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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[Abstract In Colombia, Visceral Leishmaniasis (VL) is predominant in rural areas of the Caribbean and Magdalena River Valley regions. A one year old female inhabitant of an urban zone in the city of Cartagena displayed symptoms of hepato/splenomegaly, anemia, leucopenia and malnutrition. She had not visited endemic areas for VL but tested positive for VL serologically. After treatment with Glucantime®, her symptoms disappeared; however, three months later, her Montenegro test came out positive. To identify the presence of VL vectors and reservoirs, and also environmental conditions suitable for VL transmission in the area of the reported VL case. There were carried out epidemiological, clinical, immunological and molecular studies to look for other people infected with VL. Also it was searched for VL reservoirs and vectors in the area. The study area presented environmental conditions suitable for VL transmission. No infected children were found, but seven adults had positive Montenegro tests, suggesting exposure to the parasite in this area. Additionally, the VL vector species Lu. evansi was found inside some of these people&#8217;s homes. Finally, a domestic dog and a D. marsupialis individual were also found to be infected with Leishmania infantum, confirmed by laboratory. It was demonstrated the presence of a new urban VL scenario in Colombia, which should be object of public health surveillance and acts in the studied area.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[  <font face="Verdana" size="2">      <p align="center"><font size="4"><b> Cartagena: nuevo foco de leishmaniasis visceral urbana en Colombia </b></font></p>      <p align="center"><font size="3"><b>Cartagena: New Urban Focus of Visceral Leishmaniasis in Colombia </b></font></p>      <p align="center">C. P. Zambrano Hern&aacute;ndez<Sup>a,*</Sup>    <br>  M. S. Ayala Sotelo<Sup>a </Sup>    <br>  O. P. Fuya Oviedo<Sup>a </Sup>    <br>  O. C. Barraza<Sup>b </Sup>    <br>  G. Rodr&iacute;guez Toro<Sup>c </Sup></p>      <p><Sup>a</Sup> Grupo de Parasitolog&iacute;a, Direcci&oacute;n de investigaci&oacute;n en Salud P&uacute;blica, Instituto Nacional de Salud, Bogot&aacute;, Colombia.    <br>  <sup>*</sup> Autor de correspondencia: <a href="mailto:cpilarzambrano@gmail.com">cpilarzambrano@gmail.com</a>.     ]]></body>
<body><![CDATA[<br>  <Sup>b</Sup> Grupo Biolog&iacute;a y Control de Enfermedades Infecciosas, Universidad de Antioquia, Medell&iacute;n, Colombia.    <br>  <Sup>c</Sup> Facultad de Medicina. Universidad de La Sabana, Ch&iacute;a, Cundinamarca, Colombia. </p>      <p>Recepci&oacute;n: 10-sep-2015 Aceptaci&oacute;n: 08-dic-2015 </p>  <hr>     <p><b>Resumen </b></p>      <p>En Colombia, la leishmaniasis visceral (LV) es de predominio rural, en &aacute;reas determinadas de algunos departamentos de la Regi&oacute;n Caribe y en el valle medio del r&iacute;o Magdalena. Una ni&ntilde;a de un a&ntilde;o de edad, del &aacute;rea urbana de Cartagena, present&oacute; s&iacute;ntomas de hepato-esplenomegalia, anemia, leucopenia y desnutrici&oacute;n; ella no hab&iacute;a estado en &aacute;reas de riesgo para LV, tuvo pruebas serol&oacute;gicas positivas, revers&oacute; s&iacute;ntomas con Glucantime<sup>&reg;</sup>, y luego de tres meses postratamiento su leishmanina fue positiva. Identificar la presencia de vectores, reservorios y condiciones ambientales para la transmisi&oacute;n de LV en el &aacute;rea del caso confirmado. Se realizaron estudios epidemiol&oacute;gicos, cl&iacute;nicos, inmunol&oacute;gicos y moleculares para buscar otros pacientes, reservorios y vectores. El &aacute;rea de estudio present&oacute; condiciones que favorecen la transmisi&oacute;n de la enfermedad. No se encontraron otros ni&ntilde;os enfermos. Siete personas adultas tuvieron resultado reactivo a la Prueba Intrad&eacute;rmica de Montenegro, indicando contacto previo con el par&aacute;sito, y dentro de su vivienda se captur&oacute; <i>Lu. evansi</i>. En un canino y en un <i>Didelphis marsupialis </i>se confirm&oacute; por laboratorio la infecci&oacute;n por <i>Leishmania infantum</i>. Se demostr&oacute; un foco urbano y nuevo de LV en Colombia que debe ser objeto de acciones regulares de salud p&uacute;blica. </p>      <p><b><i>Palabras clave</i>:</b> Didelphis marsupialis., Lutzomyia evansi, Leishmania infantum, Leishmaniasis visceral urbana. </p>  <hr>     <p><b>Abstract </b></p>      <p>In Colombia, Visceral Leishmaniasis (VL) is predominant in rural areas of the Caribbean and Magdalena River Valley regions. A one year old female inhabitant of an urban zone in the city of Cartagena displayed symptoms of hepato/splenomegaly, anemia, leucopenia and malnutrition. She had not visited endemic areas for VL but tested positive for VL serologically. After treatment with Glucantime<sup>&reg;</sup>, her symptoms disappeared; however, three months later, her Montenegro test came out positive. To identify the presence of VL vectors and reservoirs, and also environmental conditions suitable for VL transmission in the area of the reported VL case. There were carried out epidemiological, clinical, immunological and molecular studies to look for other people infected with VL. Also it was searched for VL reservoirs and vectors in the area. The study area presented environmental conditions suitable for VL transmission. No infected children were found, but seven adults had positive Montenegro tests, suggesting exposure to the parasite in this area. Additionally, the VL vector species <i>Lu. evansi </i>was found inside some of these people&rsquo;s homes. Finally, a domestic dog and a <i>D. marsupialis </i>individual were also found to be infected with <i>Leishmania infantum, </i>confirmed by laboratory. It was demonstrated the presence of a new urban VL scenario in Colombia, which should be object of public health surveillance and acts in the studied area. </p>      <p><b><i>Key words: </i></b>Didelphis marsupialis., Lutzomyia evansi, Leishmania infantum, urban visceral Leishmaniasis. </p>  <hr>     <p><font size="3"><b>1. Introducci&oacute;n </b></font></p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p>La leishmaniasis visceral (LV) es una antropozoonosis que contin&uacute;a siendo un importante problema de salud p&uacute;blica en Colombia. Los dos focos de transmisi&oacute;n, principalmente rural y periurbana, hist&oacute;ricamente reconocidos, est&aacute;n ubicados en el norte del pa&iacute;s (departamentos de Sucre, C&oacute;rdoba y Bol&iacute;var) y en el valle medio del r&iacute;o Magdalena (departamentos de Cundinamarca, Tolima y Huila) &#91;1&#93;. El agente etiol&oacute;gico responsable de la enfermedad en las &aacute;reas end&eacute;micas es <i>Leishmania infantum</i>. Los vectores incriminados en la transmisi&oacute;n son <i>Lutzomyia longipalpis </i>y <i>L. evansi </i>&#91;2&#93; y los principales reservorios identificados son el <i>Canis </i>familiaris y el <i>Didelphis marsupialis </i>&#91;3-6&#93;. Los s&iacute;ntomas frecuentes son fiebre, anemia, hepatoesplenomegalia y p&eacute;rdida progresiva de peso, y la mortalidad de los casos no tratados o tratados tard&iacute;amente suele ser elevada &#91;7&#93;. </p>      <p>El caso confirmado que motiv&oacute; este estudio se present&oacute; en un paciente femenino de un a&ntilde;o de edad, residente del barrio Lo Amador, de Cartagena, sin desplazamientos a &aacute;reas de riesgo, que consult&oacute; a "La Casa del Ni&ntilde;o Hospital Infantil Napole&oacute;n Franco Pareja", de Cartagena, por presentar fiebre intermitente de 38-39 &deg;C de m&aacute;s de un mes de evoluci&oacute;n, acompa&ntilde;ada de v&oacute;mito frecuente, edema de los miembros y abdomen abultado. Al examen f&iacute;sico present&oacute; palidez mucocut&aacute;nea, hepatomegalia y esplenomegalia de 4 cm por debajo del reborde costal y desnutrici&oacute;n ( <a href="#f1">figura 1</a>). Se diagnostic&oacute;: 1) S&iacute;ndrome febril en estudio, 2) S&iacute;ndrome linfoproliferativo, 3) S&iacute;ndrome an&eacute;mico, 4) Leishmaniasis visceral. En los ex&aacute;menes de laboratorio se encontr&oacute;: leucocitos: 2300 x mm<Sup>3</Sup>, hemoglobina: 6,3 g&#37;, hematocrito: 13,3&#37;, plaquetopenia e hipoalbuminemia ( <a href="#f1">figura 1</a>). </p>      <p align="center"><a name="f1"></a><img src="img/revistas/cide/v7n1/v17n1a11f1.jpg"></p>      <p>La prueba Kalazar Detect<Sup>TM </Sup>Human Rapid Test fue positiva. Se confirm&oacute; en el Laboratorio de Parasitolog&iacute;a del Instituto Nacional de Salud (INS), por anticuerpos IgG para LV por IFI (t&iacute;tulo 1:32). Se trat&oacute; con Glucantime<sup>&reg;</sup> a dosis de 20 mg/kg de peso durante 28 d&iacute;as, con mejor&iacute;a de su cuadro cl&iacute;nico. La ni&ntilde;a present&oacute; adem&aacute;s dos &uacute;lceras extensas, irregulares, de fondo necr&oacute;tico, en la frente y en el perin&eacute;, que los m&eacute;dicos tratantes interpretaron cl&iacute;nicamente como leishmaniasis cut&aacute;nea, sin confirmaci&oacute;n por laboratorio, debido a que la muestra fue inadecuada para el estudio histopatol&oacute;gico y tampoco se le realiz&oacute; diagn&oacute;stico molecular. A los tres meses de terminar el tratamiento se le practic&oacute; prueba de intradermorreacci&oacute;n de Montenegro (IDRM), la cual fue Reactiva. </p>      <p>El presente estudio tuvo como fin identificar la presencia de fleb&oacute;tomos, reservorios y condiciones ecol&oacute;gicas favorables para la transmisi&oacute;n de LV en el &aacute;rea urbana (barrio Lo Amador) de Cartagena. </p>      <p><font size="3"><b>2. Metodolog&iacute;a </b></font></p>      <p><b>2.1. 	Encuesta en la comunidad </b></p>      <p>Se dise&ntilde;&oacute; una encuesta enfocada a identificar la conformaci&oacute;n de las familias, n&uacute;mero de personas, edad, ocupaci&oacute;n y tiempo de residencia en el barrio; las caracter&iacute;sticas ecol&oacute;gicas del entorno y las condiciones habitacionales, para lo cual se recolect&oacute; la informaci&oacute;n sobre los materiales de las viviendas y la disposici&oacute;n de excretas y basuras; los conocimientos sobre la enfermedad, el vector, la forma de transmisi&oacute;n, las medidas de protecci&oacute;n utilizadas para prevenir picaduras de insectos y la tenencia de animales dom&eacute;sticos. Se aplicaron 45 encuestas. Las personas encuestadas fueron adultos cuidadores de los ni&ntilde;os, madre, padre o responsable del hogar. El tiempo de aplicaci&oacute;n de la encuesta fue de 20 minutos por vivienda. </p>      <p><b>2.2.	B&uacute;squeda Activa Comunitaria (BAC) e Institucional (BAI) de casos </b></p>      <p>Se realiz&oacute; b&uacute;squeda de casos en la comunidad, seleccionando ni&ntilde;os, con preferencia menores de cinco a&ntilde;os de edad, que presentaran s&iacute;ntomas compatibles con la enfermedad (desnutrici&oacute;n, hepatoesplenomegalia, infecciones a repetici&oacute;n, fiebre prolongada en los &uacute;ltimos tres meses). Para cada ni&ntilde;o se diligenci&oacute; una ficha cl&iacute;nica con la informaci&oacute;n sobre nombre, edad y sintomatolog&iacute;a presentada. Se les tom&oacute; muestra de sangre, que se proces&oacute; para cuantificar la presencia de anticuerpos IgG contra <i>Leishmania infantum</i>, mediante IFI. Se practic&oacute; simult&aacute;neamente la prueba Kalazar Detect<Sup>TM </Sup>Human Rapid Test &#91;8&#93;. </p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p>La b&uacute;squeda activa institucional se realiz&oacute; en "La Casa del Ni&ntilde;o Hospital Infantil Napole&oacute;n Franco Pareja", que atiende la mayor parte de la poblaci&oacute;n infantil del Distrito de Cartagena y del departamento. Se realiz&oacute; b&uacute;squeda sistematizada de las historias cl&iacute;nicas de los ni&ntilde;os atendidos durante los &uacute;ltimos seis meses, mediante los c&oacute;digos CIE 10, que tuvieran los diagn&oacute;sticos de: s&iacute;ndrome febril prolongado: R50,1, R50,9; s&iacute;ndrome an&eacute;mico: D63, D64; hepatoesplenomegalia en estudio: R16,0, R16,1, R16,2, y s&iacute;ndromes linfoproliferativos: 10 R59,0, R59,9, C96,0, C95,0, C95,9 y C96, sin evidencia de diagn&oacute;stico concluyente. Los pacientes resultantes de la b&uacute;squeda fueron captados para diagn&oacute;stico de LV mediante detecci&oacute;n de anticuerpos IgG por IFI. </p>      <p><b>2.3. Estudio de caninos con infecci&oacute;n por <i>Leishmania </i>sp. </b></p>      <p>Se inform&oacute; a la comunidad sobre la necesidad de examinar los caninos del barrio y sobre las medidas de control que se implementar&iacute;an en caso de encontrarse infectados (sacrificio humanitario), as&iacute; mismo, se hizo &eacute;nfasis en la tenencia responsable de mascotas y en la conveniencia de no tenerlas deambulantes (sin due&ntilde;o). Se tramit&oacute; consentimiento informado de los due&ntilde;os de los caninos que autorizaron el procedimiento. Se tomaron muestras de sangre de los 13 ejemplares caninos existentes en el barrio de estudio, que se procesaron para la detecci&oacute;n de anticuerpos IgG por IFI contra <i>Leishmania infantum </i>y Kalazar Detect<Sup>TM </Sup>Canine Rapid Test &#91;9&#93;. </p>      <p><b>2.4.	B&uacute;squeda de otros reservorios </b></p>      <p>Para la captura de peque&ntilde;os reservorios se sigui&oacute; la metodolog&iacute;a estandarizada &#91;10&#93;; el muestreo se realiz&oacute; con un esfuerzo de captura, utilizando 15 trampas Tomahawk y 18 trampas Sherman para roedores. El dise&ntilde;o del muestreo correspondi&oacute; a un juego de seis trampas Sherman ubicadas a 5 m de las viviendas y, luego, un juego de tres trampas Tomahawk a 10 m del grupo de trapas Sherman. </p>      <p>Las trampas se ubicaron tomando como referencia la residencia del caso &iacute;ndice (N10 25,194; W75 31,768; a 14 m), iniciando el esfuerzo a 80 m del punto de referencia, que es el lugar donde comienza el bosque del Cerro de la Popa, y terminando en la parte m&aacute;s alta del cerro, hasta donde fue posible acceder (N10 25,216; W75 31,650; a 60 m); metodolog&iacute;a que se aplic&oacute; durante dos noches. </p>      <p>A los reservorios capturados se les tom&oacute; muestras de sangre para cultivos en medio de NNN modificado y de tejidos (h&iacute;gado, bazo y ganglio linf&aacute;tico), para an&aacute;lisis molecular. Para la PCR se eligieron los primeros Jvn11 (CCCACTATATTACACCAACCCCTA) y Jw12 (GGGTAGGGGCGTTCTGCGAAA) (el primer Jvn11 fue obtenido por modificaci&oacute;n del primer Jw11 reportado previamente &#91;11&#93;, para hacer m&aacute;s espec&iacute;fica la detecci&oacute;n de especies del g&eacute;nero <i>Leishmania </i>spp. del Nuevo Mundo, tanto el subg&eacute;nero <i>Viannia </i>como el subg&eacute;nero <i>Leishmania), </i>produciendo una banda aproximada de 120 pb en ambos casos. Un microlitro (&mu;L) del ADN extraido en cada ensayo se amplific&oacute; en una mezcla de reacci&oacute;n que conten&iacute;a 2 mM de MgCl2, 200 &mu;M de dNTP, 0,55 &mu;de cada primer 1x de Taq Buffer y 1 &mu;L de Taq polimerasa en un volumen final de 25 &mu;L. Para el control positivo se utiliz&oacute; ADN de par&aacute;sitos de referencia UA140, como control negativo de la reacci&oacute;n se utiliz&oacute; agua en reemplazo del ADN. La amplificaci&oacute;n se hizo en un termociclador MJ Research<Sup>&copy; </Sup>con el siguiente perfil t&eacute;rmico: predesnaturalizaci&oacute;n de 94 &deg;C por 4 minutos, 30 ciclos: desnaturalizaci&oacute;n a90 &deg;C por 1 minuto, alineamiento de 55 &deg;Cyextensi&oacute;n de 72 &deg;C por 30 minutos, seguidos de una extensi&oacute;n final de 72 &deg;C durante 7 minutos. </p>      <p>El producto se visualiz&oacute; por electroforesis en matriz de gel de agarosa (1.5&#37;) te&ntilde;ida con bromuro de etidio (0,5 &mu;g/mL), utilizando controles positivos (<i>Leishmania infantum </i>y <i>L. panamensis</i>) y controles negativos (agua destilada y <i>Trypanosoma cruzi</i>). </p>      <p>Se remitieron muestras de tejido al laboratorio de Pesquisa em Leishmaniose Funda&ccedil;&atilde;o Oswaldo Cruz del Instituto Oswaldo Cruz en Brasil, para la confirmaci&oacute;n del diagn&oacute;stico molecular. La PCR fue realizada para una regi&oacute;n de 234 pb del Gen HSP70, seguido de RFLP con enzimas de restricci&oacute;n &#91;12&#93;. </p>      <p><b>2.5. Estudio entomol&oacute;gico </b></p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Los muestreos entomol&oacute;gicos se realizaron durante tres noches consecutivas, empleando trampas de luz CDC miniatura (seis con luz incandescente y una con luz ultravioleta); las trampas se dejaron instaladas de las 18:00 a las 6:00 horas. Se muestrearon 10 viviendas del barrio Lo Amador; en cada vivienda se hicieron muestreos en el intra y peridomicilio. Los fleb&oacute;tomos recolectados se preservaron en alcohol al 70&#37;, se aclararon con hidr&oacute;xido de potasio al 10&#37; y fenol l&iacute;quido; a las hembras se les aplic&oacute; la t&eacute;cnica de disecci&oacute;n de genitales descrita por Marcondes &#91;13&#93; y se utiliz&oacute; la clave de Young y Duncan para su tipificaci&oacute;n &#91;14&#93;. </p>      <p><b>2.6. Consideraciones &eacute;ticas </b></p>      <p>Seg&uacute;n las normas &eacute;ticas de la Declaraci&oacute;n de Helsinki y la Resoluci&oacute;n 8430 de 1993 del Ministerio de Salud y Protecci&oacute;n Social de Colombia, y cumpliendo con los lineamientos establecidos a nivel &eacute;tico del Instituto Nacional de Salud para la investigaci&oacute;n de brotes, se present&oacute; riesgo m&iacute;nimo para los seres humanos. Para la toma de muestras en ni&ntilde;os se inform&oacute; a los pacientes y a sus madres o tutores sobre el procedimiento por seguir y la interpretaci&oacute;n de los resultados. Se dispuso de consentimientos informados de los padres o tutores. Los resultados se comunicaron de forma individual. Se tuvo especial cuidado en garantizar la confidencialidad de todos los datos. </p>      <p>Para las muestras de caninos se inform&oacute; a los propietarios sobre el proceso de la toma de muestra y la interpretaci&oacute;n de los resultados, incluyendo la informaci&oacute;n sobre la pertinencia del sacrificio humanitario del animal en caso de confirmaci&oacute;n de LV; se firmaron consentimientos. De igual forma, todos los procedimientos realizados en mam&iacute;feros dom&eacute;sticos y sinantr&oacute;picos se aprobaron por el comit&eacute; de &eacute;tica para experimentaci&oacute;n animal de la Universidad de Antioquia en el acta no. 42 del 12 de mayo del 2008. </p>      <p><font size="3"><b>3. Resultados </b></font></p>      <p><b>3.1. Encuesta en la comunidad </b></p>      <p>El an&aacute;lisis descriptivo mostr&oacute; que el promedio de personas que habitaban cada vivienda fue de 6,4, con un m&iacute;nimo de dos y un m&aacute;ximo de once. Las familias estaban conformadas por varios n&uacute;cleos (familias extensas) que habitaban en un espacio reducido y con deficientes condiciones de salubridad. </p>      <p>Los encuestados fueron 81,4&#37; mujeres y 18,6&#37; hombres, con edad promedio de 39,1 a&ntilde;os (17-76 a&ntilde;os). El tiempo promedio de residencia de las familias en el barrio fue de 24 a&ntilde;os, con un m&iacute;nimo de un a&ntilde;o y un m&aacute;ximo de 55. En cuanto a la ocupaci&oacute;n de los individuos cabeza de familia, 60,5&#37; fueron amas de casa; comerciantes, un 9,3&#37;, y auxiliares de enfermer&iacute;a, un 4,7&#37;. Otras ocupaciones fueron: modista, empleada dom&eacute;stica, electricista, reciclador y alba&ntilde;il. </p>      <p>Las viviendas estaban rodeadas de bosque seco primario; en la parte trasera tenian un patio que limitaba con la zona de bosque del cerro, con libre acceso para la entrada de insectos y animales silvestres (<a href="#f2">figura 2</a>). Los dem&aacute;s resultados se describen en la <a href="#t1">tabla 1</a>. </p>      <p align="center"><a name="f2"></a><img src="img/revistas/cide/v7n1/v17n1a11f2.jpg"></p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><a name="t1"></a><img src="img/revistas/cide/v7n1/v17n1a11t1.jpg"></p>      <p><b>3.2. B&uacute;squeda activa activa comunitaria e institucional de casos </b></p>      <p>Las 62 muestras de suero de ni&ntilde;os con s&iacute;ntomas compatibles de la enfermedad, procesadas con pruebas Kalazar Detect<Sup>TM </Sup>Human Rapid Test &#91;8&#93; e IFI para la detecci&oacute;n de anticuerpos IgG contra <i>Leishmania infantum, </i>fueron negativas para LV activa en 100&#37; (62/62 todas dieron resultado negativo). </p>      <p>Se obtuvieron t&iacute;tulos bajos (1:8 y 1:16) e IDRM Reactiva en dos ni&ntilde;as familiares entre s&iacute; y convivientes en una de las viviendas ubicada en la parte alta del cerro, que se interpretaron como contacto previo con el par&aacute;sito sin desarrollar enfermedad. Adicionalmente, se aplicaron IDRM a tres adultos y dos menores de esa misma vivienda, todas con resultados Reactivos. En esta casa se detect&oacute; L<i>u </i>evans<i>i </i>dentro del domicilio. </p>      <p>El promedio de edad de los ni&ntilde;os fue de 3,9 a&ntilde;os, con un rango entre cinco meses y 13 a&ntilde;os. El 82,6&#37; fueron menores de cinco a&ntilde;os. El 52,2&#37; fueron ni&ntilde;as y el 47,8&#37;, ni&ntilde;os. Los sintomas se describen en la <a href="#t2">tabla 2</a>. </p>      <p align="center"><a name="t2"></a><img src="img/revistas/cide/v7n1/v17n1a11t2.jpg"></p>      <p>En la BAI se obtuvieron 22 muestras de pacientes que ten&iacute;an historia cl&iacute;nica que cumpl&iacute;a con los criterios definidos; los resultados de IFI para LV procesados en el Laboratorio de Parasitolog&iacute;a del INS fueron Negativos en un 100&#37; de los ni&ntilde;os. No se procesaron cultivos en medio NNN modificado debido a que todas las serolog&iacute;as no fueron reactivas. </p>      <p><b>3.3. Estudio de reservorios caninos </b></p>      <p>De las 13 muestras de ejemplares caninos procesadas por prueba Kalazar Detect<Sup>TM </Sup>Canine Rapid Test e IFI, una result&oacute; positiva por ambos m&eacute;todos (IFI 1:32), confirm&aacute;ndose como reservorio; solo este canino (1/13) present&oacute; enflaquecimiento y u&ntilde;as alargadas, s&iacute;ntomas compatibles con la enfermedad; las dem&aacute;s pruebas fueron negativas. La seroprevalencia fue de 7.69&#37;, y la concordancia de las pruebas, del 100&#37;. Tres caninos dieron t&iacute;tulos de 1:16 por IFI (asintom&aacute;ticos), lo cual sugiere contacto con el par&aacute;sito &#91;15, 16&#93;. El canino confirmado fue eliminado de forma humanitaria por el grupo de zoonosis del distrito de Cartagena y un funcionario de la Sociedad Protectora de Animales, conforme al Protocolo de Vigilancia en Salud P&uacute;blica vigente. </p>      <p><b>3.4. B&uacute;squeda de otros reservorios </b></p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Se captur&oacute; en una trampa Tomahawk un macho <i>Didelphis marsupialis </i>(fara o zarig&uuml;eya), en el punto N10 25,233; W75 31,644; 65m. En medio NNN modificado se sembraron las muestras obtenidas a partir de tejidos, las cuales fueron negativas despu&eacute;s de cinco semanas de incubaci&oacute;n a 24-26 &deg;C. En los fragmentos de bazo, h&iacute;gado y ganglios linf&aacute;ticos procesados, se demostr&oacute; ADN de <i>Leishmania sp.</i>;el producto amplificado correspondi&oacute;, seg&uacute;n el patr&oacute;n de peso molecular utilizado, a una banda de 120 pb, mediante la t&eacute;cnica de PCR con electroforesis en gel de agarosa (<a href="#f3">figura 3</a>). </p>      <p align="center"><a name="f3"></a><img src="img/revistas/cide/v7n1/v17n1a11f3.jpg"></p>      <p>La confirmaci&oacute;n se realiz&oacute; en el laboratorio de Pesquisa em Leishmaniose de la Funda&ccedil;&atilde;o Oswaldo y dio resultado negativo para dos muestras de tejido (h&iacute;gado y bazo) con el marcador utilizado HSP70, y una muestra de tejido (ganglio) positiva para <i>Leishmania infantum</i>. </p>      <p>Visualizaci&oacute;n de la electroforesis realizada en matriz de gel de agarosa al 1,5&#37; te&ntilde;ida con bromuro de etidio (0,5 microgramos/ml) (<a href="#f3">figura 3</a>). De izquierda a derecha: L&iacute;nea 1: se observa el marcador de peso molecular de 50 pares de bases, fermentans<sup>&reg;</sup>; L&iacute;neas 2 y 3: muestras de h&iacute;gado. L&iacute;neas 4 y 5: muestras de bazo. L&iacute;neas 6 y 7: muestras de ganglio. L&iacute;neas 8 y 9: muestras control positivo (Leishmania infantum y Leishmania. panamensis), L&iacute;neas 10 y 11: muestras controles negativos (agua destilada y Trypanosoma cruzi), la banda de amplificaci&oacute;n corresponde seg&uacute;n el patr&oacute;n utilizado a 120 pb. </p>      <p><b>3.5. Estudio entomol&oacute;gico </b></p>      <p>Se recolectaron 113 fleb&oacute;tomos pertenecientes a cuatro especies, entre estas <i>Lutzomyia evansi, </i>vector del agente causal de la enfermedad &#91;17&#93;. La especie m&aacute;s abundante fue <i>Lutzomyia trinidadensis, </i>78,76&#37; (89/113); seguida de <i>Lutzomyia evansi, </i>11,5&#37; (13/113); <i>Lutzomyia cayennensis, </i>6,2&#37; (7/113), y <i>Lutzomyia venezuelensis, </i>3,54&#37; (4/113). <i>L. evansi</i> fue recolectada en el dormitorio en una de las viviendas y en el peridomicilio de otras tres viviendas, <i>L. trinidadensis</i> y <i>L. cayennensis</i> fueron recolectadas tanto en el intra como en el peridomicilio y Lu <i>venezuelensis</i>, en el peridomicilio. En la zona se distribuyeron toldillos Netprotect<sup>&reg;</sup>, que son insecticidas de larga duraci&oacute;n en polietileno de alta densidad que contiene Deltametrina incorporada a la fibra distribuida de manera homog&eacute;nea, y tienen un Mesh de 136 y 200 huecos por pulgada cuadrada. Este producto es aprobado por la Organizaci&oacute;n Mundial de la Salud Pesticide Evaluation Scheme (WHOPES), act&uacute;a como una barrera f&iacute;sica y, adem&aacute;s, tiene propiedades que inhiben la picadura, repelen el paso de los fleb&oacute;tomos, protegiendo as&iacute; a las personas que duermen bajo el toldillo. En el barrio Lo Amador se distribuyeron en total 170 toldillos; se prioriz&oacute; la vivienda del caso &iacute;ndice y las viviendas aleda&ntilde;as en donde habitaran ni&ntilde;os menores de cinco a&ntilde;os. </p>      <p><font size="3"><b>4. Discusi&oacute;n </b></font></p>      <p>El &aacute;rea de estudio corresponde a una zona de pobreza, lugar de residencia &uacute;nica del caso confirmado, en donde se demostr&oacute; la presencia del vector y de reservorios silvestres y dom&eacute;sticos infectados, caracterizando as&iacute; el foco urbano de LV en Cartagena. </p>      <p>La paciente present&oacute; el cuadro cl&iacute;nico caracter&iacute;stico de LV, el cual fue confirmado por pruebas diagn&oacute;sticas de laboratorio (Kalazar Detect<Sup>TM </Sup>Human Rapid Test (positiva) e IFI (1:32); los padres de la menor no refirieron desplazamientos a &aacute;reas de riesgo, un hecho que establece el origen de la enfermedad en el foco urbano de estudio. La corta evoluci&oacute;n de la enfermedad en la ni&ntilde;a podr&iacute;a explicar los t&iacute;tulos bajos de anticuerpos anti-leishmania y la moderada visceromegalia. El frotis de m&eacute;dula &oacute;sea fue negativo para leishmaniasis; sin embargo, es importante tener en cuenta que la sensibilidad de este m&eacute;todo oscila entre 52 y 70&#37; &#91;18&#93;. La anemia y la leucopenia reportadas en el hemograma son datos de laboratorio que dan soporte a la configuraci&oacute;n del caso &#91;1&#93;. La buena respuesta al tratamiento es otra evidencia de la etiolog&iacute;a de la enfermedad, as&iacute; como la reactividad a la IDRM a los tres meses postratamiento. </p>      <p>La demostraci&oacute;n de ADN del par&aacute;sito en el h&iacute;gado y el bazo del &uacute;nico <i>Didelphis marsupialis </i>capturado, conocido y descrito como reservorio de leishmaniasis visceral en otras regiones de Colombia &#91;4, 5&#93;, confirma la presencia de reservorios cl&aacute;sicos para la transmisi&oacute;n de la LV, as&iacute; como el resultado obtenido en la seroprevalencia de LV en el principal reservorio dom&eacute;stico (caninos) del 7,69&#37;. </p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p>El hallazgo de <i>Lutzomyia evansi </i>dentro de las casas y en el peridomicilio del barrio es otra evidencia que confirma que el sitio de infecci&oacute;n de la menor fue su vivienda, debido a que <i>L. evansi </i>se ha incriminado como vector de LV en la costa caribe colombiana &#91;17&#93;, y en Venezuela tambi&eacute;n se considera vector alterno durante la estaci&oacute;n h&uacute;meda, cuando disminuyen las poblaciones de <i>L. longipalpis </i>&#91;20&#93;. Tambi&eacute;n se ha demostrado en M&eacute;xico, Guatemala, El Salvador, Honduras, Nicaragua y Costa Rica &#91;14, 20-21&#93;. Se encuentra en los troncos de arbustos, y la transmisi&oacute;n ocurre en el intra-y el peridomicilio, tanto urbano como rural, desde los 0 a los 300 m &#91;23&#93;. </p>      <p>Las viviendas limitan con zonas boscosas, secas y c&aacute;lidas; las caracter&iacute;sticas ecol&oacute;gicas y las condiciones de pobreza, sumadas a los cambios en los patrones epidemiol&oacute;gicos de transmisi&oacute;n, fueron algunos de los factores que contribuyeron a la urbanizaci&oacute;n del ciclo de transmisi&oacute;n de esta parasitosis. </p>      <p>La BAC, realizada solo en los ni&ntilde;os con sintomatolog&iacute;a compatible para la enfermedad, no confirm&oacute; la existencia de otros casos de LV, pero permiti&oacute; identificar t&iacute;tulos bajos de anticuerpos en dos ni&ntilde;as, lo cual sugiere contacto con el par&aacute;sito vs. infecci&oacute;n asintom&aacute;tica &#91;19&#93;. </p>      <p>Las ocho pruebas de Montenegro aplicadas a los miembros de la familia donde se encontr&oacute; <i>L. evansi </i>domiciliada fueron positivas; sin embargo, no se dispuso del reactivo para realizar el estudio poblacional que pudiera cuantificar la magnitud de la exposici&oacute;n a la enfermedad en el &aacute;rea, pero se propusieron las acciones de vigilancia y control regulares, por ser un foco activo y nuevo de la enfermedad. </p>      <p>Es importante mencionar los ejemplos de escenario de LV en expansi&oacute;n ocurridos en Brasil &#91;23&#93;, situaci&oacute;n agudizada por la existencia de confecci&oacute;n con VIH &#91;24&#93;, Paraguay (Asunci&oacute;n y Depto Central) y Argentina, una vez que se detect&oacute; el vector periurbano &#91;25&#93;. El Programa de Argentina comenz&oacute; con una alerta amarilla, cuando vigilancia entomol&oacute;gica detect&oacute; presencia del <i>Lu longipalpis en </i>territorio nacional en el a&ntilde;o 2004, lo cual dio lugar a una alerta naranja. La consiguiente vigilancia de casos registr&oacute; el primer caso humano aut&oacute;ctono en el a&ntilde;o 2006; a partir de ese momento el vector se dispers&oacute; a cuatro provincias (primer nivel subnacional) del noreste y a Uruguay, con casos en tres provincias (una del &aacute;rea central, debido posiblemente a <i>L. migonei</i>). En el a&ntilde;o 2013, los casos de LV humana aut&oacute;ctonos se notificaron en cuatro provincias, y se registr&oacute; <i>L. longipalpis</i> en el noroeste, pr&oacute;ximo a la frontera con Bolivia, y LV canina en todo el pa&iacute;s por migraci&oacute;n. Hasta el a&ntilde;o 2014 se registraron 114 casos humanos, con una letalidad del 10,5&#37; (0-15 a&ntilde;os: 8,3&#37;, &gt; 60 a&ntilde;os: 33,3&#37;) &#91;25&#93;. Por lo tanto, se hace necesario implementar una vigilancia regular y sostenida del evento que garantice su adecuado y oportuno control para evitar su expansi&oacute;n en el territorio estudiado y sus &aacute;reas lim&iacute;trofes. </p>      <p><font size="3"><b>5. Conclusiones </b></font></p>      <p>Teniendo en cuenta los cambios epidemiol&oacute;gicos recientes, se debe sospechar LV en pacientes que presenten signos cl&iacute;nicos caracter&iacute;sticos de la enfermedad, incluso en &aacute;reas no end&eacute;micas, con el fin de hacer un diagn&oacute;stico temprano y reducir el riesgo de complicaciones y de muerte. </p>      <p>Debido al constante asentamiento de poblaci&oacute;n en &aacute;reas perif&eacute;ricas, con condiciones sanitarias y de vida deficientes que aumentan el riesgo de infecci&oacute;n por el contacto con animales dom&eacute;sticos y silvestres infectados, se hace necesario implementar de forma regular la vigilancia epidemiol&oacute;gica, entomol&oacute;gica, por laboratorio y de reservorios en el distrito de Cartagena, ya que tiene las condiciones ecoepidemiol&oacute;gicas propicias para la urbanizaci&oacute;n de la enfermedad. </p>      <p>Las pruebas parasitol&oacute;gicas (examen directo y cultivo en medio NNN modificado) son muy poco sensibles para el diagn&oacute;stico en caninos; as&iacute;, las pruebas serol&oacute;gicas se constituyen en una herramienta esencial para detectar la condici&oacute;n de reservorios en estos, &uacute;tiles para cuantificar la seroprevalencia y para la implementaci&oacute;n &oacute;ptima y oportuna de las acciones de control. </p>      <p>Para determinar el impacto real de la infecci&oacute;n en las zonas end&eacute;micas es fundamental el empleo de pruebas diagn&oacute;sticas eficientes, eficaces, accesibles y con resultados oportunos. Conforme a los lineamientos nacionales actuales, una prueba serol&oacute;gica de Kalazar Detect<Sup>TM </Sup>Human Rapid Test en ni&ntilde;os con sintomatolog&iacute;a compatible para L. visceral est&aacute; considerada m&eacute;todo de diagn&oacute;stico confirmatorio; de este modo se sensibiliza la detecci&oacute;n, eliminando las barreras de acceso al diagn&oacute;stico oportuno, y se crea un primer paso para superar los inconvenientes de subregistro y subvaloraci&oacute;n de la incidencia y la prevalencia de la enfermedad. </p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font size="3"><b>Agradecimientos </b></font></p>      <p>A los funcionarios del Grupo de Enfermedades Transmitidas por Vectores y Zoonosis del Departamento Administrativo Distrital de Salud de Cartagena D. T. y C. (DADIS) y de la Secretar&iacute;a Departamental de Salud de Bol&iacute;var, por su apoyo y participaci&oacute;n en el trabajo de campo realizado. A la Dra. Yanira Andrea Romero Barbosa, por su participaci&oacute;n en el procesamiento de pruebas diagn&oacute;sticas en humanos y caninos. Este trabajo fue financiado por el Instituto Nacional de Salud (INS), Bogot&aacute;, Colombia, y el Departamento Administrativo Distrital de Salud de Cartagena D. T. y C. (DADIS). </p>      <p>Los autores declaramos no tener conflicto de inter&eacute;s. </p>  <hr>     <p><font size="3"><b>Referencias </b></font></p>      <!-- ref --><p>&#91;1&#93; Protocolo de Vigilancia en Salud P&uacute;blica Leishmaniasis. Minsalud-Instituto Nacional de Salud, Bogot&aacute;, 2014.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5909979&pid=S0121-7488201600010001100001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;2&#93; C. Gonz&aacute;lez, O. Cabrera, L.E. Munstermann, and C. Ferro, "Distribuci&oacute;n de los vectores de <i>Leishmania infantum </i>(Kinetoplastida: Tripasonomatidae) en Colombia", <i>Biom&eacute;dica</i>, vol. 26 (Supl 1), pp. 64-72, octubre, 2006.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5909981&pid=S0121-7488201600010001100002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;3&#93; A. Corredor, J. F. Gallego, R. B. Tesh, A. Morales, C. Ferro, D. Young <i>et al.</i>, "Epidemiology of visceral leishmaniasis in Colombia", <i>Am J Trop Med Hyg</i>, vol. 40, no. 5, pp. 480-6, mayo, 1989.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5909983&pid=S0121-7488201600010001100003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p>&#91;4&#93; A. Corredor, J. F. Gallego, R. B. Tesh, D. Pel&aacute;ez, A. D&iacute;az, M. Montilla, and M.T. Palau, "<i>Didelphis marsupialis</i>, an apparent wild reservoir of <i>Leishmania donovani chagasi </i>in Colombia, South America", <i>Trans Roy Soc Trop Med Hyg</i>, vol. 83, no. 2, pp. 195, marzo-abril, 1989.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5909985&pid=S0121-7488201600010001100004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;5&#93; B. Travi, C. Jaramillo, J. Montoya, Y. Segura, A. Zea, A. Goncalves, and I.D. V&eacute;lez, "<i>Didelphis marsupialis</i>, an important reservoir of <i>Trypanosoma (Schizotrypanum) cruzi </i>and <i>Leishmania (Leishmania) chagasi </i>in Colombia", <i>Am J Trop Med Hyg</i>, vol. 50, no. 5, pp. 557-65, mayo, 1994.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5909987&pid=S0121-7488201600010001100005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;6&#93; B. L. Travi, Y. Osorio, M. T. Becerral, and G.H. Adler, "Dynamics of <i>Leishmania chagasi </i>infection in small mammals of the undisturbed and degraded tropical dry forests of northern Colombia", <i>Trans. Roy. Soc. Trop. Med. Hyg.</i>, vol. 92, no. 3, pp. 275-8, May-June, 1998.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5909989&pid=S0121-7488201600010001100006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;7&#93; C. Oddone, "Leishmaniosis visceral: a 101 a&ntilde;os del primer caso diagnosticado en las Am&eacute;ricas" <i>Mem. Inst. Investig, Cienc. Salud</i>, vol. 10, no. 1, pp. 102-104, junio 2012.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5909991&pid=S0121-7488201600010001100007&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;8&#93; E. Gadisa, E. Custodio, C. Canavate, L. Sordo, Z. Abebe <i>et al.</i>, "Usefulness of the rK39immunochromatographic test, direct agglutination test, and leishmanin skin test for detecting asymptomatic <i>Leishmania </i>infection in children in a new visceral leishmaniasis focus in Amhara State, Ethiopia", <i>Am. J. Trop. Med. Hy.g </i>vol 86, no. 5, pp. 792-798, May, 2012.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5909993&pid=S0121-7488201600010001100008&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p>&#91;9&#93; R. J. Quinnell, C. Carson, R. Reithinger, L. M. Garcez, and O. Courtenay, "Evaluation of rk39 rapid diagnostic test for canine visceral leishmaniasis. Longitudinal study and metaanalysis", <i>PLoS. Negl. Trop. Dis.</i>, Vol. 7, no. 1, pp. e1992, January, 2013.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5909995&pid=S0121-7488201600010001100009&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;10&#93; A. L. Roque, S. C. Xavier, M. G. da Rocha, A. C. Duarte, P. S. D'Andrea, and A. M. Jansen, "<i>Trypanosoma cruzi </i>transmission cycle among wild and domestic mammals in three areas of orally transmitted Chagas disease outbreaks", <i>Am. J. Trop. Med. Hyg.</i>, vol. 79, no. 5, pp. 742-749, November, 2008.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5909997&pid=S0121-7488201600010001100010&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;11&#93; L. Nicolas, S. Sidjanski, J. H. Colle, and G. Milon, "<i>Leishmania major </i>reaches distant cutaneous sites where it persists transiently while persisting durably in the primary dermal site and its draining lymph node: a study in laboratory mice", <i>Infect. Immun.</i>, vol. 68, no. 12, pp. 6561-6, December, 2000.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5909999&pid=S0121-7488201600010001100011&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;12&#93; G. C. da Gra&ccedil;a, A. C. VolpiniI, G. A. Sierra, M. P. de Oliveira, M. H. Renato, M. C&ocirc;rtes, and E. Cupolillo, "Development and validation of PCR-based assays for diagnosis of American cutaneous leishmaniasis and identification of the parasite species", <i>Mem. Inst. Oswaldo Cruz</i>, vol. 107, no. 5, pp. 664-674, August, 2012.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910001&pid=S0121-7488201600010001100012&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;13&#93;	C. B. Marcondes, "An improved technique for the disection of female genitalia of phlebotomine sandflies (Diptera Psychodidae) with an improvement in the handing of insects", <i>Mem. Inst. O. Cruz</i>, vol. 93, no. 1, pp. 109, January-February, 1998.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910003&pid=S0121-7488201600010001100013&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p>&#91;14&#93; D. Young, and M. Duncan, "Guide to the identification and geographic distribution of <i>Lutzomyia </i>sand flies in Mexico, the West Indies, Central and South America (Diptera; Psychodidae)", <i>Mem. Amer. Ent. Inst.</i>, vol. 54, pp. 1-881. 1994.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910005&pid=S0121-7488201600010001100014&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;15&#93; M. Romero, M. C. L&oacute;pez, M. C. Echeverry, and F. Rivas, "Leishmaniasis Visceral Canina: Pruebas diagn&oacute;sticas no identifican Estados Reales de la Infecci&oacute;n", <i>Rev. Salud p&uacute;blica</i>, vol. 10, no. 2, pp. 290-98, marzo-mayo, 2008.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910007&pid=S0121-7488201600010001100015&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;16&#93; J. Fern&aacute;ndez, F. Bello, M. C. L&oacute;pez, L. I. Moncada, J. J. Vargas, M. S. Ayala, R. S. Nicholls, and C. A. Lozano, "Seroprevalencia de leishmaniasis visceral canina en el sector 8 de Neiva y 4 municipios de Huila, Colombia", <i>Biomedica</i>, vol. 26, no. 1, pp. 121-30, octubre, 2006.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910009&pid=S0121-7488201600010001100016&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;17&#93; B. L. Travi, I. D. V&eacute;lez, L. Brutus, I. Segura, C. Jaramillo, and J. Montoya, "<i>Lutzomyia evansi</i>, an alternate vector of <i>Leishmania chagasi </i>in a Colombian focus of visceral leishmaniasis", <i>Trans. R Soc. Trop. Med. Hygiene.</i>, vol. 84, no. 5, pp. 676-7, September, 1990.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910011&pid=S0121-7488201600010001100017&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;18&#93; M. G&aacute;llego, C. Riera, "Las leishmaniosis humanas: Leishmaniosis aut&oacute;ctona por <i>Leishmania infantum</i>", Unitat de Parasitologia, Departament de Microbiolog&iacute;a y Parasitolog&iacute;a Sanit&agrave;ries, Facultat de Farm&agrave;cia, Universitat de Barcelona, Control Calidad SEIMC, Barcelona, 2000.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910013&pid=S0121-7488201600010001100018&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p>&#91;19&#93; N. A&ntilde;ez, A. Rojas, E. Vargas-D&iacute;az, V. Medina, G. Crisante, J. Y. Y&eacute;pez, "Estudio epidemiol&oacute;gico sobre leishmaniasis visceral en la regi&oacute;n semi&aacute;rida del occidente de Venezuela con especial referencia a la detecci&oacute;n de infecciones inaparentes", <i>Bol. Mal. Salud Amb</i>., vol. 52. no. 2, pp. 245-256. Diciembre, 2012.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910015&pid=S0121-7488201600010001100019&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;20&#93; J. Montoya-Lerma, C. Ferro. "Fleb&oacute;tomos (Diptera: Psychodidae) de Colombia" <i>Insectos de Colombia</i>", vol. II. Colecci&oacute;n Jorge &Aacute;lvarez Lleras, no. 13. Santa Fe de Bogot&aacute;: Academia Colombiana de Ciencias Exactas, F&iacute;sicas y Naturales-Centro Editorial Javeriano, pp. 21145, 1999.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910017&pid=S0121-7488201600010001100020&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;21&#93; D. G. Young, "A review of the bloodsucking psychodid flies of Colombia (Diptera: Phlebotominae and Sycoracinae)", <i>Technical Bulletin 806</i>. Gainesville: Institute of Food and Agricultural Sciences, University of Florida, pp. 266, 1979.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910019&pid=S0121-7488201600010001100021&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;22&#93; L. A. Cort&eacute;s, J. J. Fern&aacute;ndez, "Especies de <i>Lutzomyia </i>en un foco urbano de leishmaniasis visceral y cut&aacute;nea en El Carmen de Bol&iacute;var, Bol&iacute;var, Colombia", <i>Biom&eacute;dica</i>, vo. 28, no. 3, pp. 433-40, Septiembre, 2008.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910021&pid=S0121-7488201600010001100022&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;23&#93; P. Albuquerque, G. J. da Silva, C.C. Freire, S. Oliveira, D.M. Almeida, H.F. da Silva <i>et al.</i>, "Urbanization of visceral leishmaniasis (kalaazar) in Fortaleza, Cear&aacute;, Brazil", <i>Rev. Panam. Salud Publica/Pan. Am. J. Public. Health</i>, vol. 26, 330-3, 2009.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910023&pid=S0121-7488201600010001100023&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p>&#91;24&#93; J. Alvar, P. Aparicio, A. Aseffa, M. Den Boer, C. Ca&ntilde;avate, J. P. Dedet, L. Gradoni, R. Ter Horst, R. L&oacute;pez-V&eacute;lez, J. Moreno, "The Relationship between Leishmaniasis and AIDS: the Second 10 Years", <i>Clin. Microbiol. Rev.</i>, vol. 21, no. 2, pp. 334-359, April, 2008.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910025&pid=S0121-7488201600010001100024&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>      <!-- ref --><p>&#91;25&#93; Organizaci&oacute;n Mundial de La Salud (OMS), Organizaci&oacute;n Panamericana de la Salud (OPS), "Informe final segunda reuni&oacute;n de gerentes de programas de leishmaniasis de las Am&eacute;ricas", Oficina regional para las Am&eacute;ricas, Ciudad de Panam&aacute;, 8 al 10 de octubre de 2013.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=5910027&pid=S0121-7488201600010001100025&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> </p>  </font>      ]]></body><back>
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