Resumen

La identificación de individuos en la piscicultura se ha venido estableciendo como un proceso estándar, lo que implica la utilización de un sistema de marcaje eficiente, práctico y económico. Este estudio evaluó el sistema de marcaje físico visible (V.I.E) con relación al crecimiento, sobrevivencia, retención y visibilidad en alevinos de cachama blanca (Piaractus brachypomus). Para este propósito, fueron usados 400 peces en dos experimentos con 200 peces cada uno; experimento 1 (4.5 ± 0.9 g) y experimento 2 (8.26 ± 1.94 g) evaluadas durante un periodo de 30 días, repartidos al azar en 4 tanques de 250 litros. Después de un periodo de aclimatación de 8 días y siguiendo las indicaciones del fabricante, se marcaron 128 peces con 8 colores: Azul, rojo, verde, amarillo, naranja, rosado (fluorescentes), café y morado (no fluorescentes), en dos posiciones corporales (dorso y opérculo) definidas en ensayos preliminares. Los animales no marcados (72) pero sometidos al mismo procedimiento, se utilizaron como control. Los peces en su totalidad, se midieron y pesaron al inicio y al final de cada experimento. Para ninguno de los experimentos se determinó efecto del implante sobre el crecimiento (p<0,05) entre los peces marcados y el control. La sobrevivencia en ambos experimentos fue del 100%. La retención en el dorso y opérculo en promedio para los dos experimentos fue de 94.11% y 57.52%, respectivamente. La visibilidad con luz UV y sin luz UV en el opérculo fue de 96.6% y 77.7% y para el dorso fue de 92.6% y 61.5%, respectivamente. En conclusión la posición más viable para el uso del V.I.E en animales de baja talla, es el dorso debido a su alto porcentaje de retención, preferiblemente utilizando los colores fluorescentes bajo exposición a luz UV.

Palabras clave: crecimiento, fluorescencia, identificación, implante.

Identifying individuals in fish-farming has become standard procedure, thereby implying the use of an efficient, practical and economic tagging system. This study evaluated the visible implant elastomer (VIE) system related to growth, survival, retention and visibility in cachama/pacu (Piaractus brachypomus) fry. The study involved using 400 fish in two experiments (200 fish in each experiment): experiments 1 (4.5 ± 0.9 g) and 2 (8.26 ± 1.94 g) were evaluated over a 30-day period, the fry being randomly distributed in four 250-liter tanks. Following an 8-day acclimatisation period, 128 fish were tagged with 8 colours (following the manufacturer’s instructions): blue, red, green, yellow, orange, pink (fluorescent), Brown and purple (non-fluorescent); they were tagged on two parts of the body (dorsal/back and operculum/cheek area) which had already been defined in preliminary trials. Untagged fry (72) kept in the same conditions were used as control. All fry were measured and weighed at the start and finish of each experiment. It was determined that the implant/tag had no effect on growth (p<0.05) in either tagged fry or control. The survival of both types of fry in both experiments was 100%. Tag retention in both experiments regarding the back was 94.11% on average and 57.52% for the cheek area. Visibility with UV light was 96.6% on the cheek area and 92.6% for the back and without UV light 77.7% for the cheek area and 61.5% for the back. It can thus be stated that the dorsal/back area is the most viable position for using VIE with low-weight fry due to the high retention percentage, preferably using fluorescent reporters under UV light.

Key words: growth, fluorescence, identification, implant.

A identificação de indivíduos na piscicultura se tem estabelecido como um processo regular, o que implica a utilização de um sistema de marcação eficiente, prático e económico. Este estudo avaliou o sistema de marcação física visível em relação ao crescimento, sobrevivencia, retenção e visibilidade em alevinos de cachama blanca (Piaractus brachypomus). Para este propósito, 400 peixes foram usados em dois experimentos com 200 peixes cada, experimento 1 (4.5 ± 0.9 g) e experimento 2 (8.26 ± 1.94 g) avaliados durante um período de 30 dias, repartidos ao acaso em quatro tanques de 250 litros. Uma vez aclimatados os peixes e seguindo as indicações do fabricante, marcaram-se 128 peixes com oito cores: Azul, vermelho, verde, amarelo, laranja, rosado (fluorescentes), café e morado (não fluorescentes), em duas posições corporais (Dorso e opérculo) definidas em ensaios preliminares. Os animais não marcados (72) submetidos ao mesmo procedimento se utilizaram como controle. Os peixes em sua totalidade foram medidos e pesados ao início e ao final da cada experimento. Não foi determinado efeito do implante sobre o crescimento (p<0,05) entre os peixes marcados e o controle para nenhum dos experimentos. A sobrevivência em ambos experimentos foi de 100%. A retenção no dorso e opérculo em média foi de 94.11% e 57.52%, respectivamente para os dois experimentos. A visibilidade com luz UV e sem luz UV no opérculo foi de 96.6 % e 77.7% e para o dorso foi de 92.6% e 61.5%, respectivamente. Em conclusão a posição mais viável para o uso do V.I.E em animais de baixa talha, é o dorso devido a sua alta percentagem de retenção, preferivelmente utilizando as cores fluorescentes baixo exposição a luz UV.

La piscicultura según la FAO (2014), continúa siendo la esfera de producción de alimentos de origen animal de crecimiento más rápido y actualmente produce cerca de la mitad del suministro total de pescado comestible, con lo cual realiza una contribución fundamental a la mitigación de la pobreza, siendo la alternativa más viable para cubrir la demanda y subsanar la seguridad alimentaria en los próximos años, a través del aumento en la eficiencia productiva, lo que implica mejorar las condiciones de manejo, infraestructura y calidad genética de las especies.

En este contexto el reto de la cadena piscícola colombiana es involucrar los pilares fundamentales de una manera más global e integral, donde se le dé mayor importancia al mejoramiento genético de las especies nativas con el propósito de transformar al sector en uno tecnificado y líder de la economía nacional, capaz de trascender al mercado internacional (Leiva et al., 2007).

La cachama blanca (Piaractus brachypomus) de acuerdo con Sastre et al., (2009) es considerada la especie nativa de más alto potencial piscícola, debido a su resistencia a enfermedades, hábitos omnívoros y rusticidad al manejo en cautiverio. Sin embargo, según Nascimento et al., (2010) la especie no ha podido avanzar significativamente en términos de tasas de crecimiento, conversión alimenticia, consolidación de su comercialización y consumo, y a su vez aspectos relacionados con la creciente necesidad de dietas más nutricionales por parte de la población humana, en este sentido, un desarrollo sostenible del cultivo de la especie en Colombia, además de optimizar los sistemas de producción, reproducción y cruces está ceñido al conocimiento genético de la especie (Mesa- Granda et al., 2006, Mesa-Granda y Botero-Aguirre, Evaluación del sistema de marcaje físico visible (V.I.E) en cachama blanca (Piaractus brachypomus) 25 2007). Sin embargo, la implantación de un programa genético requiere de información familiar a través de la eficiente identificación de los grupos familiares y de los peces individualmente; con respecto a Bernal y Gallego (2016), lo cual actualmente está establecido como la industria estándar para especies acuícolas, que a su vez conlleva a implementar un sistema de identificación eficaz en animales de baja talla, confiable y de bajo costo .

Uno de los sistemas de marcaje más utilizado en la industria acuícola por tener la ventaja de ser rápido, de bajo costo y fácil de usar en peces de tamaño pequeño, es el sistema de marcaje interno subcutáneo Visible Implant Elastomer (V.I.E; North-west Marine Technology Inc.), está inclusive por encima del Passive Integrated Transponder (PIT; EiD Ibérica SA - TROVAN) que por ser electrónico de aplicación interna se ha evaluado ampliamente aunque con la desventaja de ser costoso y limitante su uso en animales de tamaño pequeño.

El VIE es un marcador que a pesar de que ha sido usado con éxito en distintas especies de peces (Bailey et al., 1998, Baras et al., 1999, Baras et al., 2000, Astorga et al., 2005, Brennan et al., 2007), requiere una evaluación específica para cada una de ellas, debido a que su utilidad viene determinada por sus diferentes grados de aceptación, ya sea por factores como la talla, el color de la piel o la capacidad de soportar un manejo intenso. Es por esto que el objetivo de este trabajo consistió en evaluar el sistema de marcaje físico visible VIE en relación con el crecimiento, sobrevivencia, retención y visibilidad en alevinos de cachama blanca.

Materiales y métodos

Comité de ética

Todos los procedimientos fueron realizados de conformidad con las normas y procedimientos para el uso de animales de laboratorio, descritas por el Comité on Care and Use of Laboratory Animal Resources – National Research Counsil, USA (1996). De igual forma, los procedimientos del presente estudio, contaron con la aprobación del Comité de Bioética de la Universidad de los Llanos.

Localización

Material biológico

Se utilizaron 400 alevinos de cachama blanca clínicamente sanos, divididos en dos grupos, uno de ellos con un peso corporal promedio de 4,5 ± 0.9 g (experimento 1) y el segundo con 8.38 ± 1.98 g (experimento 2), provenientes de un mismo desove realizado en la estación piscícola Agua Verde, ubicada en el municipio de Cumaral, Departamento del Meta.

Calidad del agua

Diariamente fue evaluada la temperatura (°C) por medio de un termómetro digital MARTINI® instruments EC59. Semanalmente se evaluaron las características físicas y químicas del agua, como pH, oxígeno disuelto, amonio, dureza y alcalinidad (mg/l) por medio de un kit comercial (Kit Hach FF1-A® - Hach Company) en cada uno de los tanques. Se realizaron recambios de agua del 30% de la columna del agua durante todo el estudio con una frecuencia de tres veces por semana. Antes de llevar a cabo el estudio, se desinfectaron todos los materiales como tanques, tapas, tuberías, piedras difusoras y demás tipo de elementos que tendrían contacto con los animales.

Diseño experimental

El experimento tuvo una duración de 30 días para cada uno de los experimentos. Los peces (n=400) fueron dispuestos aleatoriamente en ocho tanques de polipropileno, con capacidad de 250 litros con dimensiones de 58x118.5x100 cm, cuatro para cada experimento y 50 animales por tanque.

Pasados ocho días como periodo de adaptación y siguiendo las recomendaciones del fabricante (North- West Marine Technology Inc.), todos los peces fueron anestesiados con 2-fenoxietanol (300 ppm, JT Baker®), para registrar el peso (g), y la talla (mm), posteriormente se marcaron animales aleatoriamente 128 peces con ocho colores: azul, rojo, verde, amarillo, naranja, rosado (fluorescentes), café y morado (no fluorescentes), en dos posiciones corporales (dorso y opérculo) definidas en ensayos preliminares (figura 1). Los animales no marcados (72) pero sometidos al mismo procedimiento se utilizaron como control. Adicionalmente se midió el tiempo (s) que duraba el proceso de marcaje. Los peces en su totalidad, se midieron y pesaron al inicio y al final de cada experimento.

La tasa de alimentación diaria durante el experimento fue del 12 % de la biomasa repartida en tres tomas, con una dieta comercial de 45 % de proteína cruda.

Con el fin de determinar los porcentajes de retención generados durante los 30 días en condiciones controladas de laboratorio, se definió que la perdida de una porción del implante no afectaba su evaluación, simplemente se observó su permanencia por lo que se definió como una variable cualitativa.

Crecimiento

La tasa de crecimiento específica se calculó mediante la expresión:

SGR (%) = (Ln PF - Ln PI) 100/ΔT

Donde PF, PI y ΔT son peso final, peso inicial y periodo de estudio respectivamente.

Visibilidad

Se realizó un experimento adicional en donde se evaluaron dos grupos de animales, uno de ellos con animales de 30 días de marcados, vs animales de un día de implantados, se observó, cual o cuales de los ocho colores utilizados en la primera fase del proyecto es más visible (rosado, azul, rojo, verde, anaranjado, blanco, azul y morado) con y sin luz U.V en alevinos de cachama blanca. Para determinar la visibilidad del implante, se diseñó una encuesta basada en la medición de la misma con una escala de 0 a 5, donde 0 es nula, 3 es buena y 5 excelente, la encuesta se realizó a 10 personas ajenas al experimento, las cuales calificaron de acuerdo a su criterio y percepción.

Análisis estadístico

Para el análisis de los datos obtenidos durante el desarrollo del estudio; se utilizó el paquete estadístico SAS 9.1 (SAS Institute 2004). En todos los casos las diferencias se consideraron significativas si P<0,05 y no significativas cuando p>0,05; el sesgo estandarizado y la curtosis estandarizada fueron usados para comprobar la normalidad de los datos tanto para peso como para longitud total; se realizó una comparación de medias mediante una prueba t-Student asumiendo varianzas iguales. Para evaluar la tasa de retención y la visibilidad en los experimentos estudiados se realizaron tablas de contingencia y pruebas de Chi-cuadrado de Pearson.

Parámetros de calidad de agua

La temperatura promedio fue de, 25.71±0.88 °C durante el día, los demás parámetros evaluados se mantuvieron constantes durante todo el estudio. El pH estuvo en 6.2, la alcalinidad en 34.2 mg/l, la dureza en 17.1 mg/l y la concentración de oxígeno disuelto en 8.0 mg/l.

Los datos obtenidos muestran que el estudio estuvo dentro de las condiciones adecuadas para cultivo de peces dulceacuícolas (Merino, 2001), y según parámetros reportados por Poleo et al., (2011) en un cultivo de cachama blanca sometidas a altas densidades y en dos sistemas cerrados de recirculación de agua, comprendiendo; Temperatura de 26 ± 1.2ºC, pH 7,3 ± 0,2, dureza 40-80 mg/L de CaCO3, y oxígeno disuelto >4,7 mg/L. Las condiciones de laboratorio de este estudio permitieron un mejor control de las características del agua y del estado sanitario de los animales reflejado en la sobrevivencia del 100% de los animales.

Crecimiento

Para peso corporal y talla, la tabla 1 describe estas variables de crecimiento a los 30 días de evaluación. Mediante el sesgo estandarizado y la curtosis estandarizada se comprobó que las muestras provenían de distribuciones normales tanto para peso como para longitud total. La Prueba t para comparar medias suponiendo varianzas iguales mediante el valor-P>0,05 demuestra que no existe diferencia estadísticamente significativa entre los pesos y la longitud total del grupo control y el VIE con un 95 % de confianza. El tiempo promedio general de manejo por pez fue de 42 segundos.

Para ninguno de los experimentos, se encontró diferencias significativas entre los animales marcados y los no marcados con relación al crecimiento (P>0.05); en el experimento 1 el promedio de peso de los individuos marcados y no marcados fue similar al inicio (4,59 ± 0.84 y 4.52 ± 0.93 g respectivamente) y al final (16 ± 3.6 y 17 ± 4.5 g respectivamente); de igual manera; en el experimento 2, el promedio de peso de los individuos marcados y no marcados fue similar al inicio (8,26 ± 1,94 y 8,58 ± 2.02 g respectivamente) y al final (29.7 ± 6,3 y 28 ± 7,2 g). El coeficiente de variación tanto para peso como para talla indicó que los animales presentaron una alta homogeneidad para estas variables. Tal como se esperaba, el análisis de varianza explicó de una manera favorable el modelo para ambas variables (R²>0.600).

La sobrevivencia en ambos experimentos fue del 100%; la tasa de crecimiento específica para los experimentos 1 y 2 fue similar tanto para los animales marcados como para los no marcados. En el experimento 1 los animales marcados y no marcados obtuvieron una tasa de crecimiento específica de 4.0%/ día y 4.1%/día, igualmente en el experimento 2 los animales marcados y no marcados obtuvieron una tasa de crecimiento específica de 4.4%/día y 4.2%/ día, respectivamente.

Retención del implante VIE

La retención para el experimento 1 en el dorso y el opérculo fue de 94.7% y 55.2% respectivamente, para el caso del experimento 2, fue de 93.4% y 59.7% respectivamente.

Visibilidad

La visibilidad con luz UV (ultravioleta) y sin luz UV en el opérculo fue de 96.6% y 77.7% y para el dorso fue de 92.6% y 61.5%, respectivamente. De interés el estadístico Chi-cuadrado que se usó para comparar la independencia entre las dos posiciones de marcaje y el uso de luz UV y luz natural permitió aceptar la hipótesis nula y probar que la posición de marcaje es independiente de la visibilidad mediante luz UV y luz natural. Sin embargo, se halló discrepancia con relación a los colores fluorescentes y los no fluorescentes mediante luz natural y luz UV, demostrando preferiblemente el uso de los colores fluorescentes bajo luz UV.

Discusión

Los sistemas de marcaje internos se han descrito ampliamente en numerables especies, destacando la importancia de evaluar la utilidad real y aprovechamiento que tiene cada especie (Soula et al., 2009).

Las diferencias anatómicas, las diferentes condiciones de calidad de agua, las diversas magnitudes de resistencia, la susceptibilidad a la manipulación y términos de crecimiento, son unas de las razones que fundamentan su evaluación para cada especie (Davis et al., 2004, Jerry et al., 2001). En este sentido, para este estudio la ausencia de diferencias en el peso, talla y tasa de crecimiento específica entre peces marcados y no marcados en ambos experimentos, concuerda con lo reportado por Soula et al., (2012) en el bocinegro (Pagrus pagrus), quien evaluó el VIE en relación con el crecimiento, mortalidad, tiempo de manejo y tasa de perdida, encontrando que no existió efecto alguno sobre las variables, al igual que lo demostrado por otros autores (Soula et al., 2009, Zeeh y Wood, 2009, Liu et al., 2011). De igual manera revela que no hay efecto sobre el crecimiento de los peces de 4.59 y 8.9 g. Estos pesos en promedio demuestran que son los más adecuados para iniciar el marcaje con VIE, según estudios similares que han examinado su efecto en otras especies de peces, por ejemplo, el nulo efecto sobre el crecimiento fue demostrado en peces de dorada (Sparus auratus L) de 7 a 18 gramos (Astorga et al., 2005), en peces de bocinegro de 2 gramos, de igual manera como lo mencionó Jerry et al., (2001). Con referencia a la sobrevivencia del 100% obtenida en este estudio se demuestra por una parte, que no existe efecto alguno del VIE que se relacione con la salud de los especímenes como lo describe Soula et al. (2009) para animales superiores a 2 gramos, por otra parte, la alta capacidad de resistencia al manejo de alevinos de cachama blanca, que a pesar de ser el máximo tiempo reportado por animal (42 segundos), frente a lo conseguido en dorada por Astorga et al., (2005) de 15.7 segundos con 4% de mortalidad y lo reportado por Bailey et al., (1998) en coho salmon (Oncorhynchus kisutch) que solo necesitó de 12 segundos por pez con un 5% de mortalidad a las 24 horas después de la marcación; estos autores concluyen que el tiempo de manejo en general depende de la destreza del implantador.

En relación con la retención del implante, se han referenciado diferentes estimados como por ejemplo Soula et al., (2012), quienes obtuvieron 75% de retención en bocinegro durante 15 y 30 días de estudio en dos tallas diferentes. Para este estudio de 30 días, un 94% en promedio para la posición corporal del dorso demuestra una elevada confiabilidad en su uso, por encima del 57.5% obtenido en el opérculo, reconociendo que aún falta evaluar esta variable por mucho más tiempo.

A manera de colofón, el estudio pone de manifiesto que es factible el uso del V.I.E. en animales de peso de 4,5 g en adelante y que la posición más viable para su uso es el dorso. Preferiblemente se debe utilizar los colores fluorescentes bajo exposición a luz UV. Finalmente el uso de este sistema de identificación, permitirá proyectar programas de cría selectiva y mejoramiento genético en la especie, una vez se estime el efecto de la genética sobre características de interés económico.

Los autores agradecen a la Dirección General de Investigaciones (DGI) de la Universidad de los Llanos por el apoyo financiero (proyecto código CAIALL-2-2013), así como al programa de Jóvenes Investigadores de Colciencias por la manutención de los jóvenes suscritos Felipe Bernal y Jeferson Valderrama.

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