Genotipificación de Chlamydia trachomatis en población femenina proveniente del departamento de Antioquia, Colombia

Nataly Orozco-Hoyos¹, Gloria I Sánchez², Eliana Restrepo-Pineda¹

1 Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia. Medellín (Antioquia), Colombia.

2 Grupo Infección y Cáncer (GIC), Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia. Medellín (Antioquia), Colombia.

Financiación: CODI código 2501

La infección de transmisión sexual causada por Chlamydia trachomatis es la más frecuente de etiología bacteriana en el mundo, se estima una incidencia global de 54 millones de casos por año. La identificación de las serovariedades de C. trachomatis se puede realizar mediante PCR-RFLP o secuenciación del gen ompA, el cual codifica para la proteína mayor de membrana externa (MOMP). Filogenéticamente el análisis de ompA divide a C. trachomatis en tres serogrupos conformados por distintas serovariedades. El serogrupo B (serovariedades B/Ba, D/Da, E, L1, y L2/L2a), el serogrupo C (serovariedades A, C, H, I/Ia, J, K, y L3), y el serogrupo I (serovariedades F y G/Ga). El objetivo de este estudio es determinar la prevalencia de las serovariedades de C. trachomatis en la población femenina del departamento de Antioquia, Colombia, mediante el secuenciamiento del gen ompA. Actualmente, se cuenta con el DNA extraído de 753 muestras de cepillado endocervical. Inicialmente se estandarizó una PCR de detección con los cebadores CTpl1 y CTpl2 los cuales amplifican un fragmento de 495 pb de el plásmido críptico de C. trachomatis, posteriormente a las muestras positivas se les realizaría una PCR semianidada para amplificar un fragmento de 1070 pb de el gen ompA, el cual sería digerido con las enzimas de restricción AluI, HinfI, EcoRI, DdeI y CfoI. Los amplicones serían corridos en una electroforesis en gel de poliacrilamida. Luego de realizar la estandarización de la PCR de detección con las cepas de referencia, se inició el procesamiento de las muestras, donde se obtuvo un patrón de bandas inespecíficas que no fue posible eliminar con diferentes modificaciones. Por lo tanto fue necesario un nuevo diseño de cebadores que amplifican un fragmento de 1094 pb del gen ompA. Los productos de PCR serán revelados en un gel de agarosa al 1,5% y posteriormente serán purificados y secuenciados.