Análisis de metilación en los promotores de los genes CDKN2B y DBC1 en pacientes con leucemia linfoide aguda, leucemia mieloide aguda y leucemia mieloide crónica

Laura M Medina-Gómez¹, Gonzalo Vásquez-Palacio¹, Carlos M Muñetón-Peña¹

1 Unidad de Genética Médica, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia. Medellín (Antioquia), Colombia.

Financiación: Programa de Sostenibilidad 2009-2010, CPT0905.

INTRODUCCIÓN

La hipermetilación del ADN, es equivalente a la inactivación de genes ocasionada por mutación. La consecuencia de la hipermetilación es un silenciamiento génico, que podría conducir a ventajas en la proliferación y favorecer el proceso de carcinogénesis. Los estudios realizados muestran altos porcentajes de metilación de CDKN2B en LLA y LMA. Igualmente se informa que la metilación de CDKN2B y DBC1 disminuyen la sobrevida de pacientes con LMA a largo plazo. Dado que la metilación es una modificación reversible, es importante identificar estas modificaciones, para suministrar a los pacientes a tratamientos efectivos con medicamentos demetilantes.

Objetivo. Determinar los patrones de metilación de los promotores de los genes DBC1 y CDKN2B en muestras de pacientes con LLA, LMA y LMC mediante PCR específica de metilación y secuenciamiento directo.

Metodología. Los ADN de pacientes y controles se convertirán con bisulfito de sodio y se amplificarán con MSP. Las muestras que amplifiquen con los primers para las regiones metiladas de cada gen, serán secuenciadas por el método de Sanger, para confirmar la metilación de los promotores de los genes CDKN2B y DBC1. El análisis de las secuencias se realizará con tres programas Contig Express, Vector NTI y AlignX.

Resultados preliminares. Hasta el momento se ha extraído el ADN de 22 muestras de LLA, 14 de LMA y 19 de LMC. De estas muestras se tienen 20 convertidas con bisulfito de sodio y amplificadas con MSP. Así, 7 LLA, 6 LMA y 7 LMC. 9/20 (45%) presentan metilación sólo en el promotor de DBC1 y 11/20 (55%) presentan metilación en los promotores de ambos genes.

Conclusión. la metilación en los promotores de los genes DBC1 y CDKN2B es un evento común en las leucemias estudiadas.