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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[DESARROLLO Y CARACTERIZACIÓN DE UNA PELÍCULA ACTIVA BIODEGRADABLE CON ANTIOXIDANTES (ALFA-TOCOFEROL) A PARTIR DE LAS PROTEÍNAS DEL LACTOSUERO]]></article-title>
<article-title xml:lang="en"><![CDATA[DEVELOPMENT AND CHARACTERIZATION OF AN ACTIVE BIODEGRADABLE FILM WITH ANTIOXIDANTS (ALPHA-TOCOPHEROL) FROM WHEY PROTEINS]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[Rationale: Whey proteins are a by-product of the dairy industry that recently have been considered as a source of contamination of the natural effluents. Several studies have shown their excellent properties for the manufacture of films and coatings with the addition of antioxidants, and have been considered as an ecological alternative that would reduce the use of synthetic polymers while ensuring the preservation of some foods. Objective: The main objective of this study was to characterize the mechanical, optical, morphological, and biodegradation properties of an active film obtained from whey cheese proteins and the natural antioxidant alpha-tocopherol, for its use in the preservation of different foods. Methods: The films were developed from a 10% solution (w/w) of whey protein concentrate (WPC) in water, 7% w/w of glycerol as plasticizer, and &alpha;-tocopherol at 1 and 2% (w/w) dissolved in ethanol were added. Mechanical properties were evaluated under the ASTM D882-01; furthermore, the films were analyzed by spectrophotometry, scanning electron microscopy (SEM) and biodegradation analysis was performed by controlling of mass loss. Results: The obtained films showed adequate physical appearance and slightly brown coloration. Tension decreased similarly with the addition of &alpha;-tocopherol at 1 and 2%; however, the highest elongation was for films with &alpha;-tocopherol at 1%. The films showed excellent barrier property in the range of 300-400 nm of the UV region. The SEM photographs showed the droplets of the antioxidant on the surface of the film, and the biodegradation of films was confirmed in the evaluated films. Conclusion: Mechanical, optical, morphology, and biodegradation properties of the films were directly affected by the amount of &alpha;-tocopherol used in the formulation. The incorporation of the natural compound in the films of protein has potential use to extend shelf life of fatty foods.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[  <font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">     <p align="right"> <b>ALIMENTOS: CIENCIA, TECNOLOG&Iacute;A E INGENIER&Iacute;A</b></p>     <p>&nbsp;</p>     <p align="center"><b><font size="4">DESARROLLO Y CARACTERIZACI&Oacute;N DE UNA PEL&Iacute;CULA ACTIVA BIODEGRADABLE CON ANTIOXIDANTES (ALFA-TOCOFEROL) A PARTIR DE LAS PROTE&Iacute;NAS DEL LACTOSUERO</font></b></p>     <p>&nbsp;</p>     <p align="center"><b><font size="3"> DEVELOPMENT AND CHARACTERIZATION OF AN ACTIVE BIODEGRADABLE FILM WITH ANTIOXIDANTS (ALPHA-TOCOPHEROL) FROM WHEY PROTEINS</font></b></p>     <p>&nbsp;</p>     <p>&nbsp;</p>     <p><b> Diana Granada-Restrepo, PhD.<sup>1*</sup>, Yaqueline Medina-Pineda, Estudiante Ingenier&iacute;a de Alimentos.<sup>1</sup>, Mario Culebras-Rubio, MSc.<sup>2</sup>, Clara G&oacute;mez-Clari, PhD.<sup>2</sup></b></p>     <p>1  Grupo de Investigaci&oacute;n Biotecnolog&iacute;a de Alimentos BIOALI, Departamento de Alimentos, Facultad de Qu&iacute;mica Farmac&eacute;utica. Universidad de Antioquia UdeA. Calle 70 No. 52-21, Medell&iacute;n, Colombia.</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>  2 Instituto de Ciencia de Materiales. Universidad de Valencia. 46071 Paterna. Valencia, Espa&ntilde;a.</p>     <p>* Autor a quien se debe dirigir la correspondencia: <a href="mailto:dianamgranda@gmail.com">dianamgranda@gmail.com</a>.</p>     <p>&nbsp;</p>     <p>Recibido: Noviembre 18 de 2013</p>         <p>Aceptado: Enero 30 de 2014</p>     <p>&nbsp;</p> <hr noshade size="1">     <p><b> RESUMEN</b></p>     <p><b>Antecedentes:</b> Las prote&iacute;nas del suero son un subproducto de la industria de derivados l&aacute;cteos que    actualmente se han convertido en una fuente de contaminaci&oacute;n de los efluentes. Estudios han mostrado    sus excelentes propiedades para la fabricaci&oacute;n de pel&iacute;culas y recubrimientos con la adici&oacute;n de antioxidantes,    considerada como una alternativa ecol&oacute;gica que reducir&iacute;a el uso de pol&iacute;meros sint&eacute;ticos y garantiza la    conservaci&oacute;n de algunos alimentos. <b>Objetivo:</b> El objetivo del presente estudio fue caracterizar las propiedades    mec&aacute;nicas, &oacute;pticas, morfol&oacute;gicas y de biodegradaci&oacute;n de una pel&iacute;cula activa, obtenida a partir de las    prote&iacute;nas extra&iacute;das del suero de queser&iacute;a y el antioxidante natural alfa-tocoferol, para ser utilizada en la    conservaci&oacute;n de diferentes alimentos. M&eacute;todos: Las pel&iacute;culas se elaboraron a partir de una soluci&oacute;n 10%    (w/w) de concentrado de prote&iacute;nas de lactosuero (WPC) en agua, se adicion&oacute; glicerol como plastificante    y alfa-tocoferol al 1 y 2% w/w disuelto en etanol. Se evaluaron las propiedades mec&aacute;nicas de las pel&iacute;culas    bajo la norma ASTM D882-01; adem&aacute;s, se analizaron por espectrofotometr&iacute;a, microscop&iacute;a electr&oacute;nica de    barrido (SEM) y se realiz&oacute; un an&aacute;lisis de biodegradaci&oacute;n por control de la p&eacute;rdida de masa. Resultados:    Las pel&iacute;culas obtenidas presentaron adecuada apariencia f&iacute;sica y coloraci&oacute;n ligeramente parda. La tensi&oacute;n    disminuy&oacute; de manera similar con la adici&oacute;n de alfa-tocoferol al 1 y 2 %; sin embargo, la m&aacute;s alta elongaci&oacute;n    se present&oacute; para pel&iacute;culas con alfa-tocoferol al 1%. Las pel&iacute;culas mostraron una excelente propiedad de    barrera, en el rango de 300-400 nm de la regi&oacute;n UV. Las fotograf&iacute;as en SEM mostraron las microgotas    del antioxidante en la superficie de la pel&iacute;cula y se confirm&oacute; el proceso de biodegradaci&oacute;n en las pel&iacute;culas    evaluadas. Conclusi&oacute;n: Las propiedades mec&aacute;nicas, &oacute;pticas, de morfolog&iacute;a y biodegradaci&oacute;n de las    pel&iacute;culas fueron directamente afectadas por la cantidad de alfa-tocoferol empleada en la formulaci&oacute;n. La    incorporaci&oacute;n del compuesto natural en las pel&iacute;culas de prote&iacute;na tiene un potencial uso para extender la  vida &uacute;til de alimentos grasos.</p>     <p>  <b>Palabras clave</b>: Prote&iacute;nas de lactosuero, alfa-tocoferol, pel&iacute;culas, plastificante, biodegradable.</p> <hr noshade size="1">     <p> <b>ABSTRACT</b></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><b>Rationale:</b> Whey proteins are a by-product of the dairy industry that recently have been considered as   a source of contamination of the natural effluents. Several studies have shown their excellent properties   for the manufacture of films and coatings with the addition of antioxidants, and have been considered as   an ecological alternative that would reduce the use of synthetic polymers while ensuring the preservation   of some foods. <b>Objective:</b> The main objective of this study was to characterize the mechanical, optical,   morphological, and biodegradation properties of an active film obtained from whey cheese proteins and   the natural antioxidant alpha-tocopherol, for its use in the preservation of different foods. <b>Methods:</b>  The films were developed from a 10% solution (w/w) of whey protein concentrate (WPC) in water, 7%   w/w of glycerol as plasticizer, and &alpha;-tocopherol at 1 and 2% (w/w) dissolved in ethanol were added. Mechanical   properties were evaluated under the ASTM D882-01; furthermore, the films were analyzed by   spectrophotometry, scanning electron microscopy (SEM) and biodegradation analysis was performed by   controlling of mass loss. <b>Results:</b> The obtained films showed adequate physical appearance and slightly   brown coloration. Tension decreased similarly with the addition of &alpha;-tocopherol at 1 and 2%; however,   the highest elongation was for films with &alpha;-tocopherol at 1%. The films showed excellent barrier property   in the range of 300-400 nm of the UV region. The SEM photographs showed the droplets of the   antioxidant on the surface of the film, and the biodegradation of films was confirmed in the evaluated   films. <b>Conclusion:</b> Mechanical, optical, morphology, and biodegradation properties of the films were   directly affected by the amount of &alpha;-tocopherol used in the formulation. The incorporation of the natural compound in the films of protein has potential use to extend shelf life of fatty foods.</p>     <p>  <b>Keywords</b>: Whey proteins, alpha-tocopherol, films, plasticizer, biodegradable.  </p> <hr noshade size="1">     <p>&nbsp;</p>     <p>&nbsp;</p>     <p><font size="3"><b>INTRODUCCI&Oacute;N</b></font></p>     <p>El envasado de alimentos se ha usado a trav&eacute;s   de los tiempos para proteger los productos alimenticios   de su entorno y para mantener la calidad de   los mismos. Muchos materiales se han empleado   para la fabricaci&oacute;n de envases, pero la mayor&iacute;a   est&aacute;n hechos de pl&aacute;sticos sint&eacute;ticos y tienen un   uso generalizado, gracias a sus buenas propiedades   mec&aacute;nicas y su eficacia como barrera al ox&iacute;geno y al   agua. Sin embargo, las pel&iacute;culas de envase sint&eacute;ticas   representan un grave problema ecol&oacute;gico debido a su no biodegradabilidad. (1)</p>       <p>Esta preocupaci&oacute;n ha llevado a los investigadores   a desarrollar nuevos materiales que puedan cumplir   con la funci&oacute;n de envases para alimentos que, adem&aacute;s   de proteger, y conservar, sean amigables con el   medio ambiente. Buscando satisfacer esta necesidad,   se han estudiado pel&iacute;culas a partir de recursos renovables,   tales como la case&iacute;na, la soya, el ma&iacute;z, la   ze&iacute;na, la queratina, el col&aacute;geno, el gluten de trigo,   la alb&uacute;mina de huevo y el suero de leche. (2-13)</p>       <p>De estas materias primas, se ha mostrado bastante   inter&eacute;s en el suero de leche, debido a que es   considerado un desecho industrial. El suero es el   l&iacute;quido resultante de la coagulaci&oacute;n de la leche   durante la elaboraci&oacute;n del queso, el cual se obtiene   tras la separaci&oacute;n de las prote&iacute;nas (case&iacute;nas) y de la   grasa. Este l&iacute;quido constituye aproximadamente   el 90% del volumen de la leche y la mayor parte   de sus compuestos son solubles en agua. Dentro   de la composici&oacute;n del suero, se pueden encontrar   compuestos como agua, lactosa, prote&iacute;nas con alto   valor nutricional, vitaminas hidrosolubles y minerales   como sodio, potasio, magnesio, cloruro y   fosfato (14). Las principales prote&iacute;nas de suero son   &beta;-lactoglobulina (&beta;-Lg) y &alpha;-lactalb&uacute;mina (&alpha;-LA),   que constituyen cerca del 50% y 20% del total, respectivamente,   mientras que, las inmunoglobulinas,   la alb&uacute;mina de suero bovino, las peptonas proteosa   y otras prote&iacute;nas menores, complementan la composici&oacute;n   proteica de este derivado (15).</p>       <p>Las pel&iacute;culas y recubrimientos elaborados, a   partir de lactosuero, constituyen una alternativa de   uso para un subproducto agr&iacute;cola que, a pesar de su   alto valor nutricional, es considerado un residuo de   la industria quesera y, durante a&ntilde;os, se han buscado   aplicaciones para su aprovechamiento y, con ello,   evitar su contaminaci&oacute;n en efluentes.</p>       <p>Las propiedades funcionales de la fracci&oacute;n   proteica del suero, especialmente los aislados de   &alpha;-lactoalb&uacute;mina y la &beta;-lactoglobulina, tienen alto   potencial para la elaboraci&oacute;n de pel&iacute;culas comestibles y envases flexibles. Productos que, adem&aacute;s de actuar como barreras selectivas para la migraci&oacute;n de humedad, gas y soluto, pueden funcionar como veh&iacute;culos de muchos ingredientes funcionales, tales como antioxidantes, agentes antimicrobianos, sabores, especias y colorantes que mejoran la funcionalidad de los materiales de envase (16).</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Los antioxidantes se pueden incorporar en las pel&iacute;culas con el fin de elaborar envases activos que permitan mejorar la estabilidad, funcionalidad y seguridad de los alimentos contenidos, lo que contribuye a la conservaci&oacute;n de la calidad en los productos (17). Algunas investigaciones se han realizado con el fin de conocer el efecto de la incorporaci&oacute;n de antioxidantes sobre una matriz biopolim&eacute;rica (18-21). Sin embargo, pocos estudios se han llevado a cabo para analizar el efecto de la adici&oacute;n de alfa-tocoferol en pel&iacute;culas de prote&iacute;na de lactosuero (22-23). En este contexto, unas adecuadas caracter&iacute;sticas mec&aacute;nicas, &oacute;pticas, morfol&oacute;gicas y de biodegradaci&oacute;n de la pel&iacute;cula, elaborada a partir de prote&iacute;nas de lactosuero y con antioxidantes, permiten un mayor acercamiento a la utilizaci&oacute;n de este subproducto como materia prima para la elaboraci&oacute;n de envases activos para alimentos. Por tanto, el objetivo de este estudio fue desarrollar y caracterizar una pel&iacute;cula activa biodegradable, a partir de las prote&iacute;nas extra&iacute;das del suero de queser&iacute;a y el antioxidante natural alfa-tocoferol, con las propiedades adecuadas para la protecci&oacute;n y almacenamiento de diferentes alimentos.</p>       <p>&nbsp;</p>     <p><font size="3">  <b>MATERIALES Y M&Eacute;TODOS</b></font></p>     <p><b>  Materiales</b></p>     <p>Para la elaboraci&oacute;n de las pel&iacute;culas se emple&oacute;   prote&iacute;na concentrada de lactosuero con 80% de   prote&iacute;na y 7% w/w de lactosa, suministrada por la   empresa Tecnas S.A (Medell&iacute;n, Ant, COL); alfatocoferol   sint&eacute;tico con 98% de pureza, suministrado   por Alfa Aesar (Ward Hill, MA, USA); glicerol de   99% de pureza y etanol al 98%, suministrados por   Panreac (Montcada i Reixac, Barna, ESP). Para las   soluciones formadoras de las pel&iacute;culas se emple&oacute; agua destilada.</p>       <p><b>Preparaci&oacute;n de la soluci&oacute;n formadora de las   pel&iacute;culas</b></p>       <p>Para la elaboraci&oacute;n de la soluci&oacute;n formadora de   pel&iacute;culas se sigui&oacute; el procedimiento descrito previamente   (23), con algunas modificaciones. En este   sentido, la prote&iacute;na concentrada de lactosuero fue   disuelta en agua destilada a temperatura ambiente   y con agitaci&oacute;n constante hasta la obtenci&oacute;n de   una soluci&oacute;n del 10% (w/w) de prote&iacute;na. La mezcla   se llev&oacute; a un ba&ntilde;o Mar&iacute;a con una temperatura de   85&deg; C por 20 min. La soluci&oacute;n obtenida fue expuesta   a un choque t&eacute;rmico con hielo por 15 minutos con   agitaci&oacute;n. Inmediatamente, se adicion&oacute; 7% de glicerol,   como plastificante, y se mantuvo la agitaci&oacute;n   constante.</p>       <p><b>Incorporaci&oacute;n del alfa-tocoferol como   antioxidante</b></p>       <p>La soluci&oacute;n formadora de las pel&iacute;culas fue puesta   en un agitador Dispermat&reg; R11 (Hemel, Herts,   U.K) a 3000 rpm por 5 minutos y se agreg&oacute; el   alfa-tocoferol, a concentraciones de 1 y 2%, usando   etanol puro como solvente para lograr la dispersi&oacute;n.   La soluci&oacute;n obtenida fue desgasificada durante   3 minutos usando un SpeedMixer Dac 400FVZ   (Landrum, SC.USA). 10 mL de la soluci&oacute;n obtenida   fueron trasferidos a cajas de Petri (12.5 cm de   di&aacute;metro) de polietileno de alta densidad (HDPE).   Las pel&iacute;culas se formaron por secado de las soluciones,   durante 48 horas a 23 &deg;C en una campana   de extracci&oacute;n.</p>       <p>Para las pruebas mec&aacute;nicas, se realiz&oacute; una   modificaci&oacute;n al procedimiento anterior. En este   caso la soluci&oacute;n obtenida fue vertida en placas   recubiertas de tefl&oacute;n (20*30 cm) y, para controlar   el espesor, se verti&oacute; la misma cantidad de soluci&oacute;n   (40 mL) para cada tratamiento con alfa-tocoferol al   1% y 2%. Como testigo, se elabor&oacute; una pel&iacute;cula sin   incorporaci&oacute;n del antioxidante (alfa-tocoferol 0%).   Estas pel&iacute;culas se secaron en campana de extracci&oacute;n   a temperatura ambiente por 48 horas y se almacenaron   en condiciones controladas con humedad   relativa de 50% y temperatura de 23&deg; C.</p>       ]]></body>
<body><![CDATA[<p><b>Caracterizaci&oacute;n de propiedades en tracci&oacute;n</b></p>       <p>El espesor de las pel&iacute;culas se determin&oacute; con un   calibrador digital Mitutoyo Absolute (Aurora, Il.   USA). El porcentaje de elongaci&oacute;n, la fuerza de   tensi&oacute;n y el m&oacute;dulo de Young se determinaron utilizando   probetas rectangulares (25.4* 150 mm) y un   espesor promedio de 0.28 mm con una separaci&oacute;n   entre mordazas de 100 mm, utilizando una m&aacute;quina   universal Multitest 1-i (Slinfold, West S. U.K), con   una velocidad de 50 mm/min y un porcentaje de   ca&iacute;da del 10% seg&uacute;n la norma ASTM D882-01. Se realizaron 10 ensayos de cada sistema.</p>      <p><b>Transmisi&oacute;n de luz de la pel&iacute;cula</b></p>     <p>Las propiedades de barrera a la luz ultravioleta y a la luz visible fueron medidas en las pel&iacute;culas en un rango entre 300 y 800 nm, para lo cual se midi&oacute; la transmitancia usando un espectrofot&oacute;metro Shimadzu UV-Vis UV-2501pc (Columbia, MD. U.S.A). Se realizaron tres medidas para cada sistema con pel&iacute;culas de 50*30 mm.</p>     <p><b>Caracterizaci&oacute;n morfol&oacute;gica por microscop&iacute;a electr&oacute;nica de barrido</b></p>     <p>La caracterizaci&oacute;n morfol&oacute;gica se realiz&oacute; con un microscopio electr&oacute;nico de barrido (SEM) Hitachi S4800 (Urbana, Il. USA) a un voltaje de 10 kV, para las muestras en su estado original. Para identificar la presencia de las microgotas del antioxidante natural, se observ&oacute; la superficie de las pel&iacute;culas con y sin alfa-tocoferol.</p>     <p><b>Biodegradaci&oacute;n de las pel&iacute;culas</b></p>     <p>Se evalu&oacute; la biodegradaci&oacute;n de las pel&iacute;culas elaboradas con alfa-tocoferol al 0%, 1% y 2%. Las muestras fueron evaluadas por triplicado, en compost preparado a partir de residuos de hojas secas, tallos, paja, c&aacute;scaras de frutas y tierra. Las pel&iacute;culas fueron moldeadas en probetas de 2*4 cm y se dispusieron en el compost manteniendo una humedad relativa entre 30-50%.</p>     <p>La p&eacute;rdida de masa y apariencia f&iacute;sica de las pel&iacute;culas se evalu&oacute; en el tiempo hasta observar su biodegradaci&oacute;n. Para ello, en tiempos seleccionados se retiraron las pel&iacute;culas del compost, se limpiaron suavemente con una brocha y se pesaron en balanza anal&iacute;tica. Se calcul&oacute; el porcentaje medio de p&eacute;rdida de masa de cada tipo de material.</p>     <p><b>An&aacute;lisis estad&iacute;stico</b></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Los datos de propiedades mec&aacute;nicas fueron procesados en el programa SPSS para Windows&reg;, versi&oacute;n 19. En el an&aacute;lisis de las variables con distribuci&oacute;n normal se utilizaron promedios y desviaci&oacute;n est&aacute;ndar (DE) para la comparaci&oacute;n entre los grupos. En todos los an&aacute;lisis se consider&oacute; un nivel de significancia del 95%.</p>      <p>&nbsp;</p>     <p> <font size="3"> <b>RESULTADOS</b></font></p>     <p>Para todas las pel&iacute;culas del ensayo con incorporaci&oacute;n    de alfa-tocoferol al 0%, 1% y 2% se obtuvieron    soluciones estables, viscosas y fluidas de coloraci&oacute;n  cremosa y sin presencia de burbujas. </p>       <p>En la incorporaci&oacute;n de alfa-tocoferol con etanol    puro como solvente, se logr&oacute; apreciar que la    viscosidad de la soluci&oacute;n disminu&iacute;a notablemente,    a mayor concentraci&oacute;n de alfa-tocoferol menor era    la viscosidad de la soluci&oacute;n formadora de la pel&iacute;cula,    lo que caus&oacute; un aumento en su fluidez. Adem&aacute;s, se    observ&oacute; que el etanol permiti&oacute; conservar las propiedades    f&iacute;sicas de color y ausencia de burbujas en la    soluci&oacute;n. Despu&eacute;s del proceso de secado, todas las    pel&iacute;culas presentaron caracter&iacute;sticas muy similares    entre ellas, con adecuada apariencia f&iacute;sica, maleables    y d&uacute;ctiles, coloraci&oacute;n ligeramente parda y con ausencia    de burbujas. Las pel&iacute;culas con incorporaci&oacute;n    de alfa-tocoferol mostraron sin&eacute;resis en la superficie,    debido al car&aacute;cter no polar de este compuesto.</p>       <p><b>Caracterizaci&oacute;n mec&aacute;nica en tracci&oacute;n </b></p>       <p>En la <a href="#f1">figura 1</a> se muestran las curvas caracter&iacute;sticas    de tensi&oacute;n-deformaci&oacute;n para cada uno de los    tres sistemas estudiados; mientras que en la <a href="#t1">tabla 1</a>    se resumen los valores num&eacute;ricos obtenidos despu&eacute;s  de los ensayos de tracci&oacute;n.</p>      <p align="center"><a name="f1"></a><img src=".../img/revistas/vitae/v21n1/v21n1a2f1.jpg"></p>     <p align="center"><a name="t1"></a><img src="/img/revistas/vitae/v21n1/v21n1a2t1.jpg"></p>        <p>En general, se observ&oacute; que la incorporaci&oacute;n del      antioxidante afect&oacute; las propiedades mec&aacute;nicas de la      pel&iacute;cula, causando una disminuci&oacute;n en la tensi&oacute;n      nominal a la ruptura, y mostrando que, aunque no      hay diferencia significativa entre las pel&iacute;culas con alfatocoferol      al 1% y al 2% w/w, se aprecia una notoria    diferencia entre &eacute;stas y la pel&iacute;cula testigo sin tocoferol.</p>          ]]></body>
<body><![CDATA[<p>La adici&oacute;n del antioxidante alfa-tocoferol tiene      efecto sobre las propiedades mec&aacute;nicas de las pel&iacute;culas      (<a href="#t1">tabla 1</a>). En este sentido, la muestra elaborada      sin adici&oacute;n de alfa-tocoferol result&oacute; ser m&aacute;s r&iacute;gida      que las pel&iacute;culas a las que se les incorporaron alfatocoferol      en concentraciones de 1 y 2 %. La rigidez      m&aacute;s alta en las pel&iacute;culas sin alfa-tocoferol se corrobor&oacute;      con el resultado del M&oacute;dulo de Young, debido      a que en dichas muestras se obtuvo estad&iacute;sticamente      el valor m&aacute;s alto. A su vez, se evidenci&oacute; un efecto      plastificante, ejercido por el antioxidante natural    sobre las muestras despu&eacute;s de su incorporaci&oacute;n.</p>        <p>Los valores corresponden al promedio &plusmn; desviaci&oacute;n  est&aacute;ndar de 10 r&eacute;plicas. En el an&aacute;lisis de  las variables con distribuci&oacute;n normal se utilizaron  promedios y desviaci&oacute;n est&aacute;ndar para la comparaci&oacute;n  entre los grupos. </p>     <p><b>Transmisi&oacute;n de luz de las pel&iacute;culas</b></p>      <p>La exposici&oacute;n a la luz visible y ultravioleta (UVVis)  produce el deterioro oxidativo de los alimentos  envasados, lo que lleva a la p&eacute;rdida de nutrientes  (vitaminas A, C y riboflavina), alteraci&oacute;n del color y  volatilizaci&oacute;n de sabores (18). Por ello, es necesario  verificar la barrera a la luz que presentan estos materiales  a longitudes de onda entre 350 y 600 nm,  donde se presenta el mayor deterioro en los productos  exhibidos en estanter&iacute;as. En la <a href="#t2">tabla 2</a> y en la <a href="#f2">figura 2</a> se presentan los resultados obtenidos en la caracterizaci&oacute;n  &oacute;ptica de las pel&iacute;culas. En este sentido, la  adici&oacute;n de alfa-tocoferol a la formulaci&oacute;n influy&oacute;  directamente en la absorbacia y transmitancia de la  pel&iacute;cula (a mayor porcentaje de alfa-tocoferol mayor  absorbancia y menor transmitancia de las pel&iacute;culas).</p>       <p align="center"><a name="t2"></a><img src="/img/revistas/vitae/v21n1/v21n1a2t2.jpg"></p>     <p align="center"><a name="f2"></a><img src="/img/revistas/vitae/v21n1/v21n1a2f2.jpg"></p>      <p>En la <a href="#f2">figura 2</a> se presenta el barrido que se realiz&oacute;  entre 300 y 800 nm para verificar la barrera a la luz  que presentan estos materiales a longitudes de onda  que causan gran impacto negativo sobre los alimentos.  Se observ&oacute; que a valores menores de 350 nm, las  pel&iacute;culas con tocoferol o sin tocoferol transmitieron  la menor cantidad de luz; adem&aacute;s, en todo el barrido,  se evidencia que a mayor porcentaje de tocoferol adicionado,  menor es la medida de la transmitancia en  las muestras y, por tanto, se present&oacute; un mejor efecto  protector sobre los alimentos envasados.</p>      <p><b>Caracterizaci&oacute;n morfol&oacute;gica por microscop&iacute;a electr&oacute;nica de barrido </b></p>     <p>El an&aacute;lisis de la microestructura de las pel&iacute;culas  permite obtener informaci&oacute;n sobre la organizaci&oacute;n  de sus componentes. En la <a href="#f3">figura 3</a> se presentan  im&aacute;genes de la superficie de las pel&iacute;culas con y sin  incorporaci&oacute;n de alfa-tocoferol. La microestructura  de las pel&iacute;culas se estudi&oacute; cualitativamente con el  objetivo de observar el efecto del antioxidante sobre  la estructura de la pel&iacute;cula.</p>      <p align="center"><a name="f3"></a><img src="/img/revistas/vitae/v21n1/v21n1a2f3.jpg"></p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p>En la <a href="#f3">figura 3A</a> se observa la superficie de la  pel&iacute;cula de prote&iacute;na de lactosuero plastificada con  glicerol y sin adici&oacute;n de alfa-tocoferol, donde se  present&oacute; una fase homog&eacute;nea comparada con las  <a href="#f3">figuras 3B</a> y <a href="#f3">3C</a>, en las que se observaron defectos  en su estructura como burbujas o microgotas que  representan el alojamiento del alfa-tocoferol en la  pel&iacute;cula. </p>     <p><b>An&aacute;lisis de biodegradaci&oacute;n </b></p>     <p>El an&aacute;lisis de biodegradaci&oacute;n, de las pel&iacute;culas  testigo y con alfa-tocoferol al 1% y 2%, se realiz&oacute;  en un compost casero, simulando la degradaci&oacute;n  en un relleno sanitario. </p>     <p>En la <a href="#f4">figura 4</a> se observa que las pel&iacute;culas de  prote&iacute;na de lactosuero con alfa-tocoferol al 1 y 2%  tienen un comportamiento muy similar, pues ambas  presentan mayor velocidad de p&eacute;rdida de masa  en los 10 primeros d&iacute;as del an&aacute;lisis, mientras que  las pel&iacute;culas testigo, sin alfa-tocoferol, presentaron  una tasa de degradaci&oacute;n mayor entre los 10 y 15  d&iacute;as de an&aacute;lisis en el compost. En las pel&iacute;culas con  incorporaci&oacute;n de alfa-tocoferol se observa una tasa  de degradaci&oacute;n menor a partir del d&iacute;a 10, comparada  con las pel&iacute;culas testigo. </p>      <p align="center"><a name="f4"></a><img src="/img/revistas/vitae/v21n1/v21n1a2f4.jpg"></p>      <p>La <a href="#f5">figura 5</a> muestra el estado de las pel&iacute;culas en  el tiempo. A los 10 d&iacute;as se observa mayor p&eacute;rdida de  masa en la pel&iacute;cula sin alfa-tocoferol y una degradaci&oacute;n  m&aacute;s lenta en las pel&iacute;culas con alfa-tocoferol  al 1% y 2%. </p>      <p align="center"><a name="f5"></a><img src="/img/revistas/vitae/v21n1/v21n1a2f5.jpg"></p>      <p>&nbsp;</p>     <p><font size="3">  <b>DISCUSI&Oacute;N</b></font></p>     <p>En el proceso de la mezcla y homogenizaci&oacute;n de    los componentes para la elaboraci&oacute;n de las pel&iacute;culas,    a partir de prote&iacute;nas de lactosuero con incorporaci&oacute;n    de alfa-tocoferol al 0%, 1% y 2%, se encontr&oacute;    que la viscosidad de esta soluci&oacute;n coincide con la    descrita en el estudio de Krochta y sus colaboradores (23), quienes evaluaron soluciones de prote&iacute;na    de lactosuero con incorporaci&oacute;n de alfa-tocoferol    y palmitato de ascorbilo, y reportaron una disminuci&oacute;n    de la viscosidad atribuido al incremento en    la concentraci&oacute;n de estos antioxidantes. Hallazgo    que puede deberse a que se utiliza etanol como    solvente proporcional, seg&uacute;n la concentraci&oacute;n de    alfa-tocoferol en la pel&iacute;cula y, por tanto, a mayor    cantidad de tocoferol en la formulaci&oacute;n menor ser&aacute;  la viscosidad de la soluci&oacute;n.</p>        ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Los plastificantes reducen la cantidad de interacciones    entre las distintas cadenas moleculares,    aumentando as&iacute; los espacios intermoleculares y    causando un incremento en las propiedades d&uacute;ctiles    del material por un descenso de su rigidez, aunque    tambi&eacute;n pueden disminuir sus propiedades de barrera    debido a un incremento en el volumen libre    (25). Los plastificantes m&aacute;s habituales para este tipo    de pel&iacute;culas, a partir de prote&iacute;nas, son los polioles,    az&uacute;cares o almidones debido a su compatibilidad    con las prote&iacute;nas y su capacidad para favorecer la    elasticidad y flexibilidad de las biopel&iacute;culas obtenidas    (25). La adici&oacute;n de alfa-tocoferol al 1% w/w    mejora sustancialmente la elasticidad de la pel&iacute;cula,    comparando con las pel&iacute;culas sin alfa-tocoferol. Los    resultados presentados en la tabla 1 y obtenidos en    la deformaci&oacute;n de las pel&iacute;culas de prote&iacute;na de suero    con alfa-tocoferol fueron muy similares a los obtenidos    por Mu&ntilde;oz y colaboradores (26) para una    pel&iacute;cula elaborada a partir de la mezcla de prote&iacute;nas    del suero y muc&iacute;lago de <i>Salvia hisp&aacute;nica L</i>, la cual se    compone principalmente de xilosa, glucosa y &aacute;cido    glucur&oacute;nico, formando un polisac&aacute;rido ramificado    donde el muc&iacute;lago tambi&eacute;n act&uacute;a como plastificante.    El m&oacute;dulo de Young o m&oacute;dulo de elasticidad    (relaci&oacute;n de tensi&oacute;n a la deformaci&oacute;n sobre la parte    lineal de la curva de esfuerzo-deformaci&oacute;n) es una    medida de la rigidez de la pel&iacute;cula (27). Como se    observa en la <a href="#t1">tabla 1</a>, el m&oacute;dulo de Young disminuye    al introducir alfa-tocoferol en las pel&iacute;culas. </p>       <p>La incorporaci&oacute;n de alfa-tocoferol, como antioxidante    natural en la formulaci&oacute;n para la elaboraci&oacute;n    de las pel&iacute;culas a partir de prote&iacute;nas de lactosuero,    tiene un efecto favorable en las propiedades &oacute;pticas,    debido a que disminuye la transmitancia y permite    inferir que, la adici&oacute;n de alfa-tocoferol en mayores    proporciones, aumentar&iacute;a a&uacute;n m&aacute;s la protecci&oacute;n de    los alimentos envasados contra el efecto perjudicial    de la luz UV. Sin embargo, con el fin de promover    una interacci&oacute;n positiva (migraci&oacute;n), entre el envase    activo y el alimento, la concentraci&oacute;n de alfatocoferol    debe ser del 1% m&iacute;nimo, seg&uacute;n Wessling    y sus colaboradores (28), y del 4% m&aacute;ximo, seg&uacute;n    Granda (29) y Graciano (30) con sus respectivos    colaboradores. Estos resultados muestran que las    pel&iacute;culas de lactosuero con alfa-tocoferol pueden    ayudar a retardar la oxidaci&oacute;n lip&iacute;dica inducida    por la luz UV en los alimentos. Los resultados son    similares a los reportados en otros estudios con    prote&iacute;na de lactosuero (31), escamas de pescado    (32) y pel&iacute;culas a partir de surimi (33). Estos estudios    muestran que, las pel&iacute;culas elaboradas con    materiales org&aacute;nicos, presentan las mejores barreras    a la luz UV, debido a que se presenta una menor    transmisi&oacute;n de luz al alimento. Por su parte, para    pel&iacute;culas de polietileno de baja densidad (PEBD),    la transmitancia a una longitud de onda de 350 nm    es de 79,9% (24); mientras que, para las pel&iacute;culas    de lactosuero con alfa-tocoferol al 0%,1% y 2%, a    la misma longitud de onda, los valores fueron de    5,66%, 3,85% y 0,48% respectivamente. Por tanto,    es evidente una mejor barrera a la luz de las pel&iacute;culas    elaboradas con materiales org&aacute;nicos respecto a las    derivadas de pol&iacute;meros sint&eacute;ticos.</p>        <p>La caracterizaci&oacute;n morfol&oacute;gica de las pel&iacute;culas    con alfa-tocoferol permiti&oacute; observar que la microestructura    es el resultado de las interacciones,    entre sus componentes y los posibles fen&oacute;menos    de desestabilizaci&oacute;n que pueden ocurrir durante la    etapa de secado. En esta direcci&oacute;n, a mayor proporci&oacute;n    del antioxidante en el sistema se observaron    huecos m&aacute;s numerosos, los cuales corresponden a    gotas de alfa- tocoferol y se deben a los fen&oacute;menos    de floculaci&oacute;n y coalescencia, durante la etapa de    secado de las pel&iacute;culas (34). Adem&aacute;s, en la superficie    de la pel&iacute;cula se observ&oacute; la presencia de peque&ntilde;as    burbujas, generadas durante el secado, por el desplazamiento    del vapor, generado el interior de la    estructura de la pel&iacute;cula, hacia arriba, formando    una gota que va produciendo orificios en las paredes    delgadas a medida que asciende (35). </p>       <p>Las pel&iacute;culas basadas en biopol&iacute;meros naturales    se asumen biodegradables; sin embargo, la tasa de    degradaci&oacute;n puede decrecer en pel&iacute;culas biopolim&eacute;ricas    formadas a trav&eacute;s de enlaces covalentes (36).    Despu&eacute;s de la p&eacute;rdida de masa inicial en los primeros    3 d&iacute;as, la actividad microbiana (degradaci&oacute;n    enzim&aacute;tica) y la hidr&oacute;lisis empezaron a dominar, lo    que resulta en una mayor tasa de biodegradaci&oacute;n    y, por consiguiente, p&eacute;rdida de masa (37). En las    pel&iacute;culas con incorporaci&oacute;n de alfa-tocoferol se    observa una tasa de degradaci&oacute;n menor a partir del        d&iacute;a 10, comparado con las pel&iacute;culas testigo, debido    principalmente a que la presencia de alfa-tocoferol,    como compuesto apolar, disminuye la cantidad de    agua disponible en la pel&iacute;cula, afectando las condiciones    de crecimiento de los microorganismos    y al mismo tiempo reduciendo la posibilidad de    hidr&oacute;lisis (38). El estudio de biodegradaci&oacute;n en    prote&iacute;na aislada de soya (37) confirma la tendencia    de biodegradaci&oacute;n en matrices biopolim&eacute;ricas similares,    mostrando una curva de p&eacute;rdida de masa  similar a la obtenida en este estudio.</p>     <p>&nbsp;  </p>     <p><b>LIMITACIONES</b></p>     <p>En este estudio no se realiz&oacute; la medici&oacute;n del    color de las pel&iacute;culas, lo que limita la precisi&oacute;n de    esta caracter&iacute;stica. En fututos trabajos se deber&iacute;a    realizar dicha medici&oacute;n para reconocer otros posibles    factores que pueden influir en la protecci&oacute;n  de los alimentos.</p>     <p>&nbsp;</p>     <p> <font size="3"> <b>CONCLUSIONES</b></font></p>     <p>La incorporaci&oacute;n del alfa-tocoferol, en pel&iacute;culas    elaboradas a partir de prote&iacute;nas de lactosuero, afecta    las propiedades mec&aacute;nicas de la pel&iacute;cula, disminuyendo    su fuerza y aumentando su elasticidad. Las    concentraciones del 2% de alfa-tocoferol favorecen    las propiedades &oacute;pticas, disminuyendo la transmitancia    y generando mayor protecci&oacute;n frente a la    luz UV, convirti&eacute;ndose esto en una caracter&iacute;stica    de protecci&oacute;n adicional para los alimentos que se    almacenen en este tipo de envase activo con antioxidante    natural. El estudio de biodegradaci&oacute;n confirma    que la alteraci&oacute;n de la estructura qu&iacute;mica de    la prote&iacute;na, con la inclusi&oacute;n del alfa-tocoferol como    antioxidante, no compromete la biodegradabilidad    de las pel&iacute;culas, y en 30 d&iacute;as de almacenamiento se    logra una p&eacute;rdida de peso equivalente al 50%. Los    resultados de este estudio sugieren que las pel&iacute;culas    activas biodegradables con la inclusi&oacute;n del antioxidante    natural alfa-tocoferol pueden representar    una opci&oacute;n de protecci&oacute;n para alimentos con alto    contenido de grasa y susceptibles a deterioros por  oxidaci&oacute;n lip&iacute;dica.</p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p>&nbsp;</p>     <p><b>AGRADECIMIENTOS</b></p>     <p>Los autores agradecen al Comit&eacute; para el Desarrollo  de la Investigaci&oacute;n &#8212;CODI&#8212; de la Universidad  de Antioquia y su estrategia para la Sostenibilidad  de los Grupos de Investigaci&oacute;n - Convocatoria a&ntilde;o  2011-2012. As&iacute; mismo, se agradece a la Universidad  de Valencia, Espa&ntilde;a por la Beca para la formaci&oacute;n  especializada de j&oacute;venes investigadores de pa&iacute;ses en  v&iacute;a de desarrollo 2012. Los investigadores dan su  agradecimiento a Geciel Pati&ntilde;o, David Guti&eacute;rrez,  Francisca Manzanares y al Doctor Rafael Gavara  por todo su apoyo y colaboraci&oacute;n durante la realizaci&oacute;n  de este estudio.</p>     <p>&nbsp;</p>     <p> <font size="3"> <b>REFERENCIAS BIBLIOGR&Aacute;FICAS</b></font></p>     <!-- ref --><p>1. Pires C, Ramos C, Teixeira G, Batista I, Mendes R, Nunes L,    Marques A. Characterization of biodegradable films prepared    with hake proteins and thyme oil. J Food Eng. 2012 Aug ; 105  (3): 422-428.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000098&pid=S0121-4004201400010000200001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>2. Chambi H, Grosso C. Edible films produced with gelatin and    casein cross-linked with transglutaminase. Food Res Int. 2006    May; 39 (4): 458-466.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000100&pid=S0121-4004201400010000200002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>       <!-- ref --><p>3. Diak OA, Amro B, Jones D, Andrews GP. The manufacture and    characterization of casein films as novel tablet coatings. J Food    bioprod process. 2007 Sep; 85 (3): 284-290.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000102&pid=S0121-4004201400010000200003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>4. Mauer LJ, Smith DE, Labuza TP. Water vapor permeability,    mechanical, and structural properties of edible <i><b>&#946;</b></i>-casein films.    Int. Dairy J. 2000 Jun; 10 (5-6): 353-358.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000104&pid=S0121-4004201400010000200004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>5. Kokoszka S, Debeaufort F, Hambleton A, Lenart A, Voilley A.    Protein and glycerol contents affect physico-chemical properties    of soy protein isolate-based edible films. Innov Food Sci Emerg    Technol. 2010 Jul; 11 (3): 503-510.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000106&pid=S0121-4004201400010000200005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>6. Su J-F, Yuan X-Y, Huang Z, Xia W-L. Properties stability and    biodegradation behaviors of soy protein isolate/poly (vinyl alcohol)    blend films. Polym Degrad Stab. 2010 Jul; 95 (7): 1226-1237.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000108&pid=S0121-4004201400010000200006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>7. Guerrero P, Nur Hanani Z, Kerry JP, de la Caba K. Characterization    of soy protein-based films prepared with acids and oils by    compression. J. Food Eng. 2011 Nov; 107 (1): 41-49.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000110&pid=S0121-4004201400010000200007&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>8. L&oacute;pez O, Zaritzky N, Garc&iacute;a M. Physicochemical characterization    of chemically modified corn starches related to rheological    behavior, retrogradation and film forming. J. Food Eng. 2010    Sep; 100 (1): 160-168.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000112&pid=S0121-4004201400010000200008&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>9. Yan Q, Hou H, Guo P, Dong H. Effects of extrusion and glycerol    content on properties of oxidized and acetylated corn starchbased    films. Carbohydr Polym. 2012 Jan; 87 (1, 4): 707-712.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000114&pid=S0121-4004201400010000200009&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>10. Zeng M, Huang Y, Lu L, Fan L, Lourdin D. Effects of fillermatrix    morphology on mechanical properties of corn starch&#8211;zein    thermo-moulded films. Carbohydr Polym. 2011 Feb; 84 (1, 11):    323-328.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000116&pid=S0121-4004201400010000200010&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>11. Fairley P, Monahan F, German J, Krochta J. Mechanical properties    and water vapor permeability of edible films from whey    protein isolate and sodium dodecyl sulfate. J. Agric. Food Chem.    1996 Feb; 44 (2): 438-443.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000118&pid=S0121-4004201400010000200011&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>12. Kaya S, Kaya A. Microwave drying effects on properties of whey    protein isolate edible films. J. Food Eng. 2000 Feb; 43(2): 91-96.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000120&pid=S0121-4004201400010000200012&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>13. Hong S, Krochta J. Oxygen barrier performance of wheyprotein-    coated plastic films as affected by temperature, relative    humidity base film and protein type. J. Food Eng. 2006 Dec; 77    (3): 739-745.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000122&pid=S0121-4004201400010000200013&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>14. Londo&ntilde;o M, Sep&uacute;lveda J, Hernandez A. Fermented fresh cheese    milkwhey beverage inoculated with Lactobacillus casei. Rev.Fac.    Nal.Agr. 2008 Jun; 61 (1): 4409-4421.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000124&pid=S0121-4004201400010000200014&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>15. Ramos O, Pereira J, Silva S, Amorim M, Fernandes J, Lopesda-    Silva J, Pintado M, Malcata F. Effect of composition of    commercial whey protein preparations upon gelation at various    pH values. Food Res Int. 2012 Oct; 48 (2):681-686.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000126&pid=S0121-4004201400010000200015&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>16. Zinoviadou K, Koutsoumanis K, Biliaderis C. Physico-chemical    properties of whey protein isolate films containing oregano oil    and their antimicrobial action against spoilage flora of fresh beef.    Meat Sci. 2009 Jul; 82 (3): 338-345.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000128&pid=S0121-4004201400010000200016&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>       <!-- ref --><p>17. Dong Sun L. Innovations in food packaging. 1a rev. ed. Jung H.    Hang; Chennai, India: Elsevier Academic Press; 2005. p 108-119.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000130&pid=S0121-4004201400010000200017&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>18. Martins J, Cerqueira M, Vicente A. Influence of &#945;-tocopherol    on physicochemical properties of chitosan-based films. Food    Hydrocoll. 2012 May; 27 (1): 220-227.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000132&pid=S0121-4004201400010000200018&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>       <!-- ref --><p>19. Pereira de Abreu D, Paseiro P, Maroto J, Cruz J. Natural antioxidant    active packaging film and its effect on lipid damage in frozen    blue shark (<i>Prionace glauca</i>). Innov Food Sci Emerg Technol. 2011    Jan; 12 (1): 50&#8211;55.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000134&pid=S0121-4004201400010000200019&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>       <!-- ref --><p>20. S&aacute;nchez R, Fabra M, Talens P. Recubrimientos comestibles a base    de caseinato s&oacute;dico con capacidad antioxidante &#91;Tesis de m&aacute;ster&#93;.    &#91;Valencia, Espa&ntilde;a&#93;: Universidad Polit&eacute;cnica de Valencia; 2011.    1-17 p.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000136&pid=S0121-4004201400010000200020&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>21. Gemili S, Yemenicioglu A, Altinkaya S. Development of antioxidant    food packaging materials with controlled release properties.    J. Food Eng. 2010 Feb; 96 (3): 325-332.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000138&pid=S0121-4004201400010000200021&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>22. Han J, Hwang H, Min S, Krochta J. Coating of Peanuts with    Edible Whey Protein Film Containing a-Tocopherol and Ascorbyl    Palmitate. J Food Sci. 2008 Oct; 73 (8): 349-355.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000140&pid=S0121-4004201400010000200022&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>23. Han J, Krochta J. Physical properties of whey protein coating    solutions and films containing antioxidants. J Food Sci. 2007    Jul; 72 (5): 308-314.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000142&pid=S0121-4004201400010000200023&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>24. Gounga M, Xu S, Wang Z. Whey protein isolate-based edible    films as affected by protein concentration, glycerol ratio and    pullulan addition in film formation. J. Food Eng. 2007 Dec; 83    (4): 521-530.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000144&pid=S0121-4004201400010000200024&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>25. Han J, Floros J. Casting antimicrobial packaging films and    measuring their physical properties and antimicrobial activity. J    Plast Film Sheet. 1997 Oct; 13: 287-298.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000146&pid=S0121-4004201400010000200025&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>26. Mu&ntilde;oz L, Aguilera J, Rodriguez L, Cobos A, Diaz O. Characterization    and microstructure of films made from mucilage of      <i>Salvia hispanica</i> and whey protein concentrate. J. Food Eng. 2012    Aug; 111 (3): 511-518.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000148&pid=S0121-4004201400010000200026&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>27. Banker G. Film coating theory and practice. J Pharm Sci. 1966    Jan; 55 (1): 81-89.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000150&pid=S0121-4004201400010000200027&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>28. Wessling C, Nielsen T, Leufv&eacute;n A. The influence of &#945;-tocopherol    concentration on the stability of linoleic acid and the properties of    low-density polyethylene. J Packaging Technology and Science.    2000 Feb; 13 (1):19-28.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000152&pid=S0121-4004201400010000200028&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>29. Granda D, Soto H, Peralta E, Troncoso R, Vallejo B, G&aacute;mez N,    Graciano A. Migration of a-Tocopherol from an active multilayer    film into whole milk powder. Food Res Int. 2009 Dec; 42 (10):    1396-1402.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000154&pid=S0121-4004201400010000200029&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>30. Graciano A, Soto H, Peralta E, Cruz P, Islas A, S&aacute;nche S, S&aacute;nchez    A, Gonz&aacute;lez N, Gonz&aacute;lez H. Migration of a-tocopherol from    LDPE films to corn oil and its effect on the oxidative stability.    Food Res Int. 2010 May; 43 (4): 1073&#8211;1078.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000156&pid=S0121-4004201400010000200030&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>31. Fang Y, Tung M, Britt J, Yada S, Dalgleish D. Tensile and barrier    properties of edible films made from whey proteins. J Food Sci.    2002 Jan; 67(1): 188-193.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000158&pid=S0121-4004201400010000200031&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>        <!-- ref --><p>32. Jongjareonrak A, Benjakul S, Visessanguan W, Prodpran T,    Tanaka M. 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