Paula Pino1; Mitchel Volcy2; Andrés Franco2; Carlos Uribe2 ; Angela Guzmán3; Blanca Restrepo4; Jaime Robledo5
Hospital Universitario San Vicente de Paúl, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia y Corporación para Investigaciones Biológicas
1 Estudiante de Maestría. Postgrado Ciencias Básicas Biomédicas. ppino@cib.org.co ; tierrapino@hotmail.com
2 Neurólogo Clínico. Unidad de Neurología Clínica. Hospital Universitario San Vicente de Paúl, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia.
3 Bacterióloga. UnidaddeBacteriología y Micobacterias , Corporación para Investigaciones Biológicas.
4 Profesora asistente en Ciencias Biológicas. UTH-School of Public Health-Brownsville Campus, University of Texas, Brownsville, TX, U.S.A.
]]> 5 Jefe de la Unidad de Bacteriología y Micobacterias, Corporación para Investigaciones Biológicas.
INTRODUCCIÓN
La tuberculosis meníngea (TBM) es la causa más importante de meningitis crónica mundialmente. Se diagnostica demostrando Mycobacterium tuberculosis en líquido cefalorraquídeo (LCR) por directo y cultivo, ambos poco sensibles (0-25%, 25-86%, respectivamente) (1). Estas dificultades han llevado a buscar métodos diagnósticos más sensibles, de bajo costo y fácil implementación.
Se han caracterizado algunos antígenos específicos de M. tuberculosis: ESAT-6, complejo 85, proteína de 38 kDa, alfacristalina (2) y CFP-10 (3), los cuales podrían tener potencial diagnóstico detectados en muestras clínicas. Esta estrategia es atractiva como herramienta diagnóstica, pues no se necesita respuesta inmune activa.
OBJETIVO
Detectar y caracterizar antígenos específicos de M. tuberculosis en LCR de pacientes con TBM, evaluar su utilidad diagnóstica y asociarlo con el estadío de la enfermedad.
METODOLOGÍA
Se estudiarán prospectivamente pacientes con diagnóstico clínico de meningitis subaguda/crónica (MSC), se les realizará directo y cultivo para M. tuberculosis en LCR, así como detección de antígenos.
]]> Se detectarán antígenos mediante Western-blot utilizando anticuerpos policlonales: antiproteínas del filtrado de cultivo de M. tuberculosis H37Rv con y sin reacción cruzada con lipoarabinomanan (LAM), antiproteínas del citosol y membrana de M. tb H37Rv sin reacción cruzada con LAM y antilisado de célula total de M. tb H37Rv. Se usarán anticuerpos monoclonales dirigidos contra antígenos descritos: alfacristalina, proteína de 19 kDa y antígeno 85B. Los antígenos detectados serán cuantificados mediante ELISA de inhibición y se evaluará su utilidad diagnóstica calculando sensibilidad, especificidad y valores predictivos.RESULTADOS
Se han diagnosticado 36 pacientes con TBM y 22 con MSC de otra etiología.
Los resultados preliminares de Western-blot utilizando dos anticuerpos policlonales (Antiproteínas de filtrado de cultivo y antiproteínas de citosol y membrana de M. tuberculosis H37Rv sin reacción con LAM), se describen a continuación:
DISCUSIÓN
El tamaño de las proteínas de bajo peso molecular coincide con el de algunas proteínas descritas: ESAT-6 (6 kDa), CFP-10 (10 kDa), alfacristalina (14 kDa), lipoproteína de 19 kDa y antígeno 85B (30 kDa); su confirmación con anticuerpos monoclonales permitirá su evaluación como herramienta diagnóstica.
PALABRAS CLAVE
MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS, ANTÍGENOS, DIAGNÓSTICO
]]> BIBLIOGRAFÍA
1. ZURGER A., LOWY F.D. Chapter 23: Tuberculosis. En DURAK D.T., SCHELD W.M., WHITLEY R.J. Infections of the Central Nervous System. Second edition. Editorial Lippincott-Raven Publishers, Philadelphia 1997:417-443.
2. ANDERSEN P. Host responses and antigens involved in protective immunity to Mycobacterium tuberculosis. Scand. J. Immunol, 1997; 45: 115-131.
3. SKJOT R.L.V., OETTINGER T., ROSENKRANDS I., RAVN P., BROCK I., JACOBSEN S., ANDERSEN P. Comparative evaluation of low-molecular-mass proteins from Mycobacterium tuberculosis identifies members of the ESAT- 6 family as immunodominant T-cell antigens. Infect Immun, 2000; 68: 214-220.
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