentes antioxidantes de origen   natural que pueden ayudar a prevenir y retardar   el da&ntilde;o oxidativo en l&iacute;pidos o prote&iacute;nas y contribuir   al estilo de vida saludable, porque el consumo de   alimentos ricos en polifenoles est&aacute; asociado a un   menor riesgo de da&ntilde;o cardiovascular, formaci&oacute;n   de c&aacute;ncer y envejecimiento prematuro (39 - 42).</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> <b>Actividad antimicrobiana</b></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> La actividad antimicrobiana<i> in vitro</i> de los extractos   acuosos de la pulpa de boroj&oacute; se evalu&oacute; cuantitativamente   por la presencia de halos de inhibici&oacute;n y   se report&oacute; el valor promedio &plusmn; desviaci&oacute;n de cada   di&aacute;metro. En la <a href="#f2">figura 2</a> pueden observarse los halos   de inhibici&oacute;n de los extractos de polifenoles en   comparaci&oacute;n con agua, &aacute;cido g&aacute;lico, fenol y &aacute;cido   l&aacute;ctico, frente a dos bacterias pat&oacute;genas humanas:   <i>S. aureus</i> y <i>E. coli</i>. Las muestras control, agua y &aacute;cido   g&aacute;lico solubilizado en agua (0,1p/v) no presentaron   halos de inhibici&oacute;n para ambas bacterias.</font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p align="center"><a name="f2"></a><img src="img/revistas/vitae/v17n3/v17n3a11f2.jpg"></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">  En la <a href="#t3">tabla 3</a>, los resultados obtenidos sobre el   contenido de polifenoles en los extractos acuosos   del boroj&oacute; se contrastan con las medidas de los halos   de inhibici&oacute;n. Esta inhibici&oacute;n puede atribuirse a   los metabolitos presentes en el fruto y est&aacute; directamente   relacionada con los polifenoles presentes   en el fitocomplejo. El an&aacute;lisis estad&iacute;stico de los resultados   muestra que existe diferencia significativa   (ANOVA p&lt;0,05) entre los halos de inhibici&oacute;n de   los extractos de Boroj&oacute; frente a los controles positivo   fenol 10% p/v y &aacute;cido l&aacute;ctico 10% p/v. Sin embargo,   estos resultados son promisorios para el Boroj&oacute;, tal   como se hace evidente en estudios realizados por   Al-Fatimi <i>et al</i>., 2007 (34) quienes refieren que un   halo de inhibici&oacute;n desde 8 mm de di&aacute;metro es indicativo   de prueba positiva de inhibici&oacute;n microbiana;   Albayrak<i> et al</i>., 2007 (19) comunican resultados de   halos de inhibici&oacute;n significativa, mayores de 6 mm.   En este estudio se obtuvieron halos de inhibici&oacute;n de   9 mm frente a <i>E. coli</i> para los extractos de boroj&oacute;,   valor superior a los registrados por Alberto <i>et al</i>.,   2006 (11) en c&aacute;scara de manzana Granny Smith   (7 mm) y manzana royal (4 mm), e inferior a lo   informado por Wang et al., 2008 (43) para hojas   de tabaco (20,23 mm), y por Estevinho <i>et al.</i>, 2008   (24) en extractos de miel (9 mm, considerada como   fuerte actividad antimicrobiana). Con respecto al <i>S.   aureus</i>, los resultados de los halos de inhibici&oacute;n para   los extractos de boroj&oacute; muestran valores entre 11 y   13 mm, superiores a los informados por Alberto <i>et   al.</i>, 2006 (11) en c&aacute;scara de manzana granny Smith   (10 mm) y manzana royal (4 mm), y por Estevinho   <i>et al</i>., 2008 (24) en extractos de miel (9 mm); pero   inferiores a los que daclaran Wang <i>et al</i>., 2008 (43)   en hojas de tabaco (17,66 mm) y Mayachiew <i>et al</i>.,   2008 (23) en extractos de grosella (21,8 mm). Estas   diferencias obedecen, probablemente, a que los extractos   que presentan mayores halos de inhibici&oacute;n   pueden tener un mayor contenido de compuestos   fen&oacute;licos, lo que indicar&iacute;a una relaci&oacute;n directa entre   el contenido de polifenoles y el efecto antimicrobiano   de los extractos.</font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p align="center"><a name="t3"></a><img src="img/revistas/vitae/v17n3/v17n3a11t3.jpg"></p>     <p>&nbsp;</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">  Los extractos de boroj&oacute; exhibieron halos de   inhibici&oacute;n mayores para <i>S. aureus</i> (Gram positiva)   que para <i>E. coli</i> (Gram negativa), resultado que coincide   con los obtenidos por Albayrak <i>et al</i>., 2007   (19), Shan<i> et al</i>., 2007 (28), Estevinho <i>et al.</i>, 2008   (24), Al-Fatimi <i>et al</i>., 2007 (34) y Alberto <i>et al</i>., 2006   (11), quienes hacen evidente una mayor inhibici&oacute;n   de los extractos con polifenoles en bacterias Gram   positivas que en bacterias Gram negativas, debido a   la sensibilidad de las bacterias Gram positivas frente   a especias y extractos de hierbas, plantas y frutos. La   mayor sensibilidad al efecto antimicrobiano puede   ser atribu&iacute;da, en el caso del <i>S. aureus</i>, a la estructura   de su membrana citoplasm&aacute;tica, la cual permite a   las sustancias antibacterianas destruir f&aacute;cilmente   la membrana de la c&eacute;lula ocasionando una salida   del citoplasma (44). La resistencia de <i>E. coli</i> frente a   las sustancias antibacterianas est&aacute; relacionada con   la superficie hidrof&iacute;lica de su membrana externa.   Esta membrana,rica en mol&eacute;culas de lipopolisac&aacute;ridos,   despliega una barrera contra la penetraci&oacute;n   de numerosas mol&eacute;culas antibi&oacute;ticas y est&aacute; tambi&eacute;n   asociada con las enzimas en el espacio periplasm&aacute;tico,   las cuales son capaces de romper las mol&eacute;culas   introducidas desde el exterior (45 - 46).</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Varios autores han estudiado la relaci&oacute;n entre   el contenido de polifenoles y la actividad antibacteriana.   Entre los m&aacute;s importantes se puede citar   a Alberto <i>et al</i>., 2006 (11), quienes investigaron el   efecto antimicrobiano de los componentes fen&oacute;licos   de la piel de dos variedades de manzana sobre   pat&oacute;genos humanos, y encontraron relaci&oacute;n directa   entre el contenido de polifenoles y el efecto antibacteriano,   en lo que coinciden con Rodr&iacute;guez <i>et   al</i>., 2007 (27), quienes afirman que las propiedades   antimicrobianas se incrementan con el aumento en   la concentraci&oacute;n de los polifenoles en muestras de   vino y clasifican la actividad antimicrobiana como:   <i>moderada</i>, cuando sus zonas de inhibici&oacute;n est&aacute;n entre   4 y 5 mm; <i>alta</i>, cuando exhibe zonas de inhibici&oacute;n   entre 6 y 9 mm; y fuerte, cuando sus zonas de inhibici&oacute;n   son mayores de 9 mm. Tambi&eacute;n Shan <i>et al</i>.,   2007 (28) encontraron una relaci&oacute;n altamente positiva   (r<sup>2</sup> = 0,70-0,93) entre la actividad antibacteriana   y el contenido de fenoles de 46 extractos de hierbas   y especias medicinales evaluadas frente a diferentes   bacterias Gram positivas y Gram negativas.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> En cuanto a la liofilizaci&oacute;n del boroj&oacute; fue claro   que el tratamiento de secado favorece la actividad   antibacteriana; as&iacute;, se present&oacute; un aumento entre 10   y 15% en la inhibici&oacute;n de <i>E. coli</i> y <i>S. aureus</i>, lo que   puede explicarse por el incremento en la concentraci&oacute;n   de polifenoles en el extracto de pulpa seca.</font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"> <b>CONCLUSIONES</b></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Los resultados obtenidos sobre el extracto del   fruto del boroj&oacute; exponen un contenido de polifenoles   con valores entre 600 y 800 mg AG/100gr,   y significativa actividad antimicrobiana frente a   las bacterias pat&oacute;genas humanas <i>S. aureus</i> y <i>E. coli</i>.   Esta actividad no puede atribuirse a la presencia de   una sola mol&eacute;cula del fruto, sino a la acci&oacute;n de los   compuestos de car&aacute;cter fen&oacute;lico que ejercen efectos   sin&eacute;rgicos, formando un fitocomplejo activo en la   inhibici&oacute;n microbiana.</font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> El estudio deja abierta la posibilidad de continuar   la investigaci&oacute;n sobre este fruto y sobre su uso potencial   como preservante y antioxidante natural para   las industrias alimentaria, farmac&eacute;utica y cosm&eacute;tica.</font></p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"> <b>AGRADECIMIENTOS</b></font></p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> Los autores agradecen al Fondo Patrimonial   Especial de la Universidad de La Sabana por su   apoyo financiero en la ejecuci&oacute;n del Proyecto   ING-34-2007.</font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>&nbsp;</p>     <p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"> <b>REFERENCIAS BIBLIOGR&Aacute;FICAS</b></font></p>     <!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 1. Giraldo C, Rengifo L, Aguilar E, Gaviria D, Alegr&iacute;a A. Determinaci&oacute;n   del sexo en boroj&oacute; (<i>Borojoa patinoi</i> Cuatrecasas) mediante   marcadores moleculares. Rev Col Biotecnol. 2004 Dic; 6 (2): 9-14.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000095&pid=S0121-4004201000030001100001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 2. Mosquera LH, R&iacute;os HA, Zapata PS. Obtenci&oacute;n de una materia   prima con valor agregado mediante secado por aspersi&oacute;n a partir   del fruto fresco de boroj&oacute; (<i>Borojoa patinoi</i> <i>Cuatrec</i>.). Rev Inst Univ   Tecnol&oacute;gica Choc&oacute;. 2005; 11 (23): 5&#8211;10.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000096&pid=S0121-4004201000030001100002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 3. Mosquera LH, Moraga G, Mart&iacute;nez-Navarrete N. Effect of   maltodextrin on the stability of freeze-dried boroj&oacute; (<i>borojoa patinoi   cuatrec</i>.) powder. J Food Eng. 2010 Mar; 97 (1): 72&#8211;78.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000097&pid=S0121-4004201000030001100003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 4. Lizcano L, Bakkali F, Ruiz-Larrea M, Ruiz-Sanz J. Antioxidant   activity and polyphenol content of aqueous extracts from Colombian   Amazonian plants with medicinal use. Food Chem.   2010 Apr 15; 119 (4): 1566&#8211;1570.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000098&pid=S0121-4004201000030001100004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 5. Ferrazzano G, Amato I, Ingenito A, de Natale A, Pollio A. Anticariogenic   effects of polyphenols from plant stimulant beverages   (cocoa, coffee, tea). Fitoterapia. 2009 Jul; 80 (5): 255&#8211;262.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000099&pid=S0121-4004201000030001100005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 6. Soobrattee M, Bahorun T, Neergheen V, Googoolye K, Aruoma   O. Assessment of the content of phenolics and antioxidant <i>actions   of the Rubiaceae, Ebenaceae, Celastraceae, Erythroxylaceae and Sterculaceae</i>  families of Mauritian endemic plants. Toxicol in Vitro. 2008   Feb; 22(1): 45&#8211;56.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000100&pid=S0121-4004201000030001100006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 7. Chan-Blanco Y, Vaillant F, P&eacute;rez A, Reynesc M, Brillouet J, Brat   P. The noni fruit (<i>Morinda citrifolia</i> L.): A review of agricultural   research, nutritional and therapeutic properties. J Food Compos   Analysis. 2006 Sep-Nov; 19 (6-7): 645&#8211;654.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000101&pid=S0121-4004201000030001100007&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 8. Palacios N, Burtin D, Leech M. Biolog&iacute;a molecular, una herramienta   para la bioprospecci&oacute;n del metabolismo secundario de   plantas en Colombia. Rev Col Biotecnol. 2004; 6 (2): 67&#8211;77.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000102&pid=S0121-4004201000030001100008&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">  9. Lapornik B, Prosek M, Golc A. Comparison of extracts prepared   from plant by-products using different solvents and extraction   time. J Food Eng. 2005 Nov; 71 (2): 214&#8211;222.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000103&pid=S0121-4004201000030001100009&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 10. Naczk M, Shahidi F. Phenolics in cereals, fruits and vegetables:   Occurrence, extraction and analysis. J Pharm Biomed Anal. 2006   Aug 28; 41(5): 1523&#8211;1542.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000104&pid=S0121-4004201000030001100010&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 11. Alberto M, Rinsdahl M, Manca M. Antimicrobial effect of   polyphenols from Apple skins on human bacterial pathogens.   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Estevinho L, Pereira A, Moreira L, Dias L, Pereira E. Antioxidant   and antimicrobial effects of phenolic compounds extracts of   Northeast Portugal honey. Food Chem Toxicol. 2008 Dec; 46   (12): 3774 &#8211; 3779.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000118&pid=S0121-4004201000030001100024&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 25. Ao C, Li A, Elzaawely A, Xuan T, Tawata S. Evaluation of antioxidant   and antibacterial activities of Ficus microcarpa L. fil.   extract. 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Rodr&iacute;guez MJ, Alberto MR, Manca de Nadra MC. Antibacterial   effect of phenolic compounds from different wines. Food   Control. 2007 Feb; 18 (2): 91&#8211;101.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000121&pid=S0121-4004201000030001100027&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 28. Shan B, Cai Y, Brooks J, Corke H. The in vitro antibacterial   activity of dietary spice and medicinal herb extracts. 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P&eacute;rez L. Estudio fitoqu&iacute;mico biodirigido de las plantas con   potencial actividad insecticida trichilia havanensis y croton   ciliatoglanduliferus. [Trabajo de pregrado]. [Puebla, M&eacute;xico]:   Universidad de las Am&eacute;ricas: 2006. 70 p.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000124&pid=S0121-4004201000030001100030&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 31. Mallikharjuna P, Rajanna L, Seetharam Y, Sharanabasappa G.   Phytochemical studies of Strychnos potatorum L.f.- A medicinal   plant. 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Al-Fatimi M, Wurster M, Schr&ouml;der G, Lindequist U. Antioxidant,   antimicrobial and cytotoxic activities of selected medicinal plants   from Yemen. J Ethnopharmacol. 2007 May 22; 111 (3): 657&#8211;666.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000128&pid=S0121-4004201000030001100034&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 35. Arango A, Quijano T. Estudio de los frutos de Boroja Patinoi   (<i>Cuatrec</i>.). 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Food Chem. 2009 Aug 1; 115 (3): 785&#8211;788.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000132&pid=S0121-4004201000030001100038&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 39. Watson R, Preedy V (Eds.). Bioactive foods promoting health.   New York: Academic Press; 2010. Fruit, vegetables and bone   health; p. 173&#8211;194.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000133&pid=S0121-4004201000030001100039&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 40. Petti S, Scully C. Polyphenols, oral health and disease: A review.   J Dent. 2009 Jun; 37 (6): 413&#8211;423.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000134&pid=S0121-4004201000030001100040&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 41. Ferrari C. Functional foods and physical activities in health   promotion of aging people. Maturitas. 2007 Dec 20; 58 (4): 327&#8211;339.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000135&pid=S0121-4004201000030001100041&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 42. Speisky H. Antioxidantes en alimentos: cultivando salud. Indualimentos.   2006; 42: 28-31.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000136&pid=S0121-4004201000030001100042&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 43. Wang H, Zhao M, Yang B, Jiang Y, Rao G. Identification of polyphenols   in tobacco leaf and their antioxidant and antimicrobial   activities. Food Chem. 2008 Apr 15; 107 (4): 1399&#8211;1406.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000137&pid=S0121-4004201000030001100043&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"> 44. Kalemba D, Kunicka A. Antibacterial and antifungal properties   of essential oils. 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<body><![CDATA[<p><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Recibido: Febrero 16 de 2010     <br>Aceptado: Agosto 19 de 2010</font> </p>      ]]></body><back>
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