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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[TÉCNICAS Y PROCESAMIENTO PARA LA RECOLECCIÓN, PRESERVACIÓN Y MONTAJE DE MARIPOSAS EN ESTUDIOS DE BIODIVERSIDAD Y CONSERVACIÓN. (LEPIDOPTERA: HESPEROIDEA - PAPILIONOIDEA)]]></article-title>
<article-title xml:lang="en"><![CDATA[PROCESSING TECHNIQUES FOR THE COLLECTION, PRESERVATION AND MOUNTING BUTTERFLIES IN BIODIVERSITY AND CONSERVATION STUDIES(LEPIDOPTERA: HESPERIOIDEA - PAPILIONOIDEA)]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[We present the techniques currently existing for biodiversity studies and conservation of butterflies, explain how you should collect and preserve, which kind of traps can be used, sampling methodologies, what you can see, what technique is used to study of genital organs and wing venation, likewise as the procedure for extending their wings, in what types of furniture and boxes should be stored in a collection of butterflies biological, labels redquired once included in a collection, and the color of the labels that identify the types and the method and how to take pictures properly preserved specimens.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[  <font face="verdana" size="2">&nbsp;     <p align="right"><font size="3"><b>CIENCIAS </b><b>NATURALES</b></font></p> &nbsp;     <p><font size="4">    <center> <b>T&Eacute;CNICAS </b><b>Y PROCESAMIENTO   PARA LA RECOLECCI&Oacute;N, PRESERVACI&Oacute;N Y MONTAJE DE MARIPOSAS EN ESTUDIOS DE BIODIVERSIDAD Y CONSERVACI&Oacute;N. (LEPIDOPTERA:   HESPEROIDEA - PAPILIONOIDEA)</b> </center></font></p> &nbsp;     <p><font size="3">    <center> <b>PROCESSING TECHNIQUES FOR THE COLLECTION, PRESERVATION AND   MOUNTING BUTTERFLIES IN BIODIVERSITY AND CONSERVATION STUDIES(LEPIDOPTERA: HESPERIOIDEA - PAPILIONOIDEA)</b> </center></font></p> &nbsp;     <p>    <center> <b>M. Gonzalo Andrade-C.</b><b>*</b><b>, Efra&iacute;n Reinel Henao Ba&ntilde;ol</b><b>**</b><b>, Paola Trivi&ntilde;o </b><b>***</b> </center></p>     <p>* Profesor   Asociado, Instituto de Ciencias Naturales, Universidad Nacional de Colombia,   Email: <a href="mailto:mgandradec@unal.edu.co">mgandradec@unal.edu.co</a> Twitter: <a href="mailto:@gonzaloandradec">@gonzaloandradec</a>    <br> ** M.Sc.,   candidato a Doctor en Ciencias - Biolog&iacute;a, Instituto de Ciencias Naturales,   Universidad Nacional de Colombia. Email: <a href="mailto:erhenaob@unal.edu.co">erhenaob@unal.edu.co</a>    ]]></body>
<body><![CDATA[<br> *** Bi&oacute;loga, estudiante M.Sc. en ciencias - Biolog&iacute;a, Instituto de Ciencias Naturales, Universidad Nacional de Colombia. Email: <a href="mailto:paola.trivino.cruz@gmail.com">paola.trivino.cruz@gmail.com</a></p> <hr size="1">     <p><b>RESUMEN</b></p>     <p>Se presenta las t&eacute;cnicas que existen actualmente para los estudios de biodiversidad y conservaci&oacute;n   de mariposas, se explica como se   deben recolectar y preservar, qu&eacute; tipo de trampas se pueden utilizar,   metodolog&iacute;as de muestreo, c&oacute;mo se pueden observar, qu&eacute; t&eacute;cnica se utiliza para el estudio de los &oacute;rganos genitales y la venaci&oacute;n de las alas; as&iacute; mismo c&oacute;mo es el procedimiento para el extendido de sus alas. Se indican los tipos de muebles y cajas en que se deben guardar las   mariposas en una colecci&oacute;n biol&oacute;gica, las etiquetas que deben llevar una vez   son incluidas en una colecci&oacute;n, as&iacute; como el color de las etiquetas que identifican los tipos y se finaliza indicando   el m&eacute;todo y la forma de hacer fotograf&iacute;as de ejemplares debidamente   preservados.</p>     <p><b>Palabras clave</b>: Colombia, Mariposas, Biodiversidad,   Conservaci&oacute;n, Recolecci&oacute;n Preservaci&oacute;n, Montaje.</p> <hr size="1">     <p><b>ABSTRACT</b></p>     <p>We present the techniques currently existing for biodiversity studies and conservation of butterflies, explain how you should collect and   preserve, which kind of traps can be used, sampling methodologies, what you can   see, what technique is used to study of genital organs and wing venation,   likewise as the procedure for extending their wings, in what types of furniture and boxes should be stored in a collection of butterflies biological, labels redquired once included in a collection, and the color of the labels that identify the types and the method and how to take pictures properly   preserved specimens.</p>     <p><b>Key words</b>: Colombia, Butterflies, Biodiversity, Conservation, Recollection,   Preservation, Assembly.</p> <hr size="1"> &nbsp;       <p><font size="3"><b>Introducci&oacute;n</b></font></p>     <p>Una colecci&oacute;n biol&oacute;gica es &uacute;til por que sirve para sustentar la biodiversidad del pa&iacute;s, nos permite documentar la distribuci&oacute;n de las   especies y son la base fundamental para la clasificaci&oacute;n, sistem&aacute;tica y biogeograf&iacute;a,   disciplinas que son esenciales para la conservaci&oacute;n. As&iacute; mismo las colecciones nos ayudan a identificar   especies amenazadas, &aacute;reas de endemismos o de alta biodiversidad y establecer prioridades de conservaci&oacute;n, en otras palabras son una biblioteca biol&oacute;gica.</p>     <p>Los organismos que   est&aacute;n depositados en una colecci&oacute;n biol&oacute;gica siempre permitir&aacute;n consultas posteriores a futuras generaciones y a expertos en los grupos para confirmar, corregir o precisar las identificaciones. Estas funcionan en la medida que se estudien sus   ejemplares y sus resultados sean publicados; las colecciones permiten comparaciones de ejemplares recolectados   por diferentes personas, en diferentes lugares y en distintos tiempos.</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Por lo mismo, la   conservaci&oacute;n de las colecciones biol&oacute;gicas es de vital importancia para mantener, en el mejor estado posible, los ejemplares que se   encuentran depositados en ellas. Se requieren de t&eacute;cnicas y procedimientos de mantenimiento   acorde con los organismos que se encuentren depositados y seg&uacute;n las   necesidades; sin embargo, toda colecci&oacute;n biol&oacute;gica, est&aacute; expuestas a   m&uacute;ltiples agentes de deterioro biol&oacute;gico que pueden causar da&ntilde;os, algunas veces   irreparables (<b>Llorente </b>1990, <b>Llorente y Castro </b>2002).</p>     <p>El prop&oacute;sito de este   art&iacute;culo es indicar las diversas t&eacute;cnicas para la recolecci&oacute;n, preservaci&oacute;n y montaje   de mariposas en estudios de   biodiversidad y conservaci&oacute;n, que permita que los investigadores interesados en   el estudio de las mariposas tengan criterios para decidir cu&aacute;les son las   mejores t&eacute;cnicas; hay procedimientos   que consideramos no son adecuados como lo mencionado por <b>Villareal     et al</b>. 2006, en donde recomiendan utilizar la inyecci&oacute;n de etanol o   acetato de etilo en el t&oacute;rax del ejemplar para su sacrificio.</p>     <p><b>1. T&eacute;cnicas de recolecci&oacute;n</b></p>     <p>Para el trabajo con   mariposas en el medio silvestre hay dos t&eacute;cnicas b&aacute;sicas de recolecci&oacute;n:</p>     <p><b>1.1 Red Entomol&oacute;gica</b></p>     <p>Tambi&eacute;n llamada red lepidopterol&oacute;gica o jama. &Eacute;sta consiste   en una aro de 40 cm de di&aacute;metro (<a href="#f1">Figura 1</a>A), tiene un cono en tela de tul muy suave, el largo del cono es de 100 cm y   la punta de este cono debe terminar de manera redondeada, para evitar da&ntilde;o alar   al ingresar en la red (<a href="#f1">Figura 1</a>B); el mango de la red, est&aacute; conformado de varias secciones, m&aacute;ximo 6, de 60 cm cada   una, que se unen entre si (<a href="#f1">Figura 1</a>C); el aro con la red se sujeta a la primer   secci&oacute;n con un tornillo (<a href="#f1">Figura 1</a>D), una vez unido este aro a las secciones se tendr&aacute; una red de 4 m de largo. &Eacute;sta red se utiliza para la captura de ejemplares en cualquier tipo de   ecosistema (<a href="#f1">Figura 1</a>E).</p>     <p>    <center><a name="f1"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f1.gif"></a></center></p>     <p><b>1.2 Trampa   van Someren-Rydon</b></p>     <p>Esta trampa consiste   en un cono de tela tul suave, generalmente de color negro o verde, el cual   tiene tapado la parte superior (<a href="#f2">Figura 2</a>A), hacia la mitad del cono debe tener   un sistema de apertura y cierre r&aacute;pido (Velcrom) para poder sacar los ejemplares, la parte inferior   del cono no debe estar cerrada, en este debe haber una base con un plato en   donde se coloca el cebo, la distancia entre la parte inferior de la trampa y la   base no debe superar 2.5 cm. (<a href="#f2">Figura 2</a>B).</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>    <center><a name="f2"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f2.gif"></a></center></p>     <p><b>2. T&eacute;cnica de sacrificio de las mariposas</b></p>     <p><b>2.1 T&eacute;cnica de presi&oacute;n digital en el t&oacute;rax</b></p>     <p>Un ejemplar debe ser sacrificado &uacute;nicamente cuando se tienen objetivos o fines de investigaci&oacute;n cient&iacute;fica. Utilizando los dedos pulgar e &iacute;ndice se hace presi&oacute;n, seg&uacute;n el tama&ntilde;o del ejemplar, en el t&oacute;rax de la mariposa, exactamente entre el meso y meta t&oacute;rax, debe tener cuidado de no presionar o   tocar las   alas por que podr&iacute;an quedar marcas de las huellas digitales y el ejemplar se estropear&iacute;a. (<a href="#f3">Figura 3</a>). </p>     <p>    <center><a name="f3"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f3.gif"></a></center></p>     <p>Esta t&eacute;cnica es la m&aacute;s   utilizada por los que trabajan con mariposas, ya que adem&aacute;s de permitir   preservar el ejemplar en perfecto estado, no da&ntilde;a sus tejidos. Nunca utilice   una jeringa para inyectar alg&uacute;n l&iacute;quido (alcohol, acetato de etilo, acetona, etc, ) con el fin de sacrificarla, ya que esto hace que el ejemplar sufra da&ntilde;os posteriores, especialmente por la humedad que termina degradando el ADN y no permite an&aacute;lisis moleculares posteriores.</p>     <p>Seg&uacute;n <b>M&aacute;rquez </b>(2005)   las mariposas pueden ser sacrificadas utilizando una c&aacute;mara letal que puede contener cianuro de potasio, acetato de   etilo, &eacute;ter o cloroformo, sustancias t&oacute;xicas que provocan la asfixia en los insectos. Sin embargo, tampoco   es recomendable esta t&eacute;cnica ya que produce deterioro de las alas en el   momento de su muerte, da&ntilde;os en los tejidos e impide hacer un an&aacute;lisis   molecular.</p>     <p>De manera general podemos recomendar el sacrificio mediante choque t&eacute;rmico, es decir, empleando   las bajas temperaturas para evitar da&ntilde;os en los ejemplares y as&iacute; poder garantizar el empleo de sus mol&eacute;culas constituyentes en futuros   an&aacute;lisis de ADN.</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><b>3. T&eacute;cnicas de Preservaci&oacute;n</b></p>     <p><b>3.1 Preservaci&oacute;n en seco</b></p>     <p><b><i>3.1.1 Tri&aacute;ngulo de papel milano o glassine</i></b></p>     <p>El tri&aacute;ngulo de papel   se utiliza como sobre para depositar el ejemplar que se recolecta, este sobre se puede hacer manualmente, utilizando papel milano blanco (casi transparente), para esto se debe   recortar un rect&aacute;ngulo de 10 x 14 cent&iacute;metros (<a href="#f4">Figura 4</a>A), se debe doblar un extremo sobre uno de sus   lados teniendo cuidado de dejar dos de   sus lados libres, uno de 1 cm y el otro de 3 cm (<a href="#f4">Figura 4</a>B); a continuaci&oacute;n en   el lado libre de 1 cm frote un poco de pegante en barra sobre la superficie y pegue haciendo un segundo dobles (<a href="#f4">Figura 4</a>C); en el lado libre   de 3 cm haga un tercer dobles, sin colocar pegante ya que este ser&aacute; utilizado como tapa del sobre (<a href="#f4">Figura 4</a>D).</p>     <p>    <center><a name="f3"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f4.gif"></a></center></p>     <p>Una vez recolectado el ejemplar col&oacute;quelo entre el sobre (<a href="#f4">Figura 4</a>E), en la tapa se debe colocar los datos de la localidad de recolecta en  siguiente orden Departamento, municipio, vereda o inspecci&oacute;n de polic&iacute;a, lugar,   fecha de recolecta, nombre del recolector, altitud, y coordenadas geogr&aacute;ficas   tomadas con un GPS directamente en campo y numero de campo del recolector;   tambi&eacute;n puede colocar en la tapa del sobre el nombre del recolector y su numero de campo y en la libreta de campo los respectivos   datos de la localidad de recolecta (<a href="#f4">Figura 4</a>F).</p>     <p><b><i>3.1.2 T&eacute;cnica   de relajaci&oacute;n o ablandamiento de ejemplares secos</i></b></p>     <p>Despu&eacute;s de recolectar   los ejemplares, se recomienda realizar los montajes en el menor tiempo   posible, pero si han pasado m&aacute;s de 3 d&iacute;as, es necesario ablandar los   ejemplares, para poder realizar el montaje. Los ejemplares   deben ser rehidratados en c&aacute;maras h&uacute;medas. (<a href="#f5">Figura 5</a>). A continuaci&oacute;n se   enumerar&aacute;n los pasos recomendados para realizar el ablandamiento.</p>     <p>    ]]></body>
<body><![CDATA[<center><a name="f5"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f5.gif"></a></center></p>     <p>a. Tome los sobres de los ejemplares recolectados y cerci&oacute;rese que cada sobre posea los   datos de procedencia o tengan el respectivo c&oacute;digo del recolector.</p>     <p>b. Seleccione   un recipiente herm&eacute;tico adecuado seg&uacute;n la cantidad y tama&ntilde;o de los ejemplares que van a ser hidratados.</p>     <p>c. Introduzca en el recipiente un papel o pa&ntilde;o absorbente y humedezca con agua de grifo suficientemente pero sin exceso, es decir que no se haga una   laguna en el recipiente y agregue cerca de 1 cc de alcohol al 70% para evitar   que se produzcan hongos y el material se pueda da&ntilde;ar.</p>     <p>d. Se recomienda colocar en la base del recipiente una malla para evitar el contacto directo del papel o pa&ntilde;o con el sobre de papel que contiene la   mariposa.</p> e. Deje durante 24 a 48 horas m&aacute;ximo el ejemplar para que   se hidrate, hasta que adquiera la soltura suficiente, como si estuviese reci&eacute;n recolectado.     <p><b><i>3.1.3 T&eacute;cnica de montaje</i></b></p>     <p>Antes de iniciar el montaje se recomienda realizar un masaje en los m&uacute;sculos alares previamente a la extensi&oacute;n alar, este masaje se realiza   ejerciendo una presi&oacute;n digital suavemente en el t&oacute;rax del ejemplar y con ayuda de pinzas entomol&oacute;gicas   presionando el borde costal de las alas anteriores con movimientos suaves tanto de apertura como de extensi&oacute;n alar.</p>     <p>a. Despu&eacute;s de tener el ejemplar relajado, proceda a su montaje en una base de madera de balso   o de poliestireno expandido o icopor (<a href="#f6">Figura 6</a>), de la siguiente manera:   Abra las alas con ayuda de pinza entomol&oacute;gica de punta plana y sin estr&iacute;as   (<a href="#f22">Figura 22</a>E), inserte el alfiler entomol&oacute;gico N&deg; 1 o 2 en el centro del   mesot&oacute;rax, (seg&uacute;n desee extender el ejemplar, es decir ventral o dorsalmente).</p>     <p>    <center><a name="f6"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f6.gif"></a></center></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>    <center><a name="f22"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f22.gif"></a></center></p>     <p>b. Mediante ayuda de una tira de papel milano o pl&aacute;stico delgado sujete las alas del ejemplar a la superficie de la   tabla de extensi&oacute;n. (<a href="#f6">Figura 6</a>).</p>     <p>c. Con ayuda de pinzas de punta plana o alfileres entomol&oacute;gicos suba o baje seg&uacute;n sea el caso, las alas anteriores, posicionando el borde inferior en &aacute;ngulo de 900 respecto al cuerpo del ejemplar, ancle con alfileres la tira de papel bordeando la superficie del ala (no rompa el ala) y termine de posicionar las alas posteriores con un &aacute;ngulo de abertura de 150 o 200. De igual manera realice este procedimiento con ayuda de alfileres para sujetar el ala,   pero no rompa la membrana alar, tenga cuidado de solo utilizar la inserci&oacute;n de los alfileres alrededor de los bordes alares para presionar. (<a href="#f6">Figura 6</a>).</p>     <p>d. Se recomienda realizar montaje tanto dorsal como ventral especialmente en grupos de coloraci&oacute;n obscura o transparente o de dif&iacute;cil determinaci&oacute;n como Nymphalidae (Satyrini - Ithomiini); Hesperiidae, Riodinidae y Lycaenidae.</p>     <p>e. En el caso del montaje de mariposas de la subfamilia Dismorphinae, hay que dejar   visible la mancha androconial ya que esta es un buen car&aacute;cter de identificaci&oacute;n   a nivel de especie (<a href="#f7">Figura 7</a>A) y para la subfamilia Heliconiinae, debe quedar visible la mancha que esta en el margen costal del ala posterior, (<a href="#f7">Figura 7</a>B).</p>     <p>    <center><a name="f7"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f7.gif"></a></center></p>     <p>f. Los ejemplares deben quedar en lugares frescos y con poca luz durante m&iacute;nimo cuatro o cinco d&iacute;as y seg&uacute;n las   condiciones ambientales, es decir si los d&iacute;as son muy lluviosos es preferible   dejarlos mas tiempo.</p>     <p><b><i>3.1.4 Cajas entomol&oacute;gicas   en una colecci&oacute;n de mariposas</i></b></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>3.1.4.1 Caja tipo Cornell</p>     <p>La caja en donde se   deposita el ejemplar en una colecci&oacute;n   tiene una medida est&aacute;ndar (48.3 x 42 x 7.7 cm) elaborada en madera con tapa de vidrio para ver el   interior. En su interior se coloca una l&aacute;mina de espuma elaborada con base en un   pol&iacute;mero termopl&aacute;stico conformado   por etileno vinil acetato de color blanco con un espesor de 1 cm. (<a href="#f8">Figura 8</a>).</p>     <p>    <center><a name="f8"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f8.gif"></a></center></p>       <p>La caja en su exterior   debe llevar varios r&oacute;tulos o etiquetas que contengan informaci&oacute;n sobre el   orden, familia, subfamilia, tribu, g&eacute;nero, especie y subespecie,   dependiendo del caso. Se recomienda que la caja sea elaborada en una madera no demasiado delgada o extra gruesa, y debe estar barnizada con laca transparente. (<a href="#f9">Figura 9</a>).</p>     <p>    <center><a name="f9"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f9.gif"></a></center></p>     <p>Estas cajas, con los   ejemplares de mariposas se encuentran en muebles compactos con cierre   herm&eacute;tico, este tipo de muebles sirven para ahorrar espacio ya que mientras no   est&aacute; en uso la colecci&oacute;n se mantienen cerrados sus m&oacute;dulos (<a href="#f10">Figura 10</a>).</p>     <p>    <center><a name="f10"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f10.gif"></a></center></p>      ]]></body>
<body><![CDATA[<p>3.1.4.2 Caja tipo Schmidtt</p>     <p>Esta caja tiene una   dimensi&oacute;n de 22.9 x 33 x 6.4 cm, sirve para depositar mariposas extendidas pero   tambi&eacute;n pueden ser usadas para mantener   duplicados de ejemplares en tri&aacute;ngulos de papel milano. (<a href="#f11">Figura 11</a>).</p>     <p>    <center><a name="f11"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f11.gif"></a></center></p>       <p><b>3.2 Preservaci&oacute;n en l&iacute;quido</b></p>     <p>Para preservar los   &oacute;rganos genitales despu&eacute;s de su extracci&oacute;n, se deben guardar en micro vial de   polietileno o de vidrio, de 4 mm de di&aacute;metro (2.5 mm x 10 mm) en su interior   se deposita glicerina, este micro vial debe tener un n&uacute;mero de disecci&oacute;n del   &oacute;rgano genital, el cual debe corresponder con una copia de esta etiqueta que debe tener el ejemplar del cual se extrae.</p>     <p>Se pueden archivar de   dos formas: adjuntar el micro vial al ejemplar o almacenar varios en un frasco   de mayor tama&ntilde;o, el cual es saturado con alcohol al 70% (<a href="#f12">Figura 12</a>), este recipiente debe ser rotulado para una mejor ubicaci&oacute;n de las muestras. Es   necesario que se revisen peri&oacute;dicamente los frascos, con el fin de reponer el alcohol evaporado o cambiarlo, seg&uacute;n sea   necesario. Se recomienda destinar un lugar fresco, oscuro y seco para la ubicaci&oacute;n de las muestras y as&iacute;, evitar su deterioro (<b>M&aacute;rquez </b>2005).</p>     <p>    <center><a name="f12"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f12.gif"></a></center></p>     <p><b>3.3 Preservaci&oacute;n en preparaciones</b></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Es com&uacute;n, en algunos casos, que se necesiten realizar preservaciones de ejemplares   o de sus partes en laminas portaobjetos, se recomienda emplear materiales de larga durabilidad y naturaleza neutra para garantizar su preservaci&oacute;n a   futuro. Antiguamente era muy com&uacute;n el montaje de escleritos, partes u &oacute;rganos genitales en l&aacute;minas portaobjeto y a&uacute;n en algunas colecciones se contin&uacute;a con esta tradici&oacute;n, sin embargo, no recomendamos esta t&eacute;cnica   debido a que las estructuras quedan fijadas y no permiten ver la dimensionalidad completa de la estructura.</p>     <p><b>3.4 Colecci&oacute;n   de tejidos</b></p>     <p><b><i>3.4.1 Procedimientos toma de muestras de ADN en   fresco</i></b></p>     <p>Lo ideal es tomar el tejido inmediatamente despu&eacute;s del sacrificio de la mariposa. Es necesario que en el campo se tengan   los reactivos e implementos necesarios, pinzas, tijeras finas de disecci&oacute;n (<a href="#f22">Figura 22</a>D), tubos para PCR tambi&eacute;n llamados tubos <i>Eppendorf </i>(<a href="#f13">Figura 13</a>C) y seg&uacute;n sea el caso, el reactivo elegido para su almacenamiento, alcohol anal&iacute;tico, nitr&oacute;geno l&iacute;quido o DMSO/EDTA (<a href="#f13">Figura 13</a>E). (<b>M&aacute;rque</b><b>z </b>2005, <b>Shokrall</b><b>a <i>et al</i>. </b>2010, <b>Salazar <i>et al. </i></b>2010, <b>Gemeinholzer <i>et al. </i></b>2010). Si no se cuenta en campo con todos los implementos   necesarios para la adecuada preservaci&oacute;n de las muestras, se   recomienda que el procedimiento se realice antes de llevar a cabo el proceso de ablandamiento en el laboratorio, antes de su montaje. Lo anterior debido a que la humedad que requiere este proceso, es un factor que degrada el ADN.</p>     <p>    <center><a name="f13"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f13.gif"></a></center></p>     <p>Cualquier parte del cuerpo de un ejemplar podr&iacute;a ser usada   para an&aacute;lisis molecular, sin embargo, se recomienda tomar como muestra dos patas. Esto se hace porque es importante mantener un <i>voucher, </i>o registro, que conserve el   valor taxon&oacute;mico del ejemplar y que pueda ser usado en estudios de tipo morfol&oacute;gico. Como recomendaci&oacute;n, se pueden desprender las dos patas del ejemplar   para ser guardadas en seco en un vial esteril.</p>     <p>Para tomar el tejido se usan unas pinzas de punta fina (<a href="#f13">Figura 13</a>B) y tijeras   esterilizadas (<a href="#f22">Figura 22</a>F), estos implementos en cada ejemplar deben ser esterilizados. Posteriormente, se deposita la muestra en un tubo para PCR est&eacute;ril (<a href="#f13">Figura 13</a>C), debidamente etiquetado y   que contenga el reactivo elegido para el almacenamiento de la muestra (<a href="#f13">Figura 13</a>E), (<b>Gemeinholzer et al. </b>2010).</p>     <p><b><i>3.4.2 Procedimiento para preservaci&oacute;n en   colecci&oacute;n de tejidos</i></b></p>     <p>Una colecci&oacute;n de tejidos se realiza con el fin de preservar las muestras de espec&iacute;menes y busca garantizar su integridad para que puedan ser usadas en   an&aacute;lisis moleculares. Es necesario destinar un espacio acondicionado para su   mantenimiento y establecer   protocolos para su manejo.   Existen varias alternativas en la obtenci&oacute;n, manejo y transporte de muestras,   para el trabajo con mariposas se resaltan dos, el congelado en seco y en   l&iacute;quido.</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Una vez obtenido el   tejido, se debe procurar que no est&eacute; expuesto a factores como, cambios de pH (<b>Mesa </b>2006) y temperaturas altas, ya que las enzimas y reacciones qu&iacute;micas que degradan el ADN tienen un &oacute;ptimo de funcionamiento alrededor de los 37-40 &deg;C. Se recomienda congelar las muestras, en   refrigeradores que las mantengan a -20&deg;C; refrigeradores Ultra (-80&deg;C) o,   idealmente, usando Nitr&oacute;geno l&iacute;quido que las puede mantener a -180&deg;C (<b>Doorenweerd     &amp; Beentjes </b>2012). Si es necesario transportar las muestras, se   recomienda el uso de neveras con hielo seco para mantener la temperatura   &oacute;ptima.</p>     <p><b>4. Etiquetas</b></p>     <p>Las etiquetas que   llevan las mariposas una vez son ingresadas a una colecci&oacute;n, obligatoriamente son dos, la primera es localidad de recolecta o de procedencia y la segunda n&uacute;mero de cat&aacute;logo de la colecci&oacute;n donde se deposita el ejemplar, no obstante despu&eacute;s de las dos anteriores pueden existir m&aacute;s etiquetas como por ejemplo, una con   el n&uacute;mero de campo del recolector otra con el n&uacute;mero consecutivo de la disecci&oacute;n de los &oacute;rganos genitales, cuando al ejemplar se le quitado su abdomen   para su extracci&oacute;n y an&aacute;lisis.</p>     <p>El tipo de papel usado   para hacer las etiquetas debe ser totalmente libre de &aacute;cido y de hongos y con   un pH de 7.5, de color blanco.</p>     <p><b>4.1 Etiqueta   localidad de recolecta o de procedencia.</b></p>     <p>Esta etiqueta debe contener los datos b&aacute;sicos de recolecta en el siguiente orden Departamento,   municipio, inspecci&oacute;n de polic&iacute;a, vereda, localidad exacta, fecha (d&iacute;a, mes,   a&ntilde;o, siempre debe escribir en palabras el respectivo nombre del mes, por   ejemplo mayo, julio, en el caso de meses como septiembre, noviembre o diciembre que su escritura es larga se recomienda abreviar como Sep. Nov. Dic.; nunca haga referencia al mes utilizando la numeraci&oacute;n   romana ya que esto puede llevar a confusiones posteriores), coordenadas   geogr&aacute;ficas exactas del lugar de recolecta tomadas con un GPS. Nombre del   recolector y altitud dada en metros. (<a href="#f14">Figura 14</a>A).</p>     <p>    <center><a name="f14"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f14.gif"></a></center></p>       <p><b>4.2 Etiqueta   identificaci&oacute;n</b></p>     <p>Se recomienda que cuando se identifique el nombre de la   especie o subespecie al cual pertenece el ejemplar se escriba   el responsable de hacer dicha identificaci&oacute;n y el a&ntilde;o.</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Cuando escriba el   nombre de la categor&iacute;a taxon&oacute;mica utilizada debe tener en cuenta lo que indica el C&oacute;digo Internacional de Nomenclatura Zool&oacute;gica   en el sentido que todo nombre de una especie est&aacute; compuesto de dos palabras (g&eacute;nero   y ep&iacute;teto espec&iacute;fico) y el nombre de una especie esta compuesto de tres palabras (g&eacute;nero, ep&iacute;teto espec&iacute;fico y ep&iacute;teto subespec&iacute;fico) en cualquiera   de estas dos categor&iacute;as siempre   debe escribir el autor y a&ntilde;o de dicha categor&iacute;a, (<a href="#f14">Figura 14</a>B).</p>     <p><b>4.3 Etiqueta n&uacute;mero de campo del recolector</b></p>     <p>Esta etiqueta, aunque   no es muy utilizada por los entom&oacute;logos, hace referencia a un n&uacute;mero   consecutivo que lleva la persona que hace la recolecci&oacute;n de la mariposa, el   cual esta relacionado en su libreta de campo. (<a href="#f14">Figura 14</a>C)</p>     <p style='line-height: 104%'><b>4.4 Etiqueta cat&aacute;logo de la colecci&oacute;n donde se deposita ejemplar</b></p>     <p>Cada colecci&oacute;n debe tener un n&uacute;mero consecutivo de cat&aacute;logo el cual identifica al ejemplar que se deposita, antecedido de un acr&oacute;nomino de la colecci&oacute;n donde est&aacute; depositado el   ejemplar, este n&uacute;mero de cat&aacute;logo debe ser &uacute;nico para este ejemplar, (<a href="#f14">Figura   14</a>D), tambi&eacute;n se utiliza como c&oacute;digo de barras, (<a href="#f14">Figura 14</a>E).</p>     <p><b>4.5 Etiqueta &oacute;rganos genitales</b></p>     <p>Se utiliza para identificar el &oacute;rgano genital que se le disecciona al ejemplar con fines   de identificaci&oacute;n, es un n&uacute;mero   consecutivo que lleva tanto el ejemplar   como la estructura retirada. (<a href="#f14">Figura 14</a>F).</p>     <p><b>4.6 Etiqueta ejemplar Tipo</b></p>     <p>Se utiliza para identificar un ejemplar designado como tipo nomenclatural, para tal fin internacionalmente se acostumbra diferentes colores   para cada tipo, as&iacute;, holotipo y/o alotipo, color rojo (<a href="#f15">Figura 15</a>A), paratipo color azul o amarillo (<a href="#f15">Figura 15</a>B).</p>     <p>    ]]></body>
<body><![CDATA[<center><a name="f15"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f15.gif"></a></center></p>     <p><b>5. Metodolog&iacute;as de muestreo</b></p>     <p>Para el muestreo de   mariposas en estudios de biodiversidad existen muchas t&eacute;cnicas, la elecci&oacute;n   de alguna de ellas debe ser acorde con los objetivos de la investigaci&oacute;n que   quiera realizar.</p>     <p><b>5.1 Binoculares</b></p>     <p>Se ha vuelto costumbre   entre los que estudian mariposas, la utilizaci&oacute;n de binoculares para la identificaci&oacute;n de especies y hasta de subespecies y se ha llegado hasta la idea de recomendar esto como una t&eacute;cnica de identificaci&oacute;n (<b>Villareal et al. </b>2004). No es un m&eacute;todo   recomendable, porque no es posible identificar una mariposa a nivel de especie o subespecie   por intermedio de binoculares, ya que es necesario observar peque&ntilde;as estructuras, tama&ntilde;os de manchas o tonos del color   en sus alas, tanto en vista dorsal como ventral, y a veces es necesario   analizar sus &oacute;rganos genitales.</p>     <p>Por lo anterior no se recomienda la utilizaci&oacute;n de esta t&eacute;cnica con fines de identificaci&oacute;n, sin embargo, puede ser utilizada para observaci&oacute;n de ejemplares   importantes de recolectar o la simple observaci&oacute;n de las mariposas en su medio   natural, ya que para observarlas no es necesaria su recolecci&oacute;n.</p>     <p><b>5.2 Muestreo con Trampas van Someren Rydon</b></p>     <p>El muestreo con Trampas van Someren Rydon es fundamental en el estudio de las mariposas diurnas, se usa desde la d&eacute;cada de 1960 para incrementar la eficiencia de los muestreos (<b>Brown &amp; Freitas </b>2000) y constituye una t&eacute;cnica   complementaria a la captura directa con red entomol&oacute;gica o para cuando se   quiere estudiar gremios alimenticos.</p>     <p>Se utilizan diversos tipos de cebos, estos se eligen de acuerdo al estudio que se pretenda realizar, as&iacute; como las condiciones ambientales que presenta el &aacute;rea de inter&eacute;s. En el neotr&oacute;pico, los cebos m&aacute;s usados actualmente son banano fermentado, pescado en descomposici&oacute;n y excremento (<b>Raguso &amp; Llorente-Bousquets </b>1990, <b>Brown &amp; Freitas </b>2000, <b>Gr&#248;tan <i>et al</i>. </b>2012). En diversos estudios se ha determinado   que estas trampas tienen un rango de   acci&oacute;n de hasta 50 m (<b>DeVries </b>1987), por lo que no es recomendable usar trampas   con cebos distintos en una distancia menor.</p>     <p>Para estudios de &iacute;ndole ecol&oacute;gico, como los de monitoreo   de poblaciones y comunidades de mariposas, se recomienda usar un m&iacute;nimo de cinco trampas por transecto, con el fin de   facilitar el posterior an&aacute;lisis y comparaci&oacute;n con otros estudios de este   tipo. (<b>Daily &amp; Ehrlich </b>1995, <b>Uehara-Prado <i>et al</i></b>. 2007, <b>Uehara-Prado <i>et al</i></b>. 2009a, <b>Uehara-Prado <i>et al</i></b>. 2009b, <b>Tufto <i>et al</i></b><i>. </i>2012). Adem&aacute;s, se recomienda que el dise&ntilde;o del muestreo incluya   al menos, una r&eacute;plica de cada   transecto, procurando que los sitios en que se instalen las trampas, presenten condiciones ambientales, bi&oacute;ticas y abi&oacute;ticas, similares (<b>Tufto <i>et al</i>. </b>2012) (<a href="#f2">Figura 2</a>A).</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Las trampas, cebadas con el mismo atrayente, pueden ponerse entre 20 y 50 metros entre s&iacute; (<b>Uehara-Prado <i>et al</i>. </b>2007). La distancia   entre trampas de 50 m, recomendada en otros trabajos (<b>Villareal <i>et al</i>. </b>2004) puede limitar el dise&ntilde;o   del muestreo, en el sentido de que en   el paisaje neotropical, sobretodo en el andino, los relictos de algunas coberturas vegetales presentan &aacute;reas bastante disminuidas y su medida lineal no es suficiente para completar los transectos con trampas (<a href="#f16">Figura 16</a>).</p>     <p>    <center><a name="f16"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f16.gif"></a></center></p>     <p>Se recomienda colgar   las trampas entre 1 y 3 metros por encima del suelo, dependiendo de la estructura de la vegetaci&oacute;n y altura del dosel (<b>Daily &amp; Ehrlich </b>1995). Para mejorar la acci&oacute;n de los cebos, es recomendable que las trampas duren, por lo menos, 48 horas en su lugar de instalaci&oacute;n y la revisi&oacute;n   debe hacerse peri&oacute;dicamente (<b>DeVries </b>1987).</p>     <p>Cuando instale estas   trampas busque que el lugar donde se ubica no este en un &aacute;rea en donde se tenga mucho viento ya que este hace   que la trampa se mueva mucho y este movimiento termina por asustar a   las mariposas que ingresan a la TVSR. (<a href="#f2">Figura 2</a>B).</p>     <p><b>5.3 B&uacute;squeda   de mariposas en transectos definidos</b></p>     <p>Hay que tener un recorrido con un tama&ntilde;o definido,   seg&uacute;n sea el objetivo del muestreo, a lo largo   de coberturas vegetales espec&iacute;ficas, estos se recorren con red entomol&oacute;gica, en un horario establecido, procurando   siempre que el esfuerzo de muestreo para todos los transectos sea similar. Los   transectos deben ser independientes entre s&iacute; y cada uno de ellos constituye   una unidad muestreal, este es un m&eacute;todo sistem&aacute;tico que permite   determinar patrones de comportamiento de las mariposas. Uno de sus mayores   limitantes es que el registro de especies raras es reducido (<b>Pozo <i>et al. </i></b>2005).</p>     <p><b>5.4 B&uacute;squeda   libre de mariposas</b></p>     <p>Se realizan recorridos   con la red entomol&oacute;gica, en horarios definidos, el horario m&aacute;s usado es entre las 9:00 y 18:30 o   a veces 19 horas, para completar el registro de especies que presentan h&aacute;bito crepuscular como son ejemplares de la tribu Morphini (<i>Antirrhea, Caerois</i>) y Brassolini (<i>Caligo</i>, <i>Brassolis</i>, <i>Catoblepia</i>, <i>Dynastor</i>, <i>Eryphanis,     Opsiphanes</i>, etc). Seg&uacute;n sea el objetivo del muestreo, se debe tener en   cuenta recorrer los distintos tipos de vegetaci&oacute;n que encuentre en su &aacute;rea de estudio, registrar el tiempo que se permanece en cada una de ellas y la hora en que se recorre. Esta t&eacute;cnica se enfoca en puntos o sitios &oacute;ptimos para la presencia de mariposas, por lo que   se requiere experiencia y conocimiento, tanto del &aacute;rea de muestreo,   como de las mariposas presentes. Presenta una limitante, en cuanto al   registro de especies comunes, que suelen ser poco registradas con este m&eacute;todo (<b>Pozo <i>et al.</i></b> 2005).</p>     <p><b>5.5 M&eacute;todo de captura-marcaje-recaptura</b></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Esta t&eacute;cnica ha sido   usada para lograr una estimaci&oacute;n de la abundancia, din&aacute;mica poblacional,   actividad de vuelo, longevidad, tasas de dispersi&oacute;n y de supervivencia de las   mariposas (<b>Turner </b>1971, <b>Kingsolver </b>1999, <b>Matter <i>et al</i>. </b>2004), as&iacute;   como para estudios de calidad de h&aacute;bitat y conectividad (<b>Haddad &amp; Tewksbury </b>2005).</p>     <p>Lo primero que se debe hacer es seleccionar el &aacute;rea determinada para el muestreo (<b>Scott </b>1975), dependiendo de los objetivos del trabajo, la(s) especie(s) de inter&eacute;s, sus h&aacute;bitos   y h&aacute;bitat. Dentro del &aacute;rea elegida, se programan jornadas de captura de individuos, procurando que en cada jornada el esfuerzo de muestreo sea similar.</p>     <p>Durante cada jornada de captura se procede   a realizar b&uacute;squeda de las   mariposas de inter&eacute;s y su captura mediante red entomol&oacute;gica. Se debe ser muy   cuidadoso con las mariposas capturadas, procurando no hacerles ning&uacute;n da&ntilde;o,   por lo que es recomendable   manipularlas con pinzas (<a href="#f22">Figura 22</a>E).   (<b>Sheppard &amp; Bishop </b>1973).</p>     <p>Se marcan los individuos en la regi&oacute;n media del ala posterior   izquierda, lado ventral, en donde se encuentra la celda discal, (<a href="#f17">Figura 17</a>), con un marcador   indeleble de punta extrafina. La marca consiste en un n&uacute;mero o c&oacute;digo &uacute;nico   para cada mariposa (<b>Kingsolver </b>1999, <b>Rivera <i>et al</i>. </b>2005). En su libreta de campo debe registrar el c&oacute;digo, sexo, hora y sitio de captura, nombre de la especie, as&iacute; como el estado de los individuos y datos de su comportamiento (<b>Turner </b>1971, <b>Mallet <i>et al</i>. </b>1987, <b>Baguette </b>2003).</p>     <p>    <center><a name="f17"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f17.gif"></a></center></p>     <p>Despu&eacute;s de tomar los datos necesarios, los individuos capturados se liberan. De acuerdo con los   objetivos de la investigaci&oacute;n, se definen las unidades de tiempo en que se realizan   las jornadas de recaptura, as&iacute; como la duraci&oacute;n y frecuencia de estas.</p>     <p><b>6. Procedimientos para identificaci&oacute;n taxon&oacute;mica</b> <b>de mariposas</b></p>     <p><b>6.1 T&eacute;cnica de preparaci&oacute;n de &oacute;rganos   genitales</b></p>     <p>En los procesos de identificaci&oacute;n taxon&oacute;mica de muchas especies y subespecies de mariposas, es   necesario realizar la disecci&oacute;n de los &oacute;rganos genitales con el fin de corroborar   o tener certeza en la identificaci&oacute;n, esta disecci&oacute;n se realiza   retirando el abdomen del ejemplar con ayuda de unas tijeras de punta fina (<a href="#f22">Figura 22</a>F) y sumergi&eacute;ndolo en una soluci&oacute;n   de KOH al 10%, se deja actuar esta soluci&oacute;n por cerca de 24   horas, o tambi&eacute;n se puede colocar el abdomen en un vial de vidrio   (<a href="#f22">Figura 22</a> I) con KOH al 10% y   dejarlo al ba&ntilde;o de Mar&iacute;a por 15 minutos con el agua en ebullici&oacute;n.</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Una vez realizado   cualquiera de los pasos anteriores se puede dar inicio a la respectiva   disecci&oacute;n bajo un estereoscopio de investigaci&oacute;n (<a href="#f18">Figura 18</a>), coloque el   abdomen en una caja de Petri con alcohol al 70% y con la ayuda de un pincel de punta fina (<a href="#f22">Figura 22</a>A), limpie las escamas que est&aacute;n en el abdomen, hasta que quede   completamente limpio, en seguida cambie el alcohol y con dos agujas finas de disecci&oacute;n (<a href="#f22">Figura 22</a>H) inicie a romper el   abdomen por un lado hasta que encuentre el &oacute;rgano genital, hay que tener mucho cuidado, debido a que las estructuras   pueden estar aun muy adheridas a las membranas o las estructuras est&aacute;n aun   muy duras y esclerosadas y por ende son muy delicadas. Una vez extra&iacute;das totalmente, es necesario neutralizar con &aacute;cido ac&eacute;tico y enjuagar con agua destilada para evitar la transparentaci&oacute;n   total y p&eacute;rdida de estas estructuras en el futuro.</p>     <p>    <center><a name="f18"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f18.gif"></a></center></p>     <p><b>6.3 Transparentaci&oacute;n alar o Aclareo de alas</b></p>     <p>La transparentaci&oacute;n alar o aclareo de alas es otro proceso importante en la b&uacute;squeda de caracteres taxon&oacute;micos y requiere de un   procedimiento sencillo pero delicado. (<a href="#f19">Figura 19</a>).</p>     <p>    <center><a name="f19"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f19.gif"></a></center></p>      <p>La t&eacute;cnica consiste en los siguientes pasos:</p>     <p>a) Desprenda   las alas del t&oacute;rax de los ejemplares</p>     <p>b) Sum&eacute;rjalas suavemente en Hipoclorito de sodio por cerca de 30 min</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>c) Enjuague   con agua destilada suavemente.</p>     <p>d) Con ayuda de pincel suave remueva las escamas de la superficie alar.</p>     <p style='text-align:justify;line-height: 20.5pt'>e) Seque   al aire libre por media hora en una superficie lisa f) Transfiera mediante pinzas las alas transparentadas a una l&aacute;mina portaobjetos.</p>     <p><b>6.4 Identificaci&oacute;n de especies y subespecies</b></p>     <p>Los procesos de identificaci&oacute;n de especies o subespecies   pueden ser una tarea de paciencia y mucho trabajo, especialmente en especies raras o poco abundantes, o de grupos taxon&oacute;micos poco conocidos donde el trabajo taxon&oacute;mico es a&uacute;n incipiente y faltan especialistas junto con literatura asociada.</p>     <p>Los caracteres   taxon&oacute;micos m&aacute;s empleados para la identificaci&oacute;n de especies o subespecies   son los patrones de coloraci&oacute;n, la forma alar, las bandas y algunas estructuras especiales como palpos, patas y &oacute;rganos genitales. En algunos casos es necesario realizar comparaciones con descripciones originales que pueden muy dispendiosas y   tomar mucho tiempo.</p>     <p>Actualmente cada grupo   taxon&oacute;mico presenta literatura especializada, listas de chequeo y especialistas,   por lo cual, es recomendado despu&eacute;s de realizar el proceso de   identificaci&oacute;n, determinar los ejemplares con dudas taxon&oacute;micas y ponerse en   contacto con personal especializado. Actualmente se cuenta con la lista de   chequeo para las mariposas neotropicales de <b>Lamas, </b>2004 y la lista   ilustrada de mariposas de las Am&eacute;ricas de <b>Warren <i>et al</i>., </b>2013, ayudas invaluables en los procesos de identificaci&oacute;n y corroboraci&oacute;n taxon&oacute;mica de las especies.</p>     <p><b>6.5 Clasificaci&oacute;n</b></p>     <p>El orden Lepidoptera   est&aacute; dividido en tres subordenes Zeugloptera, Aglossata y Heterobathmiina, este &uacute;ltimo tiene dos divisiones Monotrysia y Ditrysia, esta &uacute;ltima tiene dos secciones Tineina y Cossina, esta &uacute;ltima tiene dos subsecciones Cossina y Bombycina y en esta   &uacute;ltima est&aacute;n las polillas y mariposas.</p>     <p>Colombia cuenta con 3274 especies de mariposas de las cuales 350 son end&eacute;micas y 10 est&aacute;n   amenazadas, <b>Andrade-C. et al</b>. 2012. Est&aacute;n incluidas en seis 6 familias y   23 subfamilias y 56 tribus, (Warren, 2013) as&iacute;:</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>    <center><a name="t1"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04t1.gif"></a></center></p>     <p><b>7. Fotograf&iacute;a</b></p>     <p>Para la toma de   fotograf&iacute;as de ejemplares de mariposas se utiliza un tr&iacute;pode con una c&aacute;mara digital tipo r&eacute;flex de cualquier marca, que contenga 18 Mp, lente   de zoom de 17 - 40 mm. (<a href="#f20">Figura 20</a>), y una caja de Luz blanca.</p>     <p>    <center><a name="f20"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f20.gif"></a></center></p>     <p>Coloque la mariposa al   interior de la caja y ubique sus etiquetas a la misma altura de la mariposa, coloque una reglilla con escala entre 0 y 5 cent&iacute;metros y proceda a tomar la fotograf&iacute;a. (<a href="#f21">Figura 21</a>).</p>     <p>    <center><a name="f21"><img src="img/revistas/racefn/v37n144/v37n144a04f21.gif"></a></center></p> &nbsp;     <p><b><font size="3">Referencias</font></b></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p><b>Andrade-C. M. G., J. Betancur, E. Forero, J. Lynch, F.G. Stiles, A.</b> <b>Prieto-C. </b>2012. In. Su&aacute;rez-Mayorga, A.M. y J.C. Bello, (compiladores). Marco t&eacute;cnico y   operativo para la construcci&oacute;n de la Estrategia del INB. Esquema conceptual y   operativo para el desarrollo de la Enibio. Instituto de Investigaci&oacute;n de   Recursos Biol&oacute;gicos Alexander von Humboldt y Ministerio de Ambiente y Desarrollo Sostenible. Bogot&aacute;, D.C., Colombia. 72 pp.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000183&pid=S0370-3908201300030000400001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Baguette, M. </b>2003. Long distance dispersal and landscape occupancy in a   metapopulation of the cranberry fritillary butterfly. Ecography 26(2): 153-160.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000185&pid=S0370-3908201300030000400002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Brown, K.S. &amp; A.V.L. Freitas</b>. 2000. Atlantic Forest butterflies: indicators for landscape conservation. Biotropica 32: 934-956.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000187&pid=S0370-3908201300030000400003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Daily, G.C., &amp; P.R. Ehrlich. </b>1995. Preservation of   biodiversity in small rain forest patches: rapid evaluations using butterfly trapping. Biodiversity and Conservation 4:35-55.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000189&pid=S0370-3908201300030000400004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>DeVries, Ph.J. </b>1987. The butterflies of Costa Rica and their natural history. Papilionidae, Pieridae, Nymphalidae : 327 pp. Princeton University Press, New Jersey.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000191&pid=S0370-3908201300030000400005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p><b>Doorenweerd</b><b>, C. &amp; K. Beentjes</b>. 2012. Extensive guidelines for preserving specimen or tissue for later DNA work. <a href="http://science.naturalis.nl/" target="_blank">http://science.naturalis.nl/</a>.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000193&pid=S0370-3908201300030000400006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Gemeinholzer, B., I. Rey, K.   Weising, M. Grundmann, A.N. Muellner, H. Zetzsche, G. Droege, O.   Seberg, G. Petersen, D.M. Rawson, L.A. Weigt. </b>2010. Organizing specimen and tissue preservation in   the field for subsequent molecular analyses. IN: ABC-Taxa, Volume 8 - Manual on Field Recording Techniques and Protocols for All Taxa Biodiversity   Inventories, Chapter 7, 129-157.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000195&pid=S0370-3908201300030000400007&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Gr&#248;tan, V., R. Lande, S. Engen, B.-E. Saether, Ph.J. DeVries. </b>2012. Seasonal cycles of species diversity and similarity in a tropical   butterfly community. Journal of Animal.   Ecology. 81: 714-723.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000197&pid=S0370-3908201300030000400008&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Haddad, N.M. &amp; J.J. Tewksbury. </b>2005. Low quality   habitat corridors as movement conduits for two butterfly species. Ecological Applications 15: 250-257.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000199&pid=S0370-3908201300030000400009&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Kingsolver, J.G. </b>1999. Experimental analyses of wing size, flight, and survival in the western   white butterfly. Evolution 53(5): 1479-1490.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000201&pid=S0370-3908201300030000400010&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p><b>Lamas, G</b>. 2004. (Ed.). Atlas of Neotropical Lepidoptera, Checklist: part 4A Hesperioidea - Papilionoidea. Scientific Publisher/Association of Tropical Lepidoptera. Gainesville, U.S.A.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000203&pid=S0370-3908201300030000400011&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Llorente, J. </b>1990. La b&uacute;squeda del m&eacute;todo natural. Fondo de   Cultura Econ&oacute;mica, M&eacute;xico, D.F.,   157 p.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000205&pid=S0370-3908201300030000400012&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Llorente, J. &amp; D. Castro. </b>2002. Colecciones entomol&oacute;gicas en instituciones taxon&oacute;micas de Iberoam&eacute;rica: Â¿Hacia estrategias para el inventario de la biodiversidad?, pp. 307-318. En: C. Costa, S. A. Vanin,   J. M. Lobo &amp; A. Melic (Eds.). Proyecto de Red Iberoamericana de   biogeograf&iacute;a y entomolog&iacute;a sistem&aacute;tica, PRIBES 2002. M3M Monograf&iacute;as Tercer Milenio, vol. 2. Sociedad Entomol&oacute;gica Aragonesa (SEA) &amp;   CYTED, Zaragoza.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000207&pid=S0370-3908201300030000400013&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Mallet, J., J.T. Longino, D. Murawski, A. Murawski &amp; A.   Simpson de Gamboa. </b>1987. Handling effects in Heliconius: where do all the butterflies go? Journal of Animal Ecology 56(2): 377-386.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000209&pid=S0370-3908201300030000400014&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>M&aacute;rquez, L.J. </b>2005. T&eacute;cnicas de colecta y preservaci&oacute;n de   insectos. Bolet&iacute;n Sociedad   Entomol&oacute;gica Aragonesa. 37: 385-408.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000211&pid=S0370-3908201300030000400015&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p><b>Matter, S.F., J. Roland, A. Moilanen, and I. Hanski. </b>2004. Migration and   survival of Parnassius smintheus:   detecting effects of habitat for individual butterflies. Ecological Applications 14(5): 1526-1534.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000213&pid=S0370-3908201300030000400016&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Mesa, D.P. </b>2006. Protocolos para la preservaci&oacute;n y manejo de colecciones biol&oacute;gicas. Boletin Cientifico - Centro de Museos - Museo de Historia Natural. 10: 117-148.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000215&pid=S0370-3908201300030000400017&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Pozo, C., J. Llorente-Bousquets, A. Luis, I. Vargas y N. Salas. </b>2005. Reflexiones acerca de los m&eacute;todos de muestreo para mariposas en las   comparaciones biogeogr&aacute;ficas, pp. 203-215. En: Llorente, J. &amp; J.J. Morrone. (Eds.). Regionalizaci&oacute;n biogeogr&aacute;fica en Iberoam&eacute;rica y t&oacute;picos afines: Primeras Jornadas Biogeogr&aacute;ficas RIBES Las Prensas Ciencias, Fac. Ciencias, UNAM. M&eacute;xico, D.F.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000217&pid=S0370-3908201300030000400018&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Raguso, R.A. &amp; J.E. Llorente-Bousquets</b>. 1990. The butterflies (Lepidoptera) of the Tuxtlas Mts., Veracruz, Mexico, revisited: Species- richness and habitat   disturbance. J. Res. Lep., 29: 105-133.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000219&pid=S0370-3908201300030000400019&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Salazar, C., S.W. Baxter, C. Pardo-Diaz, Wu. G. Surridge A., M. Linares, E. Bermingham, C.D. Jiggins. </b>2010. Genetic Evidence   for Hybrid Trait Speciation in <i>Heliconius </i>Butterflies. PLoS Genet 6(4): e1000930. doi:10.1371/journal.pgen.1000930   .    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000221&pid=S0370-3908201300030000400020&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p><b>Scott, J.A. </b>1975. Flight patterns among eleven species of diurnal Lepidoptera. Ecology 56 (6): 1367-1377.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000223&pid=S0370-3908201300030000400021&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Sheppard, P.M., &amp; J.A. Bishop. </b>1973. The study of   populations of Lepidoptera by capture-recapture methods. Journal of Research   on the Lepidoptera 12(8) :135-144.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000225&pid=S0370-3908201300030000400022&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Shokralla, S., G.   Singer, M. Hajibabaei</b>. 2010. Direct PCR amplification   and sequencing of specimens&#39; DNA from preservative ethanol. BioTechniques 48(3): 233-234.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000227&pid=S0370-3908201300030000400023&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Rivera, J.M., C.E. Prieto Sierra, &amp; C. Takegami. </b>2005. Estructura poblacional de <i>Morpho   sulkowskyi </i>Kollar, 1850 (Lepidoptera: Nymphalidae) en un sector de la cordillera occidental, departamento del Cauca   (Colombia). Entomotr&oacute;pica 20(1): 15-22.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000229&pid=S0370-3908201300030000400024&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Tufto, J., R. Lande, T.H. Ringsby, S. Engen, S. Saether, B.E. Walla,   T.R. and Ph.J. DeVries. </b>2012. Estimating Brownian motion dispersal rate, longevity and population density from spatially explicit mark-recapture data on tropical butterflies. Journal of Animal Ecology 81: 756-769.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000231&pid=S0370-3908201300030000400025&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p><b>Turner, J.R.G. </b>1971. Experiments on the Demography of Tropical Butterflies. 11. Longevity and Home-range Behaviour in <i>Heliconius erato. </i>Biotropica   3(1): 21-31.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000233&pid=S0370-3908201300030000400026&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Uehara-Prado, M., &amp; A.V.L. Freitas</b>. 2009a. The effect of   rainforest fragmentation on species diversity and mimicry ring composition of Ithomiinae butterflies.- Insect Conserv. Diver., 2: 23-28.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000235&pid=S0370-3908201300030000400027&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Uehara-Prado, M., J. de Oliveira Fernandes, A. de Moura Bello, G.</b> <b>Machado, A.J. Santos, F.Z. Vaz-De-Mello, A.V.L. Freitas. </b>2009b. Selecting   terrestrial arthropods as indicators of small-scale disturbance: A first   approach in the Brazilian Atlantic Forest. Biological Conservation, Volume 142, Issue 6., 1220-1228.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000237&pid=S0370-3908201300030000400028&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Uehara-Prado, M., K.S. Brown, and A.V.L. Freitas. </b>2007. Species richness, composition and abundance of fruit-feeding butterflies in the Brazilian Atlantic Forest: comparison between a fragmented and a continuous landscape. Global Ecology and Biogeography, 16: 43-54.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000239&pid=S0370-3908201300030000400029&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     <!-- ref --><p><b>Villareal, H., M. &Aacute;lvarez, S. C&oacute;rdoba, F. Escobar, G. Fagua, F.   Gast, H. Mendoza, M. Ospina, &amp; A.M. Uma&ntilde;a. </b>2004. Manual de m&eacute;todos para el desarrollo de inventarios de biodiversidad. Programa de Inventarios   de Biodiversidad. Instituto de Investigaci&oacute;n de Recursos Biol&oacute;gicos Alexander   von Humboldt. Bogot&aacute;, Colombia. 236 pp.    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000241&pid=S0370-3908201300030000400030&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p><b>Warren, A.D., K.J. Davis, E.M. Stangeland, J.P. Pelham &amp; N.V.</b> <b>Grishin. </b>2013. Illustrated Lists of American Butterflies.&#91;20-VII-2013&#93;    &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000243&pid=S0370-3908201300030000400031&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref -->.</p>     <p>Recibido: 16 de agosto de 2013    <br> Aceptado para su publicaci&oacute;n: 6 de septiembre de 2013</p> </font>      ]]></body><back>
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